再談鴨黃病毒病

劉建濤，孫法良，楊同濤，崔京騰，寧明剛

（齊魯動物保健品有限公司，山東濟南250105）

再談鴨黃病毒病

劉建濤，孫法良，楊同濤，崔京騰，寧明剛

（齊魯動物保健品有限公司，山東濟南250105）

2010年4月以來，在我國福建、上海、浙江、山東等養(yǎng)鴨集中區(qū)，陸續(xù)爆發(fā)了一種以蛋鴨、種鴨短時間內(nèi)采食、產(chǎn)蛋大幅度下降，肉鴨、成鴨共濟失調(diào)神經(jīng)癥狀為主要特征的疾病，該病傳播迅速、蔓延范圍廣，給我國養(yǎng)鴨業(yè)帶來巨大損失[1]。

1 發(fā)病歷史與現(xiàn)狀

1995年，在我國河北省邯鄲、石家莊等地出現(xiàn)產(chǎn)蛋下降并伴有神經(jīng)癥狀的鴨群，對病鴨進行病毒分離發(fā)現(xiàn)該病毒為有囊膜的RNA病毒，并初步命名為病毒性腦炎病毒[2]。2010年，在我國浙江首先發(fā)病，之后短短半年內(nèi)迅速蔓延到福建、上海、江蘇、山東等養(yǎng)鴨大區(qū)，患病鴨群表現(xiàn)出頭頸歪斜、腿腳麻痹、共濟失調(diào)等神經(jīng)癥狀，種鴨、蛋鴨出現(xiàn)產(chǎn)蛋下降并伴有死亡，表現(xiàn)為出血性卵巢炎[3-4]；之后5年時間，在全國多省份仍有該病發(fā)生；現(xiàn)階段，隨著黃病毒疫苗問世，發(fā)病逐漸減少。

2 病原學(xué)

2.1 生物學(xué)分類鴨坦布蘇病毒屬于黃病毒科、黃病毒屬、恩塔亞病毒群的坦布蘇病毒；自然條件下，黃病毒家屬成員大多數(shù)以蚊、蜱等為傳播媒介，坦布蘇病毒早期發(fā)現(xiàn)于馬來西亞和泰國的庫蚊中，在我國發(fā)生坦布蘇病毒之前未有黃病毒大面積發(fā)病的報道，也沒有證據(jù)表明該病毒可以感染人類而致病[5]。

2.2 分子生物學(xué)特征鴨坦布蘇病毒為不分節(jié)段的單股正鏈RNA病毒，電鏡下病毒粒子為小球形，直徑為40～50nm，表面具有脂質(zhì)包膜，其上有纖突，包膜內(nèi)為20面體對稱的核衣殼蛋白，其內(nèi)包含病毒核酸[6]。

病毒分子量為3.8×106，基因組全長11Kb，由10990個核苷酸組成；主要編碼C蛋白、M蛋白、E蛋白三個結(jié)構(gòu)蛋白和NS1、NS2等7個非結(jié)構(gòu)蛋白。C蛋白與基因組RNA結(jié)合，是病毒的核心，保護基因組RNA免受RNA酶的分解和其他因素引起的損傷；M蛋白參與病毒囊膜的構(gòu)成，對維持E蛋白的空間結(jié)構(gòu)具有重要作用；E蛋白是構(gòu)成病毒囊膜的主要蛋白，含有多個抗原決定簇，引起宿主機體相關(guān)免疫反應(yīng)及產(chǎn)生中和抗體的主要抗原蛋白[7-8]。

2.3 理化特性和培養(yǎng)特性坦布蘇病毒經(jīng)乙醚、氯仿處理后，很快失去感染性；經(jīng)去氧膽酸鈉處理后，病毒效價下降很快，說明該病毒對乙醚、氯仿和去氧膽堿鹽敏感。病毒不耐熱，56℃維持15min或者50℃以上60min病毒活性喪失。病毒適宜的pH范圍為6～9，當(dāng)pH＞10或pH＜5時其感染性喪失。該病毒不凝集鴨、鵝、豬、兔等動物的紅細胞[9]。

坦布蘇病毒可以在健康鴨胚、鴨胚成纖維細胞、雞胚成纖維細胞原代細胞、SPF雞胚中增殖；病毒液接種于9～10日齡鴨胚或SPF雞胚尿囊腔種，2～5d胚體死亡，表現(xiàn)為絨毛尿囊膜水腫、增厚，胚體水腫、出血和發(fā)育不良；通過比較發(fā)現(xiàn)，該病毒更適合在鴨胚中增殖，而在雞胚上要盲傳幾代后才出現(xiàn)良好的適應(yīng)性。病毒液接種于鴨胚成纖維細胞，2～3d后出現(xiàn)明顯細胞病變，細胞折光性增強，細胞圓縮、脫落和死亡[10]。

3 流行病學(xué)

坦布蘇病毒最初在馬來西亞分離到，之后在泰國陸續(xù)有坦布蘇病毒發(fā)生的報道，1997年在我國石家莊有疑似該病的報道，但未引起重視，直到2010年4月，在國內(nèi)養(yǎng)鴨區(qū)迅速蔓延發(fā)??；病原未被確定之前，該病曾被稱為“鴨出血性卵巢炎”、“鴨傳染性產(chǎn)蛋減少癥”、“鴨產(chǎn)蛋下降-死亡綜合征”、“鴨、鵝腦炎-卵巢綜合征”、“鴨黃病毒病”；2011年8月，在山東省泰安市召開的“中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)會分會第一次全國鴨病防控高級研討會”上，各專家達成初步共識，將該病統(tǒng)一命名為“鴨坦布蘇病毒病”。

鴨坦布蘇病毒病一年四季均可感染，夏秋季節(jié)尤為嚴重；自然爆發(fā)時，坦布蘇病毒可感染多個品種的鴨，包括北京鴨、櫻桃谷鴨等肉鴨，紹興鴨、繆云麻鴨、金定鴨、康貝爾鴨、臺灣白改鴨等蛋鴨[11]。

鴨坦布蘇病毒病流行范圍廣，損失大（養(yǎng)鴨集中區(qū)基本全部覆蓋，2010年流行短短半年時間，已造成經(jīng)濟損失超過50億元）；傳播速度快（1周左右可感染一個養(yǎng)殖小區(qū)所有鴨群，1戶一旦發(fā)病，以發(fā)病戶為中心，短時間內(nèi)傳遍周邊區(qū)域）；發(fā)病急，發(fā)病率高，但死亡率較低[12]（產(chǎn)蛋鴨死亡率一般低于10%，多數(shù)在5%以下）。

4 臨床癥狀

常呈急性發(fā)病，發(fā)病初期，種鴨采食驟然下降，隨之產(chǎn)蛋率大幅度下降（可從90%下降到10%以內(nèi)，嚴重者停產(chǎn)），種蛋受精率平均下降10%。病鴨體溫升高，排綠色稀糞，發(fā)病率可達100%，死淘率一般在5%～15%，個別情況下可達50%以上。育雛、育成、商品鴨可在20日齡前后發(fā)病，主要表現(xiàn)神經(jīng)癥狀，死淘率一般在10～30%[13]。流行后期表現(xiàn)為翻個、行走不穩(wěn)、無法站立甚至癱瘓等神經(jīng)癥狀。病程大約維持一個月左右，之后可自行康復(fù)。

5 病理學(xué)變化

5.1 病理剖檢變化雛鴨感染后，可見腦部毛細血管充血，腦水腫，腦膜散在大小不一的出血點；心包積液，心內(nèi)膜出血；肝臟腫大或出血，呈土黃色；脾臟腫大出血；胰腺液化有壞死點；肺水腫出血；腎臟腫大出血等。

產(chǎn)蛋鴨感染后，可見腦膜出血、腦組織水腫；肝腫大出血；脾臟斑駁狀大理石樣花紋；胰腺液化壞死；心冠脂肪有出血點，嚴重者心臟內(nèi)膜和外膜都有出血；卵巢發(fā)育不良，卵泡變形、萎縮，卵泡膜嚴重充血出血，嚴重者卵泡發(fā)生破裂并形成卵黃性腹膜炎，輸卵管水腫并伴有粘液性滲出[6]。

5.2 病理組織學(xué)變化

5.2.1 腦間質(zhì)性水腫，伴隨炎性細胞浸潤；大腦血管外膜細胞活化，靜脈血管壁增厚，血管擴張呈充血狀態(tài)，血管周圍間隙增大；可以見到“衛(wèi)星現(xiàn)象”。

5.2.2 肝臟淋巴細胞滲出和浸潤，表現(xiàn)為間質(zhì)性肝炎。

5.2.3 心臟肌纖維變性壞死伴隨大量炎性細胞浸潤；外膜、肌層水腫，漿液性物質(zhì)滲出[14]。

5.2.4 生殖系統(tǒng)輸卵管粘膜層毛細血管充血，上皮細胞變性、脫落；固有層炎性細胞浸潤、水腫、出血；漿膜下層、肌層充滿大量變性壞死的炎性細胞；卵泡主要表現(xiàn)為膜充血出血，卵泡內(nèi)充滿大量紅細胞，部分卵泡膜增厚，網(wǎng)狀細胞和淋巴細胞浸潤，呈典型的出血性卵巢炎[15]。

6 實驗室診斷方法

目前常用的分子生物學(xué)檢測方法有：①RTPCR檢測方法，具有快速、簡便、特異性好、靈敏度高等優(yōu)勢；②套式RT-PCR檢測方法，特異性好、靈敏度高；③逆轉(zhuǎn)錄半套式PCR檢測方法，靈敏度是普通PCR方法的1000倍，接近熒光定量PCR；④熒光定量PCR檢測方法，既有常規(guī)PCR的快速、高敏感性等特點，又具有準確性高、實時監(jiān)測、效率高等優(yōu)點；⑤ELISA檢測方法，敏感性高、特異性和穩(wěn)定性好，適用于大規(guī)模的檢測等[16]。

7 預(yù)防和治療

目前，該病仍無特效治療藥物，針對鴨群應(yīng)采取如下措施：①重視養(yǎng)殖場生物安全措施，提高養(yǎng)殖人員的素質(zhì)，做好管理和飼養(yǎng)人員隔離工作；②做好大環(huán)境的消毒工作，對養(yǎng)殖場所用設(shè)備和運輸車輛等徹底消毒，減少發(fā)病鴨場與健康鴨場的車輛和人員的流動；③給予鴨群全價的營養(yǎng)和飼料，提高鴨群日常保健意識，加強衛(wèi)生、墊料的消毒和管理工作；④做好鴨坦布蘇病毒病活疫苗（蛋鴨或種鴨1～2周齡首免，12～18周齡二免）或滅活疫苗（蛋鴨或種鴨1周左右首免，兩周后加強免疫一次，開產(chǎn)前2～4周第三次免疫）的接種工作，提高機體特異性抵抗力。

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