劉培燕 喬顯森 韓斌 馮智慧
紅細胞多凝集現(xiàn)象1例*
劉培燕 喬顯森 韓斌 馮智慧
紅細胞多凝集 交叉配血
多凝集紅細胞是指紅細胞膜發(fā)生異常后,紅細胞除與自身血清、新生兒血清不發(fā)生凝集外,可與幾乎所有成年人的血清發(fā)生凝集反應(yīng),在血型鑒定和交叉配血試驗中常引起正反定型不符和次側(cè)凝集的現(xiàn)象[1]。近期在交叉配血過程中發(fā)現(xiàn)1例紅細胞多凝集現(xiàn)象,現(xiàn)報告如下。
1 病歷資料 患者,女,81歲,因患骨髓增生異常綜合征(MDS)進入青島市中心醫(yī)院住院治療,術(shù)前備血時檢測血型為B型,RhD陽性,抗體篩查陽性,與B型紅細胞交叉配血不合,遂送本實驗室進行檢測。
2 試劑與儀器 單克隆抗-A試劑(Sanquin,8000160478),單克隆抗-B試劑(Sanquin,8000169003),抗-D試劑(Millipore,BME1201E),ABO反定型試劑紅細胞(上海血液生物制品有限公司,20145333),多克隆抗人球蛋白(Sanquin,8000186886),人源抗-A、抗-B(成都協(xié)和生物技術(shù)公司,20140714),抗體鑒定譜細胞(Sanquin,8000208116),聚凝胺(珠海貝索生物技術(shù)有限公司,113052)。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。KUBO7A 2420細胞洗滌離心機,BM402電熱恒溫水浴箱。
3 血清學(xué)試驗
3.1 ABO血型鑒定:按照文獻介紹的經(jīng)典試管法操作[2,3],以單克隆抗-A、抗-B、抗-D定型試劑及ABO反定型試劑紅細胞進行正反定型。
3.2 多凝集紅細胞的確認:應(yīng)用人源抗-A,人源抗-B、正常AB型獻血者血清及B型新生兒血清檢測。將患者血清與抗體鑒定譜細胞按照1∶2混合,在鹽水及多克隆抗人球蛋白介質(zhì)檢測患者的不規(guī)則抗體。
3.3 交叉配血:取患者血樣與同型Rh(D)陽性獻血者血樣,分別在鹽水介質(zhì)、聚凝胺介質(zhì)及抗人球介質(zhì)中進行交叉配血。
1 血型與抗體鑒定試驗 應(yīng)用單克隆抗-A、抗-B及ABO反定型試劑紅細胞鑒定患者血型為B型、RhD陽性??贵w鑒定試驗結(jié)果鹽水介質(zhì)為陰性,部分譜細胞抗人球介質(zhì)為陽性,但不規(guī)則抗體的特異性不能確定;患者紅細胞直接抗人球試驗結(jié)果為陰性。
2 交叉配血 患者血樣與8份B型RhD陽性健康無償獻血者血液制品進行交叉配血。主側(cè)配血患者血清與獻血者紅細胞在鹽水介質(zhì)均無凝集,抗人球介質(zhì)中2份出現(xiàn)弱凝集,其余6份無凝集;聚凝胺介質(zhì)均無凝集;次側(cè)在上述3種介質(zhì)中均發(fā)生凝集,自身反應(yīng)未見凝集。結(jié)果見表1。
3 確認多凝集紅細胞 分析上述配血實驗結(jié)果,患者患MDS后很可能產(chǎn)生Tn活化多凝集紅細胞[3],因此進行了多凝集紅細胞的確認試驗,結(jié)果分別為:①患者紅細胞與人源抗-A試劑反應(yīng)出現(xiàn)凝集,凝集強度為2+,與人源抗-B試劑反應(yīng)的凝集強度為4+,其與單克隆抗-A、抗-B試劑反應(yīng)格局不同;②患者紅細胞與正常人AB型血清反應(yīng),凝集強度為2+;③與B型新生兒血清無反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)果見表2。
多凝集紅細胞是指紅細胞膜發(fā)生異常后,紅細胞除與自身血清、新生兒血清不發(fā)生凝集外,可與幾乎所有成年人的血清發(fā)生凝集反應(yīng)。該多凝集反應(yīng)是由于大多數(shù)人的血清中存在針對隱蔽抗原的IgM抗體引起[4]。根據(jù)形成原因的不同,多凝集紅細胞可分為3類:微生物性的多凝集(T、Tk、Th、Tx、獲得性B);非微生物性的多凝集(持久穩(wěn)固型)(Tn,Co2cl NOR Th);遺傳性的多凝集(Sd(a++)(Cad)、HEMPAS、NOR、Hyde Park)[5]。微生物性多凝集反應(yīng)與敗血病、腸道或呼吸道感染、傷口感染具有相關(guān)性,通常是由于細菌或病毒糖苷酶的催化作用使紅細胞表面的部分糖基被切除,暴露出一些中間底物,如T糖鏈(抗原),人體內(nèi)普遍存在抗-T,所以會出現(xiàn)患者紅細胞與人源血清(漿)發(fā)生凝集的現(xiàn)象。與微生物性多凝集不同,非微生物性的多凝集是由于體細胞突變導(dǎo)致寡糖生物合成受阻,使得某些抗原暴露,如Tn抗原,可與大多數(shù)成人血清(漿)中存在的抗-Tn反應(yīng)而發(fā)生多凝集現(xiàn)象[6]。遺傳性的多凝集反應(yīng)出現(xiàn)在稀有抗原的遺傳,如Sda抗原,在一些罕見的個體紅細胞上具有超強表達,可與大多數(shù)成年人的血清(漿)中普遍存在的針對這種稀有抗原的抗體發(fā)生多凝集反應(yīng)。
表1 各項質(zhì)量檢測結(jié)果
表2 患者紅細胞與不同血清反應(yīng)結(jié)果
多凝集紅細胞在血型鑒定和交叉配血中常引起正反定型不符和次側(cè)凝集的現(xiàn)象。如本例中患者紅細胞在未致敏的情況下,與試劑單克隆抗體反應(yīng)的正反定型相符,為B型,但在應(yīng)用人源抗-A、抗-B時,患者紅細胞均發(fā)生凝集,且與ABO同型的健康獻血者血清及AB型健康獻血者的血清均發(fā)生凝集反應(yīng)。這是由于正常人血清中大多含有IgM類抗體,可與多凝集紅細胞上暴露的隱蔽抗原反應(yīng)。因此在血型鑒定過程中若使用單克隆抗體試劑,則能有效避免多凝集紅細胞引起的血型鑒定困難。
對于產(chǎn)生多凝集紅細胞的患者,在應(yīng)用人血清抗-A、抗-B血型試劑時,一定要注意試劑中可能含有的針對紅細胞上暴露的隱蔽抗原的抗體,其可能引起血型誤判;在臨床輸血中若輸入含相應(yīng)抗體的血制品時可發(fā)生溶血性輸血反應(yīng),因此在輸血前交叉配血時一定要高度重視次側(cè)配血(供血者血清+受血者紅細胞),避免漏檢多凝集紅細胞,本例中我們選擇交叉配血主側(cè)相合的獻血者紅細胞進行洗滌后輸注給患者,可有效避免溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生。
1 張春燕,劉杰,趙素珍.Tn多凝集紅細胞致ABO疑難血型鑒定1例[J]. 臨床輸血與檢驗,2009,11(2):177-178.
2 劉達莊.免疫血液學(xué)[M].上海:科學(xué)技術(shù)出版社,2002:40.44.194-196. 219.220.222.
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5 杰夫·丹尼爾,主編. 朱自嚴,主譯.人類血型[M].北京:科學(xué)出版社,2007:632-637.
6 樊鳳艷,張松,劉曉莉. Tn多凝集致ABO血型鑒定疑難一例[J]. 臨床輸血與檢驗,2012,14(1):83-84.
R331.1+41 R457.1+1
B
1671-2587(2017)01-0091-02
2016-06-16)
(本文編輯:姚萍)
10.3969/j.issn.1671-2587.2017.01.027
*本課題受青島市南區(qū)科技發(fā)展資金項目(No.2013-13-013-YY)和青島市醫(yī)療衛(wèi)生優(yōu)秀人才培養(yǎng)項目資助
266071 山東省青島市中心血站輸血醫(yī)學(xué)研究所(劉培燕,韓斌,馮智慧);青島市中心醫(yī)療集團(喬顯森)
劉培燕(1985–),女,山東莒縣人,主管技師,博士,主要從事輸血醫(yī)學(xué)工作,(Tel)18669809529。
馮智慧,男,碩士,主要從事血液免疫學(xué)、HLA與造血干細胞移植工作,(E-mail)qd_hla@163.com。