彩葉新品種‘白果’南天竹引進(jìn)與快繁技術(shù)

張慶瑞，路買林，任雪玲，殷兆晴

彩葉新品種‘白果’南天竹引進(jìn)與快繁技術(shù)

張慶瑞1，路買林1，任雪玲2，殷兆晴1

（1. 河南林業(yè)職業(yè)學(xué)院，河南 洛陽(yáng) 471002；2. 洛陽(yáng)市綠化工程管理處，河南 洛陽(yáng) 471000）

通過對(duì)引進(jìn)的‘白果’南天竹（‘Alba’） 的實(shí)地栽培和觀測(cè)，表明‘白果’南天竹在河南地區(qū)表現(xiàn)良好。以‘白果’南天竹的莖段為外植體進(jìn)行快繁研究，結(jié)果表明：腋芽誘導(dǎo)的適宜培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1，誘導(dǎo)率為89.13%；適合南天竹增殖的培養(yǎng)基為MS+ NAA 1.5 mg·L-1+6-BA 0.1 mg·L-1，增殖系數(shù)為3.58。較高的6-BA濃度下，易出現(xiàn)愈傷組織和玻璃化苗。生根的適宜培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.2 mg·L-1，生根率45%。

‘白果’南天竹；適應(yīng)性；無性系

‘白果’南天竹（‘Alba’） 是由美國(guó)喬治亞大學(xué)選育的南天竹新品種，屬小檗科南天竹屬，常綠灌木。生長(zhǎng)健壯、抗病力強(qiáng)；株形高大優(yōu)美、緊湊；果實(shí)為獨(dú)特的黃白色，抱卵形，經(jīng)冬不落，觀果期長(zhǎng)；葉子春季綠色，夏季黃色，冬季深紅色，季相變化明顯，是少有的一樹三色樹種。無論孤植、叢植，還是做地被，或用于花鏡，‘白果’南天竹都是不可多得的造景材料。

目前，國(guó)內(nèi)對(duì)‘白果’南天竹的研究還是空白。同屬植物的研究多集中在南天竹和火焰南天竹上，研究方向主要是栽培技術(shù)、提取物及繁殖技術(shù)等方面。本項(xiàng)目首次將‘白果’南天竹引入我國(guó)并進(jìn)行了適應(yīng)性記載，對(duì)無性系的建立進(jìn)行了初步研究。

1 材料與方法

1.1 材料引進(jìn)與觀測(cè)

2015年初，項(xiàng)目組在河南林業(yè)職業(yè)學(xué)院教學(xué)基地建立專用的“南天竹引種區(qū)”，并進(jìn)行了土壤處理等準(zhǔn)備工作。2015年9月16日項(xiàng)目組從美國(guó)引進(jìn)‘白果’南天竹30株，定植于引種區(qū)內(nèi)。同期進(jìn)行連續(xù)觀測(cè)。觀測(cè)內(nèi)容：株高；冠幅；葉序長(zhǎng)寬；小葉形狀、長(zhǎng)、寬；葉色；變色時(shí)間等。

1.2 快繁技術(shù)

1.2.1外植體的消毒

快繁技術(shù)所采用的外植體為莖段，消毒藥劑為75%的酒精和0.1%的升汞。消毒處理為：①75%酒精30 s+0.1%升汞6 min；②75%酒精30 s+0.1%升汞8 min；③75%酒精30 s+0.1%升汞10 min。記錄接種數(shù)量和成活數(shù)量，計(jì)算成活率。

1.2.2腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的篩選

以MS為基本培養(yǎng)基，6-BA濃度分別從0 mg?L-1到2 mg?L-1設(shè)5個(gè)濃度梯度，NAA濃度分別從0 mg?L-1到0.5 mg?L-1設(shè)3個(gè)濃度梯度，瓊脂5 g·L-1，蔗糖20 g·L-1，pH值5.8。共15個(gè)處理。接種后記錄萌發(fā)時(shí)間，并計(jì)算萌發(fā)率。

1.2.3腋芽增殖培養(yǎng)基的篩選

從誘導(dǎo)成功的芽中，選取節(jié)數(shù)在兩節(jié)以上，高度在2 cm以上的芽，切除原莖段后接種到腋芽增殖培養(yǎng)基上。增殖培養(yǎng)基共12個(gè)處理。均以MS為基本培養(yǎng)基，分別添加不同濃度的6-BA和NAA，瓊脂5 g·L-1，蔗糖20 g·L-1，pH值5.8。28 d后觀察長(zhǎng)勢(shì)，計(jì)算增殖系數(shù)。

1.2.4生根培養(yǎng)基的篩選

生根培養(yǎng)基采用1/2 MS為基本培養(yǎng)基，添加不同濃度的NAA。選取株高2 cm以上的組培苗，接種到生根培養(yǎng)基上。28 d后調(diào)查生根率、平均根長(zhǎng)、平均根數(shù)和最長(zhǎng)根長(zhǎng)。

上述培養(yǎng)環(huán)境均為：光照時(shí)間12 h，溫度23℃。

2 結(jié)果分析

2.1 ‘白果’南天竹在河南地區(qū)的表現(xiàn)

2.1.1形態(tài)特征

常綠灌木，3 a生苗株高為70~100 cm。莖叢生，分枝少，光滑無毛。葉互生，三回羽狀復(fù)葉，小葉橢圓形，頂端漸尖，全緣，薄革質(zhì)。圓錐花絮腋生，花白色。果實(shí)黃白色，抱卵形。‘白果’南天竹與南天竹形態(tài)特征比較見表1。

表1 ‘白果’南天竹與南天竹形態(tài)特征比較

2.1.2生長(zhǎng)發(fā)育

每年4月份，待日均溫達(dá)到15℃時(shí)，‘白果’南天竹腋芽開始萌動(dòng)。初生莖綠色，易斷，隨氣溫升高，莖快速木質(zhì)化。4~5月生長(zhǎng)速度最快，但受氣溫忽高忽低的影響，莖節(jié)長(zhǎng)短有差異，（最長(zhǎng)的5.5 cm，最短的0.5 cm），7月上旬，盛夏高溫期停止生長(zhǎng)。頂端優(yōu)勢(shì)明顯。秋季有二次生長(zhǎng)現(xiàn)象。

春季新葉為亮綠色，6月下旬，氣溫接近30℃時(shí)，頂部葉片漸漸轉(zhuǎn)為黃綠色，光線越強(qiáng)，夏季葉色越黃。9月下旬，葉色又開始漸紅，至深秋為深紅色，可持續(xù)到來年3月。

5月上旬花蕾初綻開，20號(hào)左右盛開，花白色?；ê蠼Y(jié)果，果實(shí)為獨(dú)特的黃白色，冬季不落果。

2.2 ‘白果’南天竹快繁技術(shù)

2.2.1最佳消毒時(shí)間的篩選

本消毒處理共設(shè)3個(gè)時(shí)間段，從表2中可以看出，隨升汞消毒時(shí)間的延長(zhǎng)，感染的數(shù)量呈遞減趨勢(shì)，但死亡的外植體數(shù)量呈增長(zhǎng)趨勢(shì)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，較長(zhǎng)的消毒時(shí)間處理，易出現(xiàn)褐化現(xiàn)象，外植體的成活率不高。最佳的消毒時(shí)間應(yīng)為75%酒精30 s+0.1%升汞8 min。

2.2.2不同植物激素對(duì)腋芽誘導(dǎo)的影響

從表3可以看出，沒有添加任何激素的MS培養(yǎng)基上，外植體的誘導(dǎo)率最低，只有40.91%，說明激素對(duì)外植體的誘導(dǎo)具有決定性作用。但在激素濃度最高的組合上（MS+6-BA2 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1），外植體的誘導(dǎo)率也不高（60.00%）， 說明激素濃度過大時(shí)，會(huì)對(duì)外植體的誘導(dǎo)起到抑制作用。不改變6-BA濃度，隨NAA濃度的增大，各組合的芽誘導(dǎo)率均增加，但差別不大。當(dāng)NAA濃度不變時(shí)，外植體的誘導(dǎo)率隨6-BA濃度增加呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，但當(dāng)6-BA濃度達(dá)到2 mg·L-1時(shí)，誘導(dǎo)率開始下降。

本研究得出適合南天竹腋芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1。

表2 不同消毒處理對(duì)‘白果’南天竹莖段成活率的影響

表3 不同濃度6-BA和NAA對(duì)‘白果’南天竹腋芽誘導(dǎo)的影響

2.2.3不同植物激素對(duì)腋芽增殖的影響

6-BA由表4中可以看出，當(dāng)NAA濃度不變時(shí)，隨著6-BA濃度的增加，芽的增殖倍數(shù)呈上升趨勢(shì)，但增幅不明顯；當(dāng)NAA濃度為1.5 mg·L-1時(shí)，不同6-BA濃度間芽的增殖倍數(shù)數(shù)值差異不大。當(dāng)6-BA濃度不變，隨NAA濃度增加，芽的增殖倍數(shù)也呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，且1 mg·L-1NAA濃度比0 mg·L-1NAA濃度的增殖倍數(shù)明顯增長(zhǎng)，1.5 mg·L-1NAA 與1 mg·L-1NAA間增殖倍數(shù)差異不大。

從組培苗的生長(zhǎng)表現(xiàn)來看，在低6-BA濃度時(shí)，增殖苗均能正常生長(zhǎng)，隨著6-BA濃度的增加，增殖苗出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象，并形成愈傷組織，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，愈傷組織變褐并壞死。NAA對(duì)愈傷形成和組培苗的玻璃化影響不明顯，但6-BA與NAA的總濃度越高，形成愈傷組織和玻璃化越嚴(yán)重。

本研究得出適合南天竹增殖的培養(yǎng)基為MS+ NAA 1.5 mg·L-1+6-BA 0.1 mg·L-1。

表4 不同濃度6-BA和NAA對(duì)‘白果’南天竹芽增殖的影響

2.2.4生根培養(yǎng)基的篩選

從表5中可以看出， NAA 4個(gè)濃度對(duì)比，0.2 mg·L-1的NAA配方在生根率、平均根數(shù)方面，數(shù)值都是最高的；而0.1 mg·L-1的NAA配方的生根率、平均根數(shù)方面，都是最低的；0.3 mg·L-1和0.4 mg·L-1居于上述兩者之間。但平均根長(zhǎng)和最長(zhǎng)根長(zhǎng)均與NAA濃度呈正比， 0.4 mg·L-1NAA的效果最好，分別為2.09 cm（平均根長(zhǎng)）、3.1 cm（最長(zhǎng)根長(zhǎng)），而0.2 mg·L-1的NAA配方位居第三。說明，NAA的濃度高低影響南天竹生根，較高的NAA濃度有利于根的生長(zhǎng)，但過高的NAA濃度會(huì)抑制生根率和生根數(shù)量。綜合各方面因素，‘白果’南天竹生根的最佳培養(yǎng)基為1/2 MS+NAA 0.2 mg·L-1。

表5 不同濃度NAA對(duì)‘白果’南天竹生根的影響

3 結(jié)論與討論

通過連續(xù)兩年的觀測(cè)，‘白果’南天竹在河南地區(qū)生長(zhǎng)良好，適應(yīng)河南地區(qū)的氣候，冬季無需保護(hù)即可越冬，是一種可在河南及周邊省市種植的新型觀葉樹種。

‘白果’南天竹最大的觀賞特點(diǎn)是葉片的季相變化，春季新葉綠色，夏季變黃，秋季又呈現(xiàn)鮮艷的紅色。果實(shí)為獨(dú)特的黃白色，經(jīng)冬不凋，即可觀葉，亦可觀果，是點(diǎn)綴園林建筑小品的優(yōu)良材料，或植于墻偶，或伴以賞石，或林緣叢植，均能引人入勝，趣意盎然。

‘白果’南天竹以腋芽做為外植體時(shí)，最佳的消毒處理為75%酒精30 s+0.1%升汞8 min；適宜的增殖培養(yǎng)基為MS+NAA 1.5 mg·L-1+6-BA 0.1 mg·L-1，增殖倍數(shù)為3.58，最佳的生根培養(yǎng)基為1/2 MS+NAA 0.2 mg·L-1，平均根數(shù)為2.56根。

‘白果’南天竹初次繼代時(shí)，莖節(jié)較長(zhǎng)，苗高3~4 cm，可通過切段來增加繁殖系數(shù)。繼代兩三次后，莖節(jié)明顯縮短，多數(shù)莖長(zhǎng)不足2 cm，不易分段，主要通過不定芽來增殖。不定芽增殖系數(shù)僅3.58，增殖倍數(shù)較低，成為影響‘白果’南天竹快繁的瓶頸。這一現(xiàn)象在火焰南天竹和南天竹上有同樣表現(xiàn)，王珊[1]、李慧[2]、杜永芹[3]、王華宇[4]、鄧玉營(yíng)[5]等對(duì)火焰南天竹增殖培養(yǎng)時(shí)，增殖系數(shù)均在4左右。王春[6]、蔡鵬[7]等得出的南天竹的最高增值倍數(shù)分別為7.3 ~（10.3、6.27）。

Debergh[8-9]，Kevers[10]和pagues[11]等均指出，組培過程中細(xì)胞分裂素易導(dǎo)致玻璃化現(xiàn)象。牛自勉[12-13]、李瑤[14]、和任東植[15]等發(fā)現(xiàn)，高濃度的 6-BA 對(duì)玻璃化的產(chǎn)生有一定的促進(jìn)作用，這與本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果一致。本實(shí)驗(yàn)中6-BA濃度對(duì)組培苗玻璃化影響明顯，且隨著繼代次數(shù)的增加，新生側(cè)芽也易出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象，且生長(zhǎng)速度緩慢。

本實(shí)驗(yàn)僅用NAA做生根實(shí)驗(yàn)，其他植物激素對(duì)‘白果’南天竹生根的影響，有待進(jìn)一步研究。

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（責(zé)任編輯：王團(tuán)榮）

Research on the Introduction and Rapid Propagation Technique of Color-leafed NewVarietyAlba

Zhang Qingrui1，Lu Mailin1，Ren Xueling2，Yin Zhaoqing1

（1. Forestru Vocational College, Luoyang Henan 471002,China; 2. Luo yang Greening Project Management of fice, Luoyang Henan 471000,China）

The field cultivation and observation on the introduced“Alba” shows that it grows well in Henan area. Take the stem of“Alba”as the explant, the rapid propagation research results suggest that the suitable medium for axillary bud induction is MS+6-BA1.5 mg﹒L-1+NAA0.5 mg﹒L-1, and the inductivity is 89.13%; the suitable medium for propagation ofMS+ NAA 1.5 mg﹒L-1+6-BA 0.1 mg﹒L-1, and the propagation coefficient is 3.58. Under the higher 6-BAconcentration, it tends to appear callus and vitrified shoots. The suitable medium for rooting is 1/2MS+NAA0.2 mg﹒L-1，and the rooting percentage is 45%.

Alba; adaptation; clones

S 793.9

A

1003-2630（2017）04-0007-04

2017-12-16

國(guó)家林業(yè)局948項(xiàng)目：南天竹優(yōu)良品種及規(guī)?；旆奔夹g(shù)引進(jìn)（編號(hào)：2014-4-70）

張慶瑞（1980-），女，河南焦作人。河南林業(yè)職業(yè)學(xué)院，講師，碩士研究生，主要從事園林植物栽培生理研究。