玻璃體液在法醫(yī)毒物學(xué)實踐中的價值評析

沈敏，向平

（司法部司法鑒定科學(xué)技術(shù)研究所上海市法醫(yī)學(xué)重點實驗室上海市司法鑒定專業(yè)技術(shù)服務(wù)平臺，上海200063）

鑒定綜述R e v i e w

玻璃體液在法醫(yī)毒物學(xué)實踐中的價值評析

沈敏，向平

（司法部司法鑒定科學(xué)技術(shù)研究所上海市法醫(yī)學(xué)重點實驗室上海市司法鑒定專業(yè)技術(shù)服務(wù)平臺，上海200063）

玻璃體液因具有相對隔絕的解剖特征、受尸體腐敗和內(nèi)外部污染影響小、較少發(fā)生死后再分布、化學(xué)物質(zhì)濃度相對穩(wěn)定的優(yōu)勢特點而成為法醫(yī)毒物學(xué)關(guān)注和研究的對象。從提升毒物鑒定結(jié)果的可靠性以及深化玻璃體液應(yīng)用研究的角度，綜述了玻璃體液毒物定性定量分析的文獻報道，探討了玻璃體液在死后毒物學(xué)實踐中的潛在應(yīng)用價值以及存在的問題，提出當(dāng)缺失血液檢材或血液的可靠性受死后因素影響時，玻璃體液可作為血液的替代檢材或作為血液分析的質(zhì)量控制措施。

玻璃體液；死后毒物學(xué)；血-視網(wǎng)膜屏障；法醫(yī)毒物學(xué)；死后再分布

生物檢材的選擇與毒物鑒定結(jié)果信息的可靠性、科學(xué)性和充分性密切關(guān)聯(lián)。在死后毒物學(xué)領(lǐng)域，由于尸體高度腐敗、死后生成、死后再分布、體內(nèi)局部污染等因素存在，選取可反映死者生前毒物真實水平的生物檢材或血液的替代檢材顯得尤為重要。如研究表明相當(dāng)部分毒物存在死后再分布，雖然死后再分布很少能改變大劑量毒物中毒死亡的定性，但卻可能影響處于中毒量或接近致死量的案件的死因認定。目前人們已普遍認同死后再分布可導(dǎo)致心血和外周血毒物濃度的差異，應(yīng)用外周血可顯著降低死后再分布的影響，以保障分析結(jié)果的可靠性，然而外周血“金標(biāo)準”仍然會受到尸體高度腐敗的影響。于是，具有相對隔絕的解剖特點、受尸體腐敗和外界污染影響小、較少發(fā)生死后再分布、化學(xué)物質(zhì)濃度相對穩(wěn)定的玻璃體液，成為法醫(yī)病理學(xué)和法醫(yī)毒物學(xué)領(lǐng)域關(guān)注和研究的對象。

法醫(yī)毒物學(xué)領(lǐng)域有關(guān)玻璃體液與血液等體液的比較研究已有近50年的歷史，但多見于散在的、個別毒物的文獻報道，尚未在鑒定實踐中受到應(yīng)有的關(guān)注和應(yīng)用。隨著人們對體內(nèi)毒物轉(zhuǎn)運消除和死后再分布的認知提升、實際案例定性定量數(shù)據(jù)的積累、分析技術(shù)的快速發(fā)展以及結(jié)果解釋的證據(jù)要求，將玻璃體液作為血液的替代檢材或作為血液分析的質(zhì)量控制措施的理念意識、迫切性和可行性顯著增強。本文從提升毒物鑒定結(jié)果的可靠性以及深化玻璃體液應(yīng)用研究的角度，綜述了玻璃體液中毒物的轉(zhuǎn)運消除和死后變化，以及玻璃體液毒物定性定量分析研究的文獻報道，并收集了100多種毒藥物和300多個案例的濃度數(shù)據(jù)，探討玻璃體液在法醫(yī)毒物學(xué)實踐中的應(yīng)用價值和存在問題，以供同行參考、研究。

1 玻璃體液概述

1.1 玻璃體液的構(gòu)成

玻璃體是一種獨特透明的細胞外基質(zhì)，呈粘液凝膠狀，容積約4.6mL。玻璃體的結(jié)構(gòu)大分子有透明質(zhì)酸、蛋白多糖、膠原及非膠原蛋白質(zhì)，這些大分子結(jié)構(gòu)具有互補功能，其交互作用構(gòu)成了玻璃體的凝膠特性。另外，玻璃體還含有非結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)，大多數(shù)血清成分均可存在于玻璃體液中，但濃度要比血清低得多[1]。玻璃體有少量細胞即玻璃體細胞，主要限于玻璃體皮質(zhì)和玻璃體基底部。玻璃體液的組成約99%為水，1%為少量蛋白質(zhì)（包括可溶性蛋白）、無機鹽、糖、乳酸、尿素、維生素C、氨基酸和脂質(zhì)等。玻璃體隨著年齡的增長出現(xiàn)進展性液化，液化過程從4歲開始，成人時約20%的玻璃體液化，80歲時增加至50%。

1.2 血-視網(wǎng)膜屏障

血-視網(wǎng)膜屏障（blood retinal barrier，BRB）類似血-腦屏障，是一種選擇性的屏障，其保證了視網(wǎng)膜功能所需的輸入和限制可能的病原體（如酶、過敏毒素）入侵[2]。BRB實際上包括兩個屏障：（1）外屏障。即BRB的上皮部分，由視網(wǎng)膜色素上皮細胞（RPE）及其連接組成。外屏障使視網(wǎng)膜組織液與脈絡(luò)膜組織液分離，后者與血漿成分極為相似。RPE除作為視網(wǎng)膜的選擇性通透屏障外，還能主動運輸各種離子、分子和液體。（2）內(nèi)屏障。即BRB的內(nèi)皮部分，為視網(wǎng)膜毛細血管內(nèi)皮細胞及其連接。血-視網(wǎng)膜屏障的通透性分為內(nèi)向通透性和外向通透性，前者是指物質(zhì)經(jīng)過BRB透入到神經(jīng)視網(wǎng)膜，甚至到達玻璃體；后者是指物質(zhì)從玻璃體或神經(jīng)視網(wǎng)膜經(jīng)BRB到達視網(wǎng)膜毛細血管腔或脈絡(luò)膜組織[3]。在正常情況下，由于視網(wǎng)膜毛細血管內(nèi)皮細胞的單向主動運輸作用和RPE泵的作用，內(nèi)向通透性明顯低于外向通透性，這是維持神經(jīng)視網(wǎng)膜內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的必要條件。BRB可能會受到各種因素和病癥的影響，最常見的是糖尿病視網(wǎng)膜病變和與年齡相關(guān)的黃斑變性。

1.3 外源性物質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運

法醫(yī)毒物學(xué)領(lǐng)域所涉外源性物質(zhì)主要來源于體循環(huán)，從視網(wǎng)膜穿透血-視網(wǎng)膜屏障進入玻璃體液。而這些物質(zhì)從玻璃體液消除一般認為有兩種途徑：反方向通過BRB的后腔消除途徑；通過前腔環(huán)形空間擴散至房水，然后由房水更新及脈絡(luò)膜血流而消除。

外源性物質(zhì)滲透到視網(wǎng)膜取決于多種因素[4]，包括血漿濃度、物質(zhì)的理化性質(zhì)、藥理作用、分布容積、血漿蛋白結(jié)合和BRB相對通透性。物質(zhì)可被動擴散或主動轉(zhuǎn)運跨越屏障：一般情況下，較高分子量和/或較強親水性更可能表現(xiàn)為主動的跨膜轉(zhuǎn)運[5]。由于僅非結(jié)合型物質(zhì)可以跨越生物膜，故血漿蛋白結(jié)合率也是決定擴散程度的另一重要因素。在法醫(yī)毒物學(xué)研究領(lǐng)域，Holmgren等[6]發(fā)現(xiàn)血液/玻璃體液濃度比值與血漿蛋白結(jié)合率之間存在顯著的相關(guān)性。

許多蛋白承載著外源性物質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運，BRB所涉的主要轉(zhuǎn)運蛋白有，多藥耐藥（MDR）P-糖蛋白（P-gp轉(zhuǎn)運蛋白，包括或MDR1）、多藥耐藥相關(guān)蛋白（MRP）和乳腺癌耐藥蛋白（BCRP）。與被動擴散相比，主動轉(zhuǎn)運在物質(zhì)濃度超過載體的轉(zhuǎn)運能力時有飽和現(xiàn)象，并與同底物的其他物質(zhì)存在競爭性抑制。在法醫(yī)毒物學(xué)領(lǐng)域，這種毒物的相互作用可能對玻璃體液濃度的解釋產(chǎn)生重要影響，尤其是影響玻璃體液/血液濃度比。不同的轉(zhuǎn)運機制及其影響因素對于理解以及解釋外源性物質(zhì)在血液和玻璃體液中濃度分布非常關(guān)鍵。臨床上有許多眼科治療藥物的轉(zhuǎn)運機制研究和藥代動力學(xué)研究，但關(guān)于毒物的轉(zhuǎn)運知識以及相關(guān)研究文獻記載極為罕見。

1.4 玻璃體液的死后變化

玻璃體由于受到眼眶的保護及相對隔絕的解剖特點，尸體腐敗和外界污染等因素對其影響小。此外，其較少發(fā)生死后再分布，死后玻璃體液中外源性物質(zhì)的化學(xué)變化較血液緩慢，濃度相對穩(wěn)定。

上述優(yōu)勢特征使其成為法醫(yī)病理學(xué)死亡時間推斷研究的重要對象，在中毒死亡鑒定中也具有潛在的應(yīng)用價值。

死后玻璃體液依據(jù)死亡時間和環(huán)境條件趨于液化。玻璃體液離體后其儲存穩(wěn)定性是法醫(yī)毒物學(xué)關(guān)注的重要問題。Harper等[7]通過51對玻璃體液和外周血樣本的分析，發(fā)現(xiàn)玻璃體液不易受細菌污染，但作者仍建議在無菌條件下取樣（注射器和容器），以強化樣品儲存穩(wěn)定性的優(yōu)勢。兩眼球的毒物濃度比較研究表明，眠爾通、甲基苯丙胺、MDMA、苯妥英鈉、巴比妥類和可卡因均沒有顯著差異，然而作者仍推薦兩者獨立采集、分別盛裝[8-9]。

也有采用穩(wěn)定劑如氟化鈉（NaF）或氟化鉀（KF）阻斷酶的活性，防止某些外源性物質(zhì)的變化或降解。Holmgren等[6]評估了KF對血液和玻璃體液于-20℃保存1年條件下穩(wěn)定性的影響，46個藥物中僅佐匹克隆（n=13）在沒有KF時表現(xiàn)出濃度顯著降低。Melo等[10]研究了儲存溫度對玻璃體液中苯二氮卓類藥物（勞拉西泮、艾司唑侖、利眠寧、凱他唑侖）濃度的影響，結(jié)果顯示在低溫（-20℃、-80℃）存儲時，藥物濃度沒有明顯變化；4℃和25℃時，某些藥物可穩(wěn)定數(shù)周，而凱他唑侖在12周時完全降解。Rees[11]考察了玻璃體液中可卡因存儲84 d的穩(wěn)定性，-18℃時無論有無穩(wěn)定劑（NaF）均表現(xiàn)穩(wěn)定；4℃條件下儲存14d，其濃度在有和無穩(wěn)定劑情況下分別下降25%和50%。

在上述實驗數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上，法醫(yī)學(xué)工作者應(yīng)形成共識：獨立采集兩個眼球的玻璃體液并分別盛裝保存；其中一個樣本用于毒物學(xué)分析，應(yīng)添加穩(wěn)定劑（1．5%NaF或KF）以防止外源性物質(zhì)的變化和降解，另一樣本不加穩(wěn)定劑，用于生物化學(xué)分析；樣品應(yīng)存放于-20℃條件下保存。

2 玻璃體液毒物分析結(jié)果評析

1969年，F(xiàn)elby等[12]首先報道了關(guān)于死后玻璃體液分析的研究報告。作者在死者的玻璃體液中檢出了巴比妥類藥物，且濃度與其血清水平接近，表明巴比妥類藥物可通過被動擴散進入玻璃體液。作者認為血清/玻璃體液濃度比＞1表示死亡發(fā)生于攝藥后不久，先于藥物平衡相到達。在技術(shù)上分析玻璃體液比血液更為簡便，尤其對于腐敗尸體更凸顯其優(yōu)勢。此后，玻璃體液毒物分析的研究和應(yīng)用逐漸增多，表1總結(jié)了300多個血液和玻璃體液毒物濃度的研究報道[13-152]，以供比較分析和結(jié)果解釋。

2.1 定性分析結(jié)果評析

定性篩選分析可發(fā)現(xiàn)或排除外源性物質(zhì)的存在，是法醫(yī)毒物鑒定最基本、最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)。血液、尿液是定性篩選分析的常用生物檢材，其中尿液因有更為寬（含代謝物）、長（毒物留存時間）的檢測窗口而具有一定的優(yōu)勢。關(guān)于較為全面的玻璃體液用于篩選分析的適用性研究僅見2篇文獻。2010年P(guān)elander[153]運用液相色譜/飛行時間質(zhì)譜（LC-TOFMS）對玻璃體液作為篩選分析檢材的可替代性進行了評價。其實驗室比較了50例案件的尿液和玻璃體液經(jīng)LC-TOFMS篩選分析的陽性發(fā)現(xiàn)，結(jié)果兩者的陽性檢出總數(shù)分別為376和245，確定毒性物質(zhì)總數(shù)為97，其中39為代謝產(chǎn)物。尿液分析確定55個母體化合物和39個代謝物，而玻璃體液的檢出數(shù)較尿液低，分別為45和24。研究結(jié)果恰如預(yù)期，因尿液中目標(biāo)物濃度較高，代謝物主要存在于尿液，故尿液有更高的陽性檢出率。同時研究發(fā)現(xiàn)玻璃體液表現(xiàn)出低背景噪音，有效降低了儀器污染和基質(zhì)效應(yīng)。基于研究結(jié)果，作者認為玻璃體液是可行的、易于處理的定性篩選分析的替代性檢材，盡管其目標(biāo)物和代謝物濃度低于尿液，但方法cutoff值的平均數(shù)和中位數(shù)分別達到0．072 μg/mL和0．032 μg/mL，可以滿足死后毒物學(xué)分析的需要。Metushi[154]2016年報道了血液和玻璃體液的氣相色譜/質(zhì)譜（GC-MS）篩選分析的比較研究結(jié)果。其實驗室篩選分析了51個死者的血液和玻璃體液，陽性發(fā)現(xiàn)數(shù)分別為209和169，確定目標(biāo)物的總數(shù)分別為71和60。研究表明玻璃體液中難以識別（存在）的目標(biāo)物有7-氨基氯硝西泮、苯甲托品、環(huán)苯扎林、嗎啡、去甲文拉法辛、苯妥英、異丙嗪、唑吡坦和佐匹克隆等，其可能解釋是這些目標(biāo)物難以跨越血-視網(wǎng)膜屏障。Metushi也建議玻璃體液可作為死后毒物篩選分析的適宜檢材。盡管上述二項研究所用技術(shù)平臺不同，對目標(biāo)物的適用范圍和靈敏度有所不同，但研究結(jié)果大體是一致的。即以尿液陽性檢出數(shù)為基準時，玻璃體液的檢出率為65%；以血液陽性檢出數(shù)為基準時，玻璃體液的檢出率為80%，而據(jù)表1統(tǒng)計，玻璃體液則有更高的陽性檢出比例。當(dāng)然，需要更大規(guī)模的、統(tǒng)一標(biāo)準的研究結(jié)果來支撐玻璃體液檢材的適用性評價。

不同類別的外源性物質(zhì)在玻璃體液中存在情況不同。（1）阿片類。通過示蹤單乙酰嗎啡（6-MAM）判斷近期是否攝入海洛因一直是研究的關(guān)注焦點。pragst等[155]報道在29例涉阿片死亡案中，2例玻璃體液檢出6-MAM而尿液呈陰性，盡管一般認為尿液中6-MAM濃度較高。Wyman等[156]研究表明對于海洛因相關(guān)的死亡，若僅用血液分析，6-MAM的未檢出率分別為36%（n=25），59%（n=70），50%（n =12）和25%（n=20）。其提出兩個假設(shè)解釋為什么玻璃體液的6-MAM檢出率高于血液：6-MAM因親脂性（logP值=1．56）易透過血-視網(wǎng)膜屏障；玻璃體液中無酯酶存在，從而限制了6-MAM的降解。然而假設(shè)需要謹慎，因為許多生物物種的玻璃體液中存在活性酯酶，可使海洛因水解成6-MAM和嗎啡。另有假說認為，玻璃體液酯酶的性質(zhì)不同于血液，如腦突觸乙酰膽堿酯酶無法水解海洛因。血液中6-MAM陰性時，有時也用嗎啡/可待因比來判斷所檢嗎啡系可待因代謝（嗎啡/可待因＜1）還是攝入海洛因（嗎啡/可待因＞1）。Rees等[157]發(fā)現(xiàn)，玻璃體液中嗎啡/可待因比對揭示海洛因攝入與否也同樣有效。（2）苯二氮卓類。據(jù)Robertson報道[158]，其實驗室涉及3-硝基苯二氮卓類（硝西泮、氟硝西泮、氯硝西泮）的死后毒物學(xué)分析，僅在其中30%的血液中檢出母體藥物，15%的血液中檢出7-氨基代謝物，而玻璃體液母體藥物的檢出率為10%，7-氨基代謝物均未檢出。其檢出率差異可能由于玻璃體液中目標(biāo)物水平一般僅為血液的1/3。Scott[159]分析了17例苯二氮卓類藥物（地西泮、去甲西泮、替馬西泮）死亡案，其中7例血液中檢出而玻璃體液中均為檢出。實驗結(jié)果表明，苯二氮卓類表現(xiàn)為高度蛋白結(jié)合，其中性或弱酸性的性質(zhì)則進一步阻止其進入玻璃體液。（3）其他物質(zhì)。在無血液的情況下，玻璃體液對于揭示可卡因的濫用也具有價值，有報道[160]認為玻璃體液的檢測窗口較血液更寬。Jenkins[161]的研究表明涉苯環(huán)己哌啶（PCP）死者其玻璃體液均呈陽性。這些研究揭示了玻璃體液在檢測外源性物質(zhì)方面的適宜性，某些目標(biāo)物（6-MAM、可卡因和PCP）的檢測窗較血液更寬，而苯二氮卓類物質(zhì)則有所限制。對于在體內(nèi)低濃度存在的目標(biāo)物如大麻酚類和四氫大麻酸，則不宜采用玻璃體液分析，有報道在30例陽性血液的死者中，僅1例玻璃體液呈陽性。要指出的是目前的研究大部分套用血液分析方法，開發(fā)和驗證玻璃體液的專用技術(shù)可能會降低檢測閾值和提高檢出率。

2.2 定量分析結(jié)果評析

2．2．1 阿片類

Scott[162]報道了20例海洛因依賴者死亡案例的分析結(jié)果：玻璃體液的嗎啡濃度較血液低，但兩者具有顯著的相關(guān)性（R2=0．697）；玻璃體液的6-MAM濃度高于血液和其他組織，但與血液沒有相關(guān)性，作者據(jù)此認為玻璃體液可作為嗎啡分析的替代檢材。Rees[157]證實了上述結(jié)果，但認為玻璃體液和血液嗎啡濃度的相關(guān)性取決于攝入至死亡的時間間隔，也可受攝入方式的影響，故血液嗎啡濃度不能從玻璃體液水平外推。作者同樣獲得玻璃體液可待因濃度高于血液，兩者呈相關(guān)性（R2=0．672）的實驗結(jié)果。羥考酮顯示玻璃體液和血藥濃度的正相關(guān)關(guān)系，但從玻璃體液外推血液水平結(jié)果過于分散[163]。

2．2．2 可卡因

與其他物質(zhì)不同，死后血液中可卡因濃度幾乎很少與死亡時間關(guān)聯(lián)，而很大程度上取決于體內(nèi)或體外降解。因玻璃體液中外源性物質(zhì)相對穩(wěn)定，故對其研究相對較多，然而結(jié)果不盡相同。Antonides[164]通過對40例案件分析，發(fā)現(xiàn)玻璃體液可卡因濃度高于血液的占72%，但兩者沒有相關(guān)性，其認為高玻璃體液濃度應(yīng)歸結(jié)于血液中可卡因的降解。Duer[165]以“總可卡因”即可卡因及其代謝物（愛康寧，愛康寧甲酯和苯甲酰愛康寧）濃度的總和為對象，獲得了“玻璃體液和外周血以及玻璃體液和心血濃度間的相關(guān)性分別為0．939和0．883”的結(jié)果，故筆者認為玻璃體液與血液相同，分析可卡因是可靠的。也有報道玻璃體液濃度與血液濃度接近（平均值1．03；范圍0．36～2．94），認為玻璃體液陽性結(jié)果可以確認血液中可卡因的存在但不能準確估算血藥濃度[166]。Carvahlo[167]等發(fā)現(xiàn)在7例可卡因過量死亡案例中玻璃體液與血液呈現(xiàn)良好的相關(guān)性（可卡因r=0．98；苯甲酰愛康寧r=0．95），而在11例涉可卡因意外死亡案例中并非如此。另有研究表明，玻璃體液和血液可卡因、cocaethylene平均濃度（n=53）沒有顯著不同。這些結(jié)果差異突顯了參數(shù)的重要性，因可卡因死亡案件的攝藥時間、死亡時間、死后再分布和穩(wěn)定性不能控制，故根據(jù)玻璃體液水平不能外推死亡時血液可卡因濃度。

2.2.2 苯二氮卓類

對于硝基苯二氮卓類（硝西泮、氟硝西泮、氯硝西泮）及其氨基代謝物，Robertson[158]統(tǒng)計52個死亡案例血液和玻璃體液目標(biāo)物濃度的相關(guān)性：母體藥物為r=0.626，代謝物為r=0.764。作者稱血液與尿液、膽汁和肝臟的代謝物濃度也存在此類正相關(guān)關(guān)系。Scott[159]報道了17例死者的替馬西泮、地西泮和去甲西泮的相關(guān)系數(shù)分別為0.788、0.723和0.068，玻璃體液水平顯著低于血液。雖然有相關(guān)性的研究報道，但數(shù)據(jù)結(jié)果較為分散，可能與攝藥方式、攝藥至死亡時間以及尸體解剖時間等參數(shù)有關(guān)。其他研究給出了玻璃體液和血液的弱相關(guān)性和分散結(jié)果發(fā)現(xiàn)，如去甲西泮（n=58，R2=0.473）、溴西泮（n=31，R2=0.345）和奧沙西泮（n=28，R2=0.588）。由此看來，玻璃體液濃度不能定量解釋其血液水平。

2.2.3 γ-羥基丁酸

γ-羥丁酸（GHB）天然存在于生物體，臨床上用于麻醉，同時GHB也作為濫用物質(zhì)成為死后毒物學(xué)的新生目標(biāo)物。死后血藥濃度解釋的目的是確定所發(fā)現(xiàn)的GHB屬內(nèi)源性還是外源性進入。血液GHB水平升高會誤導(dǎo)提示外源性物質(zhì)的進入，而玻璃體液可以驗證血液水平的真實性。Kintz[168]稱可用“解釋樹”確定GHB來源，首先用心血和50 mg/L閾值來判斷GHB的存在，陽性時則用外周血和玻璃體液進一步證實。另有研究報道，分析心血、外周血、玻璃體液、尿液和腦脊液，發(fā)現(xiàn)玻璃體液水平高于血液水平，有時甚至是五個檢材中最高的[169]。在最近的綜述中，有學(xué)者強調(diào)閾值可用于個案的解釋而不是硬指標(biāo)[170]，筆者觀察到隨著取樣和儲存技術(shù)的增強，GHB閾值有下降的趨勢。

2.2.4 MDMA

De Letter[9]等證明在平衡穩(wěn)態(tài)時，玻璃體液和血液MDMA濃度之間存在相關(guān)性，120 min和240 min時的相關(guān)系數(shù)分別為0.98和0.95。研究表明，玻璃體液MDMA濃度較血液有更長時間（73 h）的穩(wěn)定性，更能代表生前的血液水平。玻璃體液可以用于推斷死亡時血液中MDMA濃度。

2.2.5 其他化合物

56例死亡案例研究發(fā)現(xiàn)，血液和玻璃體液PCP水平間沒有相關(guān)性[161]。Holmgren[6]考察了血液和玻璃體液中46個目標(biāo)物于-20℃保存12個月后兩者間的相關(guān)性，結(jié)果顯示約一半目標(biāo)物（n=23），包括苯丙胺、地爾硫卓、曲馬多，文拉法辛等存在相關(guān)性，而化合物如氯丙咪嗪、氯氮平、舍曲林等則沒有相關(guān)性。鑒于這些結(jié)果基于的樣本量較小，不能支持從玻璃體液濃度外推至血液濃度，但可作為未來研究的基礎(chǔ)。

如上所述，死亡案件中用于從玻璃體液水平外推血液水平的基礎(chǔ)是兩者的相關(guān)性。然而，也有學(xué)者提出用玻璃體液地西泮濃度的統(tǒng)計數(shù)據(jù)來區(qū)分臨床治療和過量使用。

2.3 典型目標(biāo)物-乙醇

乙醇是法醫(yī)學(xué)鑒定實踐中普遍涉及的重要目標(biāo)物，也是充分體現(xiàn)玻璃體液價值的典型目標(biāo)物。通常準確測定和正確解讀死者的血液乙醇濃度（BAC）是法醫(yī)毒物學(xué)工作者的重要任務(wù)，對于死因確認和案件性質(zhì)起著關(guān)鍵性的作用。然而由于尸體腐敗、乙醇死后生成、乙醇死后擴散、交通和航空遇難污染以及血液樣本缺失等因素，使死后BAC的解釋和應(yīng)用遭受極大的挑戰(zhàn)，于是人們把研究目標(biāo)集中于人體富含水的其他液體——玻璃體液。

Iona[171]進行了較大規(guī)模的玻璃體液乙醇濃度（VAC）、尿液乙醇濃度（UAC）和BAC的相關(guān)性研究，統(tǒng)計分析顯示三者乙醇濃度存在顯著相關(guān)性，其中VAC與BAC的相關(guān)系數(shù)為0.887，VAC/BAC為1.07（平均值為1.11，SD為0.299）。相同的研究結(jié)果也有多個報道[172-173]，如Jones在對 706個案例研究的基礎(chǔ)上得到VAC/BAC平均值為1.19，標(biāo)準偏差為0.285；DiMaio報道VAC/BAC平均值為1.2等。Iona認為，玻璃體液與血液乙醇濃度的相關(guān)性、可靠性優(yōu)于尿液，當(dāng)血液樣本缺失或懷疑BAC受死后因素影響（死后生成，腐敗損失、防腐干擾、死后再分布）時，玻璃體液可作為血液的替代檢材或作為血液乙醇濃度解釋的質(zhì)量控制措施。如空難致人體嚴重撕裂傷，可引起廣泛的微生物污染因而生成大量乙醇（1.9 mg/mL），死后再分布或胃部擴散也可引起心血BAC的假性升高，故某些情況下單純依據(jù)死后BAC易產(chǎn)生錯誤的結(jié)論。此外，作者還認為玻璃體液在乙醇分析中的價值體現(xiàn)在可以對BAC進行追溯驗證。由于VAC總體較BAC高，且峰值濃度（平衡）較血液延遲1～2 h，即乙醇吸收階段，VAC低于BAC；乙醇消除階段，VAC高于BAC，故玻璃體液可提供死者死亡前1～2h的BAC信息。血液與玻璃體液的儲存穩(wěn)定性研究也表明玻璃體液更有優(yōu)勢。Olsen[174]復(fù)評估了邁阿密法醫(yī)部門5～6年前收集的血液和玻璃體液樣本，結(jié)果BAC有35%的降低，VAC僅有6．1%的損失。

近年來，人們試圖用乙醇的體內(nèi)代謝物乙醛葡萄糖醛酸苷及酯類區(qū)分腐敗產(chǎn)生以及外污染，但這些新的marker是否可代替玻璃體液呢？目前的檢測水平尚有難度，因為BAC需0．5 mg/mL以上才能同時檢出代謝物，但腐敗產(chǎn)生的BAC一般＜0．3mg/mL，此時代謝物分析結(jié)果陰性，仍無法判斷是生前攝入還是死后形成。

2.4 生存時間

某些學(xué)者提出用血液/玻璃體液濃度比估計生存時間（即攝藥至死亡的時間間隔），其基本依據(jù)是外源性物質(zhì)從血液到玻璃體液需要一定的分布時間，攝藥初期血液/玻璃體液濃度比高于平衡時兩者的濃度比。Scott等[159]的案例數(shù)據(jù)研究表明，攝苯二氮卓類快速死亡的血液/玻璃體液濃度比更高，其提供了估計攝藥時間的方法，但作者強調(diào)該濃度比值可受各種因素尤其是死后再分布的影響。地西泮動物實驗?zāi)Ｐ脱芯勘砻?，肌注? h血液/玻璃體液濃度比為20，6h下降至4．5，藥后1～2h達平衡時，比例為10，作者認為血液/玻璃體液濃度比可作為判斷攝藥至死亡時間的補充工具。Antonides等[164]也調(diào)查分析了攝藥死亡案例，報道當(dāng)可卡因血藥濃度高于玻璃體液時，死亡發(fā)生于攝藥后不久，此時血液中苯甲酰愛康寧水平雙倍于玻璃體液水平。

2.5 死后再分布

De Letter等[175]以兔實驗?zāi)Ｐ蜑閷ο?，研究了MDMA的死后再分布，結(jié)果表明玻璃體液中MDMA濃度更穩(wěn)定，代表生前血液水平而不是死后血液水平。然而研究發(fā)現(xiàn)，眼球壁的MDMA水平有升高現(xiàn)象，尤其是死亡時間較長的，故存在擴散的可能性。地高辛的死后再分布研究發(fā)現(xiàn)，19例尸體的脈絡(luò)膜和視網(wǎng)膜組織中地高辛濃度非常高（63．9～485ng/g），接近心肌藥物水平和高于玻璃體液的發(fā)現(xiàn)（2．2～7．1ng/mL），筆者認為這些差異表明存在從脈絡(luò)膜和視網(wǎng)膜組織至玻璃體液的死后再分布[176]。Mckinney[177]等研究了可卡因的死后再分布，實驗豬靜脈給藥后5min處死，采集死亡時和死后8h體液，結(jié)果血液可卡因濃度沒有改變，而玻璃體液水平有較大上升，筆者認為該濃度上升系死后再分布引起。玻璃體液可卡因的基線水平較低（平均為939ng/mL，血液平均為3245 ng/mL），而8 h后兩者接近（玻璃體液平均為3 067ng/mL；血液平均為3568ng/mL），作者推測視網(wǎng)膜組織可能是藥物積累的區(qū)域，死后釋放至玻璃體液。Maskell等[178]研究了海洛因代謝物嗎啡和3-嗎啡葡醛酸苷（M3G）的死后再分布，發(fā)現(xiàn)實驗兔死后24h玻璃體液游離嗎啡濃度和總嗎啡濃度分別增加181%和425%，M3G濃度增加了1，002%。作者解釋玻璃體液中嗎啡、M3G濃度增加系特定組織中目標(biāo)物濃度擴散所致。

上述研究表明，玻璃體液是防止受腹腔死后再分布影響的主要基質(zhì)，但眼組織中累積的目標(biāo)物死后可擴散至玻璃體液。

2.6 局限性

玻璃體液的局限性除了采樣量有限外，主要體現(xiàn)在法醫(yī)毒物學(xué)關(guān)注的定量解釋。各種實驗動物或尸體解剖研究結(jié)果表明，大多數(shù)目標(biāo)物的玻璃體液濃度和血液濃度不相關(guān)或存在顯著的分散度，故玻璃體液濃度通常不能外推至血藥濃度。這些研究結(jié)果也反映了各種不可控因素和未知參數(shù)的影響，如存活時間、死亡時間、眼科疾病和藥物相互作用等。要優(yōu)化玻璃體液在定量解釋中的效用，必須考慮以下可能性[13]。（1）要提高對玻璃體液中外源性物質(zhì)分布的認知。雖然擴散看似大多數(shù)化合物的運轉(zhuǎn)機制，但血液擴散不僅僅是被動的，還需要增強理解目標(biāo)物的生前分布作用和主動運輸機制。（2）探索目標(biāo)物在眼組織中的分布非常重要，特別是脈絡(luò)膜和視網(wǎng)膜有可能作為目標(biāo)物累積區(qū)，死后進行玻璃體液再分布。（3）必須運用統(tǒng)計工具，以期最大限度的確定評估玻璃體液濃度的不確定性。即使發(fā)現(xiàn)高于血液的外源性物質(zhì)濃度，重要的是要根據(jù)案件的具體情況，報告玻璃體液結(jié)果的不確定性。

表1 涉毒死者玻璃體液和血液中目標(biāo)物濃度

續(xù)表1

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3 結(jié)論

當(dāng)血液檢材缺失或血液檢材的可靠性可能受死后因素影響時，需要有適宜的檢材替代。理想的替代檢材應(yīng)可發(fā)現(xiàn)血液中存在的相同外源性物質(zhì)，具有相關(guān)的物質(zhì)濃度，不受死亡的影響，玻璃體液較為接近此理想狀態(tài)。從操作實踐的角度，玻璃體液易于取樣，儲存條件相對不高，樣品處理和分析較為簡便。此外，由于法醫(yī)學(xué)涉及的大多數(shù)目標(biāo)物存在于玻璃體液，故玻璃體液可作為缺失血液檢材時篩選分析的替代檢材。某些目標(biāo)物（6-MAM、PCP、可卡因）的檢測窗口較血液更寬，這種定性篩選的優(yōu)勢可隨專用技術(shù)的開發(fā)及較低檢測閾值的實現(xiàn)而強化。雖然，玻璃體液與血液的比較研究顯示不同的相關(guān)性結(jié)果，但并不影響其驗證性應(yīng)用。尤其是在延遲尸體解剖或質(zhì)疑血液的可靠性受死后因素影響的情況下，玻璃體液可作為血液分析的質(zhì)量控制措施。

玻璃體液在相當(dāng)部分國家的法醫(yī)學(xué)死亡鑒定中已成為毒物分析的常規(guī)檢材，借助本綜述期望得到同行的關(guān)注和共識，以推動玻璃體液在我國的推廣應(yīng)用。

[1]陳瑤清，蔡繼峰，文繼舫.玻璃體液化學(xué)成分規(guī)律性改變與死亡時間推斷的研究進展[J].法醫(yī)學(xué)雜志，2009，25（1）：53-56.

[2]Jordan J，Ruiz-Moreno J M.Advances in the Understanding of Retinal Drug Disposition and the Role of Blood-Ocular Barrier Transporters[J].Expert Opin Drug Metab Toxicol，2013，（9）:1181-1192.

[3]吳永強.血-視網(wǎng)膜屏障及其臨床意義[J].國外醫(yī)學(xué)眼科學(xué)分冊，1992，16（1）:18-23.

[4]Cunha-Vaz J G.The Blood-Retinal Barriers System.Basic Concepts and Clinical Evaluation[J].Exp Eye Res，2004，（78）:715-721.

[5]Mannermaa E，Vellonen K S，Urtti A.Drug Transport in Corneal Epithelium and Blood-Retina Barrier:Emerging Role of Transporters in Ocular Pharmacokinetics[J].Adv Drug Deliv Rev，2006，（58）:1136-1163.

[6]Holmgren P，Druid H，Holmgren A，et al.Stability of Drugs in Stored Postmortem Femoral Blood and Vitreous Humor[J].J Forensic Sci，2004，（49）:820-825.

[7]Harper D R A Comparative Study of the Microbiological Contamination of Postmortem Blood and Vitreous Humour Samples Taken for Ethanol Determination[J].Forensic Sci Int，1989，（43）:37-44.

[8]Bevalot F，Gustin M P，Cartiser N，et al.Interpretation of Drug Concentrations in an Alternative Matrix:The Case of Meprobamate in Vitreous Humor[J].Int J Legal Med，2011，（125）:463-468.

[9]De Letter E A，De Paepe P，Clauwaert K M，et al.Is Vitreous HumourUsefulfortheInterpretation of 3，4-Methylenedioxymethamphetamine（MDMA）Blood Levels?Experimental Approach with Rabbits[J].Int J Legal Med，2000，（114）: 29-35.

[10]Melo P，Bastos M L，Teixeira H M.Benzodiazepine Stability in Postmortem Samples Stored at Different Temperatures[J].J Anal Toxicol，2012，（36）:52-60.

[11]Rees K A，Jones N S，McLaughlin P A，et al.The Effect of Sodium Fluoride Preservative and Storage Temperature on the Stability of Cocaine in Horse Blood，Sheep Vitreous and Deer Muscle[J].Forensic Sci Int，2012，（217）:182-188. [12]Felby S，Olsen J.Comparative Studies of Postmortem Barbiturate and Meprobamate in Vitreous Humor，Blood and Liver[J].J Forensic Sci，1969，（14）:507-514.

[13]Be′valot F，Cartiser N，Bottinelli C，et al.Vitreous Humor Analysis for the Detection of Xenobiotics in Forensic Toxicology:A Review[J].Forensic Toxicol，2016，（34）:12-40.

[14]Andreasen M F，Telving R，Rosendal I，et al.Andersen LV（2015）A Fatal Poisoning Involving 25C-NBOMe[J]. Forensic Sci Int，2015，（251）:e1-e8.

[15]Decaestecker T，De Letter E，Clauwaert K，et al.Fatal 4-MTA Intoxication:Development of a Liquid Chromatographic-Tandem Mass Spectrometric Assay for Multiple Matrices[J].J Anal Toxicol，2001，（25）:705-710.

[16]Seetohul L N，Pounder D J.Four Fatalities Involving 5-IT[J].J Anal Toxicol，2013，（37）:447-451.

[17]Barbera N，Busardo F P，Indorato F，et al.The Pathogenetic Role of Adulterants in 5 Cases of Drug Addicts with a Fatal Outcome[J].Forensic Sci Int，2013，（227）:74-76. [18]Tracqui A，Kintz P，Wendling P，et al.Toxicological Findings in a Fatal Case of Acebutolol Self-Poisoning[J].J Anal Toxicol，1992，（16）:398-400.

[19]Singer P P，Jones G R，Bannach B G，et al.Acute Fatal Acetaminophen Overdose without Liver Necrosis[J].J Forensic Sci，2007，（52）:992-994.

[20]Jones G R，Pounder D J.Site Dependence of Drug Concentrations in Postmortem Blood—A Case Study[J].J Anal Toxicol，1987，（11）:186-190.

[21]Singer P P，Jones G R.Very Unusual Ethanol Distribution in a Fatality[J].J Anal Toxicol 1997，（21）:506-508.

[22].Bicker W，Monticelli F，Bauer A，et al.Quantification ofAconitine in Post-Mortem Specimens by Validated Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry Method:Three Case Reports on Fatal‘Monkshood’Poisoning[J].Drug Test Anal，2013，（5）:753-762.

[23]Jenkins A J，Levine B，Locke J L，et al.A Fatality Due to Alprazolam Intoxication[J].J Anal Toxicol，1997，（21）:218-220.

[24]Tracqui A，Kintz P，Ritter-Lohner S，et al.Toxicological Findings after Fatal Amitriptyline Self-Poisoning[J].Hum Exp Toxicol，1990，（9）:257-261.

[25]Hurst H E，Jarboe C H.Clinical Findings，Elimination Pharmacokinetics，and Tissue Drug Concentrations Following a Fatal Amitriptyline Intoxication[J].Clin Toxicol，1981，（18）:119-125.

[26]Langford A M，Pounder D J.Possible Markers for Postmortem Drug Redistribution[J].J Forensic Sci，1997，（42）: 88-92.

[27]Pounder D J，Owen V，Quigley C.Postmortem Changes in Blood Amitriptyline Concentration[J].Am J Forensic Med Pathol，1994，（15）:224-230.

[28]Ziminski K R，Wemyss C T，Bidanset J H，et al.Comparative Study of Postmortem Barbiturates，Methadone，and Morphine in Vitreous Humor，Blood，and Tissue[J].J Forensic Sci，1984，（29）:903-909.

[29]Winek C L，Wahba W W，Rozin L.Amoxapine Fatalities: Three Case Studies[J].Forensic Sci Int，1984，（26）:33-38. [30]Kiely E，Lee C J，Marinetti L.A Fatality from an Oral Ingestion of Methamphetamine[J].J Anal Toxicol，2009，（33）: 557-560.

[31]Logan B K，Weiss E L，Harruff R C.Case Report:Distribution of Methamphetamine in a Massive Fatal Ingestion[J]. J Forensic Sci，1996，（41）:322-323.

[32]Sayama H，Komura H，Kogayu M.Application of Hybrid Approach Based on Empirical and Physiological Concept for Predicting Pharmacokinetics in Humans—Usefulness of Exponent on Prospective Evaluation of Predictability[J]. Drug Metab Dispos，2013，（41）:498-507.

[33]Quatrehomme G，Ricq O，Lapalus P，et al.Acute Arsenic Intoxication:Forensic and Toxicologic Aspects（An Observation）[J].J Forensic Sci，1992，（37）:1163-1171.

[34]Garside D，Ropero-Miller J D，Riemer E C.Postmortem Tissue Distribution of Atomoxetine Following Fatal and Nonfatal Doses-Three Case Reports[J].J Forensic Sci，2006，（51）:179-182.

[35]Brooks J P，Phillips M，Stafford D T，et al.A Case of Benzphetamine Poisoning[J].Am J Forensic Med Pathol，1982，（3）:245-247.

[36]Palmer R B，Alakija P，de Baca J E，et al.Fatal Brodifacoum Rodenticide Poisoning:Autopsy and Toxicologic Findings[J].J Forensic Sci，1999，（44）:851-855.

[37]Yazzie J，Kelly S C，Zumwalt R E，et al.Fatal Bupivacaine Intoxication Following Unusual Erotic Practices[J].J Forensic Sci，2004，（49）:351-353

[38]Hutchison J D Jr，Harris A，Rasmussen S A，et al.Concentrations of Butriptyline in Biological Fluids Following a Fatal Overdose[J].J Anal Toxicol，1994，（18）:220-224.

[39]Garriott J C，Simmons L M，Poklis A，et al.Five Cases of Fatal Overdose from Caffeine-Containing“Look-Alike”Drugs[J].J Anal Toxicol，1985，（9）:141-143.

[40]Tombolini A，Cingolani M.Fatal Accidental Ingestion of Carbon Tetrachloride:A Postmortem Distribution Study[J].J Forensic Sci 1996，（41）:166-168.

[41]Gerace E，Ciccotelli V，Rapetti P，et al.Distribution of Chloralose in a Fatal Intoxication[J].J Anal Toxicol，2012，（36）:452-456.

[42]Wogoman H，Steinberg M，Jenkins A J.Acute Intoxication with Guaifenesin，Diphenhydramine，and Chlorpheniramine[J]. Am J Forensic Med Pathol，1999，（20）:199-202.

[43]Moriya F，Hashimoto Y，Kuo T L.Pitfalls when Determining Tissue Distributions of Organophosphorus Chemicals: Sodium Fluoride Accelerates Chemical Degradation[J].J Anal Toxicol，1999，（23）:210-215.

[44]Anastos N，McIntyre I M，Lynch M J，et al.Postmortem Concentrations of Citalopram[J].J Forensic Sci，2002，（47）: 882-884.

[45]Hargrove V，Molina D K.A Fatality Due to Cyproheptadine and Citalopram[J].J Anal Toxicol，2009，（33）:564-567.

[46]Magdalan J，Zawadzki M，Sloka T，et al.Suicidal Overdose with Relapsing Clomipramine Concentrations Due to a Large Gastric Pharmacobezoar[J].Forensic Sci Int，2013，（229）:e19-e22.

[47]Sporkert F，Augsburger M，Giroud C，et al.Determination and Distribution of Clotiapine（Entumine）in Human Plasma，Post-Mortem Blood and Tissue Samples from Clotiapine-Treated Patients and from Autopsy Cases[J].Forensic Sci Int，2007，（170）:193-199.

[48]Keller T，Miki A，Binda S，et al.Fatal Overdose of Clozapine[J].Forensic Sci Int，1997，（86）:119-125.

[49]Poklis A，Maginn D，Barr J L.Tissue Disposition of Cocaine in Man:A Report of Five Fatal Poisonings[J].Forensic Sci Int，1987，（33）:83-88.

[50]Peretti F J，Isenschmid D S，Levine B，et al.Cocaine Fatality:An Unexplained Blood Concentration in a Fatal Overdose[J].Forensic Sci Int，1990，（48）:135-138.

[51]Furnari C，Ottaviano V，Sacchetti G，et al.A Fatal Case of Cocaine Poisoning in a Body Packer[J].J Forensic Sci2002，（47）:208-210.

[52]Alvear E，von Baer D，Mardones C，et al.Determination of Cocaine and Its Major Metabolite Benzoylecgonine in Several Matrices Obtained from Deceased Individuals with Presumed Drug Consumption Prior to Death[J].J Forensic Leg Med，2014，（23）:37-43.

[53]Amon C A，Tate L G，Wright R K，et al.Sudden Death Due to Ingestion of Cocaine[J].J Anal Toxicol 1986，（10）: 217-218.

[54]Di Maio V J，Garriott J C.Four Deaths Due to Intravenous Injection of Cocaine[J].Forensic Sci Int，1978，（12）:119-125.

[55]Giroud C，Michaud K，Sporkert F，et al.A Fatal Overdose of Cocaine Associated with Coingestion of Marijuana，Buprenorphine，and Fluoxetine.Body Fluid and Tissue Distribution of Cocaine and Its Metabolites Determined by Hydrophilic Interaction Chromatography-Mass Spectrometry（HILIC-MS）[J].J Anal Toxicol，2004，（28）:464-474.

[56]Fucci N，De Giovanni N，De Giorgio F，et al.An Evaluation of the Cozart RapiScan System as an Onsite Screening Tool for Drugs of Abuse in a Non-Conventional Biological Matrix:Vitreous Humor[J].Forensic Sci Int，2006，（156）:102-105.

[57]Sanches L R，Seulin S C，Leyton V，et al.Determination of Opiates in Whole Blood and Vitreous Humor:A Study of the Matrix Effect and an Experimental Design to Optimize Conditions for the Enzymatic Hydrolysis of Glucuronides[J]. J Anal Toxicol，2012，（36）:162-170.

[58]Frost J，Lokken T N，Brede W R，et al.A Validated Method for Simultaneous Determination of Codeine，Codeine-6-Glucuronide，Norcodeine，Morphine，Morphine-3-Glucuronide and Morphine-6-Glucuronide in Post-Mortem Blood，Vitreous Fluid，Muscle，F(xiàn)at and Brain Tissue by LC-MS[J].J Anal Toxicol，2015，（39）:203-212.

[59]Cheze M，Deveaux M，Pepin G.Liquid Chromatographytandem Mass Spectrometry forthe Determination of Colchicine in Postmortem Body Fluids.Case Report of Two Fatalities and Review of the Literature[J].J Anal Toxicol，2006，（30）:593-598.

[60]Jones G R，Singer P P，Bannach B.Application of LC-MS Analysis to a Colchicine Fatality[J].J Anal Toxicol，2002，（26）:365-369.

[61]Lauer E，Widmer C，Versace F，et al.Body Fluid and Tissue Analysis Using Filter Paper Sampling Support Prior to LC-MS/MS:Application to Fatal Overdose with Colchicine[J]. Drug Test Anal，2013，（5）:763-772.

[62]Blanco P J，Rivero A G.First Case of Illegal Euthanasia in Spain:Fatal Oral Potassium Cyanide Poisoning[J].Soud Lek，2004，（49）:30-33.

[63]DiMaio V J，Garriott J C，Putnam R.Digoxin Concentrations in Postmortem Specimens after Overdose and Therapeutic Use[J].J Forensic Sci，1975，（20）:340-347.

[64]Kaliciak H A，Huckin S N，Cave W S.A Death Attributed Solely to Diltiazem[J].J Anal Toxicol，1992，（16）:102-103. [65]Baker A M，Johnson D G，Levisky J A，et al.Fatal Diphenhydramine Intoxication in Infants[J].J Forensic Sci，2003，（48）:425-428.

[66]Mozayani A，Schrode P，Carter J，et al.A Multiple Drug Fatality Involving MK-801（Dizocilpine），a Mimic of Phencyclidine[J].Forensic Sci Int，2003，（133）:113-117.

[67]Anderson D，Reed S，Lintemoot J，et al.A First Look at Duloxetine（Cymbalta）in a Postmortem Laboratory[J].J Anal Toxicol，2006，（30）:576-580.

[68]Morini L，Pozzi F，Risso E，et al.Distribution of Embutramide and Mebezonium Iodide in a Suicide after Tanax Injection[J].J Anal Toxicol，2012，（36）:349-352.

[69]Broussard L A，Broussard A K，Pittman T S，et al.Death Due to Inhalation of Ethyl Chloride[J].J Forensic Sci，2000，（45）:223-225.

[70]Yacoub I，Robinson C A，Simmons G T，et al.Death Attributed to Ethyl Chloride[J].J Anal Toxicol，1993，（17）:384-385.

[71]Morano R A，Spies C，Walker F B，et al.Fatal Intoxication Involving Etryptamine[J].J Forensic Sci，1993，38:721-725.

[72]Molina D K，Hargrove V M，Rodriguez R G.Distribution of Etomidate in a Fatal Intoxication[J].J Anal Toxicol，2008，（32）:715-718.

[73]Anderson D T，Muto J J.Duragesic Transdermal Patch: Postmortem Tissue Distribution of Fentanyl in 25 Cases[J]. J Anal Toxicol，2000，（24）:627-634.

[74]Coopman V，Cordonnier J，Pien K，et al.LC-MS/MS Analysis of Fentanyl and Norfentanyl in a Fatality Due to Application of Multiple Durogesic Transdermal Therapeutic Systems[J].Forensic Sci Int，2007，（169）:223-227.

[75]Wiesbrock U O，Rochholz G，F(xiàn)ranzelius C，et al.Excessive Use of Fentanyl Patches as the Only Means of Suicide[J].Arch Kriminol，2008，（222）:23-30.

[76]Levine B，Chute D，Caplan Y H.Flecainide Intoxication[J].J Anal Toxicol，1990，（14）:335-336.

[77]Martinez M A，Ballesteros S，Piga F J，et al.The Tissue Distribution of Fluoride in a Fatal Case of Self-Poisoning[J].J Anal Toxicol，2007，（31）:526-533.

[78]Johnson R D，Lewis R J，Angier M K.The Distribution of Fluoxetine in Human Fluids and Tissues[J].J Anal Toxicol，2007，（31）:409-414.

[79]McIntyre I M，Syrjanen M L，Lawrence K L，et al.A Fatality Due to Flurazepam[J].J Forensic Sci，1994，（39）:1571-1574. [80]Kunsman G W，Rodriguez R，Rodriguez P.Fluvoxamine Distribution in Postmortem Cases[J].Am J Forensic MedPathol，1999，（20）:78-83.

[81]Ferrara S D，Tedeschi L，F(xiàn)rison G，et al.Fatality Due to Gamma-Hydroxybutyric Acid（GHB）and Heroin Intoxication[J].J Forensic Sci，1995，（40）:501-504.

[82]Kintz P，Villain M，Pelissier A L，et al.Unusually High Concentrations in a Fatal GHB Case[J].J Anal Toxicol，2005，（29）:582-585.

[83]Mazarr-Proo S，Kerrigan S.Distribution of GHB in Tissues and Fluids Following a Fatal Overdose[J].J Anal Toxicol，2005，（29）:398-400.

[84]Meatherall R，Lee C，Phillips S.Accidental Death from Hydromorphone Ingestion[J].J Forensic Sci，2011，（56）: S271-S274.

[85]Thevis M，Thomas A，Schanzer W，et al.Measuring Insulin in Human Vitreous Humour Using LC-MS/MS[J].Drug Test Anal，2012，（4）:53-56.

[86]Palmiere C，Sabatasso S，Torrent C，et al.Post-Mortem Determination of Insulin Using Chemiluminescence Enzyme Immunoassay:PreliminaryResults[J].Drug Test Anal，2015，（7）:797-803.

[87]Hess C，Madea B，Daldrup T，et al.Determination of Hypoglycaemia Induced by Insulin or Its Synthetic Analogues Post Mortem[J].Drug Test Anal，2013，（5）:802-807.

[88]Nowicka J，Skowronek R，Czech E，et al.Comments on‘Measuring Insulin in Human Vitreous Humour Using LCMS/MS’by Thevis et al[J].Drug Test Anal，2013，（5）: 133-134.

[89]Winston D C.Suicide via Insulin Overdose in Nondiabetics: the New Mexico Experience[J].Am J Forensic Med Pathol，2000，（21）:237-240.

[90]Pricone M G，King C V，Drummer O H，et al.Postmortem Investigation of Lamotrigine Concentrations[J].J Forensic Sci，2000，（45）:11-15.

[91]Yonemitsu K，Pounder D J.Postmortem Changes in Blood Tranylcypromine Concentration:Competing Redistribution and Degradation Effects[J].Forensic Sci Int，1993，（59）:177-184. [92]Mazzola C D，Miron S，Jenkins A J.Loxapine Intoxication: Case Report and Literature Review[J].J Anal Toxicol，2000，（24）:638-641.

[93]Favretto D，F(xiàn)rison G，Maietti S，et al.LC-ESI-MS/MS on an Ion Trap for the Determination of LSD，Iso-LSD，Nor-LSD and 2-Oxo-3-Hydroxy-LSD in Blood，Urine and Vitreous Humor[J].Int J Legal Med，2007，（121）:259-265.

[94]Gaillard Y P，Cuquel A C，Boucher A，et al.A Fatality FollowingIngestion of the Designer Drug Meta-Chlorophenylpiperazine（mCPP）in an Asthmatic-HPLC-MS/MS Detection in Biofluids and Hair[J].J Forensic Sci，2013，（58）:263-269.

[95]De Letter E A，Clauwaert K M，Lambert W E，et al.Distribution Study of 3，4-Methylenedioxymethamphetamine and 3，4-Methylenedioxyamphetamine in a Fatal Overdose[J].J Anal Toxicol，2002，（26）:113-118.

[96]Moore K A，Mozayani A，F(xiàn)ierro M F，et al.Distribution of 3，4-Methylenedioxymethamphetamine（MDMA）and 3，4-Methylenedioxyamphetamine（MDA）Stereoisomers in a Fatal Poisoning[J].Forensic Sci Int，1996，（83）:111-119.

[97]De Letter E A，Bouche M P，Van Bocxlaer J F，et al.Interpretation of a 3，4-Methylenedioxymethamphetamine（MDMA）Blood Level:Discussion by Means of a Distribution Study in Two Fatalities[J].Forensic Sci Int，2004，（141）: 85-90.

[98]Adamowicz P，Tokarczyk B，Stanaszek R，et al.Fatal Mephedrone Intoxication—A Case Report[J].J Anal Toxicol，2013，（37）:37-42.

[99]Henry J L，Epley J，Rohrig T P.The Analysis and Distribution of Mescaline in Postmortem Tissues[J].J Anal Toxicol，2003，（27）:381-382.

[100]CouperFJ，ChopraK，Pierre-LouisML.Fatal Methadone Intoxication in an Infant[J].Forensic Sci Int，2005，（153）: 71-73.

[101]Wu Chen N B，Donoghue E R，Schaffer M I.Methanol Intoxication:Distribution in Postmortem Tissues and Fluids Including Vitreous Humor[J].J Forensic Sci，1985，（30）: 213-216.

[102]Beno J M，Hartman R，Wallace C，et al.Homicidal Methanol Poisoning in a Child[J].J Anal Toxicol，2011，（35）:524-528.

[103]Pla A，Hernandez A F，Gil F，et al.A Fatal Case of Oral Ingestion of Methanol.Distribution in Postmortem Tissues and Fluids Including Pericardial Fluid and Vitreous Humor[J].Forensic Sci Int，1991，（49）:193-196.

[104]Andresen H，Schmoldt H，Matschke J，et al.Fatal Methanol Intoxication with Different Survival Times-Morphological Findings and Postmortem Methanol Distribution[J].Forensic Sci Int，2008，（179）:206-210.

[105]Avella J，Briglia E，Harleman G，et al.Percutaneous Absorption and Distribution of Methanol in a Homicide[J]. J Anal Toxicol，2005，（29）:734-737.

[106]Akhgari M，Panahianpour M H，Bazmi E，et al.Fatal Methanol Poisoning:Features of Liver Histopathology[J]. Toxicol Ind Health，2013，（29）:136-141.

[107]Hantson P，Haufroid V，Mahieu P.Determination of Formic Acid Tissue and Fluid Concentrations in Three Fatalities Due to Methanol Poisoning[J].Am J Forensic Med Pathol，2000，（21）:335-338.

[108]Moriya F，Hashimoto Y.A Fatal Poisoning Caused byMethomyl and Nicotine[J].Forensic Sci Int，2005，（149）: 167-170.

[109]McIntyre I M，Hamm C E，Aldridge L，et al.Acute Methylone Intoxication in an Accidental Drowning-A Case Report[J].Forensic Sci Int，2013，（231）:e1-e3.

[110]Cantrell F L，Ogera P，Mallett P，et al.Fatal Oral Methylphenidate Intoxication with Postmortem Concentrations[J].J Forensic Sci，2014，（59）:847-849.

[111]Rohrig T P，Rundle D A，Leifer W N.Fatality Resulting from Metoprolol Overdose[J].J Anal Toxicol，1987，（11）: 231-232.

[112]Stajic M，Granger R H，Beyer J C.Fatal Metoprolol Overdose[J].J Anal Toxicol，1984，（8）:228-230.

[113]Kempton J，Manoukian A，Levine B，et al.A Mexiletine Intoxication[J].J Anal Toxicol，1994，（18）:346-347.

[114]Rohrig T P，Harty L E.Postmortem Distribution of Mexiletine in a Fatal Overdose[J].J Anal Toxicol，1994，（18）:354-356.

[115]Anderson D T，F(xiàn)ritz K L，Muto J J.Distribution of Mirtazapine（Remeron）in Thirteen Postmortem Cases[J].J Anal Toxicol，1999，（23）:544-548.

[116]Kirkton C，McIntyre I M.Therapeutic and Toxic Concentrations of Mirtazapine[J].J Anal Toxicol，2006，（30）:687-691.

[117]McIntyre I M，Trochta A，Stolberg S，et al.Mitragynine‘Kratom’Related Fatality:A Case Report with Postmortem Concentrations[J].J Anal Toxicol，2015，（39）:152-155.

[118]McIntyre I M，King C V，Staikos V，et al.A Fatality Involving Moclobemide，Sertraline，and Pimozide[J].JForensic Sci，1997，（42）:951-953.

[119]Winek C L，Wahba W W，Rozin L.Heroin Fatality Due to Penile Injection[J].Am J Forensic Med Pathol，1999，（20）:90-92.

[120]Gock S B，Wong S H，Stormo K A，et al.Self-Intoxication with Morphine Obtained from an Infusion Pump[J].J Anal Toxicol 1999，（23）:130-133.

[121]Kintz P，Mangin P，Lugnier A A，et al.Toxicological Data after Heroin Overdose[J].Hum Toxicol，1989，（8）:487-489.

[122]Wetli C V，Rao A，Rao V J.Fatal Heroin Body Packing[J].Am J Forensic Med Pathol，1997，（18）:312-318.

[123]Seetohul L N，De Paoli G，Drummond G，et al.Nefopam Hydrochloride:A Fatal Overdose[J].JAnalToxicol，2015，（39）:486-489.

[124]Kemp P M，Sneed G S，George C E，et al.Postmortem Distribution of Nicotine and Cotinine from a Case Involving the Simultaneous Administration of Multiple Nicotine Transdermal Systems[J].J Anal Toxicol，1997，（21）:310-313. [125]Jenkins A J，Sarconi K M，Raaf H N.Determination of Olanzapine in a Postmortem Case[J].J Anal Toxicol，1998，（22）:605-609.

[126]Linnet K，Steentoft A，Simonsen K W，et al.An Oxcarbazepine-Related Fatality with an Overview of 26 Oxcarbazepine Postmortem Cases[J].ForensicSciInt，2008，（177）: 248-251.

[127]Anderson D T，F(xiàn)ritz K L，Muto J J.Oxycontin:The Concept of a “Ghost Pill”and the Postmortem Tissue Distribution of Oxycodone in 36 Cases[J].J Anal Toxicol，2002，（26）:448-459.

[128]Al-Asmari A I，Anderson R A，Cooper G A.Oxycodonerelated Fatalities in the West of Scotland[J].J Anal Toxicol，2009，（33）:423-432.

[129]Romain N，Giroud C，Michaud K，et al.Suicide by Injection of a Veterinarian Barbiturate Euthanasia Agent: Report of a Case and Toxicological Analysis[J].Forensic Sci Int，2003，（131）:103-107.

[130]Crichton M L，Shenton C F，Drummond G，et al.Analysis of Phenazepam and 3-Hydroxyphenazepam in Post-Mortem Fluids and Tissues[J].Drug Test Anal，2015，7（10）:926-936.

[131]Sturner W Q，Spruill F G，Garriott J C.Two Propylhexedrine-Associated Fatalities:Benzedrine Revisited[J]. J Forensic Sci，1974，（19）:572-574.

[132]Flammia D D，Valouch T，Venuti S.Tissue Distribution of Quetiapine in 20 Cases in Virginia[J].J Anal Toxicol，2006，（30）:287-292.

[133]Langman L J，Kaliciak H A，Carlyle S.Fatal Overdoses Associated with Quetiapine[J].J Anal Toxicol，2004，（28）: 520-525.

[134]Hopenwasser J，Mozayani A，Danielson T J，et al.Postmortem Distribution of the Novel Antipsychotic Drug Quetiapine[J].J Anal Toxicol，2004，（28）:264-267.

[135]Coopman V，De Leeuw M，Cordonnier J，et al.Suicidal Death after Injection of a Castor Bean Extract（Ricinus communis L.）[J].Forensic Sci Int，2009，（189）:e13-e20. [136]Duband S，Bidat C，Gaillard Y，et al.A Fatal Intoxication Case Involving Ropinirole[J].J Forensic Leg Med，2012，（19）:422-425.

[137]Lewis R J，Angier M K，Williamson K S，et al.Analysis of Sertraline in Postmortem Fluids and Tissues in 11 Aviation Accident Victims[J].J Anal Toxicol，2013，（37）:208-216.

[138]Lindsey T，O’Hara J，Irvine R，et al.Strychnine Overdose Following Ingestion of Gopher Bait[J].J Anal Toxicol，2004，（28）:135-137.

[139]Ferslew K E，Hagardorn A N，McCormick W F.Postmortem Determination of the Biological Distribution of Sufentanil and Midazolam after an Acute Intoxication[J].JForensic Sci，1989，（34）:249-257.

[140]Lin D L，Lin R L.Distribution of 11-Nor-9-Carboxy-D9-Tetrahydrocannabinol in Traffic Fatality Cases[J].J Anal Toxicol，2005，（29）:58-61.

[141]Mozayani A，Carter J，Nix R.Distribution of Topiramate in a Medical Examiner’s Case[J].J Anal Toxicol，1999，（23）:556-558.

[142]Moriya F，Hashimoto Y.A Case of Fatal Triazolam Overdose[J].Leg Med，2003，5（Suppl 1）:S91-S95.

[143]Bayley M，Walsh F M，Valske M J.Report of a Fatal，Acute Tripelennamine Intoxication[J].J Forensic Sci，1975，（20）:539-543.

[144]Poklis A，Poklis J L，Trautman D，et al.Disposition of Valproic Acid in a Case of Fatal Intoxication[J].J Anal Toxicol，1998，（22）:537-540.

[145]Stove C P，De Letter E A，Piette M H，et al.Fatality Following a Suicidal Overdose with Varenicline[J].Int J Legal Med，2013，（127）:85-91.

[146]Kunsman G W，Kunsman C M，Presses C L，et al.A Mixed-Drug Intoxication Involving Venlafaxine and Verapamil[J].J Forensic Sci，2000，45:926-928.

[147]Goeringer K E，McIntyre I M，Drummer O H.Postmortem Tissue Concentrations of Venlafaxine[J].Forensic Sci Int，2001，（121）:70-75.

[148]Parsons A T，Anthony R M，Meeker J E.Two Fatal Cases of Venlafaxine Poisoning[J].J Anal Toxicol，1996，（20）: 266-268.

[149]Jaffe P D，Batziris H P，van der Hoeven P，et al.A Study Involving Venlafaxine Overdoses:Comparison of Fatal and Therapeutic Concentrations in Postmortem Specimens[J].J Forensic Sci，1999，（44）:193-196.

[150]Kintz P，Tracqui A，Potard D，et al.An Unusual Death by Zipeprol Overdose[J].Forensic Sci Int，1994，（64）:159-163.

[151]Gock S B，Wong S H，Nuwayhid N，et al.Acute Zolpidem Overdose—Report of Two Cases[J].J Anal Toxicol，1999，（23）:559-562.

[152]Meatherall R C.Zopiclone Fatality in a Hospitalized Patient[J].J Forensic Sci，1997，（42）:340-343.

[153]Anna Pelander，Johanna Ristimaa，Ilkka Ojanper?.Vitreous Humor as an Alternative Matrix for Comprehensive Drug Screening in Postmortem Toxicology by Liquid Chromatography-Time-of-Flight Mass Spectrometry[J].J Anal Toxicol，2010，（34）:312-318.

[154]Imir G M，Robert L F，Iain M M.Assessment and Comparison of Vitreous Humor as an Alternative Matrix for Forensic Toxicology Screening by GC-MS[J].J Anal Toxicol，2016，（40）:243-247.

[155]Pragst F，Spiegel K，Leuschner U，et al.Detection of 6-Acetylmorphine in Vitreous Humor and Cerebrospinal Fluid—Comparison with Urinary Analysis for Proving Heroin Administration in Opiate Fatalities[J].J Anal Toxicol，1999，（23）:168-172.

[156]Wyman J，Bultman S.Postmortem Distribution of Heroin Metabolites in Femoral Blood，Liver，Cerebrospinal Fluid，and Vitreous Humor[J].J Anal Toxicol，2004，（28）:260-263.

[157]Rees K A，Pounder D J，Osselton M D.Distribution of Opiates in Femoral Blood and Vitreous Humour in Heroin/ Morphine-RelatedDeaths[J].ForensicSci Int，2013，（226）: 152-159.

[158]Robertson M D，Drummer O H.Postmortem Distribution and Redistribution of Nitrobenzodiazepines in Man[J].J Forensic Sci，1998，（43）:9-13.

[159]Scott K S，Oliver J S.The Use of Vitreous Humor as an Alternative to Whole Blood for the Analysis of Benzodiazepines[J].J Forensic Sci，2001，（46）:694-697.

[160]Rees KA，Seulin S，Yonamine M，et al.Analysis of Skeletal Muscle Has Potential Value in the Assessment of Cocainerelated Deaths[J].ForensicSciInt，2013，（226）:46-53.

[161]Jenkins A J，Oblock J.Phencyclidine and Cannabinoids in Vitreous Humor[J].Leg Med，2008，（10）:201-203.

[162]Scott K S，Oliver J S.Vitreous Humor as an Alternative Sample to Blood for the Supercritical Fluid Extraction of Morphine and 6-Monoacetylmorphine[J].Med Sci Law，1999，（39）:77-81.

[163]Knittel J L，Clay D J，Bailey K M，et al.Comparison of Oxycodone in Vitreous Humor and Blood Using EMIT Screening and Gas Chromatographic-Mass Spectrometric Quantitation[J].J Anal Toxicol，2009，（33）:433-438.

[164]Antonides H M，Kiely E R，Marinetti L J.Vitreous Fluid Quantification of Opiates，Cocaine，and Benzoylecgonine: Comparison of Calibration Curves in both Blood and Vitreous Matrices with Corresponding Concentrations in Blood[J].J Anal Toxicol，2007，（31）:469-476.

[165]Duer W C，Spitz D J，McFarland S.Relationships between Concentrations of Cocaine and Its Hydrolysates in Peripheral Blood，Heart Blood，Vitreous Humor and Urine[J].J Forensic Sci，2006，（51）:421-425.

[166]Fernandez P，Aldonza M，Bouzas A，et al.GC-FID Determination of Cocaine and Its Metabolites in Human Bile and Vitreous Humor[J].J Appl Toxicol，2006，（26）:253-257.

[167]Carvalho V M，F(xiàn)ukushima A R，F(xiàn)ontes L R，et al.Cocaine Postmortem Distribution in Three Brain Structures: A Comparison with Whole Blood and Vitreous Humour[J].J Forensic Leg Med，2013，（20）:143-145.

[168]Kintz P，Villain M，Cirimele V，et al.GHB in Postmortem Toxicology.Discrimination between Endogenous Production from Exposure Using Multiple Specimens[J]. Forensic Sci Int，2004，（143）:177-181.

[169]Andresen-Streichert H，Jensen P，Kietzerow J，et al. Endogenous Gamma-Hydroxybutyric Acid（GHB）Concentrations in Post-Mortem Specimens and Further Recommendation for Interpretative Cut-Offs[J].Int J Legal Med，2014，（129）:57-68.

[170]Castro A L，Dias M，Reis F，et al.Gamma-Hydroxybutyric Acid Endogenous Production and Post-Mortem Behaviour—The Importance of Different Biological Matrices，Cut-Off Reference Values，Sample Collection and Storage Conditions[J].J Forensic Leg Med，2014，（27C）: 17-24.

[171]Ioan B G，Jitaru V，Damian R，et al.Study on the Relationship between the Concentration of Ethanol in the Blood，Urine and the Vitreous Humour[J].Rom J Leg Med，2015，（23）:211-216.

[172]Jones A，Holmgren P.Uncertainty in Estimating Blood Ethanol Concentrations by Analysis of Vitreous Humour[J]. J Clin Pathol.2001，54（9）:699-702.

[173]DiMaio V J，DiMaio D.Forensic Pathology[M].2nd ed. Florida:CRC Press LLC，2001.

[174]Olsen T，Hearn W L.Stablity of Ethanol in Postmortem Blood and Vitreous Humor in Long-Term Refrigerated Storage[J].J Anal Toxicol，2003，27（7）:517-519.

[175]De Letter E A，Clauwaert K M，Belpaire F M，et al. Post-Mortem Redistribution of 3，4-Methylenedioxymethamphetamine（MDMA，“Ecstasy”）in the Rabbit.Part I:Experimental Approach after in Vivo Intravenous Infusion[J].Int J Legal Med，2002，（116）:216-224.

[176]Ritz S，Harding P，Martz W，et al.Measurement of Digitalis-Glycoside Levels in Ocular Tissues:A Way to Improve Postmortem Diagnosis of Lethal Digitalis-Glycoside Poisoning I.Digoxin[J].Int J Legal Med，1992，（105）:149-154.

[177]McKinney P E，Phillips S，Gomez H F，et al.Vitreous Humor Cocaine and Metabolite Concentrations:Do Postmortem Specimens Reflect Blood Levels at the Time of Death[J].J Forensic Sci，1995，（40）:102-107.

[178]Maskell P D，Albeishy M，De Paoli G，et al.Postmortem Redistribution of the Heroin Metabolites Morphine and Morphine-3-Glucuronide in Rabbits over 24h[J].Int J Legal Med，2016，130（2）:519-531.

（本文編輯：卓先義）

Evaluation of Vitreous Humor in Forensic Toxicology Application

SHEN Min,XIANG Ping
(Shanghai Key Laboratory of Forensic Medicine,Shanghai Forensic Service Platform,Institute of Forensic Science, Ministry of Justice,Shanghai 200063,China)

Vitreous humor has become a specimen that attracts attentions and is worth studying because of its relatively independent anatomical characteristics.Drug concentrations in vitreous humor are less likely to be influenced by contamination,bacterial invasion,and postmortem redistribution.To promote the reliability of forensic toxicology results and to further study on the application of vitreous humor,this paper reviews the published quantitative and qualitative analysis for drugs in vitreous humor.The potential values and limitions of vitreous humor applied in forensic toxicology are discussed.It is proposed that vitreous humor is a suitable complementary specimen when blood is not available,or a control supplement to the blood analysis results,when they are affected by postmortem factors.

vitreous humor;postmortem toxicology;blood-ocular barrier;forensic toxicology;postmortem redistribution

DF795.1

A

10.3969/j.issn.1671-2072.2017.01.004

1671-2072-（2017）01-0023-22

2016-11-02

上海市科技攻關(guān)項目（15DZ1207500）；上海市法醫(yī)學(xué)重點實驗室資助項目（14DZ2270800）；上海市司法鑒定專業(yè)技術(shù)服務(wù)平臺資助項目（16DZ2290900）

沈敏（1955—），女，研究員，博士研究生導(dǎo)師，主要從事法醫(yī)毒物鑒定研究和司法鑒定管理工作。

E-mail:shenm@ssfjd.cn。