狼毒大戟中二萜成分的研究

馬玉坤 白麗明 郭麗娜 王 健

(1.齊齊哈爾大學(xué) 化學(xué)與化工學(xué)院，黑龍江 齊齊哈爾 161006；2.齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，黑龍江 齊齊哈爾 161000)

狼毒大戟(EuphorbiaFischerianaSteud. ), 為大戟科大戟屬植物, 在我國(guó)主要生長(zhǎng)于內(nèi)蒙古、東北及河北等地區(qū)。其根入藥為中藥狼毒，是一種傳統(tǒng)的中藥材[1]。狼毒始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為下品，其味苦、辛，性平，有毒，具有泄水逐飲，破積殺蟲的功效，主治水腫腹脹，痰食蟲積，心腹疼痛，結(jié)核，疥癬等[2]。為進(jìn)一步開發(fā)研究狼毒大戟的藥用價(jià)值，開發(fā)植物資源的綜合利用，本文對(duì)干燥的狼毒大戟根部無水乙醇浸泡液石油醚萃取物化學(xué)成分進(jìn)行了研究。從中分離得到4種單體化合物，并對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了鑒定，分別為巖大戟內(nèi)酯A、巖大戟內(nèi)酯B、17-羥基巖大戟內(nèi)酯A和17-羥基巖大戟內(nèi)酯B。

1材料與儀器

BrukerAM-600 型核磁共振波譜儀(TMS 為內(nèi)標(biāo))；美國(guó)Waters公司高效液相色譜儀；柱色譜用硅膠為青島海洋化工廠產(chǎn)品(200目～300目)；薄層色譜硅膠板為青島海洋化工廠生產(chǎn)；索氏動(dòng)態(tài)提取濃縮機(jī)組和多功能萃取罐由砥石機(jī)械生產(chǎn)；北京賽百奧科技有限公司生產(chǎn)的多功能暗箱紫外分析儀；所有分析純?cè)噭┚鶠樘旖蚴懈挥罹?xì)化工有限公司生產(chǎn)；色譜純?cè)噭榘⒗≡噭S生產(chǎn)。

實(shí)驗(yàn)所用狼毒大戟于 2013 年采自內(nèi)蒙古自治區(qū)，將根部剪粹后室內(nèi)陰干，經(jīng)齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院中藥教研室郭麗娜教授教授鑒定為為EuphorbiaFischerianaSteud.，標(biāo)本收藏于齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院醫(yī)藥科學(xué)研究院藥用植物成分研究室。

2提取與分離

將干燥狼毒大戟根部28.92 kg，用無水乙醇浸泡提取5次，過濾合并提取液，減壓濃縮得深棕色粗浸膏。用水將該粗浸膏制成懸浮液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，減壓蒸餾至恒重，分別得到石油醚萃取物1.08 kg、乙酸乙酯萃取物0.7 kg和正丁醇萃取物0.2 kg。

取石油醚層萃取物1.08 kg，用硅膠柱色譜、HPLC、重結(jié)晶等方法分離純化得到化合物1(2.01 g)，化合物2(1.04 g)，化合物3(1.36 g)，化合物4(1.77 g)。

3結(jié)果與討論

3.1 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：無色雪花狀晶體(石油醚)，

1H-NMR (600MHz,CDCl3), δ:0.72(3H,s),0.85(3H,s),0.94(3H,s),2.05(3H,s),2.63(1H,d,J=5.4Hz),3.70(1H,s),5.45(1H,d,J=5.4Hz)。

13C-NMR(600MHz,CDC13),δ:8.68(C-17),15.02(C-20),18.46(C-2),20.89(C-6),21.93(C-19),33.51(C-18),33.54(C-4),34.17(C-7),39.90(C-3),41.45(C-10),41.54(C-1),51.87(C-9),53.53(C-5),54.51(C-14),61.21(C-8),104.12(C-11),125.23(C-15),145.04(C-13),147.50(C-12),170.65(C-16)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[3]，故鑒定化合物1 為jolkinolide A。

化合物2：無色針狀晶體(甲醇)。

1H-NMR (600 MHz, CDCl3), δ:0.83(3H,s),0.85(3H,s),0.94(3H,s),2.08(3H,s),2.29(1H,s),3.68(1H,s),4.04(1H,s,)。

13C-NMR(600MHz,CDCl3)δ:8.58(C-17),15.27(C-20),18.27(C-2),20.37(C-6),21.72(C-19),33.32(C-18),33.37(C-4),35.47(C-7),39.00(C-1),39.07(C-10),41.13(C-3),47.85(C-9),53.34(C-5),55.19(C-14),60.79(C-8),65.91(C-11),85.05(C-12),130.13(C-15),148.44(C-13),169.45(C-16)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[4]，故鑒定化合物2為jolkinolideB。

化合物3：無色針狀晶體(乙酸乙酯)。

1H-NMR(600 MHz, CDCl3)δ: 0.74(3H, s); 0.86(3H, s), 0.95(3H, s), 2.66(1H, d, J=5.4 Hz), 4.04(1H,d,J=5.4Hz), 4.65(2H, s),5.58 (1H, d, J=5.4 Hz)。

13C-NMR(600 MHz, CDCl3)δ: 15.13(C-20),18.46(C-2), 20.85(C-6), 21.93(C-19), 33.50(C-18), 33.56(C-4), 34.00(C-7), 39.94(C-1), 41.52(C-10), 41.53(C-3), 51.81(C-9),53.55(C-5),54.46(C-14), 56.37(C-17), 61.33(C-8), 106.55(C-11),127.43(C-15),146.65(C-13), 147.35(C-12),169.24(C-16)。

以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[5]，故鑒定化合物3為17-hydroxyjolkinolideA。

化合物4：無色針狀晶體(乙酸乙酯)。

1H-NMR(600 MHz, CDCl3)δ: 0.80(3H,s), 0.80(3H,s), 0.88(3H, s), 2.30(1H, s),3.24(1H,s),4.02(1H,s),4.14(1H,s)。

13C-NMR(600 MHz, CDCl3)δ: 15.47(C-20),18.42(C-2),20.82(C-6),21.88(C-19),33.45(C-18),33.53(C-4),35.55(C-7),39.06(C-1),39.24(C-10),41.28(C-3),47.89(C-9),53.54(C-5),55.29(C-14),56.51(C-17),61.57(C-11),66.84(C-8),85.41(C-12),133.51(C-15),150.80(C-13),168.19(C-16)。

以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[6]，故鑒定化合物4為17-hydroxyjolkinolide B。

3.2 討論

干燥的狼毒大戟根部28.92 kg，粉碎后利用無水乙醇30 ℃恒溫浸泡提取，合并浸提液濃縮至小體積，加水混懸，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得到石油醚萃取物(1.08 kg),乙酸乙酯萃取物(0.7 kg),正丁醇萃取物(0.2 kg)。三種萃取物占狼毒大戟根部的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為：3.7%、2.4%和0.7%。從石油醚萃取物中分離得到4個(gè)化合物，通過理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)分析鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。分別鑒定為：巖大戟內(nèi)酯A、巖大戟內(nèi)酯B和17-羥基巖大戟內(nèi)酯A、17-羥基巖大戟內(nèi)酯B。

[1] 俞媚華,侯愛君.狼毒大戟抗乙肝病毒活性成分的研究[J].中國(guó)中藥雜志,2010,35(22):3 002～3 005.

[2] 南京中醫(yī)藥大學(xué).中藥大辭典.下冊(cè)[M].上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2006:2 549.

[3] 馬良,王歡,王金蘭,等. 狼毒大戟地上部分化學(xué)成分研究 [J]. 齊齊哈爾大學(xué)學(xué)報(bào), 2012,28(6): 27～29.

[4] 劉桂芳, 付玉琴, 楊志強(qiáng),等.狼毒大戟抗癌活性成分二萜內(nèi)酯的分離鑒定[J] .中藥通報(bào),1988, 13:291～292.

[5] 劉文粢, 馬晴高, 秦國(guó)偉, 等.狼毒大戟的化學(xué)成分研究[Ⅱ] [J] .中草藥, 2004,35(3):260.

[6] 潘勤,施敏峰,閔知大.狼毒大戟中4 中Jolkinolide型二萜的二維核磁共振研究[ J] .中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2004, 35:16～19.