張秋會(huì) 胡興斌 安群星 張婧 尹文
Rh聯(lián)合Duffy血型系統(tǒng)的抗體鑒定及輸血治療1例
張秋會(huì) 胡興斌 安群星 張婧 尹文
Rh血型系統(tǒng) Duffy血型系統(tǒng) 抗體鑒定 輸血治療
不規(guī)則抗體可引起溶血性輸血反應(yīng)及疑難配血,為確?;颊咻斎胂嗪系难撼煞?,進(jìn)行紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩選與特異性抗體檢測(cè)具有十分重要的意義,特別是對(duì)體內(nèi)產(chǎn)生多種或高頻率抗體的患者,可避免急需輸血時(shí)找不到相合血液而措手不及以至于延誤臨床治療。
筆者在臨床工作中遇到1例AB型患者體內(nèi)產(chǎn)生稀有抗-cE聯(lián)合抗-Fya抗體導(dǎo)致配血困難,通過(guò)對(duì)抗體特異性鑒定并選擇相容性洗滌紅細(xì)胞輸注而完成治療,現(xiàn)報(bào)告如下。
1 病歷簡(jiǎn)介 患者,女,72歲,已婚,漢族,既往有輸血史、妊娠史,診斷為“再生障礙性貧血”?,F(xiàn)因胸悶、氣短、乏力半月,加重1 d,在當(dāng)?shù)蒯t(yī)院經(jīng)輸血糾正貧血治療時(shí),出現(xiàn)交叉配血困難而轉(zhuǎn)入我院急診科。入院后血常規(guī)檢查:RBC 1.08×1012/L,PLT 120×109/L,Hb 38 g/L,WBC 3.47×109/L,急需輸血治療,常規(guī)輸血前抗體篩選檢測(cè)為陽(yáng)性,交叉配血困難,送血型參比室進(jìn)一步做抗體鑒定和交叉配血。
2 儀器與試劑 西班牙Grifols公司W(wǎng)ADiana全自動(dòng)血型儀系統(tǒng)。抗-A、抗-B(長(zhǎng)春博德生物有限公司,批號(hào)20141022);抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e(批號(hào)20143303);抗-IgG,C3d(多特異性)、篩選細(xì)胞、譜細(xì)胞 (批號(hào)20140424,20147025,20145705)均購(gòu)自上海血液生物醫(yī)藥有限公司;進(jìn)口譜細(xì)胞(荷蘭Sanquin公司,批號(hào) 8000210314);抗- Fya、抗-Fyb(DIAGAST公司,批號(hào)Fya437000,F(xiàn)yb439000)。
3 血型鑒定、抗體篩選、抗體鑒定、吸收放散、抗體效價(jià)檢測(cè) 均按文獻(xiàn)[1,2]方法進(jìn)行操作。
1 血型鑒定 患者為AB型/CCDee/Fy(a-b+),直接抗球蛋白試驗(yàn)結(jié)果為陰性。
2 抗體鑒定 患者血清與自身細(xì)胞在鹽水介質(zhì)和抗人球蛋白介質(zhì)中均未見(jiàn)凝集,可排除自身抗體;與譜細(xì)胞在鹽水介質(zhì)中無(wú)凝集,進(jìn)一步排除IgM性質(zhì)抗體;在抗人球蛋白和微柱凝膠介質(zhì)中均凝集,說(shuō)明患者血清中存在IgG性質(zhì)抗體,結(jié)果見(jiàn)表1,根據(jù)反應(yīng)格局并結(jié)合患者血型,初步判斷患者血清中存在抗-cE的同時(shí)也可能存在抗-Fya抗體,故用吸收放散實(shí)驗(yàn)分別鑒定。
3 吸收放散試驗(yàn) 用O型CCDee/Fy(a+b-)紅細(xì)胞在(37℃ 3 h)吸收患者血清,吸收后的血清與16人份進(jìn)口譜細(xì)胞在微柱凝膠卡中進(jìn)行反應(yīng),反應(yīng)格局見(jiàn)表1,結(jié)果證明患者血清中存在抗-cE。
4 放散試驗(yàn) 用O型CCDee/Fy(a+b-)紅細(xì)胞在(37℃ 3 h)吸收患者血清后,再將吸收后的紅細(xì)胞在56℃熱放散,放散液與16人份進(jìn)口譜細(xì)胞在微柱凝膠卡中反應(yīng),反應(yīng)格局見(jiàn)1,顯示患者血清中同時(shí)存在抗-Fya抗體。
5 抗體效價(jià) IgG抗-c/E/Fya抗體效價(jià)測(cè)定,患者血清做倍比稀釋后分別與O型CcDee、CCDEE、Fya(a+b-)細(xì)胞做間接抗人球蛋白試驗(yàn),檢測(cè)抗體效價(jià)分別為:IgG抗-c:16;抗-E:16;抗-Fya:32。
6 交叉配血試驗(yàn) 該患者為AB型/CCDee/Fya(a-b+),因從AB型獻(xiàn)血者143例中未找到對(duì)應(yīng)抗原陰性的紅細(xì)胞,故遵循《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》,選擇相容性輸注方案,從O型獻(xiàn)血者中為患者篩查對(duì)應(yīng)抗原陰性的紅細(xì)胞,從540例中篩出cE抗原陰性215例(占40%),又從cE抗原陰性215例中篩出Fya抗原陰性2例(占0.37%)。將獻(xiàn)血者血樣與患者血樣(血漿)在WADiana全自動(dòng)血型儀中進(jìn)行主側(cè)交叉配血,配血結(jié)果無(wú)凝集、無(wú)溶血。
7 輸血治療 患者輸注上述洗滌紅細(xì)胞2 U,輸注過(guò)程順利,輸注后患者Hb由38 g/L升至58 g/L,輸注效果顯著。
本例患者診斷為再生障礙性貧血,有多次輸血史、妊娠史,具備產(chǎn)生免疫性抗體的條件。由于該患者血型為AB型/CCDee/Fy(a-b+);缺乏c、E 和 Fya抗原,通過(guò)多次輸血或妊娠導(dǎo)致患者體內(nèi)產(chǎn)生抗-cE聯(lián)合抗-Fya實(shí)為罕見(jiàn)。抗-cE是Rh血型系統(tǒng)中最常見(jiàn)的抗體,也是最具有臨床意義的血型抗體,常以復(fù)合抗原形成存在,免疫后常產(chǎn)生復(fù)合抗體[3],可引起溶血性輸血反應(yīng)。而抗-Fya屬于高頻率稀有抗體,最常見(jiàn)為IgG性質(zhì)[4]。亞洲人中Fya抗原頻率高達(dá)95%,白種人中只有70%,而黑人中約70%為Fy(a-b-)[3-5]???Fya抗體多數(shù)是由輸血產(chǎn)生的,也可以由刺激產(chǎn)生,可造成致命性的溶血性和遲發(fā)性輸血反應(yīng)[6],需準(zhǔn)確鑒定不規(guī)則抗體。由于該患者屬急診輸血,爭(zhēng)取時(shí)間和盡快輸血是關(guān)鍵,為保證抗體檢測(cè)的準(zhǔn)確性,我們采用國(guó)內(nèi)外2套譜細(xì)胞進(jìn)行抗體檢測(cè),可以相互補(bǔ)充,防止抗體漏檢。通過(guò)吸收放散試驗(yàn)和抗原表型檢測(cè)進(jìn)一步證實(shí)這一結(jié)果,為交叉配血工作提供了可靠的理論依據(jù)。
表1 患者血清吸收后和吸收后放散液與譜細(xì)胞反應(yīng)格局
臨床輸血緊急情況下,不規(guī)則抗體存在常導(dǎo)致交叉配血困難。而本例患者是由多次輸血免疫產(chǎn)生了抗-cE聯(lián)合高頻率抗-Fya抗體引起交叉配血困難,由此可見(jiàn)輸血是導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生抗體的重要環(huán)節(jié),建議對(duì)有多次反復(fù)或大量輸血患者,輸血時(shí)不僅ABO和Rh血型抗原應(yīng)相合性輸注,也要做到其他血型抗原相合性輸注,盡量避免輸入缺乏相應(yīng)抗原刺激而使機(jī)體產(chǎn)生抗體。對(duì)于體內(nèi)產(chǎn)生高頻率抗原的血型抗體患者,在短時(shí)間內(nèi)很難找到相合血液,通過(guò)隨機(jī)篩血試驗(yàn)找到相合的血液非常困難,嚴(yán)重時(shí)會(huì)延誤臨床治療危及患者生命。因此,采供血機(jī)構(gòu)應(yīng)建立高頻率抗原陰性獻(xiàn)血者資料庫(kù),有效解決困擾臨床因高頻率抗體產(chǎn)生而不能及時(shí)為患者提供相合血液輸注這一難題。
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457.1+1
B
1671-2587(2017)01-0093-02
2016-09-15)
(本文編輯:姚萍)
10.3969/j.issn.1671-2587.2017.01.028
710032 陜西省西安市第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院輸血科
張秋會(huì)(1976–),女,陜西咸陽(yáng)人,主管技師,學(xué)士,主要從事臨床輸血及免疫血液學(xué)檢測(cè)工作,(Tel)15991758633(E-mail)zhangqh@fmmu.edu.cn。
尹文,男,教授,博士生導(dǎo)師,主要從事臨床免疫血液學(xué)研究,(Tel)029-84775465。