實驗室樣品采集的一般要求及注意事項

（新鄉(xiāng)縣農(nóng)牧局，河南 新鄉(xiāng) 453003）

實驗室樣品采集的一般要求及注意事項

?？煽?，楊繁

（新鄉(xiāng)縣農(nóng)牧局，河南 新鄉(xiāng) 453003）

檢測樣品是檢測工作的源頭，檢測樣品的質(zhì)量決定著檢測工作的成敗。動物的體液、離體組織、排泄物等是疾病診斷的基本條件，檢測樣品采集不恰當會影響檢驗結(jié)果，導致誤診。正確采集樣品對疾病的確診、病情發(fā)展的預測及防預措施的制定有重要意義。

1 基本要求

具有與采集病原微生物樣本所需要的生物安全防護水平相適應(yīng)的設(shè)備。

具有掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能的工作人員，采集樣品應(yīng)無菌操作，做好個人防護，穿戴個人無菌防護用品。

具有有效地防止病原微生物擴散和感染的措施，做好環(huán)境消毒和動物尸體處理工作，防止污染環(huán)境，防止疫病傳播。

具有保證病原微生物樣本質(zhì)量的技術(shù)方法和手段?？紤]動物福利做好動物保定，在減少動物應(yīng)激的同時，避免動物對采樣人員造成傷害。

根據(jù)檢測目的的不同，采集相應(yīng)的樣品，據(jù)病原不同分別采集相應(yīng)的組織臟器、內(nèi)容物、分泌物、排泄物。當不能初步判斷病因時，應(yīng)進行全面采樣以備檢驗。

2 一般原則

2.1 剖檢原則

首先排除炭疽，先觀察是否有血液凝固不良現(xiàn)象，若有鼻孔流血等病死動物，應(yīng)耳尖采血涂片，痘病、炭疽病死的動物嚴禁剖檢。

2.2 采樣

避免外源性的污染，順序是從胸腔到腹腔，先采實質(zhì)器官最后采集污染的組織。

2.3 采取的病料必須有代表性

采取組織病變明顯部位，采取病料時應(yīng)根據(jù)不同的疾病及檢驗目的，采其相應(yīng)的病料，病因不明無法第一時間判斷的疾病應(yīng)系統(tǒng)采集。病料的采取應(yīng)在使用治療藥物前，用藥后會影響病料中微生物的檢出。死亡動物的內(nèi)臟病料采取，最遲不超過死后6 h（尤其在夏季），否則尸體腐敗，難以采到合格的病料。血液樣品在采前一般禁食8 h，采集血樣時，應(yīng)根據(jù)采樣對象、檢驗目的及所需量，確定采血方法與采血部位。

3 樣品采集記錄

送往實驗室的樣品必須認真填寫采樣單，一式兩份，一份隨樣品送實驗室，另一份留送備案。填寫內(nèi)容應(yīng)包括養(yǎng)殖場（戶）名稱及詳細地址，畜主姓名及聯(lián)系電話，動物品種、種類及數(shù)量，被采樣日齡。是否健康動物，若被感染動物，應(yīng)填寫被采集動物種類、數(shù)量、發(fā)病日期、造成損失、感染動物在畜群中的分布情況、發(fā)病動物及死亡數(shù)量、臨床癥狀、病理變化、免疫及用藥情況。病料名稱、種類、保存方法，送檢單位名稱和送檢人姓名、聯(lián)系方式。

4 注意事項

4.1 無菌操作

所用的器械及容器要進行嚴格的消毒。刀剪鑷子等金屬用具可煮沸消毒30 min，使用前用酒精擦拭，并在火焰上燒一燒；器皿（玻制、陶制及琺瑯制等）在高壓滅菌器或干烤箱內(nèi)滅菌；軟木塞和橡皮塞應(yīng)高壓滅菌。采集最適病料或理想的病料，應(yīng)是無菌采取的含病原微生物量多的血液器官組織或分泌物和排泄物。如無法估計是何種疾病時，應(yīng)根據(jù)臨床癥狀和病理變化采集病料，或全面采取病料，取材時應(yīng)注意病原微生物感染所致疫病的類型。

4.2 病料采集的時間

一般在疾病流行早期典型、急性期，此時病原微生物的檢出率高；后期由于體內(nèi)免疫力的產(chǎn)生，病原微生物減少，檢測病原微生物比較困難，同時可能出現(xiàn)交叉感染，增加判斷的難度。

4.3 細菌學檢驗

病料應(yīng)采自未經(jīng)抗菌藥物治療的患病動物并做涂片。供顯微鏡檢查的膿汁、血液、分泌物等樣品，應(yīng)無菌操作，盡快進行涂片、固定。各種拭子處理時，將保存液中的拭子充分振蕩、刷洗后，取上清液。

4.4 樣品的保存和運輸

所采集的樣品要以最快最直接的途徑送往實驗室。如果樣品能在采集后24 h內(nèi)抵達實驗室的應(yīng)放在4℃容器中密封保存，派具備資格的專人運送。

4.5 其他

供做切片的樣品采取后必須立即投入固定液，采取一種病料，使用一套器械，或器械用酒精擦拭、火焰滅菌后再采取另一種病料；一種病料放入一種容器，不可混放。所有樣品容器應(yīng)做好標注，以便復檢查驗和防止混淆。血液樣品采集后應(yīng)避免震蕩，于室溫下靜置2 h待血清析出后分離血清，置4℃保存，如需長期保存應(yīng)置于-20℃。避免反復凍融。

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