2014年某院臨床常見病原菌的分布及耐藥性分析

黃萍 袁敏

2014年某院臨床常見病原菌的分布及耐藥性分析

黃萍 袁敏

目的 了解本院2014年臨床分離菌對常見抗生素的耐藥狀況，為臨床醫(yī)生合理選擇抗菌藥物提供參考依據(jù)，減少和延緩耐藥菌的產(chǎn)生。方法采用珠海迪爾公司DL-96全自動細(xì)菌鑒定/藥敏分析儀，對2014年各科室送檢標(biāo)本中培養(yǎng)分離出的1 221株條件致病菌進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果1 221株臨床分離菌中革蘭陽性球菌440株（占36.04%），革蘭陰性桿菌781株（占63.96%）；革蘭陽性球菌中排列前3位的分別是金黃色葡萄球菌149株（12.20%）、凝固酶陰性葡萄球菌123株（10.07%）、腸球菌124株（10.16%）；革蘭陰性桿菌中腸桿菌科細(xì)菌排列前2位的分別是大腸埃希菌245株（20.06%）、肺炎克雷伯菌162株（13.27%）；非發(fā)酵菌中以銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌最常見，分別為143株（11.71%）和122株（9.99%）。葡萄球菌屬中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）檢出率分別占金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌的76.71%和81.4%，未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素和替考拉寧的葡萄球菌。在革蘭陰性桿菌中產(chǎn)超廣譜內(nèi)酰胺酶（ESBLs）檢出率占大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的77.2%和26.0%，均對碳青霉烯類具有很好的敏感性。結(jié)論2014年度院內(nèi)病原菌以革蘭陰性桿菌居多，且細(xì)菌多重耐藥日趨嚴(yán)重，因此開展細(xì)菌耐藥監(jiān)測和掌握細(xì)菌耐藥變遷動態(tài)，對指導(dǎo)臨床合理應(yīng)用抗菌藥物和有效控制院內(nèi)感染具有重要意義。

細(xì)菌耐藥性 抗菌藥物 革蘭陰性桿菌 革蘭陽性球菌

隨著廣譜抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，細(xì)菌耐藥現(xiàn)象日趨嚴(yán)重，甚至出現(xiàn)了多重耐藥和高度耐藥菌株，細(xì)菌耐藥已成為全世界醫(yī)療領(lǐng)域中備受矚目的問題之一[1]，給臨床治療造成極大的困難。為全面了解本院臨床細(xì)菌耐藥性的發(fā)生情況，給臨床用藥提供參考，現(xiàn)對本院2014年臨床分離的致病菌及藥敏情況進(jìn)行回顧性分析。

材料與方法

1 菌株來源 取自2014年1～12月住院患者送檢的各類標(biāo)本共6 760份，按常規(guī)方法分離鑒定，得到致病菌共1 889株，去除同一病例從相同部位標(biāo)本中所獲重復(fù)菌株，去除真菌后，納入1 221株進(jìn)行分析。

2 細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn) 按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》的要求對所收集標(biāo)本進(jìn)行分離培養(yǎng)[2]，病原菌鑒定及藥敏試驗(yàn)采用珠海迪爾公司DL-96全自動微生物鑒定/藥敏分析儀及配套微生物檢測試劑。

3 質(zhì)控菌株 大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、金黃色葡萄球菌ATCC25923、糞腸球菌ATCC29212。

4 數(shù)據(jù)處理 藥敏結(jié)果判讀依據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所（CLSI）最新標(biāo)準(zhǔn)，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)用WHONET5.6軟件。

結(jié) 果

1 細(xì)菌分布

1.1 科室分布：分離的1 221株細(xì)菌全部來自住院患者，其中干部病房送檢標(biāo)本分離的菌株最多，為537株（17.28%），其他依次為ICU病房321株（15.39 %）、呼吸內(nèi)科282株（14.06 %）、消化內(nèi)科228株（11.86%）、神經(jīng)內(nèi)科203株（11.31 %）、泌尿外科122株（ 9.66 %）、普外科132株（9.12%），其他科室144株（11.31%）

1.2 標(biāo)本分布：自痰液中分離的致病菌最多，共482株，占39.47%，其次為中段尿363株（29.73 %），分泌物268株（21.95% ），血液99株（8.10% ），其他9株（0.73%）。

1.3 病原菌的構(gòu)成比：1 221株病原菌中，革蘭陽性球菌440株，占36.04%，革蘭陽性球菌中最常見的是金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌和腸球菌。革蘭陰性桿菌781株，占63.96%，革蘭陰性桿菌中以大腸埃希菌最多見，其他依次為肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌、嗜麥芽窄食假單胞菌等，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中產(chǎn)ESBLs分別占二者總數(shù)的77.2%和26.0%。主要病原菌分布詳見表1。

2 細(xì)菌耐藥性分析

2.1 常見革蘭陽性球菌耐藥情況：耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）檢出率為76.71%，未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素和替考拉林的葡萄球菌，整個葡萄球菌對β-內(nèi)酰胺類、喹諾酮類和大環(huán)酯類的耐藥率均在50%以上。在分離的124株腸球菌中糞腸球菌占52.41%，屎腸球菌占47.58%。未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素和利奈唑胺的腸球菌、屎腸球菌對各種抗菌藥物的耐藥率高于糞腸球菌。常見革蘭陽性球菌的耐藥率詳見表2。

表1 1 221株細(xì)菌檢出構(gòu)成比（%）

2.2 常見革蘭陰性桿菌耐藥情況：腸桿菌科細(xì)菌均對碳青霉烯類抗生素高度敏感，對大部分β-內(nèi)酰胺類、磺胺類和喹諾酮類的耐藥率較高，均大于50%，但對阿米卡星和第四代頭孢類抗生素頭孢吡肟有較好的敏感性。在非發(fā)酵菌中以銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌最常見，鮑曼不動桿菌對常用抗菌藥物的耐藥率均較高，除對阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率在50%以下，其余抗菌藥物耐藥率均在50%以上。常見革蘭陰性桿菌耐藥情況詳見表3。

討 論

2014年本院監(jiān)測的1 221株臨床分離細(xì)菌中，仍以革蘭陰性桿菌為主，占63.96%；革蘭陽性球菌占36.04%，與目前國內(nèi)的細(xì)菌流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果基本一致[3]。

表2結(jié)果顯示，葡萄球菌對青霉素類、喹諾酮類及大環(huán)酯類耐藥率都很高，對頭孢菌素和氨基糖苷類抗生素的耐藥率也逐年增加，但未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素的菌株。因此臨床治療葡萄球菌感染時不可僅憑經(jīng)驗(yàn)用藥，而應(yīng)參考藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

本研究亦顯示MRSA的檢出率為76.71%，高于2009年中國CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測中心的MRSA檢出率52.7%，這可能與地域、患者病情、醫(yī)生用藥習(xí)慣等有關(guān)。革蘭陽性球菌中MRSA耐藥機(jī)制主要是mecA基因通過R質(zhì)粒或轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)入金黃色葡萄球菌，編碼一個78 kD的青霉素結(jié)合蛋白2a（PBP2a），其與β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的親和力極低，使藥物不能阻礙MRSA細(xì)胞壁肽聚糖層合成，從而產(chǎn)生耐藥，表現(xiàn)為多重耐藥性和異質(zhì)性，被列為目前世界范圍內(nèi)最難解決的感染性疾病之一。在我國對于MRSA、MRCNS引起的最后

防線，應(yīng)采取謹(jǐn)慎、合理的措施，保護(hù)使用萬古霉素類藥物，對推遲耐藥菌出現(xiàn)很必要。

表2 常見革蘭陽性球菌耐藥率（%）

表3 常見革蘭陰性桿菌耐藥率（%）

對腸球菌感染可選用呋喃妥因、萬古霉素、替考拉林。由于呋喃妥因用藥后40%以原型自尿中排出，所以對于尿液中分離出糞腸球菌的感染，建議首選呋喃妥因。此次調(diào)查未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素的金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌和腸球菌，但仍需引起重視，加強(qiáng)對萬古霉素使用的管理及細(xì)菌耐藥性監(jiān)測，因?yàn)槟壳皩RSA、VRE尚無理想的治療方法[4]。

本次監(jiān)測顯示，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中產(chǎn)ESBLs株分別為77.2%和26.0%，與國內(nèi)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[5]。腸桿菌屬細(xì)菌尤其是大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌因產(chǎn)ESBLs而對β-內(nèi)酰胺類、三代頭孢類、喹諾酮類耐藥較嚴(yán)重，給臨床治療帶來較大困難，與ESBLs的特性有關(guān)。產(chǎn)ESBLs的細(xì)菌不僅對第3代、第4代頭孢類抗菌素產(chǎn)生耐藥性，而且由于細(xì)菌攜帶的質(zhì)粒中除ESBLs外，還帶有對氟喹諾酮類、氨基糖苷類和磺胺類抗菌劑的耐藥基因，極易對常用抗菌劑產(chǎn)生耐藥。從表3中可見此類細(xì)菌對碳青霉烯類抗生素高度敏感，對含酶抑制劑的復(fù)合物抗菌藥物如哌拉西林/他唑巴坦和頭孢哌酮/舒巴坦也保持較高的抗菌活性，因此可作為治療這兩種細(xì)菌感染最理想的抗生素，特別是對重癥感染仍作為首選藥物[6]。非發(fā)酵菌呈多重耐藥及廣泛耐藥菌株，銅綠假單胞菌和不動桿菌是院內(nèi)感染常見的條件致病菌，耐藥機(jī)制復(fù)雜且銅綠假單胞菌極易形成生物被膜，一旦感染則難以清除[7]。本次調(diào)查顯示，銅綠假單胞菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率較高，分別為43.4%和26.6%，對頭孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星最為敏感，因此臨床上針對銅綠假單胞菌導(dǎo)致的嚴(yán)重感染可考慮選擇聯(lián)合應(yīng)用β-內(nèi)酰胺類抗假單胞菌藥與氨基糖苷類（如阿米卡星）或氟喹諾酮類藥物。

從本次結(jié)果可見，鮑曼不動桿菌在臨床標(biāo)本中的分離率僅次于銅綠假單胞菌，居痰液中分離的條件致病菌種首位，其對大多數(shù)頭孢菌素類、氨基糖苷類、喹諾酮類的耐藥率均大于50%，可作為臨床選用的敏感性較高的抗菌藥物僅有阿米卡星、多粘菌素和頭孢哌酮/舒巴坦等。對美羅培南和亞胺培南的耐藥率分別為44.6%和52.7%，這可能與近幾年碳青霉烯類抗菌藥物廣泛應(yīng)用，從而誘導(dǎo)耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌增長有關(guān)[8]。

目前，細(xì)菌耐藥性已成為世界抗感染治療領(lǐng)域面臨的重大問題，在中國，由于抗菌藥物的長期濫用，細(xì)菌耐藥的形勢更為嚴(yán)峻[9]。細(xì)菌耐藥的產(chǎn)生與細(xì)菌中存在諸多耐藥基因和抗生素廣泛應(yīng)用的程度密切相關(guān)。隨著廣譜抗生素的廣泛應(yīng)用，出現(xiàn)大量多重耐藥菌株，給臨床治療帶來了極大威脅，為此有必要采取適當(dāng)措施，合理應(yīng)用抗菌藥物、防止濫用，尤其是萬古霉素、碳青霉烯類及其他對于耐藥菌有良好療效的藥物，盡可能延長臨床適用期，為人類健康造福。

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An Analysis of the Clinic Distribution and Drug-resistance of Pathogenic Bacteriain in Wuhan

HUANG Ping，YUAN Min. Department of Clinical laboratory，the Eleventh Hospital of Wuhan City，430010

Objective To investigate the drug-resistance of common pathogenic bacteria from a hospital in 2014 and to provide evidences for rational use of antibiotics in the clinic.Methods1 221 strains of bacteria were isolated from clinical specimens in 2014. The pathogens were identified and retrospectively analyzed statistically by Zhuhai Dl Medical Biotech L-96 automated microbial identification system.ResultsAmong all the 1 221 isolates，36.04%（n=440） were Gram-positive bacteria; 63.96% （n=781） were Gram-negative bacteria. The three major Gram-positive bacteria were Staphylococcus aureus （12.20%，n=149），Coagulase - negative Staphylococcus sp. （10.07%，n=123），and Enterococcus sp. （10.16%，n=124）; The top two Gram-negative bacteria were Escherichia coli （20.06%，n=245），and Klebsiella pneumoiae（13.27%）. The most common non-fermentative bacteria included Pseudomonas aeruginosa（11.71%，n=143） and Acinetobacter baumanii（9.99%，n=122）. In Staphylococcus，MRSA and MRCNS detection rates were 76.71% of S.aureus and 81.4% of Coagulase- negative Staphylococcus，respectively. No vancomycin and Teicoplanin resistant Staphylococcus had been found. In Gram-negative bacteria，detection rates of ESBLs were 77.2% of E. coli and 26.0% of K.pneumoiae，both were equally sensitive to carbapenems.ConclusionHospital’s bacterial drug resistance is increased ，among them the Gram-negative bacteria dominate. The constant surveillance and control of bacterial antibiotics resistance are crucial to the rational application of antibiotics and prevention of nosocomial infection.

Bacterial resistance Antibiotic drugs Gram-negative bacilus Gram-positive coccidia

R378

A

1671-2587（2017）01-0075-04

2016-08-13）

（本文編輯：王敏）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.01.021

430010 湖北省武漢市第十一醫(yī)院檢驗(yàn)科

黃萍（1969–），女，湖北武漢人，主管技師，學(xué)士，主要從事微生物檢驗(yàn)工作，（Tel）18062519201（E-mail）764521174@qq.com。