蝴蝶蘭叢生芽組織培養(yǎng)研究進展

黃 丹，陳和明，呂復(fù)兵

（廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境園藝研究所/廣東省園林花卉種質(zhì)創(chuàng)新綜合利用重點實驗室，廣東 廣州 510640）

蝴蝶蘭（Phalaenopsis）為蘭科蝴蝶蘭屬植物，原產(chǎn)于亞熱帶雨林地區(qū)，本性喜暖畏寒，為附生性蘭花。其花型似蝶、色彩多樣、鮮艷多姿，花序好、花期長，廣受花卉愛好者的喜愛，素有“蘭花皇后”的美稱，在全世界廣泛栽培［1］。蝴蝶蘭是單莖性氣生蘭，幾乎沒有側(cè)芽萌發(fā)，不能通過分株方式進行繁殖；同時蝴蝶蘭種子不含胚乳，自然條件下萌發(fā)率非常低，不能通過播種方式進行繁殖［2］。因此，以上兩種繁殖方式均不能滿足市場對蝴蝶蘭的廣泛需求。

目前，蝴蝶蘭的繁殖方法主要為無菌播種［3-4］和組織培養(yǎng)無性繁殖［5］，無菌播種主要進行雜交或自交獲得種子，經(jīng)過無菌播種得到實生苗，但實生苗分離大且變異多，不能保持親本的遺傳穩(wěn)定性，花色、花期多變等；利用莖、根、葉等外植體誘導(dǎo)原球莖進行增殖并分化成苗，雖然性狀相對一致，但仍有較高的變異率，如花色不純等［6］。利用叢生芽進行蝴蝶蘭繁殖是一種從芽到芽的增殖途徑，其優(yōu)點是通過芽長芽的方式使親本的遺傳穩(wěn)定，減少變異的發(fā)生，是最有效的快速繁殖方法［7-9］。因此，本文主要針對蝴蝶蘭叢生芽組織培養(yǎng)研究進展進行綜述，旨在為蝴蝶蘭種苗規(guī)?；a(chǎn)提供依據(jù)。

1 外植體

1.1 外植體的選取

譚鵬鵬等［10］及尚楊娟等［11］以花梗為外植體，對花梗腋芽進行了試驗研究，結(jié)果表明：第2節(jié)、第3節(jié)花梗有較高的萌發(fā)率，以第3節(jié)萌發(fā)率最高；并得出花?；康牡?～3節(jié)誘導(dǎo)營養(yǎng)芽成功率較高，第4和第5節(jié)靠近頂端部分成為花芽的幾率大，這可能與芽的分化部位有關(guān)，花梗基部的芽主要是休眠芽，在生長激素的誘導(dǎo)刺激下容易發(fā)育成營養(yǎng)芽，但花序頂端的芽含有未完全分化的花原基，在培養(yǎng)基中比較容易誘導(dǎo)萌發(fā)為花芽［12］。劉亮等［8］在蝴蝶蘭叢生芽誘導(dǎo)試驗中也采用花梗腋芽作為外植體，將第一代誘導(dǎo)出來的新花梗芽作為叢生芽增殖的材料，增殖倍數(shù)可達5.5。

1.2 外植體的消毒滅菌

馬曉娟等［13］在蝴蝶蘭V31品種的花梗組培快繁中發(fā)現(xiàn)，消毒時間對花梗腋芽的誘導(dǎo)率、褐化死亡率和污染率都有明顯影響，在0.1%氯化汞的條件下，消毒8 min的誘導(dǎo)率比消毒10 min的誘導(dǎo)率高出6.62%，且褐化率明顯偏低。付鎮(zhèn)芳等［14］在蝴蝶蘭大辣椒花梗組織快繁研究中發(fā)現(xiàn)，消毒劑、消毒時間對外植體無菌處理至關(guān)重要，既要消毒干凈外植體，又不能損傷外植體的組織。其中花梗在次氯酸鈉消毒過程中，有大量細菌性、真菌性污染出現(xiàn)，當消毒20 min時污染減少，但用升汞消毒時，隨著滅菌時間的增加，細菌性、真菌性污染逐漸減少，其中消毒10 min和15 min時最徹底，但消毒10 min的成活率高于15 min。然而，曾德華等［15］在滿天紅蝴蝶蘭花梗組培快繁中，用升汞消毒9～11 min時，細菌性污染出現(xiàn)較多，當消毒13～15 min時，隨時間的增加，細菌性污染減少，成功率高達85%以上。

2 叢生芽的誘導(dǎo)

2.1 基本培養(yǎng)基對叢生芽誘導(dǎo)的影響

馬曉娟等［13］在蝴蝶蘭叢生芽快速繁殖體系中，在1/2MS和MS培養(yǎng)基中，1/2MS的誘導(dǎo)率比MS高出24.94%、褐化率也明顯比MS低，而MS培養(yǎng)基褐化嚴重且發(fā)生早，表明1/2MS培養(yǎng)基更有利于外植體的誘導(dǎo)。田甜［16］將蝴蝶蘭外植體分別接種在MS、KYOTO、1/2MS 3種培養(yǎng)基中發(fā)現(xiàn)，1/2MS培養(yǎng)基萌發(fā)率最高。但武愛龍等［17］在蝴蝶蘭大辣椒組織培養(yǎng)與快速繁殖的研究中，以花寶一號為基本培養(yǎng)基，誘導(dǎo)叢生芽的最佳配方為：花寶一號+NAA 0.3 mg/L+6-BA 5.0 mg/L。

2.2 6-BA及NAA對叢生芽誘導(dǎo)的影響

李金雨等［18］研究發(fā)現(xiàn)，6-BA濃度在0.0～3.0 mg/L之間，隨著6-BA濃度的增加，蝴蝶蘭叢生芽的誘導(dǎo)率上升，且誘導(dǎo)時間縮短；但6-BA濃度在3.0～7.0 mg/L之間，隨著6-BA濃度的上升，其誘導(dǎo)時間逐漸縮短，但誘導(dǎo)率沒有明顯變化，說明當6-BA濃度在3.0 mg/L以上時，增加6-BA濃度對蝴蝶蘭叢生芽誘導(dǎo)率作用不大。因此，3.0 mg/L的6-BA對誘導(dǎo)蝴蝶蘭叢生芽是最適宜的。劉亮等［8］認為在不添加NAA的條件下，隨著6-BA濃度的增加，誘導(dǎo)率上升且誘導(dǎo)時間縮短，當6-BA 3.0mg/L時，添加少量NAA誘導(dǎo)率達100%，因此6-BA和NAA組合使用效果較好。華海霞［19］也認為NAA對芽的誘導(dǎo)影響不大，而6-BA的影響顯著，隨著6-BA濃度的上升，增殖系數(shù)變大，在6-BA 2.0 mg/L、NAA 0.5 mg/L下效果最好。但張偉等［20］的試驗認為，在相同培養(yǎng)基的條件下，同時使用6-BA、NAA時誘導(dǎo)率比單獨使用6-BA時低，且培養(yǎng)時間長；當6-BA的濃度達到5.0 mg/L時，誘導(dǎo)率略有下降且生長較弱，表明高濃度的6-BA不適合蝴蝶蘭花梗側(cè)芽的誘導(dǎo)，當單獨使用6-BA且濃度在3.0 mg/L時，誘導(dǎo)率最高。

3 叢生芽的增殖

3.1 切割與擺放方式對叢生芽增殖的影響

鐘海豐等［21］設(shè)置了6種不同的芽體物理切分與擺放方式，研究結(jié)果表明：芽體不同切分與擺放方式對蝴蝶蘭叢生芽增殖具有顯著影響。芽體切除生長點后橫插，其單芽平均增殖率顯著高于其他處理，其中PSP-3（單芽切除生長點后橫插）和PSP-6（雙芽切除生長點后橫插）的單芽平均誘導(dǎo)芽數(shù)分別為6個和5.9個，而常規(guī)單芽切除2/3葉片后豎插，其單芽平均誘導(dǎo)芽數(shù)僅為3.5個。但芽體損傷和芽體大小方面，不同處理的死亡率有所不同，單芽切除2/3葉片后縱切橫插的死亡率最高、達33.3%，單芽切除生長點后橫插的死亡率次之、為23.3%。

3.2 基本培養(yǎng)基對叢生芽增殖的影響

付鎮(zhèn)芳等［14］利用蝴蝶蘭大辣椒對基本培養(yǎng)基的增殖情況進行試驗，結(jié)果表明：不同基本培養(yǎng)基對蝴蝶蘭大辣椒的增殖有明顯不同的作用，其中MS培養(yǎng)基比1/2MS更有利于不定芽的增殖，增殖系數(shù)達2.35。但武愛龍等［17］在蝴蝶蘭大辣椒組織培養(yǎng)與快速繁殖的研究中得出，利用花寶一號為基本培養(yǎng)基，叢生芽增殖和分化的最佳培養(yǎng)基為：花寶一號+NAA 0.2 mg/L +6-BA 6.0mg/L，增殖系數(shù)為5.53倍。同時，在規(guī)?；N苗生產(chǎn)中，普遍利用花寶一號作為誘導(dǎo)和增殖的培養(yǎng)基。

3.3 6-BA對叢生芽增殖的影響

在蝴蝶蘭叢生芽的增殖過程中，不同濃度的6-BA具有明顯影響。馬曉娟等［13］在試驗研究中發(fā)現(xiàn)，6-BA濃度為5.0 mg/L時，叢生芽生長健壯，且增殖率最高；當6-BA處于1.0 mg/L低濃度時叢生芽增殖減少，當濃度升高至5.0 mg/L增殖率逐漸上升，但6-BA濃度大于5.0 mg/L時增殖率隨濃度的上升而下降。李金雨等［18］認為隨著6-BA濃度的上升，叢生芽的芽數(shù)增多，增殖率上升，各處理間差異達到極顯著，表明6-BA對蝴蝶蘭叢生芽的增殖具有決定性影響，其中濃度為6-BA 8.0 mg/L時增殖率最高、可達304%，且叢生芽生長健壯，便于下一步的增殖及壯苗生根。當6-BA濃度高于10.0 mg/L時增殖率逐漸上升，但叢生芽生長較弱且有畸形芽出現(xiàn)，不利于增殖。譚鵬鵬等［10］也認為增加6-BA的濃度，增殖率隨之上升，當6-BA濃度從5.0 mg/L上升到7.0 mg/L時增殖率達到最高，當增加到10.0 mg/L時增殖率有所下降，表明高濃度的生長激素抑制了芽的分化。

3.4 6-BA及NAA對叢生芽增殖的影響

譚鵬鵬等［10］認為，在6-BA濃度相同、NAA濃度不同的條件下，其增殖系數(shù)有所不同，隨著NAA濃度的上升，增殖系數(shù)也相應(yīng)地增大，表明NAA對叢生芽的分化有促進作用。華海霞［18］在試驗中發(fā)現(xiàn)，1.5～2.0 mg/L的6-BA有利于芽的增殖，濃度在2.0 mg/L時增殖效果最好；NAA對增殖作用不明顯，但低濃度的NAA具有協(xié)同作用［22］，所以最佳增殖培養(yǎng)基為1/2MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L。但楊海蕓等［23］和譚巍等［24］在NAA和IAA生長素對蝴蝶蘭增殖的試驗中發(fā)現(xiàn)，NAA要優(yōu)于IAA且濃度在0.5 mg/L時，增殖率最高，在6-BA和KT兩種細胞分裂素中，6-BA優(yōu)于KT，在6-BA濃度為7.0 mg/L時增殖率最高。張偉等［20］也認為NAA濃度在0.5 mg/L、6-BA濃度在1.0～7.0 mg/L時，叢生芽增殖率逐漸提高，當6-BA濃度為5.0 mg/L時增殖芽數(shù)較多且生長強壯；但6-BA濃度達7.0 mg/L時增殖芽數(shù)最多，但有畸形芽出現(xiàn)。曾德華等［15］研究發(fā)現(xiàn)，6-BA和NAA的最佳濃度為3.0 mg/L和0.5 mg/L或3.0 mg/L和1.0 mg/L時，增殖效果最好。侯義龍等［25］在迷你蝴蝶蘭花梗側(cè)芽組織培養(yǎng)技術(shù)的研究中發(fā)現(xiàn)，6-BA 8.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L最適宜叢生芽的增殖?？梢姡?-BA濃度過高并不能達到最好的效果，唯有6-BA、NAA在配合使用且適宜濃度下，增殖效果最為理想。

3.5 6-BA及其他激素對叢生芽增殖的影響

楊錄軍等［26］在蝴蝶蘭新品種鄭農(nóng)火鳳凰的組培快繁研究中發(fā)現(xiàn)，影響叢生芽增殖最大的因素是6-BA，其次是腺嘌呤，然后為CM，叢生芽在1/3MS + 6-BA 2.0 mg/L +腺嘌呤3.0 mg/L+ NAA 0.2 mg/L + CM 100 mL/L的培養(yǎng)基上增殖效果最好。漆子鈺等［27］在蝴蝶蘭小麻雀的組培快繁研究中發(fā)現(xiàn)，6-BA 8.0 mg/L + 蛋白胨0.5 mg/L增殖率最高，表明低濃度的蛋白胨有促進增殖的作用。然而，周全等［28］研究發(fā)現(xiàn)，6-BA和TDZ兩種激素在蝴蝶蘭叢生芽增殖過程中，TDZ的增殖效果優(yōu)于6-BA，適于叢生芽增殖的培養(yǎng)基為1/3MS + TDZ 2.0 mg/L + NAA 0.1 mg/L+ 蔗糖20 g/L + 瓊脂8.0 g/L + 活性炭2.0 g/L +CM 200 mL/L。

4 壯苗生根

在壯苗生根培養(yǎng)過程中，不同培養(yǎng)基的生根情況不同，其中NAA是關(guān)鍵。李金雨等［18］研究結(jié)果表明，MS + NAA 0.5 mg/L + 10%香蕉汁與MS + IBA 0.5 mg/L + 10%香蕉汁對生根的影響沒有差異，其它處理均達極顯著差異，其中以NAA 0.5 mg/L + 10%椰子汁的培養(yǎng)基對生根的效果最好，平均生根數(shù)達3.6條。同時，試驗結(jié)果還表明，椰子汁或香蕉汁等對生根有良好的促進作用。劉亮等［8］將增殖芽轉(zhuǎn)入1/2MS + NAA 1.0 mg/L和1/2MS + IBA 0.3 mg/L培養(yǎng)基中進行壯苗生根試驗，結(jié)果表明兩種培養(yǎng)基均能誘導(dǎo)生根，但后者生根快，平均根數(shù)可達3.3條且生長健壯。譚鵬鵬等［10］研究發(fā)現(xiàn)，在生根階段，添加香蕉泥和活性炭對生根及壯苗有明顯促進作用，香蕉泥對pH值有緩沖作用，并且含有天然的腺嘌呤等植物激素，有利于植物根系的生長。馬曉娟等［13］發(fā)現(xiàn)，椰汁、香蕉泥和土豆泥能明顯影響叢生芽增殖和分化，椰汁有利于增殖并促進生根，且顯著優(yōu)于其他兩種處理，土豆泥能促進根數(shù)和葉片數(shù)的增加。張啟香等［29］認為，當6-BA與NAA的配比適當時，蝴蝶蘭的生根較多，植株長勢旺盛且健壯，其中6-BA具有細胞分裂與分化的作用，細胞分裂可以打破頂端優(yōu)勢的影響。鄭玉忠等［30］認為壯苗生根對植株的移栽成活具有重要作用，因此應(yīng)篩選激素種類并找到適宜濃度。

5 褐化防治

張和等［31］認為在蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的褐變不利于根的形成與生長，褐變是離體培養(yǎng)的無性系植物或進行組織培養(yǎng)時，從植物上切取時傷口所分泌出的酚類物質(zhì)，在多酚氧化酶的作用下轉(zhuǎn)變成醌類物質(zhì)所引起，且褐變率會隨著培養(yǎng)時間的延長而增加，并生成棕褐色的醌類物質(zhì)，在培養(yǎng)基中逐漸擴散，同時抑制酶的活性，毒害外植體。其中活性炭具有強大的吸附能力，能吸附非極性分子和色素等大分子，減少有害物質(zhì)的形成。王立婭等［32］發(fā)現(xiàn)，1%活性炭能促進生根，并能防止植物自身的酚類物質(zhì)排泌和變褐，對繁殖材料的形態(tài)發(fā)生和器官形成具有良好作用。除了活性炭能抑制Ca+的吸收和防止褐變外，檸檬酸、Vc等物質(zhì)對緩解褐化也有一定作用，而當pH值在5.4～5.5時，排的褐變物質(zhì)也相應(yīng)減少［31］。張偉等［20］發(fā)現(xiàn)添加30 mg/L檸檬酸能減少褐化且效果顯著，表明檸檬酸能有效降低褐化率、提高誘導(dǎo)率。但段文武等［33］在蝴蝶蘭組培的研究中發(fā)現(xiàn)，顯著抑制褐化且對褐化影響最大的是活性炭，轉(zhuǎn)接周期對褐化的影響次之，對褐化影響從大到小分別為活性炭、轉(zhuǎn)接周期、溫度、椰子汁，其中活性炭1.0 g/L、轉(zhuǎn)接周期10 d、溫度25℃、椰子汁濃度150 mL/L，為抑制褐化的最優(yōu)組合。

6 結(jié)論與展望

對蝴蝶蘭叢生芽組織培養(yǎng)研究進展進行綜述，有利于更系統(tǒng)、更完整地了解當前取得的水平和進展情況，能夠更好、更快地為種苗生產(chǎn)提供借鑒和服務(wù)。綜合以上的分析，以花梗為外植體，通過花梗腋芽誘導(dǎo)營養(yǎng)芽成功率較高，其中第2節(jié)和第3節(jié)最好；外植體消毒滅菌時，0.1%氯化汞消毒8～15 min比次氯酸鈉效果好，但不同品種的消毒時間略有差異。在叢生芽誘導(dǎo)中，以1/2MS或花寶一號為基本培養(yǎng)基，6-BA濃度在3.0～7.0 mg/L之間，或6-BA和NAA搭配可誘導(dǎo)出叢生芽；在增殖培養(yǎng)中，6-BA或TDZ對叢生芽增殖有明顯影響，NAA在適宜濃度下配合使用，增殖效果更佳，并以MS或花寶一號為基本培養(yǎng)基；在壯苗生根中，主要以低濃度的NAA或IBA，并配以椰子汁或香蕉汁、土豆汁等有機物對壯苗生根促進作用明顯。在眾多防褐化因子中，活性炭能顯著抑制褐化且對褐化的影響最大，轉(zhuǎn)接周期對褐化的影響次之，對褐化影響從大到小分別為活性炭、轉(zhuǎn)接周期、溫度、椰子汁，其中活性炭1.0 g/L、轉(zhuǎn)接周期10 d、溫度25℃、椰子汁濃度150 mL/L為抑制褐化的最優(yōu)組合。

雖然蝴蝶蘭組織培養(yǎng)的研究目前已經(jīng)取得了相當大的研究成果，但仍然存在一些問題，特別是不同品種其消毒時間、誘導(dǎo)率、增殖率、轉(zhuǎn)接周期等均有差異，因此，需要更深入、細致地對不同類型的蝴蝶蘭進行研究，找出適合自身的最佳消毒時間、培養(yǎng)基配方及轉(zhuǎn)接周期等，才能在生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。

［1］ 陳和明，呂復(fù)兵，朱根發(fā)，等. 20份蝴蝶蘭組培及栽培特性研究［J］. 中國園藝文摘，2015（5）：33-35.

［2］ 魏琪，李鳳蘭，胡國富，等. 蝴蝶蘭快速繁殖研究進展［J］. 園藝學(xué)報，2006，33（4）：915-920.

［3］ 閆釗. 蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)和快繁研究［J］. 中國園藝文摘，2015（12）：21，146.

［4］ Mweetwa A M，Welbaum G E，Tay D. Effects of development，temperature，and calcium hypochlorite treatment on in vitro germinability ofPhalaenopsisseeds［J］. Scientia Horticulturae，2008，117（3）：257-262.

［5］ 曾凡景，楊恒，趙惠恩. 國內(nèi)蝴蝶蘭育種與繁殖栽培現(xiàn)狀研究［J］. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011（11）：127-130.

［6］ 曹孜義，劉國民. 實用植物組織培養(yǎng)技術(shù)教程［M］. 蘭州：甘肅科學(xué)技術(shù)出版社，2002：179-181.

［7］ 潘學(xué)峰，王安石，李海珠. 利用叢芽途徑快速繁殖蝴蝶蘭的研究［J］. 海南大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2005，23（1）：47-60.

［8］ 劉亮，易自力，蔣建雄，等. 蝴蝶蘭叢生芽、原球莖途徑的組織培養(yǎng)研究［J］. 亞熱帶植物科學(xué)，2008，37（3）：43-45.

［9］ 劉榮維，梅慶超，崔元方，等. 叢生芽—— 蝴蝶蘭無性快速繁殖的新途徑［J］. 熱帶作物學(xué)報，1993，14（2）：105-107.

［10］ 譚鵬鵬，彭方仁，江榮翠，等. 蝴蝶蘭叢生芽快繁體系的建立［J］. 技術(shù)開發(fā)，2013，27（4）：80-84.

［11］ 尚楊娟，譚鵬鵬，彭方仁. 蝴蝶蘭花梗腋芽的初代培養(yǎng)［J］. 林業(yè)科技開發(fā)，2009，23（2）：100-104.

［12］ 王熊. 蘭花快速無性繁殖研究及花芽分化的探討［J］. 植物生理學(xué)報，1984，10（4）：391-397.

［13］ 馬曉娟，陳瑤瑤，莊衛(wèi)東，等. 蝴蝶蘭叢生芽快速繁殖體系的建立［J］. 福建農(nóng)業(yè)科技，2012（3-4）：111-114.

［14］ 付鎮(zhèn)芳，何博，馬杰，等. 蝴蝶蘭“大辣椒”花梗組織快繁技術(shù)研究［J］. 林業(yè)科技通訊，2017（5）：66-69.

［15］ 曾德華，郁培義，陳偉玉，等. “滿天紅”蝴蝶蘭花梗組培快繁技術(shù)研究［J］. 熱帶林業(yè)，2014，42（1）：46-49.

［16］ 田甜. 在對蝴蝶蘭組織培養(yǎng)快繁技術(shù)研究［J］.南方農(nóng)業(yè)，2015（9）：23-24.

［17］ 武愛龍，吳建陽，卓海容.蝴蝶蘭“大辣椒”組織培養(yǎng)與快速繁殖［J］. 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報，2015，30（11）：1075-1081.

［18］ 李金雨，洪麗萍. 蝴蝶蘭叢生芽途徑的組織培養(yǎng)技術(shù)［J］. 熱帶作物學(xué)報，2010，31（4）：610-613.

［19］ 華海霞. 蝴蝶蘭叢生芽組織培養(yǎng)的研究［J］. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（34）：12059-12060，12064.

［20］ 張偉，喬保建，李冰冰，等. 蝴蝶蘭高效組培快繁及溫室移栽技術(shù)［J］. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，43（9）：83-86.

［21］ 鐘海豐，鐘淮欽，黃敏玲，等. 蝴蝶蘭叢生芽增殖培養(yǎng)條件優(yōu)化研究［J］. 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報，2013，28（7）：675-679.

［22］ 姚麗娟，徐曉薇，林紹生，等. 蝴蝶蘭原球莖增殖分化影響因子探討［J］. 亞熱帶植物科學(xué)，2004，33（3）：42-44.

［23］ 楊海蕓，吳震.不同培養(yǎng)條件對蝴蝶蘭離體葉片叢生芽發(fā)生的影響［J］. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2007，30（1）：44-49.

［24］ 譚巍，尤海波，劉博文. 蝴蝶蘭組織培養(yǎng)中叢生芽增殖的研究［J］. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011（2）：20-21

［25］ 侯義龍，冷陽，呂杰凱，等.迷你蝴蝶蘭花梗側(cè)芽組織培養(yǎng)技術(shù)的研究［J］.大連大學(xué)學(xué)報，2016，37（3）：62-64.

［26］ 楊錄軍，王俊，楊書才，等.蝴蝶蘭新品種“鄭農(nóng)火鳳凰”的組培快繁技術(shù)研究［J］. 陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015（11）：52-54.

［27］ 漆子鈺，陳俊暉，林志剛，等.蝴蝶蘭小麻雀的組培快繁技術(shù)［J］. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，45（4）：35-38.

［28］ 周全，周翔，唐興國，等.蝴蝶蘭原球莖和叢生芽增殖條件優(yōu)化［J］. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，49（3）：596-598.

［29］ 張啟香，方炎明，張曉平. 蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)和快速繁殖［J］. 植物資源與環(huán)境學(xué)報，2004，13（3）：38-40

［30］ 鄭玉忠，張振霞，陳澤華. 蝴蝶蘭組織培養(yǎng)研究進展［J］. 亞熱帶植物科學(xué)，2006，35（1）：71-74.

［31］ 張和，徐虹. 影響蝴蝶蘭組培苗生產(chǎn)中褐變的因素及其調(diào)控［J］. 現(xiàn)代園藝，2014（9）：55-56.

［32］ 王立婭，方正，李英麗，等. 蝴蝶蘭組織培養(yǎng)中防褐化技術(shù)研究［J］. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2008，31（5）：42-45.

［33］ 段文武，蔣祖豐，伍芬桂，等. 蝴蝶蘭組織培養(yǎng)褐化抑制研究［J］. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2017（14）：137-140.