2014年-2015年粵北規(guī)模豬場H1亞型豬流感血清學(xué)調(diào)查與分析

胡鴻惠，黃健強(qiáng)，南文金，吳靜波，彭國良

(韶關(guān)學(xué)院,廣東韶關(guān) 512005)

2014年-2015年粵北規(guī)模豬場H1亞型豬流感血清學(xué)調(diào)查與分析

胡鴻惠，黃健強(qiáng)，南文金，吳靜波，彭國良

(韶關(guān)學(xué)院,廣東韶關(guān) 512005)

為調(diào)查粵北地區(qū)規(guī)?；i場H1亞型豬流感病毒的流行和感染情況，采用H1亞型豬流感抗體檢測試劑盒檢測2014年-2015年采自粵北25個未進(jìn)行SIV免疫的規(guī)?；i場的376份豬血清。結(jié)果表明,2014年和2015年H1亞型豬流感感染總抗體率分別為13.04%和14.58%，而 1月～3月的感染抗體陽性率分別為19.05%和25.00%。該地區(qū)H1亞型豬流感感染抗體陽性率相對較低，表現(xiàn)出一定的區(qū)域性特征，1月～3月感染抗體陽性率均明顯高于其他月份，該地區(qū)冬季抗體陽性率相對較高。

豬流感；抗體陽性率；H1亞型

豬流感(Swine influenza，SI)廣泛存在我國各地，能使患病豬群生產(chǎn)性能下降，影響豬群健康及豬肉品質(zhì)，給養(yǎng)豬業(yè)造成極大危害。與禽流感不同，甲型H1N1流感能夠以人傳人，早在2009年4月，墨西哥公布發(fā)生人傳人的甲型H1N1流感案例，引起了各界重視，這是一宗由H1N1病毒感染給人的病例，并在基因分析的過程發(fā)現(xiàn)基因內(nèi)有豬、雞及來自亞洲、歐洲及美洲人種的基因，繼而引發(fā)了科研工作者們對豬流感病毒(Swine influenza virus，SIV)的研究熱潮，而養(yǎng)殖場戶則并不是非常重視[1-2]。根據(jù)流感病毒血凝素(HA)和神經(jīng)氨酸酶(NA)的抗原性不同，流感病毒分為15種不同的H抗原亞型和9種不同的N抗原亞型，其中H1和H3亞型的豬流感在一些省市的豬群中表現(xiàn)為地方性流行的特點(diǎn)[3-4]。徐敏等[5]調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)廣東省內(nèi)豬流感流行情況存在明顯的地域性差異，粵西和珠三角地區(qū)豬流感抗體陽性率較高，而粵東和粵北則較低。有關(guān)廣東省的豬流感監(jiān)測和報道較少，但粵北地區(qū)是廣東省的南大門，又是廣東省、湖南省、江西省三省交匯的重要交通樞紐地，鑒于豬流感具有較大的公共衛(wèi)生學(xué)意義和粵北的區(qū)域特征，該病的監(jiān)測和防御不容忽視。本研究旨在調(diào)查廣東省粵北及其周邊區(qū)域規(guī)?；i場的H1亞型豬流感的流行情況，了解區(qū)域內(nèi)豬流感的流行動態(tài)，為豬流感的防控提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品 抽選2014年-2015年粵北地區(qū)及周邊規(guī)模豬場送檢的376份豬血清樣品，其中2014年的184份送檢樣品分別來自13個豬場，大部分為常規(guī)免疫監(jiān)測的樣品；2015年的192份送檢樣品來自12個豬場，均為常規(guī)免疫監(jiān)測送檢樣品。送檢豬場均未進(jìn)行過豬流感疫苗的免疫。采集的豬血使用實驗室常規(guī)方法進(jìn)行血清分離，置-20℃保存。

1.1.2 試劑盒 豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測試劑盒，武漢科前動物生物制品有限責(zé)任公司產(chǎn)品，生產(chǎn)批號為20150302。1.1.3 儀器設(shè)備 Multiskan MK3酶標(biāo)儀，美國Thermo公司產(chǎn)品；臺式冷凍離心機(jī)，美國Sigma公司產(chǎn)品；單道移液器、多道移液器，德國Brand公司產(chǎn)品；303A-4恒溫培養(yǎng)箱，購自上海申安醫(yī)療器械廠。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 根據(jù)豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測試劑盒說明書進(jìn)行血清樣品的檢測，檢測前將試劑盒和檢測樣品恢復(fù)到室溫，反應(yīng)步驟在25℃恒溫培養(yǎng)箱中孵育。

1.2.2 結(jié)果判定 按照試劑盒說明書進(jìn)行判定，兩個陽性對照孔的OD 630 nm值相差應(yīng)<0.3，陽性對照孔OD 630 nm值均應(yīng)≥0.8，且<2.0，試驗才成立。如果樣品OD 630 nm≥0.4，判為陽性；如果OD 630值<0.4，判為陰性。

2 結(jié)果

2.1 2014年不同規(guī)模豬場豬流感抗體檢測

檢測2014年的13個豬場184份豬血清，其中H1亞型豬流感血清樣品抗體陽性數(shù)為24份，總血清樣品陽性率為13.04%；H1亞型豬流感抗體陽性場數(shù)為8個，場陽性率為61.54%，每個場的陽性率由0～50%不等(表1)。

2.2 2015年不同規(guī)模豬場豬流感抗體檢測

檢測2015年的12個豬場192份豬血清，其中每個豬場各隨機(jī)抽選了16份豬血清，檢測結(jié)果顯示H1亞型豬流感血清樣品抗體陽性數(shù)為28份，總血清樣品陽性率為14.58%；H1亞型豬流感抗體陽性場數(shù)為8個，場陽性率為66.67 %，各場血清樣品陽性率由0～43.75%不等(表2)。

2.3 2014年、2015年各季度豬場豬流感抗體檢測結(jié)果與分析

統(tǒng)計分析2014年和2015年各個季度豬場的H1亞型豬流感感染抗體陽性率，結(jié)果表明2014年第一季度的感染抗體陽性率最高，為19.05%；第二、三、四季度依次為15%、12.7%、7.5%。2015年也是第一季度最高，為25%，第二、三、四季度依次為14.58%、8.33%、10.41%。2015年較2014年相比，總感染抗體陽性率略有上升，但差異不顯著，與相關(guān)報道相比均處于相對較低水平(表3)。從4個季度總的檢測結(jié)果來看，這2年的第一季度抗體陽性率均高于其他季節(jié)，但兩年的感染抗體陽性率基本保持相同的規(guī)律。

表1 2014年不同豬場豬流感病毒抗體檢測結(jié)果

表2 2015年不同規(guī)模豬場豬流感病毒抗體檢測結(jié)果

表3 2014年和2015年各季度豬流感病毒抗體檢測結(jié)果比較

3 討論

本研究中，采集血清的豬場均未進(jìn)行過豬流感疫苗的免疫接種，豬群中H1亞型豬流感病毒抗體陽性情況可以客觀地反映區(qū)域內(nèi)豬群感染豬流感病毒的情況。

從送檢的2014年-2015年廣東省粵北及周邊地區(qū)規(guī)模豬場的血清樣品中抽選376份血清進(jìn)行豬流感病毒H1亞型抗體的檢測。結(jié)果表明,第一，2014年和2015年粵北及周邊區(qū)域規(guī)?；i場豬流感病毒H1亞型總感染抗體陽性率分別為13.04%和14.58%，但不同豬場的豬流感病毒抗體陽性率分別由0～50%和0～43.75%不等。有研究人員對中國南方1976年-1982年進(jìn)行的豬流行病學(xué)監(jiān)測中，分離出104株豬流感病毒，其中72株為H1N1亞型，占分離株總數(shù)的74.6%。而廣東省的豬流感的流行情況一直備受關(guān)注，其中倪漢忠等[6]調(diào)查顯示，1998年采集的廣東省豬群162份血清中H1亞型抗體陽性率30.9%；李海燕等[7]測定2001年來自廣東省的205份豬血清，抗SWN77(H1)陽性率為4.4%；孫彥偉等[8]調(diào)查顯示，2006年廣東省部分地區(qū)規(guī)?；i場中H1亞型抗體陽性率為46.09%；董尚智等[9]對2005年-2007年廣東省珠海珠海地區(qū)規(guī)模養(yǎng)豬場調(diào)查結(jié)果顯示，該區(qū)域普遍受到豬流感威脅，且主要感染的豬流感病毒是H1 亞型；林文等[10]調(diào)查2009年廣東省9個地級市931份血清的結(jié)果顯示，H1亞型抗體陽性率高于其他亞型豬流感，在3.5%～44.0%之間；徐敏等[5]對2009年-2010年廣東省14 個市28個規(guī)?；i場1 015份豬血清測定結(jié)果顯示，H1 亞型抗體總陽性率為40.9%，過去粵北去養(yǎng)殖量相對較少，而養(yǎng)殖環(huán)境較優(yōu)，可能是粵北區(qū)域豬流感抗體陽性率明顯較低的因素之一。

本調(diào)查結(jié)果顯示，豬流感抗體陽性率與徐敏等的研究基本相一致，且2015年總感染抗體陽性率比2014年略高約1.5個百分點(diǎn)，無顯著差異，均表現(xiàn)為粵北區(qū)域豬流感的總感染抗體陽性率相對較低；而不同豬場的陽性率范圍與林文等研究基本相同，這可能與不同豬場的管理水平和豬群狀況相關(guān)。但是，隨著廣東省畜牧產(chǎn)業(yè)的轉(zhuǎn)移，近年來粵北區(qū)域的規(guī)模化養(yǎng)殖量大幅度增加，僅粵北韶關(guān)市的生豬出欄量就擴(kuò)大到約300萬頭每年。這種區(qū)域疫病防控的優(yōu)勢能否保持和延續(xù)，就與區(qū)域內(nèi)的養(yǎng)殖理念、防疫理念、防控布局等息息相關(guān)。當(dāng)然，每個場的養(yǎng)殖和管理水平更是決定疾病發(fā)生率的重要因素，所以不同豬場的表現(xiàn)相差較大。第二，2014年和2015年的檢測結(jié)果均表明，冬季豬流感病毒H1亞型感染抗體陽性率明顯高于其他3個季節(jié)，與林文等報道秋冬兩季的陽性率明顯高于春夏季節(jié)的結(jié)論略有差異?；洷钡貐^(qū)地處南嶺山脈之腳，全年最高氣溫可到39℃，最低氣溫可達(dá)0℃，氣溫相對廣東省其他地方而言，冬季相對較冷，這應(yīng)該是造成冬季豬流感感染抗體陽性率相對較高的主要因素。

總之，豬流感的影響不僅在于其動物傳染病學(xué)的意義，更在于其深遠(yuǎn)的公共衛(wèi)生意義?，F(xiàn)有的研究表明，豬流感病毒HA序列上受體結(jié)合位點(diǎn)具有與2種流感病毒受體相同的結(jié)合特異性，決定了豬流感不僅可感染豬，同時也具有感染禽、人、馬等鳥類和其他哺乳動物的能力，而預(yù)防豬流感病毒H1亞型必須做好以下三方面的工作：一是預(yù)防豬感染H1亞型豬流感；二是預(yù)防豬流感傳染人；三是預(yù)防豬流感在人與人之間的傳播[10-11]。同時，應(yīng)該加強(qiáng)豬流感病毒感染情況的監(jiān)測，監(jiān)控豬群中豬流感的發(fā)展動態(tài)。因此，本研究為摸清豬流感病毒H1亞型在粵北地區(qū)的流行情況獲得了重要數(shù)據(jù)，研究工作可為制定該病的防控措施提供了基礎(chǔ)資料。

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Serological Investigation and Analysis of Swine Influenza H1 Subtype in Farms of North Guangdong from 2014 to 2015

HU Hong-hui,HUANG Jian-qiang,NAN Wen-jin,WU Jing-bo,PENG Guo-liang

(ShaoguanUnivercity,Shaoguan,Guangdong,512005,China)

In order to investigate the epidemic and infection of H1 subtype SIV in north region of Guangdong,the H1 subtype swine influenza virus antibody detection reagent box was used to detect 376 porcine serum samples collected from 25 large-scale pig farms without SIV immunization in northern Guangdong.Results showed the total positive rates of H1 SIV antibody were 13.04% and 14.58% respectively in 2014 and 2015,while the positive rates from Junuary to March were 19.05% and 25.00% respectively.The positive rate of H1 SIV antibody in this area was relatively low,showing a certain regional characteristics.The antibody positive rate was significantly higher from January to March than that in other monthes,and showed relatively high antibody positive rate in winter only.

Swine influenza virus; antibody positive rate;H1 subtype

2016-06-02

廣東省科技計劃項目(2013B0203606008，2016A040402038)；廣東省農(nóng)業(yè)科技項目(016LM1141)；廣東省協(xié)同創(chuàng)新發(fā)展中心平臺項目(YKY-2014-52-16)；韶關(guān)市科技計劃項目(2013/NO6,2014CX/N319)

胡鴻惠(1982-)，女，湖南郴州人，助理研究員，碩士研究生，主要從事動物生產(chǎn)與疾病研究。

S852.659.5;S858.28

B

1007-5038(2017)01-0125-04