草魚和赤眼鱒及其正交F1代的肌肉營(yíng)養(yǎng)特性比較

李偉，李迪，肖調(diào)義.*，黃春紅，金生振，周智愚

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省特色水產(chǎn)資源利用工程技術(shù)研究中心，湖南 長(zhǎng)沙410128；2.湖南文理學(xué)院水產(chǎn)高效健康生產(chǎn)湖南省協(xié)同創(chuàng)新中心，湖南 常德 415000)

草魚和赤眼鱒及其正交F1代的肌肉營(yíng)養(yǎng)特性比較

李偉1，李迪1，肖調(diào)義1.2*，黃春紅2，金生振1，周智愚1

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省特色水產(chǎn)資源利用工程技術(shù)研究中心，湖南 長(zhǎng)沙410128；2.湖南文理學(xué)院水產(chǎn)高效健康生產(chǎn)湖南省協(xié)同創(chuàng)新中心，湖南 常德 415000)

為比較草魚和赤眼鱒正交(草魚(♀)×赤眼鱒(♂))的子一代F1(下文中簡(jiǎn)稱“正交F1”)與同齡草魚、赤眼鱒的肌肉營(yíng)養(yǎng)特性，評(píng)價(jià)正交F1肌肉的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，選取18月齡的健康正交F1、草魚及赤眼鱒各12尾，采用生化方法分析3種魚背肌中水分、粗脂肪、粗蛋白和粗灰分的含量以及氨基酸和脂肪酸的組成，并進(jìn)行氨基酸營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)。結(jié)果顯示：正交 F1肌肉中的水分含量顯著低于草魚的(P＜0.05)，顯著高于赤眼鱒的(P＜0.05)；粗蛋白含量顯著高于草魚的(P＜0.05)，顯著低于赤眼鱒的(P＜0.05)；正交F1肌肉中的總氨基酸(AA)含量、必需氨基酸(EAA)含量和鮮味氨基酸(DAA)含量分別為156.45、62.81、61.32 mg/g，其中AA含量和DAA含量均顯著高于草魚的(P＜0.05)，且低于赤眼鱒的(P＞0.05)；對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行氨基酸評(píng)分(AAS)和化學(xué)評(píng)分(CS)分析，發(fā)現(xiàn)賴氨酸為 3種試驗(yàn)魚共有的評(píng)分最高的氨基酸；正交F1不飽和脂肪酸(UFA)占總脂肪酸的67.67%，顯著高于赤眼鱒的(P＜0.05)，顯著低于草魚的(P＜0.05)，其ω6族多不飽和脂肪酸與ω3族多不飽和脂肪酸族的比值為5.88。結(jié)果表明，正交F1較草魚具有更好的肌肉營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。

草魚(♀)；赤眼鱒(♂)；正交F1；肌肉營(yíng)養(yǎng)；氨基酸；脂肪酸

雜交子代在肉質(zhì)、生長(zhǎng)、抗病、抗逆性等性狀方面往往具有一定的雜交優(yōu)勢(shì)[1–2]。雜交組合團(tuán)頭魴 (Megalobrama amblycephala)×翹 嘴 紅 鲌(Erythroculter ilishaeformis)[3]、 斑 鱧 (Channa maculate)×烏 鱧 (Channa argus)[4–5]、 褐 牙 鲆(Paralichthys olivax)×犬 齒 牙 鲆 (Paralichthys dentatus)[6]等在肉質(zhì)方面具有明顯的雜交優(yōu)勢(shì)。肖調(diào)義研究團(tuán)隊(duì)于 2009年開始研究草魚(Ctenopharyngodon idellus)和赤眼鱒(Squaliobarbus curriculus)正交(草魚(♀)×赤眼鱒(♂))的子一代F1(下文中簡(jiǎn)稱“正交F1”) 抗草魚出血病病毒(grass carp reovirus，GCRV)的分子機(jī)理。前期研究結(jié)果表明，雜交育種能夠明顯提高子代對(duì)GCRV的抗性[7]，但正交F1肌肉營(yíng)養(yǎng)特性尚不清楚。本試驗(yàn)中以18月齡健康正交F1、赤眼鱒和草魚為研究對(duì)象，采用生化分析方法分別測(cè)定肌肉中的水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分的含量和氨基酸組成及脂肪酸組成，并評(píng)價(jià)其氨基酸營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，比較分析雜交F1、赤眼鱒和草魚肌肉的營(yíng)養(yǎng)特性，旨在為雜交F1的開發(fā)利用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

以18月齡健康的正交F1、赤眼鱒和草魚各12尾為試材。正交F1的體質(zhì)量為(993.09±24.63) g，體長(zhǎng)(36.24±0.31) cm，赤眼鱒的體質(zhì)量為(229.71±9.81) g，體長(zhǎng)(20.54±0.35) cm，草魚的體質(zhì)量為(2545.65± 69.65) g，體長(zhǎng)(47.56±0.45) cm。試材由湖南省瀏陽(yáng)市北盛鎮(zhèn)烏龍漁場(chǎng)提供，為2013年5月同批次繁育個(gè)體，其生長(zhǎng)和飼喂條件相同。每種魚選擇 12尾，用丁香酚麻醉處理后，每尾采集背部白肌15～20 g，切碎后用自封袋保存，分別用于營(yíng)養(yǎng)成分、氨基酸組成和脂肪酸組成的測(cè)定與分析。單項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定設(shè)置4個(gè)重復(fù)。營(yíng)養(yǎng)成分和氨基酸組成分析樣品置于–20 ℃保存。脂肪酸組成分析樣品置于–80 ℃保存。

1.2 方法

1.2.1 營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定

1) 水分含量測(cè)定。依據(jù)GB/T 5009.3—2010，精確稱取13～15 g肌肉樣品(m1)于恒重后的培養(yǎng)皿中，并精確稱量培養(yǎng)皿和試樣的總質(zhì)量(m2)。置于105 ℃干燥箱中干燥3 h后加蓋放入干燥器內(nèi)冷卻0.5 h，精確稱量；放入105 ℃干燥箱中干燥1 h后，移入干燥器內(nèi)冷卻0.5 h，再稱量培養(yǎng)皿和試樣干燥后的總質(zhì)量(m3)。重復(fù)操作至前后2次質(zhì)量差不超過(guò)2 mg。水分含量= (m2– m3)/m1。

2) 粗蛋白含量測(cè)定。參照GB 5009.5—2010，精確稱取肌肉樣品1～2 g，采用FOSS凱氏定氮儀8100進(jìn)行檢測(cè)。

3) 粗脂肪含量測(cè)定。參照GB/T 14772—2008，用脫脂濾紙精確稱取干燥后的肌肉樣品(約1～2 g，G1)，并折疊成單個(gè)濾紙包，精確稱量抽提前脂肪包的質(zhì)量(G2)。將所有濾紙包放入索氏提取筒內(nèi)并連接瓶底，注入無(wú)水乙醚(國(guó)藥，上海)。試驗(yàn)期間控制提取液每6～8 min回流1次，用玻璃棒接取1滴提取液，待乙醚揮發(fā)干燥至玻璃棒表面無(wú)油污(表明脂肪抽提完成)。抽提結(jié)束后，將脂肪包放在空氣中讓乙醚大部分揮發(fā)，然后將濾紙包移入恒重的鋁盒，置入105 ℃干燥箱中干燥1 h，置于干燥箱內(nèi)冷卻至室溫，精確稱量脂肪包干燥后的質(zhì)量(G3)。重復(fù)干燥30 min，至前后2次稱量相差不超過(guò)2 mg。粗脂肪含量=(G2–G3)/G1。

4) 粗灰分含量測(cè)定。依據(jù)GB/T 5009.4—2010，精確稱取肌肉樣品(W1，3～5 g)放入恒重的坩堝(重復(fù)灼燒至前后2次稱量相差不超過(guò)0.5 mg），精確稱量樣品和坩堝的總質(zhì)量(W2)。先在電爐上以小火充分炭化至無(wú)煙，然后置于馬弗爐中，在(550±25)℃灼燒4 h。冷卻至 200 ℃左右，取出，在空氣中冷卻1 min，放入干燥器中冷卻30 min，精確稱量坩堝和灰分的質(zhì)量(W3)。重復(fù)灼燒至前后2次稱量相差不超過(guò)0.5 mg。粗灰分含量=( W3– W2)/W1。

1.2.2 氨基酸含量的測(cè)定與評(píng)價(jià)

1) 氨基酸含量測(cè)定。參照 GB/T 5009.124—2003，精確稱量肌肉樣品1～2 g，加入15 mL 鹽酸(6 mol/L)水解，用日立L–8800型氨基酸分析儀進(jìn)行測(cè)定。

2) 營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)。將必需氨基酸含量換算成每1 g蛋白中氨基酸的質(zhì)量(mg/g)，并與 FAO/WHO 2007年建議的氨基酸評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)和全雞蛋蛋白質(zhì)的氨基酸模式進(jìn)行比較，計(jì)算出氨基酸評(píng)分、化學(xué)評(píng)分和必需氨基酸指數(shù)。

氨基酸評(píng)分=樣品蛋白質(zhì)的氨基酸含量/FAO/ WHO評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)模式氨基酸含量。

化學(xué)評(píng)分=樣品蛋白質(zhì)氨基酸含量/雞蛋蛋白中氨基酸含量。

式中：n為參與比較的必需氨基酸種數(shù)；a，b，c，…，I為魚體肌肉中蛋白質(zhì)各必需氨基酸的含量(%)；A，B，C，…，I 為雞蛋蛋白質(zhì)各必需氨基酸的含量(%)。

1.2.3 脂肪酸相對(duì)含量的測(cè)定

依據(jù) GB/T 9695.2—2008測(cè)定脂肪酸相對(duì)含量。將肌肉樣品加液氮研磨至粉末狀，精確稱取2～3 g，采用甲醇–氯仿法提取脂肪，萃取后充氮以讓氯仿?lián)]發(fā)，將所得油樣進(jìn)行甲酯化后進(jìn)行氣相色譜分析，用峰面積歸一化法計(jì)算脂肪酸組成。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析

使用MS Excel 2013和SPSS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。用單因素方差分析法(One–Way ANOVA)、 Duncan法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 正交F1和赤眼鱒及草魚的肌肉常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分

常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)試結(jié)果(表1)顯示，3種魚正交F1肌肉中的水分含量為 78.47%，顯著低于草魚的(79.75%)，顯著高于赤眼鱒的(76.51%)。正交F1肌肉中的粗蛋白含量為 18.25%，均顯著高于草魚的(17.29%)，顯著低于赤眼鱒的(19.16%)。正交F1肌肉中的粗脂肪含量為 1.99%，顯著低于赤眼鱒的(3.07%)，高于草魚的(但二者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)。正交F1肌肉中的灰分含量為1.15%，均顯著低于草魚的(1.29%)和赤眼鱒的(1.51%)。

表1 3種魚肌肉的常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量Table 1 Nutritional composition from muscles of three kinds of fishes (n=4)

2.2 雜交F1和赤眼鱒及草魚的肌肉中氨基酸組成

氨基酸組成分析結(jié)果(表2)顯示，3種魚正交F1肌肉中的鮮味氨基酸含量為61.32 mg/g，顯著高于草魚的(55.93 mg/g)，低于赤眼鱒的(62.87 mg/g)，但其間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 3種魚肌肉中的氨基酸含量(n=4)Table 2 Amino acids from muscles of three kinds of fishes (n=4)

由表3可見，正交F1肌肉中的總氨基酸含量為156.45 mg/g，顯著高于草魚的(145.34 mg/g)，顯著低于赤眼鱒的(164.66 mg/g)。3種魚肌肉中總必需氨基酸含量由高到低依次為赤眼鱒、正交F1、草魚，分別為66.94、62.81、59.96 mg/g，但三者間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3種魚肌肉中的必需氨基酸含量占總氨基酸含量的比分別為 40.14%、40.65%和40.45%；必需氨基酸含量與非必需氨基酸含量的比分別為67.08%、68.5%和68.25%。

表3 3種魚肌肉中的總氨基酸含量(n=4)Table 3 Total amino acids from muscles of three kinds of fishes (n=4)

由表4氨基酸的氨基酸評(píng)分、化學(xué)評(píng)分和必需氨基酸指數(shù)可見，雜交F1、赤眼鱒及草魚肌肉中均是賴氨酸含量最高，3種魚肌肉的氨基酸評(píng)分均大于1，化學(xué)評(píng)分均大于0.5。3種魚的氨基酸評(píng)分結(jié)果顯示，纈氨酸為正交F1和赤眼鱒共同的第一限制性氨基酸，而草魚第一限制性氨基酸為蛋氨酸+半胱氨酸?；瘜W(xué)評(píng)分結(jié)果顯示，蛋氨酸+半胱氨酸為3種魚的共同第一限制性氨基酸。由必需氨基酸指數(shù)(EAAI)可知，正交F1必需氨基酸指數(shù)為78.79，比草魚的(77.63)高，但低于赤眼鱒的(80.47)。

表4 3種魚的氨基酸評(píng)分和化學(xué)評(píng)分及必需氨基酸指數(shù)Table 4 Comparison analysis on the AAS, CS, and EAAI from muscles of three kinds of fishes

2.3 正交F1和赤眼鱒及草魚的脂肪酸組成

由表4可見，3種魚肌肉中共檢出36種脂肪酸，除正交F1未檢出羊油酸(6∶0)外，3種肌肉樣品中脂肪酸組成類別基本相同。正交F1與草魚肌肉脂肪酸中油酸(18∶1n–9t)的含量最高，而赤眼鱒脂肪酸中含量最高的脂肪酸為硬脂酸(18∶0)。正交 F1肌肉中不飽和脂肪酸UFA的含量為67.67%，與赤眼鱒的 56.01%和草魚的 75.79%均具有顯著性差異(P＜0.05)。3種魚肌肉中亞麻酸占總脂肪酸的含量由高到低依次為草魚(16.74%)、正交 F1(15.33%)、赤眼鱒(13.89%)，三者之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，同時(shí)赤眼鱒中的 α–亞麻酸(18∶3n–3)的含量(9.04%)顯著高于正交F1的1.33%和草魚的1.41%(P＜0.05)。正交 F1肌肉中 ω3族多不飽和脂肪酸(18∶3n–3、20∶5n–3、20∶3n–3和22∶6n–3)的含量為3.20%，顯著低于赤眼鱒的 15.19%(P＜0.05)，高于草魚的2.74%，但二者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。正交 F1肌肉中ω6族多不飽和脂肪酸(18∶2n–6c、18∶3n–6、20∶2、20∶3n–6和20∶4n–6)與ω3族多不飽和脂肪酸的比值為5.88，顯著高于與赤眼鱒的比(1.40)，低于與草魚的比(7.34)。

表4 3種魚肌肉的脂肪酸相對(duì)含量(n=4)Table 4 Relative component of fatty acids from muscles of three kinds of fishes (n=4)

表4 (續(xù))

3 結(jié)論與討論

魚肉的氨基酸組成平衡，且易被人體吸收，是人類理想的蛋白質(zhì)來(lái)源[8]。本試驗(yàn)中草魚和赤眼鱒正交F1肌肉中的粗蛋白含量為18.25%，比草魚的(17.29%)和斑點(diǎn)叉尾鮰的(16.69%)[9]高，與鳡魚的(19.61%)[10]、黃金鱸的(18.62%)[11]、鱖魚的(17.83%)[12]相近，說(shuō)明正交F1是一種蛋白質(zhì)含量豐富的魚類。魚體肌肉中水分含量與干物質(zhì)含量呈負(fù)相關(guān)，正交F1肌肉中的水分含量為78.47%，低于鰱的(81.10%)和鳙魚的(80.72%)[13]，與翹嘴紅鲌的(80.80%)[14]、黃金鱸的(77.9%)[11]和斑駁尖塘鱧的(78.12%)[15]接近，說(shuō)明正交F1肌肉中干物質(zhì)含量豐富。正交F1肌肉中總氨基酸的含量為156.45 mg/g，高于草魚的(145.34 mg/g)，但低于黃金鱸的(187.7 mg/g)[11]和鳡魚的(206.59 mg/g)。脂肪是人體的重要組成部分，脂肪的缺乏和不均衡攝入會(huì)增加患產(chǎn)后抑郁癥、肥胖、心血管疾病、腫瘤甚至癌癥等疾病的風(fēng)險(xiǎn)[16–18]。攝入多不飽和脂肪酸比值較高的脂肪酸有助于降低患上述疾病的風(fēng)險(xiǎn)。ω6與ω3多不飽和脂肪酸比值的理想值為(5～10)∶1[10]。ω6族的亞油酸(18∶2n–6c)和ω3族的α–亞麻酸(18∶3n–3)是人體必需的脂肪酸，人體可利用ω6族的亞油酸(18∶2n–6c)和ω3族的α–亞麻酸(18∶3n–3)合成重要的花生四烯酸(20∶4n–6)、二十碳五烯酸(20∶5n–3)和二十二碳六烯酸(22∶6n–3)等ω6和ω3族多不飽和脂肪酸。本試驗(yàn)中，正交F1的ω6、ω3多不飽和脂肪酸的比值為5.88，屬于理想值范圍。

雜交育種可以獲得生長(zhǎng)、肉質(zhì)、抗病、適應(yīng)性等方面具有明顯超親優(yōu)勢(shì)的子代。何周玲等[3]研究翹嘴鳊的肌肉營(yíng)養(yǎng)成分，發(fā)現(xiàn)翹嘴鳊肌肉中的不飽和脂肪酸和鮮味氨基酸具有明顯的超親優(yōu)勢(shì)。鄭國(guó)棟等[19]研究了團(tuán)頭魴(♀)×翹嘴鲌(♂)的雜交后代及其親本的生長(zhǎng)性能，發(fā)現(xiàn)魴鲌中間型個(gè)體的生長(zhǎng)速率顯著高于其雙親，在生長(zhǎng)性能上表現(xiàn)出明顯的超親優(yōu)勢(shì)。關(guān)健等[6]分析褐牙鲆(♀)×犬齒牙鲆(♂)雜交F1的肌肉營(yíng)養(yǎng)成分，發(fā)現(xiàn)其在蛋白質(zhì)含量、氨基酸總量、必需氨基酸與鮮味氨基酸總量上表現(xiàn)出超親優(yōu)勢(shì)。本試驗(yàn)中，正交F1灰分含量顯著低于雙親，表現(xiàn)出顯著的負(fù)向超親優(yōu)勢(shì)。雜交育種同樣可以獲得具有明顯中親優(yōu)勢(shì)的子代。強(qiáng)俊等[20]用海豚鏈球菌感染吉富羅非魚與奧利亞羅非魚自繁F1與雜交F1，發(fā)現(xiàn)雜交可以提高選育后代的抗病力，但不具有超親優(yōu)勢(shì)。Bryden等[21]分析雜交大馬哈魚的12個(gè)數(shù)量遺傳性狀，發(fā)現(xiàn)其中的3/4出現(xiàn)平均優(yōu)勢(shì)，但不具有超親優(yōu)勢(shì)。鄒根禮等[4]發(fā)現(xiàn)雜交鱧肌肉品質(zhì)、氨基酸水平和物理特性均優(yōu)于烏鱧，表現(xiàn)出一定的雜交優(yōu)勢(shì)。本試驗(yàn)中，正交F1肌肉中水分含量、蛋白質(zhì)含量、脂肪含量、必需氨基酸含量、必需氨基酸指數(shù)、不飽和脂肪酸含量和單不飽和脂肪酸含量均介于雙親之間，表現(xiàn)出一定的雜交優(yōu)勢(shì)。魚肉中的蛋白質(zhì)含量和氨基酸組成不僅與魚的品種有關(guān)，而且與生長(zhǎng)環(huán)境和餌料有關(guān)[22–23]。

正交F1肌肉中的水分、粗蛋白和粗脂肪含量均介于雙親之間，粗蛋白含量分別顯著高于草魚的和顯著低于赤眼鱒的，且與肉食性魚類相近，說(shuō)明正交F1的粗蛋白含量豐富，具有一定的雜交優(yōu)勢(shì)。正交F1肌肉中鮮味氨基酸的含量顯著高于草魚的，與赤眼鱒的含量相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明正交F1代肌肉的味道更加鮮美。正交F1肌肉中 ω6族多不飽和脂肪酸與ω3族多不飽和脂肪酸的比值顯著低于草魚的，說(shuō)明正交F1不飽和脂肪酸的組成更加平衡。綜上所述，正交F1肌肉具有較低的水分含量和較高的蛋白質(zhì)含量，其氨基酸組成平衡，鮮味氨基酸含量豐富，多不飽和脂肪酸PUFAs占總脂肪酸的比例高，具有較低的ω6、ω3比值，是一種營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美和品質(zhì)優(yōu)良的魚類。

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責(zé)任編輯：王賽群

英文編輯：王 庫(kù)

Comparison the muscle nutritional characteristics on Grass carp Ctenopharyngodon idellus (♀), barbel chub Squaliobarbus curriculus (♂) and their crossing generation F1

LI Wei1, LI Di1, XIAO Tiaoyi1,2*, HUANG Chunhong2, JIN Shengzhen1, ZHOU Zhiyu1
(1.Hunan Engineering Technology Research Center of Featured Aquatic Resources Utilization, Hunan agricultural University, Changsha 410128, China; 2.Key Laboratory of Zoology in Hunan Higher Education, Hunan University of Arts and Science, Changde, Hunan 415000, China)

Indicators, including moisture, crude protein, crude fat, ash, amino acids, and fatty acids from dorsal muscle of eighteen–month–old healthy grass carp (Ctenopharyngodon idellus)(♀), barbel chub (Squaliobarbus curriculus)(♂) and their crossing generation F1, were measured to investigate their muscle nutritional characteristics, as well as the evaluation on nutritional value of amino acid (AA).The results showed that moisture and crude protein from F1was significantly lower than those from grass carp (P ＜ 0.05), but significantly higher than those from barbel chub (P ＜ 0.05); crude protein from F1was significantly higher than that from grass carp (P ＜ 0.05), but significantly lower than that from barbel chub (P ＜ 0.05); total amino acid (AA), essential amino acid (EAA) and delicious amino acid (DAA) from F1were 156.45 mg/g, 62.81 mg/g and 61.32 mg/g, respectively; AA and DAA from F1were significantly higher than that from grass carp (P ＜ 0.05), but significantly lower than that from barbel chub (P＞0.05).Both AAS and CS of lysine were the highest in the three kinds of fishes.The percentage of unsaturated fatty acids (UFA) from F1was 67.67%, and its value of ω6/ω3 ratio was 5.88, which was significantly lower than that from grass carp (P ＜ 0.05).These results demonstrated thatthe crossing generation F1had higher nutritional value than grass carp.

grass carp (♀); barbel chub (♂); crossing generation F1; muscle nutrition; amino acids; fatty acids

S963.16

：A

：1007-1032(2017)01-0052-06

2016–01–03

2016–09–21

國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31272652)；現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金(CARS–46–42)

李偉(1989—)，男，湖南常德人，碩士研究生，主要從事水產(chǎn)動(dòng)物遺傳育種研究，match10@qq.com；*通信作者，肖調(diào)義，教授，主要從事水產(chǎn)動(dòng)物遺傳育種研究，tyxiao1128@163.com