右美托咪定對糖尿病大鼠體液免疫及補體的影響

童希忠 陳 勇 郎海麗 胡小蘭 余樹春 胡衍輝 徐國海

(南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院麻醉科，江西 南昌 330006)

右美托咪定對糖尿病大鼠體液免疫及補體的影響

童希忠1陳 勇 郎海麗 胡小蘭 余樹春 胡衍輝 徐國海

(南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院麻醉科，江西 南昌 330006)

目的 評價右美托咪定對糖尿病大鼠體液免疫及補體的影響。方法 健康成年雄性SD大鼠72只，體重300～350 g，采用隨機數(shù)字表法，將其隨機分為3組(n=24)：對照組(C組)、糖尿病組(DM組)和右美托咪定+糖尿病組(DEX組)。DM組和DEX組以鏈脲佐菌素(STZ)60 mg/kg一次性腹腔注射建立糖尿病大鼠模型，于模型穩(wěn)定后4 w時3組大鼠均實施剖腹探查術(shù)，手術(shù)時間30 min。DEX組于手術(shù)開始前經(jīng)10 min靜脈輸注右美托咪定負(fù)荷劑量1 μg/kg，隨后以5 μg·kg-1·h-1(容量1 ml/h)的速率維持4 h，C組和DM組給予等容量生理鹽水。分別于術(shù)前(T0)、術(shù)畢(T1)、術(shù)后24 h(T2)和72 h(T3)時每組隨機取6只大鼠采集血樣，測定血糖，并采用ELISA法檢測血清IgG、IgA及IgM和補體CH50、C3及C4濃度；分別于T0～T3時采血結(jié)束后處死大鼠，處死前稱重，解剖分離脾臟組織稱重，計算脾臟指數(shù)。結(jié)果 與C組比較，DM組和DEX組T0～T3時血清IgG、IgM濃度及脾臟指數(shù)降低，IgA、CH50、C3及C4濃度升高(P<0.05)；與DM組比較，DEX組T1～T3時血清IgG、IgM濃度及脾臟指數(shù)升高，IgA、CH50、C3及C4濃度降低(P<0.05)。結(jié)論 右美托咪定可改善糖尿病大鼠圍術(shù)期體液免疫及補體功能。

右美托咪定；糖尿??；免疫球蛋白；補體

糖尿病(DM)是一種以血糖升高為特征的常見慢性病〔1〕，研究表明，DM患者易出現(xiàn)多種免疫功能的異常，手術(shù)創(chuàng)傷、麻醉以及術(shù)后疼痛等均可抑制DM患者圍術(shù)期機體免疫功能，增加患者術(shù)后感染及其他并發(fā)癥發(fā)生的可能〔2，3〕，因此，有效地防治DM患者圍術(shù)期免疫功能抑制對于促進(jìn)其預(yù)后具有重要意義。右美托咪定是一種高效高選擇性作用于外周和中樞α2腎上腺素能受體激動劑，具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗焦慮和抗交感等多種效應(yīng)，且無呼吸抑制作用，主要用于ICU患者的鎮(zhèn)靜以及麻醉時的輔助鎮(zhèn)靜〔4〕。研究發(fā)現(xiàn)，右美托咪定可改善腫瘤患者圍術(shù)期細(xì)胞免疫功能〔5〕，減輕DM患者圍術(shù)期糖代謝紊亂〔6〕，但其對DM患者圍術(shù)期體液免疫功能及補體功能的影響尚未見報道。因此，本研究擬評價右美托咪定對DM大鼠圍術(shù)期體液免疫及補體的影響。

1 材料與方法

1.1 動物及分組 健康成年雄性SD大鼠72只(南昌大學(xué)實驗動物科學(xué)部提供)，體重300～350 g，采用隨機數(shù)字表法，將其隨機分為3組(n=24)：對照組(C組)、糖尿病組(DM組)和右美托咪定+糖尿病組(DEX組)。

1.2 DM模型制備 DM組和DEX組參照文獻(xiàn)〔7〕介紹的方法建立大鼠DM模型，一次性腹腔注射1%鏈脲佐菌素-檸檬酸鹽緩沖液60 mg/kg，2 d后經(jīng)尾靜脈抽血測空腹血糖(FPG)，≥16.7 mmol/L，并出現(xiàn)多飲、多食、多尿等癥狀即為大鼠模型制備成功。

1.3 實驗方法 DM模型穩(wěn)定后4 w時三組大鼠均實施剖腹探查術(shù)，腹腔注射戊巴比妥鈉40 mg/kg麻醉下，于腹部正中切口開腹，行剖腹探查術(shù)，維持手術(shù)時間30 min。術(shù)畢傷口涂抹青霉素粉末預(yù)防感染，縫合切口。大鼠蘇醒后單獨飼養(yǎng)。DEX組于手術(shù)開始前經(jīng)10 min靜脈輸注右美托咪定負(fù)荷劑量1 μg/kg，隨后以5 μg·kg-1·h-1(容量1 ml/h)的速率維持4 h，C組和DM組給予等容量生理鹽水。

1.4 觀察指標(biāo) 分別于術(shù)前(T0)、術(shù)畢(T1)、術(shù)后24 h(T2)、72 h(T3)時每組隨機取6只大鼠采集血樣，測定血糖，并采用ELISA法檢測血清IgG、IgA及IgM和補體CH50、C3及C4濃度；分別于T0～T3時采血結(jié)束后處死大鼠，處死前稱重，解剖分離脾臟組織稱重，計算脾臟指數(shù)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析及LSD-t檢驗。

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠FPG水平比較 與C組比較，DM組和DEX組T0～T3時FPG升高(P<0.05)；與D組比較，DEX組T1～T3時FPG下降(P<0.05)，T0時無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，見表1。

表1 三組大鼠圍術(shù)期FPG水平比較

與C組比較：1)P<0.05；與DM組比較：2)P<0.05，下表同

2.2 各組大鼠體液免疫及補體變化 與C組比較，DM組和DEX組T0～T3時血清IgG、IgM濃度及脾臟指數(shù)降低，IgA、CH50、C3及C4濃度升高(P<0.05)；與DM組比較，DEX組T1～T3時血清IgG、IgM濃度及脾臟指數(shù)升高，IgA、CH50、C3及C4濃度降低(P<0.05)，見表2。

表2 三組大鼠圍術(shù)期體液免疫、補體及脾臟 指數(shù)比較

3 討 論

體液免疫中的抗體IgG、IgA和IgM是機體抗感染的重要組成部分，由漿細(xì)胞合成和分泌，存在于機體的血液、體液、外分泌液及部分細(xì)胞的細(xì)胞膜上，是反映機體體液免疫狀態(tài)的關(guān)鍵指標(biāo)〔7〕。研究證實，DM患者免疫球蛋白含量的改變與DM的發(fā)生發(fā)展程度密切關(guān)聯(lián)，也與機體免疫功能及DM并發(fā)癥的發(fā)生密切相關(guān)〔8〕。本研究結(jié)果表明，DM大鼠自身體液免疫功能下降，手術(shù)創(chuàng)傷后體液免疫功能進(jìn)一步下降，而右美托咪定可改善DM大鼠圍術(shù)期體液免疫功能。

補體系統(tǒng)作為炎性反應(yīng)的重要組成部分日益受到重視，是由多種糖蛋白組成的蛋白酶解系統(tǒng)，在機體抗感染、免疫調(diào)節(jié)和免疫監(jiān)視中發(fā)揮重要作用，特定情況下也可導(dǎo)致組織損傷。在臨床上同時測定總補體活性(CH50)及補體成分C3及C4可以反映補體功能〔9〕。補體成分廣泛沉積于DM患者的血管病變組織中，其水平的高低與組織病變的嚴(yán)重程度相關(guān)〔10〕，提示補體活化參與DM血管病變的發(fā)生。另有研究發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病患者和糖耐量減低者補體C3水平升高〔11〕。本研究結(jié)果表明，DM可誘發(fā)大鼠補體功能異常，右美托咪定可有效抑制DM大鼠血清補體CH50、C3及C4水平的升高，從而改善DM大鼠圍術(shù)期補體功能。付作文等〔12〕研究發(fā)現(xiàn)，右美托咪定可有效抑制患者圍術(shù)期血清C3、C4的升高，與本研究結(jié)果一致。

脾臟指數(shù)是脾臟免疫功能的主要指標(biāo)，其數(shù)值高低的變化在一定程度上可反映機體的免疫調(diào)節(jié)功能作用。本研究結(jié)果表明，右美托咪定可改善DM大鼠脾臟功能，提高大鼠體液免疫功能。免疫力下降是DM的顯著特征，然而，導(dǎo)致機體免疫功能改變的機制尚不清楚，有學(xué)者認(rèn)為是由于高血糖所致〔13〕。高血糖可導(dǎo)致紅細(xì)胞膜代謝改變，影響紅細(xì)胞的免疫功能；體內(nèi)蛋白質(zhì)的糖基化可導(dǎo)致免疫球蛋白功能低下；高血糖還可延緩淋巴細(xì)胞分裂。本研究結(jié)果提示右美托咪定可降低DM大鼠圍術(shù)期血糖水平。高項羽等〔6〕的研究與本研究結(jié)果一致，其發(fā)現(xiàn)右美托咪定可抑制DM患者術(shù)中應(yīng)激反應(yīng)，改善圍術(shù)期糖代謝紊亂，促進(jìn)DM患者術(shù)后恢復(fù)。

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12 付作文，程朝暉，譚海燕.右美托咪定對腦腫瘤切除術(shù)患者血清補體C3、C4水平的影響〔J〕.實用醫(yī)學(xué)雜志，2013；29(8)：1341-2.

13 張 宏，于德民，陳 櫻，等.2型糖尿病患者免疫功能變化與血糖和胰島素水平相關(guān)性的研究〔J〕.免疫檢驗和臨床醫(yī)學(xué)雜志，2002；9(2)：90.

〔2015-09-12修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)

江西省衛(wèi)計委科技計劃項目(20175208)

陳 勇(1986-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事臨床麻醉學(xué)研究。

童希忠(1971-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事臨床麻醉學(xué)研究。

R392

A

1005-9202(2017)03-0564-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.03.017

1 江西省玉山縣婦幼保健院