肺結(jié)核合并糖尿病患者T淋巴細(xì)胞亞群及紅細(xì)胞免疫功能的變化及意義

陸恩詞 朱穎蔚

(常州市第三人民醫(yī)院，江蘇 常州 213001)

肺結(jié)核合并糖尿病患者T淋巴細(xì)胞亞群及紅細(xì)胞免疫功能的變化及意義

陸恩詞 朱穎蔚1

(常州市第三人民醫(yī)院，江蘇 常州 213001)

目的 探討肺結(jié)核合并糖尿病患者T淋巴細(xì)胞亞群及紅細(xì)胞免疫功能的變化及意義。方法 選取41例肺結(jié)核合并糖尿病患者為肺結(jié)核合并糖尿病組，55例肺結(jié)核患者為肺結(jié)核組，50例健康人群為對照組。比較各組紅細(xì)胞免疫功能紅細(xì)胞花環(huán)(DTER)、紅細(xì)胞C3b羅體花環(huán)(RBC-C3bRR)、紅細(xì)胞免疫復(fù)合物花環(huán)(RBC-ICR)及T淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)免疫功能。結(jié)果 與對照組比較，肺結(jié)核患者DTER、RBC-C3bRR顯著降低，RBC-ICR顯著升高(P<0.05)。與肺結(jié)核組相比較，肺結(jié)核合并糖尿病組DTER、RBC-C3bRR顯著降低，RBC-ICR顯著升高(P<0.05)。與對照組相比較肺結(jié)核患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均顯著降低，CD8+顯著升高(P<0.05)。與肺結(jié)核比較，肺結(jié)核合并糖尿病患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著降低，CD8+顯著升高(P<0.05)。結(jié)論 肺結(jié)核合并糖尿病患者T淋巴細(xì)胞亞群及紅細(xì)胞免疫功能低下，其免疫功能受損程度大于單純肺結(jié)核患者。

肺結(jié)核；糖尿??；紅細(xì)胞；T淋巴細(xì)胞亞群

肺結(jié)核(TB)是糖尿病(DM)的機(jī)會(huì)性感染之一〔1,2〕，臨床研究結(jié)果顯示，DM患者結(jié)核病患病率為非DM患者的3～6倍，且血糖控制不良DM患者的結(jié)核病發(fā)病率為血糖控制良好DM患者的3倍〔3，4〕。既往研究證實(shí)，肺結(jié)核可降低機(jī)體細(xì)胞免疫功能，主要包括紅細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞免疫功能下降，但肺結(jié)核合并糖尿病患者細(xì)胞免疫功能的相關(guān)研究尚未見報(bào)道〔5〕。本研究探討肺結(jié)核合并糖尿病患者T淋巴細(xì)胞亞群及紅細(xì)胞免疫功能的變化及其意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年4月至2014年4月我院收治的肺結(jié)核合并糖尿病患者共41例為肺結(jié)核合并糖尿病組，男27例，女14例；年齡31～86〔平均(47.2±10.4)〕歲。選取同期我院收治的肺結(jié)核患者55例為肺結(jié)核組，男34例，女21例；年齡30～87〔平均(47.5±11.6)〕歲。選取同期于我院行健康體檢人群共50例為對照組，男30例，女20例；年齡32～85〔平均(47.1±11.2)〕歲。各組患者性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。糖尿病診斷符合2009年美國糖尿病協(xié)會(huì)(ADA)制定的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)〔6〕。肺結(jié)核診斷符合《臨床診療指南結(jié)核病分冊》中制定的肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)〔7〕。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合肺結(jié)核和(或)糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)；②知情同意并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①精神病患者、孕婦、哺乳期婦女等特殊人群；②合并惡性腫瘤患者；③嚴(yán)重心、肝、腎等臟器功能障礙者。

1.2 方法

1.2.1 血液采集 所有患者空腹抽取肘靜脈血4 ml，EDTA 3K+抗凝，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 T淋巴細(xì)胞亞群檢測 取CD4、CD8、CD3單抗各20 μl，分別加抗凝全血100 μl，混勻后避光置室溫孵育15 min，上流式細(xì)胞儀，分別檢測CD4+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞、CD3+T淋巴細(xì)胞的百分比，并計(jì)算CD4+/CD8+比值，選用FITC/PE雙色標(biāo)記的同型IgG作為陰性對照。

1.2.3 紅細(xì)胞免疫功能檢測 抗凝血10 μl加入5 ml PBS洗滌2次，800 r/min，離心5 min，用PBS調(diào)節(jié)紅細(xì)胞懸液濃度至1.25×107個(gè)/ml。取50 μl補(bǔ)體致敏或未致敏酵母菌懸液加至EP管，加入50 μl上述紅細(xì)胞懸液，混勻，37℃水浴30 min，震蕩混勻，水平抹平片，待室溫下自然干燥后行瑞氏-吉姆薩染色，油鏡下進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。分別計(jì)算紅細(xì)胞花環(huán)(DTER)、紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)(RBC-C3bRR)、紅細(xì)胞免疫復(fù)合物花環(huán)(RBC-ICR)。

1.3 觀察指標(biāo) 比較各組患者紅細(xì)胞免疫功能(DTER、RBC-C3bRR、RBC-ICR)及T淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2及t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 各組紅細(xì)胞免疫功能比較 與對照組比較，肺結(jié)核患者DTER、RBC-C3bRR顯著降低，RBC-ICR顯著升高(P<0.05)。與肺結(jié)核患者比較，肺結(jié)核合并糖尿病患者DTER、RBC-C3bRR均顯著降低，RBC-ICR顯著升高(P<0.05)。見表1。

2.2 各組T淋巴細(xì)胞亞群比較 與對照組比較，肺結(jié)核患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著降低，CD8+顯著升高(P<0.05)。與肺結(jié)核患者相比較，肺結(jié)核合并糖尿病患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著降低，CD8+顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 各組紅細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞免疫功能比較±s)

與對照組比較：1)P<0.05；與肺結(jié)核組比較：2)P<0.05

3 討 論

DM與TB二者關(guān)系密切且相互影響。DM患者由于持續(xù)高血糖可導(dǎo)致機(jī)體蛋白質(zhì)及脂肪代謝紊亂，引發(fā)營養(yǎng)不良和免疫力低下，且高糖又可作為結(jié)核分枝桿菌(MTB)的良好培養(yǎng)基，從而導(dǎo)致TB易感性增加；其次，高血糖可造成酸性環(huán)境，更利于MTB的生長與定植；DM微血管病變可累及肺部，導(dǎo)致肺部通氣血流比例失衡，肺氧分壓增高，有利于MTB繁殖〔8，9〕。TB又可反過來加重DM患者代謝紊亂，二者相互促進(jìn)，形成惡性循環(huán)。我國TB合并DM發(fā)病率不斷增加，其臨床癥狀、發(fā)病特點(diǎn)、治療方法及預(yù)后均不同于普通結(jié)核病患者，給TB合并DM的防治帶來新的挑戰(zhàn)〔10〕。DM與TB患者由于存在痰細(xì)菌培養(yǎng)轉(zhuǎn)陽延遲，其預(yù)后較差，病死率和復(fù)發(fā)率均顯著高于單純TB患者。因此，探尋DM合并TB的發(fā)病特點(diǎn)，是控制病情及改善預(yù)后的重要措施〔11〕。

T淋巴細(xì)胞亞群和Th1/Th2細(xì)胞因子是機(jī)體內(nèi)重要的免疫細(xì)胞和介質(zhì)，可直接或間接參與調(diào)節(jié)體內(nèi)各種病理、生理反應(yīng)。按表型不同，T淋巴細(xì)胞可分為CD3+、CD4+和CD8+等亞群，CD3+代表總T淋巴細(xì)胞，其數(shù)量直接反映機(jī)體參與免疫應(yīng)答的免疫活性細(xì)胞活性和數(shù)量；CD8+為T殺傷細(xì)胞，直接參與病毒清除過程；CD4+為T輔助細(xì)胞，可促進(jìn)B淋巴細(xì)胞分泌抗體，對CD8+的增殖、活化具有重要調(diào)節(jié)作用，T淋巴細(xì)胞亞群比例的改變可導(dǎo)致機(jī)體正常免疫功能狀態(tài)的改變，并影響機(jī)體病毒清除過程〔12〕。CD4+/CD8+比值上調(diào)可提示機(jī)體免疫功能升高，相反，CD4+/CD8+比值下調(diào)則提示機(jī)體出現(xiàn)免疫抑制〔13〕。本研究提示單純肺結(jié)核患者存在T淋巴細(xì)胞亞群比例失衡現(xiàn)象，而合并DM可加重肺結(jié)核患者這一表現(xiàn)，DM所致的長期高血糖狀態(tài)及大量代謝產(chǎn)物累積是加重細(xì)胞免疫功能紊亂的重要機(jī)制之一。紅細(xì)胞免疫功能主要通過其細(xì)胞表面C3b受體黏附功能實(shí)現(xiàn)，而血清中促進(jìn)因子(RFER)及抑制因子(RFIDR)則參與其免疫功能調(diào)控。紅細(xì)胞免疫功能異?？蓪?dǎo)致紅細(xì)胞吞噬能力的降低。本研究提示單純肺結(jié)核患者體內(nèi)抗原抗體免疫復(fù)合物顯著增多，紅細(xì)胞免疫功能下降，而合并DM可加重肺結(jié)核患者這一表現(xiàn)，高糖化血紅蛋白常伴隨紅細(xì)胞免疫功能低下，可能是進(jìn)一步加劇紅細(xì)胞免疫功能紊亂的重要機(jī)制。

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〔2015-06-11修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)

陸恩詞(1976-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事肺結(jié)核并糖尿病的治療研究。

R521.9

A

1005-9202(2017)03-0648-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.03.055

1 常州市第二人民醫(yī)院