Mindray BC-6800全自動血液細胞分析儀低值血小板臨床性能評價

施紫微 黃 婷 胡錫林

Mindray BC-6800全自動血液細胞分析儀低值血小板臨床性能評價

施紫微①黃 婷①胡錫林②*

目的：評估Mindray BC-6800全自動血液細胞分析儀低值血小板(PLT)臨床性能，對比評價自動及手動進樣兩種模式低值PLT的檢測結(jié)果。方法：參照國際血液學標準化委員會(ICSH)、美國臨床實驗室標準化協(xié)會(CLSI)等標準，評估BC-6800低值PLT重復性及攜帶污染率；選取108份PLT減少患者抗凝全血，采用自動和手動兩種模式進行檢測，評估兩種模式對低值PLT檢測結(jié)果的一致性。結(jié)果：自動及手動模式低值PLT均有較好重復性，20×109/L以上樣本兩種模式變異系數(shù)(CV)均能保證在5%以內(nèi)。20×109/L以內(nèi)樣本兩種模式重復測試標準差(SD)和極差(R)均非常小，標準差(SD)分別為0.5和0.8，極差(R)分別為1和2，結(jié)果波動均非常小。自動及手動模式PLT攜帶污染率均＜1%，高值PLT對低值PLT均無攜帶干擾。108份低值PLT樣本兩個模式相關(guān)系數(shù)達到0.9910。對臨床醫(yī)學決定水平濃度點進行分析，兩種模式偏差較小。結(jié)論：Mindray BC-6800全自動血液細胞分析儀對低值PLT具有良好臨床性能，自動與手動模式對低值PLT檢測一致性較好，可根據(jù)實際情況選擇合適的模式進行測試。

血液細胞分析儀；自動進樣；手動進樣；血小板減少；性能評估

[First-author’s address]Department of Clinical Laboratory, the Second Inpatient, Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Command, Fuzhou 350003, China.

血小板(platelet，PLT)是研究止血與凝血障礙的重要指標之一，準確的PLT計數(shù)在臨床應用和治療中均具有十分重要的參考意義[1-2]。Mindray BC-6800全自動血液細胞分析儀是全自動五分類血液細胞分析儀，采用激光散射、鞘流阻抗和流式細胞技術(shù)(含熒光染色)等方法對血液樣本進行細胞分類計數(shù)；同時血紅蛋白采用比色法進行測定[3-4]。本研究參照國際血液學標準委員會(nternational Council for Standardization in Haematology，ICSH)和美國國家臨床實驗室標準化協(xié)會(Clinical and Laboratory Sstandards Institute，CLSI)的相關(guān)標準和指南，對該儀器的低值PLT檢測能力進行研究，其主要研究項目包括低值PLT重復性、攜帶污染率、自動進樣與手動進樣兩種模式對低值PLT檢測的一致性。通過對這些項目的評估確認BC-6800是否滿足低值PLT日常檢測的需要，自動與手動進樣兩種模式在低值PLT檢測能力是否有差異。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

(1)儀器。BC-6800全自動血液細胞分析儀(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)。

(2)試劑。BC-6800全自動血液細胞分析儀相應配套檢測試劑：M-68FD染色液(批號2015042801)、M-68LB溶血劑(批號2015081805)、M-68LD溶血劑(批號2015081605)、M-68LH溶血劑(批號2015061804)以及M-68DS稀釋液(批號20150811102)原裝試劑均由深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司提供。乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)和真空采血管(2 ml)由福州長庚醫(yī)療器械有限公司提供，均在有效期內(nèi)使用。

(3)質(zhì)控品。BC-6D血細胞分析儀室內(nèi)質(zhì)控物：批號分別為MB015L(低值)、MB015N(中值)及MB015H(高值)，由深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司提供，均在有效期內(nèi)使用。

1.2 標本來源

標本均取自南京軍區(qū)福州總醫(yī)院2016年1-3月門診和住院的108例血液病患者。均按照世界衛(wèi)生組織(WHO)《靜脈采血的最佳操作》[5]采集的靜脈血液。

1.3 檢測方法

BC-6800全自動血液分析儀在實驗前使用廠商配套校準品進行校準，并且參加福建省臨床檢驗中心室間質(zhì)評成績優(yōu)秀以及南京軍區(qū)臨床檢驗中心室間質(zhì)量評比成績優(yōu)秀。每日對高值、中值、低值進行室內(nèi)質(zhì)量控制，在質(zhì)量控制后進行檢測。所有操作均嚴格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[6]的要求。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用Microsoft Excel 2007對重復性及攜帶污染率數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計，兩種模式對比采用Analyseit v4.20統(tǒng)計軟件進行Deming Regression和Bland-Altman Plot分析。

2 結(jié)果

2.1 重復性試驗

選取3份低值PLT全血標本，分別在自動進樣模式及手動進樣模式進行重復性測試，其中一份PLT≤20×109/L，一份PLT20～40×109/L，另一份PLT在40～60×109/L。每例樣本分別在自動進樣模式及手動進樣模式各連續(xù)檢測6次，計算兩種模式各組的均值(mean)、標準差(standard deviation，SD)及變異系數(shù)(coefficient variation，CV)%，對于低值樣本，從統(tǒng)計學上看PLT≤20×109/L的CV%會比PLT20～40×109/L和40～60×109/L樣本的CV%大，推薦采用SD作為判斷標準，建議SD≤3×109/L。重復性試驗結(jié)果見表1、表2和表3。

表1 自動進樣和手動進樣的重復性[PLT＜(20×109)/L]

表2 自動進樣和手動進樣的重復性[PLT(20～40)×109/L]

表3 自動進樣和手動進樣的重復性[PLT(40～60)×109/L]

2.2 攜帶污染率測定

采用自動進樣模式和手動進樣模式，各選取一份高值標本，連續(xù)檢測3次(H1、H2、H3)，立即選取一份低值標本連續(xù)檢測3次(L1、L2、L3)。攜帶污染率計算為公式1：

攜帶污染率要求＜1.0%，攜帶污染率測定結(jié)果見表4。

表4 攜帶污染率測定結(jié)果

2.3 兩種進樣方式低值PLT對比測試

選取108例無PLT聚集報警的低值PLT標本，對同一份標本采用自動進樣模式與手動進樣模式分別進行分析。將各檢測標本結(jié)果采用EP9-A3進行統(tǒng)計，并用Deming Regression和Bland-Altman Plot進行分析，醫(yī)學決定水平的各濃度點要求絕對偏差在±5×109/L以內(nèi)，相對偏差在±10%以內(nèi)。

(1)將自動進樣與手動進樣模式進行Deming Regression分析，其結(jié)果如圖1所示。

圖1 自動進樣與手動進樣模式Deming Regression分析圖

圖2 自動進樣與手動進樣模式Bland-Altman Plot分析圖

(2)將自動進樣與手動進樣模式檢測結(jié)果偏差進行Bland-Altman Plot分析，＞95%的濃度點在偏差的95%置信區(qū)間內(nèi)，其結(jié)果如圖2所示。(3)醫(yī)學決定水平各濃度點的偏差分析。在臨床上，當PLT在20～50×109/L時，可有輕度出血或手術(shù)后出血癥狀，當＜20×109/L時，可有較嚴重出血。此外，美國CLSI H26-A2文件上將PLT為10×109/L定義為一個非常重要的醫(yī)學決定水平濃度點，因此參照EP9-A3文件的統(tǒng)計方法，對10×109/ L、20×109/L及50×109/L的3個濃度點進行了分析(見表5)。

表5 自動進樣與手動進樣醫(yī)學決定水平濃度點的偏差分析

(4)將自動進樣與手動進樣模式進行回歸分析(見表6)。

3 討論

BC-6800采用阻抗法、激光散射法、結(jié)合熒光染色的流式細胞技術(shù)進行細胞分類計數(shù)，采用比色法進行血紅蛋白測定。輸出33項測量參數(shù)加14項研究參數(shù)；紅細胞分布直方圖、PLT分布直方圖兩個直方圖；分類散點圖、嗜堿散點圖、網(wǎng)織紅散點圖、光學PLT散點圖、擴展網(wǎng)織紅散點圖及有核紅散點圖多個二維散點圖及三維散點圖[7-9]。具有手動、自動及預稀釋等3種血樣進樣方式，CBC、CBC＋DIFF、CBC＋DIFF＋RET、CBC＋RET、CBC＋NRBC、CBC＋DIFF＋NRBC、CBC＋DIFF＋RET＋NRBC、RET等8種測量模式，每小時最快可測量125個樣本[10-11]。

表6 自動進樣與手動進樣的回歸分析

本研究重點對該儀器的低值PLT檢測能力進行研究，主要研究項目包括低值PLT重復性、攜帶污染率、自動進樣與手動進樣兩種模式對低值PLT檢測的一致性[12]。通過對這些項目的評估確認BC-6800是否滿足低值PLT日常檢測的需要，自動與手動進樣兩種模式在低值PLT檢測能力的差異，其評估結(jié)果如下。

(1)自動進樣與手動進樣對低值PLT均具有良好的重復性，PLT＜20×109/L、PLT在20～40×109/L及PLT在40～60×109/L的3段內(nèi)，自動進樣與手動進樣SD均＜3，而20×109/L以上的樣本兩種模式CV%均能夠保證在5%以內(nèi)。而20×109/L以內(nèi)的樣本主要因為樣本值本身比較小所以CV%略大，但通過實際數(shù)據(jù)分析，兩種模式重復測試SD及極差(R)均非常小，自動進樣模式及手動進樣模式SD分別為0.5及0.8，兩個模式R分別為1及2，結(jié)果波動均非常小。

(2)自動進樣與手動進樣攜帶污染率分析，自動進樣與手動進樣攜帶污染率分別為0.71%及0.36%，均＜1%，高值PLT樣本對低值PLT樣本無干擾。

(3)選取108例低值PLT樣本，采取兩種模式進行測試對比分析，相關(guān)系數(shù)達到了0.9910。對臨床醫(yī)學決定水平濃度點進行分析，兩種模式偏差較小，結(jié)果一致性較好。

準確的PLT計數(shù)對于出血性、血液性疾病的診斷以及臨床輸注PLT的評價等都具有十分重要的參考意義[13-15]。PLT的輸注日益增多以及價格昂貴和存在風險，因此不準確的PLT計數(shù)會誤導臨床診治，增加患者的經(jīng)濟負擔。本研究評估結(jié)果表明，Mindray BC-6800全自動血液細胞分析儀兩種檢測模式對低值PLT檢測結(jié)果具有高度一致性，但兩種檢測模式要求的血量具有較大差異，自動進樣模式為200 μl，手動進樣模式為150 μl。如果采用自動進樣模式進行標本測量，操作完全自動化，人工干預較少；而手動進樣要求血量較少，150 μl左右即可完成測試，但操作略為繁瑣。兩種進樣模式檢測全血細胞的原理雖然相同，但所需血液樣本量不同，表明兩種進樣模式的進樣通道和內(nèi)部管路不完全相同[16-17]。

手動模式檢測標本時由于人為因素的不穩(wěn)定性，因而可能會引起兩種檢測結(jié)果的偏差。在日常工作中多數(shù)標本均通過自動進樣模式進行檢測，并且室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量評價均在自動進樣模式下進行，因而不能反映手動進樣模式的準確性。手動模式雖然用血量少，適用于兒童和老年人等不易采血的患者，但由于人為因素，例如混勻狀態(tài)的不穩(wěn)定，因而CV較于自動進樣模式偏高。因此，在計數(shù)PLT時，尤其當檢測低值PLT時，應考慮此類誤差可能給檢測結(jié)果帶來的不準確性，必要時建議使用手工法進行復檢以保證結(jié)果的準確性。此外，由于某些生理或病理原因，有些標本PLT會較容易聚集，標本采集后放置時間越久，PLT越容易發(fā)生聚集，在PLT計數(shù)時應排除大體積PLT、PLT聚集等PLT假性減少的標本[18-20]。

4 結(jié)語

通過對Mindray BC-6800全自動血液細胞分析儀低值PLT的臨床性能評估，并對自動進樣及手動進樣兩種進樣模式低值PLT檢測結(jié)果進行對比評價，表明BC-6800對低值PLT檢測具有良好的臨床性能，自動進樣與手動進樣模式對低值PLT檢測一致性較好，可根據(jù)科室的實際情況，自行選擇合適的模式進行PLT檢測。

[1]International Council for Standardization in Hematology.ICSH guidelines for the evaluation of blood cell analysers including those used for differential leucocyte and reticulocyte countin[J]. Int J Lab Hematol，2014，36(6)：613-627.

[2]CLSI EP9-A3.Clinical and Laboratory Standards Institute(CLSI).Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples：Approved Guideline-Third Edition[S].CLSI，2013.

[3]朱忠勇.準確計數(shù)血小板方法學研究進展[J].國外醫(yī)學臨床生物化學與檢驗學分冊，2002，23(3)：131-132.

[4]柴麗.血小板5項參數(shù)檢測對腦梗死診斷的臨床應用價值分析[J].中國醫(yī)學裝備，2014，11(8)：60-61.

[5]WHO.WHO guidelines on drawing：blood best practices in phlebotomy[S].Atlanta，USA：WHO，2010.

[6]尚紅，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2015：123.

[7]徐菡，樂家新，蘭亞婷，等.Mindray BC-5300自動血液細胞分析儀性能的初步評價[J].中國醫(yī)學裝備，2013，10(8)：6-9.

[8]常靜秋，艾冬琴.邁瑞B(yǎng)C-6800血細胞分析儀的臨床性能評價[J].中國衛(wèi)生標準管理，2016，7(7)：153-155.

[9]李瑋，冉向陽，王縛鯤，等.野戰(zhàn)(應急)快速檢驗系統(tǒng)A型與常規(guī)實驗室血細胞分析儀檢測結(jié)果對比分析[J].中國醫(yī)學裝備，2014，11(6)：106-108.

[10]余秀群，沈?qū)W耕.BC-6800全自動血液分析儀3種吸樣模式測定結(jié)果可比性分析[J].中外醫(yī)學研究，2015，13(16)：70-71.

[11]石巍，嚴開斌.Coulter LH750全自動血液分析儀兩種進樣模式檢測結(jié)果比對分析[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2012，33(9)：1120，1137.

[12]吳敏，文艷，劉愛勝，等.Sysmex XN-9000血液分析儀檢測低值血小板的性能評價[J].中國醫(yī)學裝備，2015，12(8)：51-53.

[13]陳麟鳳，潘繼春，馮倩，等.26045例血小板輸注效果的影響因素分析研究[J].中國實驗血液學雜志，2015，23(4)：1081-1086.

[14]Lambert MP，Sullivan SK，F(xiàn)uentes RA，et al. Challenges and promises for the develo-pment of donor-independent platelet transfusions[J]. Blood，2013，121(17)：3319-3324.

[15]Marionneaux S，F(xiàn)rancisco N，Chan V，et al. Comparison of automated platelet counts and potential effect on transfusion decisions in cancer patients[J].Am J Clin Pathol，2013，140(5)：747-754.

[16]沈軼驪，顧國浩，沈怡敏，等.國產(chǎn)全自動血液分析儀的性能評價[J].重慶醫(yī)學，2015，44(35)：5003-5005.

[17]Meintker L，Ringwald J，Rauh M，et al.Comparison of automated differential blood cell counts from Abbott Sapphire，Siemens Advia 120，Beckman Coulter DxH 800，and Sysmex XE2100 in normal and pathologic samples[J]. Am J Clin Pathol，2013，139(5)：641-650.

[18]Zandecki M，Genevieve F，Gerard J，et al.Spurious counts and spurious results on hematology analysers：Areview.Part 1 platelets[J].Int J Lab Hematol，2007，29(1)：4-20.

[19]古宏心.血細胞分析儀測定血小板時假性減低的因素[J].中國醫(yī)藥導報，2007，4(5)：68-69.

[20]王桂英.BC-6800全自動血細胞計數(shù)儀檢測血小板假性減低原因分析及應對措施[J].青海醫(yī)藥雜志，2015，45(7)：58-60.

Clinical performance evaluation of low-count platelet samples for Mindray BC-6800 automatic hematology analyzer/

SHI Zi-wei, HUANG Ting, HU Xi-lin//China Medical Equipment,2017,14(2):23-26.

Objective:To evaluate the clinical performance of low-count platelet(PLT) samples for Mindray BC-6800 automatic hematology analyzer and compare the detection results between two sampling mode(automatic injection, manual injection).Methods:To evaluate the repeatability and contamination rate of low-count platelet samples depend on ICHC, CLSI and other standards; to choose 108 blood samples with thrombocytopenia and detect them in two kinds of detection mode (automatic and manual operation), and then evaluate the consistency of low-count PLT samples between the two modes.Results:The results of two detection modes for low-count platelet samples showed there were well repeatability between them. The CV% of those samples which PLT were upon 20×109/L can be assurance within 5% in two modes. The value and fluctuation of SD and range of those samples which PLT were under 20×109/L were smaller; the SD of two modes were 0.5 and 0.8, respectively; and the Range were 1 and 2, respectively. Both of the two modes were less than 1% in carryover rates, high PLT accounts has no influence on low accounts. The correlation coefficient was up to 0.9910 between the two modes by analyzing the 108 blood samples. The results demonstrate there were low deviation and well consistency between the two modes by analyzing medical decision level concentration point for them.Conclusion:Mindray BC-6800 has good clinical performance to detect low-count PLT samples and there are well consistency between automatic and manual operation. Clinical Laboratory chooses which suitable mode to detect samples may depend on self-situation.

Hematology analyzer; Automatic injection; Manual injection; Low-count platelet samples; Performance evaluation

1672-8270(2017)02-0023-04

R197.39

A

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2017.02.007

2016-09-16

①南京軍區(qū)福州總醫(yī)院第二住院部檢驗科 福建 福州 350003

②南京軍區(qū)鼓浪嶼療養(yǎng)院檢驗科 福建 廈門 361002

*通訊作者：Hxl122@163.com

施紫微,女,(1990- ),本科學歷，技師。南京軍區(qū)福州總醫(yī)院第二住院部檢驗科，從事臨床檢驗工作和免疫學檢驗工作。