解毒祛瘀法對高危骨髓增生異常綜合征患者細(xì)胞免疫表型的影響*

錢麗麗 李曉芳

浙江省中醫(yī)院 浙江 杭州 310006

解毒祛瘀法對高危骨髓增生異常綜合征患者細(xì)胞免疫表型的影響*

錢麗麗 李曉芳

浙江省中醫(yī)院 浙江 杭州 310006

目的：觀察解毒祛瘀法治療對高危型骨髓增生異常綜合征患者細(xì)胞免疫表型的影響。方法：采用隨機對照法將高危型骨髓增生異常綜合征的患者分為治療組和對照組各18例，治療組以解毒祛瘀中藥聯(lián)合西藥治療，對照組僅用西藥治療。觀察總體有效率及細(xì)胞免疫表型（CD13、CD14、CD15、CD33、CD34）變化。結(jié)果：治療組總體有效率明顯高于對照組(P＜0.05)；治療組CD13、CD14、CD33、CD34較治療前明顯降低，治療組CD15對照治療前明顯升高(均P＜0.05)；治療組治療前后差值與對照組治療前后差值比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論：解毒祛瘀法對高危型骨髓增生異常綜合征有較好療效，并能對患者免疫表型細(xì)胞有調(diào)節(jié)作用，是一種可行的治療選擇。

解毒祛瘀法 骨髓增生異常綜合征 細(xì)胞免疫表型 臨床研究

骨髓增生異常綜合征(MDS)是發(fā)生在造血干細(xì)胞階段的異質(zhì)性克隆性疾病，主要特征是無效造血及較高的白血病轉(zhuǎn)化率。血象可呈全血細(xì)胞減少，或任何一系及二系血細(xì)胞減少，表現(xiàn)為貧血、感染或出血[1]。其發(fā)病機制至今未明，臨床上尚無確切有效的治療方法，目前西醫(yī)常規(guī)治療對MDS的總體療效在50%以下[2]。本研究納入18例高危型MDS患者并予解毒祛瘀法聯(lián)合西藥治療，以總體有效率和細(xì)胞免疫表型的變化為主要觀察指標(biāo)，探討其可能的治療機制。

1 臨床資料

1.1 病例選擇標(biāo)準(zhǔn)：參照《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》[3]，根據(jù)國際預(yù)后積分系統(tǒng)（IPSS）進(jìn)行危險度分型[4]。排除標(biāo)準(zhǔn)：①排除其它引起全血細(xì)胞減少的疾病，如白血病、PNH、再障等；②合并嚴(yán)重心血管、肝、腎、造血系統(tǒng)及免疫系統(tǒng)疾病、精神病患者；③有嚴(yán)重不可控制的感染、出血等癥狀的患者；④中醫(yī)辨證證型復(fù)雜或進(jìn)行造血干細(xì)胞移植者；⑤妊娠或哺乳期婦女，對本試驗處方組成過敏者。

1.2 一般資料：2013年10月～2015年10月在本院經(jīng)血常規(guī)、骨穿、活檢、染色體等檢查確診為MDS患者，IPSS評分為高危型，共36例。隨機分為治療組及對照組各18例。治療組男8例，女10例，中位年齡39歲。對照組男7例，女11例，中位年齡42歲。

2 治療方法

2.1 對照組：使用反應(yīng)停、雷利度胺或地西他賓治療；必要時輸注紅細(xì)胞及血小板等支持治療。

2.2 治療組：在對照組的基礎(chǔ)上，加用中藥治療。根據(jù)我院既往治療MDS經(jīng)驗，高危型患者往往表現(xiàn)出面色黯淡，或鼻衄、齒衄、肌衄，低熱不退，肌膚甲錯，舌紅絳、苔黃少津，脈細(xì)弦澀等表現(xiàn)。屬陰陽雙虧，瘀毒互結(jié)證。應(yīng)以解毒祛瘀，陰陽雙補為治法。方選膈下逐瘀湯、青蒿鱉甲湯合十全大補湯，藥用：五靈脂、丹皮、烏藥、香附、知母各6g，當(dāng)歸、鱉甲、白術(shù)各15g，川芎、紅花、枳殼各9g，桃仁、赤芍、青蒿、熟地、白芍、茯苓、生姜、大棗各12g，延胡索、甘草各3g，生地、黨參各20g。每日1劑，水煎，早晚分服。

兩組均以28天為1療程，3個療程為1個治療周期。

3 療效觀察

3.1 療效評價：總體治療療效評價參照《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》[3]擬定。完全緩解：骨髓穿刺原始細(xì)胞＜5%，各系細(xì)胞無異常發(fā)育；外周血無原始細(xì)胞，各系細(xì)胞無異常發(fā)育，絕對值恢復(fù)正常且在不使用造血刺激因子的情況下維持至少2個月。部分緩解：骨髓穿刺原始細(xì)胞較前減少50%或以上，或診斷分型較前相比轉(zhuǎn)化為較輕的亞型，其余標(biāo)準(zhǔn)同完全緩解。血液學(xué)改善：紅系：顯效：治療前血紅蛋白低于正常值，治療后升高20g/L以上或脫離輸注紅細(xì)胞；有效：治療前血紅蛋白低于正常值，治療后升高10～20g/L或輸血需求較前減少50%。巨核系：顯效：治療前血小板低于正常值，治療后較前升高30× 109/L以上或脫離輸注血小板；有效：治療前血小板低于正常值，治療后升高10-30×109/L之間。粒系：顯效：治療前中性粒細(xì)胞數(shù)低于正常值，治療后增加100%以上或凈增值≥0.5×109/L；有效：治療前中性粒細(xì)胞數(shù)低于正常值，治療后增加100%以上但凈增值＜0.5×109/L。無效：不能歸入上述任何一種情況?？傆行剩剑ㄍ耆徑猓糠志徑猓簩W(xué)改善）/總例數(shù)×100%。

3.2 細(xì)胞免疫分型檢測方法：采集患者治療前后骨髓標(biāo)本進(jìn)行細(xì)胞免疫表型分析。采用BD公司提供的鼠抗人單克隆抗體標(biāo)記的FITC-CD13、FITC-CD14、FITCCD15、PE-CD33、PE-CD34、及Percp-CD45，BDFACS Calibur流式細(xì)胞儀上機進(jìn)行檢測。CD45/SSC設(shè)門分析各群細(xì)胞占有核細(xì)胞比例。

3.3 統(tǒng)計學(xué)方法：應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件，計量資料用均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差（±s）描述，對正態(tài)資料采用成組t檢驗；計數(shù)資料采用卡方檢驗。P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。

3.4 治療結(jié)果：分述如下。

3.4.1 總體療效評價：見表1。

表1 總體療效評價

3.4.2 治療組治療前后細(xì)胞免疫表型結(jié)果：見表2。

表2 治療組細(xì)胞免疫表型測定結(jié)果（±s，n=18）

表2 治療組細(xì)胞免疫表型測定結(jié)果（±s，n=18）

注：與治療前比較，*P＜0.05

免疫表型CD13 CD14 CD15 CD33 CD34治療前35.16±2.72 10.90±1.83 42.47±8.34 26.58±4.22 7.77±1.15治療后30.34±3.71*8.53±2.00*45.09±8.35*25.44±4.82*7.14±1.36*

3.4.3 治療組與對照組治療前后細(xì)胞免疫表型差值進(jìn)行比較：見表3。

表32 組治療前后細(xì)胞免疫表型差值結(jié)果比較（±s）

表32 組治療前后細(xì)胞免疫表型差值結(jié)果比較（±s）

注：與對照組比較，*P＜0.05

免疫表型CD13 CD14 CD15 CD33 CD34對照組（n=18）治療前后差值0.52±0.89 0.23±0.54 -0.57±1.51 0.42±0.74 0.15±0.42治療組（n=18）治療前后差值4.82±3.09*2.43±1.07*-2.62±2.44*1.14±1.29*0.63±0.73*

4 討論

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，此病的發(fā)生是由多種因素導(dǎo)致的正氣虧虛，邪毒外侵，瘀血內(nèi)阻，虛實錯雜的癥候[5]。我院研究團(tuán)隊認(rèn)為MDS的發(fā)病是以脾腎虧虛為本,瘀毒內(nèi)蘊為標(biāo)的動態(tài)發(fā)病過程。尤其是高危型患者，主要表現(xiàn)為陰陽雙虧，毒瘀互結(jié)的癥候，故治以解毒祛瘀法為主。MDS由于早期造血細(xì)胞的分化成熟障礙，失去了向正?？寺≡鲋撤只哪芰?同時細(xì)胞膜上與細(xì)胞分化有關(guān)的蛋白也有相應(yīng)的變化[6]，如單核系特異性抗原CD14、早期粒系抗原CD13、CD33以及干細(xì)胞抗原CD34表達(dá)增多，晚期粒細(xì)胞抗原CD15表達(dá)減少[7-9]。臨床觀察表明，治療組治療后CD13、CD14、CD33、CD34的表達(dá)較治療前顯著降低，CD15較前顯著增高，且治療組治療前后差值也明顯大于對照組（均P＜0.05）。提示中醫(yī)藥解毒祛瘀法可通過減少髓系異常表達(dá)并促進(jìn)細(xì)胞分化，改善高危型MDS的狀態(tài)。

綜上所述，解毒祛瘀法治療高危型骨髓增生異常綜合征，總體有效率較單用西藥對照組高，并能通過抑制惡性克隆、改善粒系分化成熟障礙起到治療作用，是有效的治療選擇。

[1]鄧家棟,楊崇禮,楊天楹,等.鄧家棟臨床血液學(xué)[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2001：753.

[2]邱林.骨髓增生異常綜合癥發(fā)病機制和臨床治療的研究進(jìn)展[J].臨床腫瘤學(xué)雜志,2009,14(12)：1057-1063.

[3]張之南，沈悌.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)[M].第3版.北京:科學(xué)出版社,2008：144-145.

[4]Garcia-ManeroG.Myelodysplasticsyndromes:2014 update on diagnosis,risk-stratification,and management[J].Am J Hematol,2014,89(1)：97-108.

[5]張翔,周郁鴻.活血化瘀法在血液系統(tǒng)惡性腫瘤臨床治療中的應(yīng)用研究概況[J].浙江中醫(yī)雜志,2012,47(3)：229-231.

[6]趙琳，邱仲川，陳佩，等.復(fù)方參鹿顆粒對相對低危骨髓增生異常綜合征患者骨髓細(xì)胞免疫表型的影響[J].新中醫(yī)，2013,45(4)：104-106.

[7]王衍晶,姜鳳,高霞.骨髓增生異常綜合征(MDS)免疫表型研究[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2009,31(3)：342-345.

[8]李志超,梁輝.骨髓增生異常綜合征中的免疫紊亂與病情進(jìn)展[J].國際輸血及血液學(xué)雜志,2007,30(1)：114-116.

[9]王韞秀，張繼紅，胡延平，等.多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)在慢性粒單核細(xì)胞白血病、骨髓增生異常綜合癥及急性單核細(xì)胞白血病免疫表型鑒別中的應(yīng)用及其意義[J].中國實驗血液學(xué)雜志，2012,20（4）：857-862.

2016-07-07

浙江省中醫(yī)藥優(yōu)秀青年人才基金計劃中醫(yī)藥分型論治對MDS患者細(xì)胞免疫表型的影響，編號：2012ZQ010