●曹佳圓
現(xiàn)代色譜技術在中藥檢驗中的運用研究
●曹佳圓
近年來隨著科學技術以及相應檢驗設備的不斷更新發(fā)展,應用于藥品檢驗工作中的檢驗技術也不斷的更新,各種藥品檢驗技術在藥品檢驗中發(fā)揮著巨大的作用,為保證藥物治療以及藥物效果提供了科學依據(jù),該文對此進行了系統(tǒng)介紹。
中藥檢驗;現(xiàn)代色譜技術;高效毛細管電泳技術;掃描電鏡技術
現(xiàn)代色譜技術是目前應用于各種樣品檢驗中的常用方法,其可以分離、分析、純化幾乎所有的檢驗樣品。現(xiàn)代色譜技術在其應用中具有靈敏度高、重現(xiàn)性好、檢驗速度快等優(yōu)點。其檢驗原理是將檢驗的藥物通過應用色譜柱分離得到不同的組分可以隨著流動相直接進入霧化器,在霧化器內(nèi)經(jīng)過處理后形成霧化微粒,霧化形成的溶劑微粒在狹窄光束的照射下出現(xiàn)不同的光束散射情況,被散射的光束信號被接收器接收后轉(zhuǎn)化成為電信號,通過相應的電信號值可以分辨相應成分質(zhì)粒的大小及數(shù)量,進而可以分析到藥物中各種成分的含量?,F(xiàn)代色譜技術在其應用中具有應用范圍較廣的優(yōu)點,由于中藥成分中會有多種不同類型的成分,各種成分的特性不一,既往傳統(tǒng)的檢驗技術對于中藥中各種成分的檢驗準確性差別較大,導致其檢驗結果準確性較差?,F(xiàn)代色譜技術在其應用中除了可以對揮發(fā)成分的含量進行檢驗以外,對于不能揮發(fā)的藥物成分,現(xiàn)代色譜技術通過應用霧化技術使藥物成分可以經(jīng)過現(xiàn)代色譜技術進行檢測??梢?,現(xiàn)代色譜技術在其應用過程中具有操作簡便、準確性高等優(yōu)點,但是現(xiàn)代色譜技術檢驗也有一定的局限性,應用現(xiàn)代色譜技術進行檢驗的藥物成分必須有其準確的色譜表,這樣在應用中才能準確測量其含量。因此,為能進一步提高現(xiàn)代色譜技術的應用價值以及其準確性,需要對各種藥物成分進行進一步完善其色譜資料。而且在應用現(xiàn)在色譜檢驗過程中應用的藥物必須純度要高,原始藥物必須未經(jīng)過特殊的化學方式處理以及未變質(zhì)的中藥材。因此,現(xiàn)代色譜技術依賴于其準確性高、操作簡便等優(yōu)點會在科學檢驗中取得更好的應用。
高效毛細管電泳技術又稱作為毛細管電泳,其主要技術原理為在高壓電場為驅(qū)動力的作用之下,以毛細管作為通道,根據(jù)所需檢驗樣品中各不同成分之間淌度和分配行為上的差異從而將各種成分分離的技術。目前在重要的檢驗研究中具有廣泛的應用范圍。在其應用中所需要的應用裝備主要有:毛細管柱、進樣系統(tǒng)、高壓系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)收集系統(tǒng)等各不同設施組成。由于中藥材種類繁多,不同中藥中的各種組成成分均不相同,而且由中藥制作的中藥制劑類型各不相同,為了能有效的將各種不同組分進行分離,目前高效毛細管電泳技術是較為常用的手段之一。其主要的應有范圍有:①有效地分離藥物中的蛋白成分:根據(jù)不同產(chǎn)期、產(chǎn)地中藥材中蛋白的含量各不相同,應用高效毛細管電泳技術可以有效地分離出藥材中蛋白的劑量,通過對分離所得的蛋白量進行分析可以明顯區(qū)別不同藥材中蛋白含量,從而可以有效地檢驗各藥材的相應藥效;②中藥材中生物堿類物質(zhì)的檢驗:生物堿作為中藥中天然存在的藥物成分,許多中藥的主要藥效成分為生物堿組成,但是天然的藥材與炮制之后藥物效果的差異并無明確的研究結果。隨著高效毛細管電泳技術的應用,通過對藥材不同制劑前后其中生物堿的含量進行分析可以發(fā)現(xiàn),經(jīng)過人工炮制之后其中生物堿的含量明顯降低。比如目前常用的馬錢子堿等中藥經(jīng)過炮制之后其生物堿含量降低90%左右;③對于中藥材中黃酮類、酚酸類中藥成分的鑒定:由于黃酮類、酚酸類藥物成分經(jīng)過處理之后會帶有一定的電荷,經(jīng)過電泳技術可以明顯地區(qū)分不同藥物成分的含量和分離鋒線進而可以區(qū)別不同藥物中不同藥效成分的含量多少??梢?,應用高效毛細管電泳技術可以高效、快速、簡便的分離中藥制劑種不同藥效成分的含量,在中藥制劑的檢驗工作中具有重要的應用意義。
掃描電鏡技術是指在應用顯微鏡圓筒、電源線路、視頻控制裝置和真空系統(tǒng)等裝置對中藥材標本進行電鏡下觀察處理的檢驗手段。目前掃描電鏡技術主要應用于中藥材的微觀形態(tài)以及微觀結構的觀察處理。其主要的技術手段是通過將需要觀察的標本經(jīng)過干燥處理之后,將所需要檢驗的樣品置于樣品臺之上,通過真空噴鍍儀器對樣品進行噴鍍處理,處理后的樣品玻片直接在顯微電鏡下觀察,將觀察得到的圖像進行分析,可以對中藥材的微觀形態(tài)、亞微觀形態(tài)進行比對分析。目前掃描電鏡技術在重要的檢驗過程中主要應用于藥材真假鑒別。其主要的鑒別中藥材有種子、花粉以及藥材表皮等。許多關于應用掃描電鏡技術進行中藥鑒別的研究報告指出,應用掃描電鏡技術在觀察中可以發(fā)現(xiàn),許多真假中藥材其樣品的表面或斷面結構存在著明顯的差異,在顯微鏡之下可以獲得較為清晰三維圖像,對于觀察具有更為直接的鑒別依據(jù)??梢姡瑨呙桦婄R技術在中藥材的真假鑒別觀察中具有明顯的應用價值。
目前隨著環(huán)境的污染以及藥物制作過程中各種污染的影響,導致許多種中藥材以及中藥制劑中汞的含量明顯超標。目前中藥檢驗中常用的汞含量測定方法為冷蒸汽原子吸收光譜法。冷蒸汽原子吸收光譜法其主要的作用原理為應用高價的還原劑將汞還原為汞蒸氣,根據(jù)汞蒸汽對其特征譜線(253.7nm)具有強烈吸收作用[16]。通過對色譜可以明顯觀察到其吸光度,根據(jù)其吸光度與汞含量呈一定比率便可以準確地測定出其中汞的含量。在既往日本報道的水俁病中,其主要的致病原因便是汞中毒導致的。汞含量超標后食用進入體內(nèi)便會導致食用這種毒,出現(xiàn)聽力降低、四肢麻木、眼睛失明等嚴重的影響。因此,為了有效避免中藥材以及中藥制劑收到汞等重金屬元素的污染導致的不良后果,以及因為重金屬污染導致的藥物效果受到影響,應用冷蒸汽原子吸收光譜法可以有效地檢測出中藥材以及中藥制劑中汞等重金屬元素的含量,進而降低用藥者重金屬中毒的可能以受收到的重金屬危害,有效地提高患者用藥的安全性。
超臨界流體萃取法是指在應用各種超臨界CO2流體作為檢驗所用的流體相,通過在流體相中加入改性劑然后達到調(diào)節(jié)溶解、洗脫能力以及改善峰形的目的。其中在其檢驗過程中,超臨界CO2流體作為檢驗應用的流體相,在檢驗過程中由于CO2的超臨界溫度為31℃,而且在其應用過程中具有無毒害等優(yōu)點,可以有效地檢驗各種不同類型中藥材以及中藥制劑中相應成分的含量。其中目前常用的超臨界流體萃取法主要用于六應丸中冰片以及丁香酚的含量關系,在檢驗過程中具有應用簡便、操作迅速以及檢驗結果準確等優(yōu)點。而且超臨界流體萃取法對于檢驗丹參中丹參酮的成分也具有較為準確的檢驗結果以及檢驗成效。但是目前在大量的研究以及應用中可以發(fā)現(xiàn),超臨界流體萃取法在中藥的檢驗過程中,其單獨使用時檢驗效果較低,高檢驗效果會導致檢驗成本大大提高,因此在目前的檢驗中應用超臨界流體萃取法多聯(lián)合配合與現(xiàn)代色譜法技術協(xié)調(diào)檢驗相關中藥材以及中藥制劑中相應成分的含量。因此,在上述的研究中可以發(fā)現(xiàn),超臨界流體萃取法目前在中藥的檢驗中也具有較為廣泛的應用范圍,但是在其應用效果以及相應的檢驗過程只能夠可以發(fā)現(xiàn),超臨界流體萃取法常需要進一步完善,以更好地應用于中藥檢驗工作中。
(作者單位:陜西國際商貿(mào)學院)
[1]楊棄塵.現(xiàn)代色譜技術本在中藥檢驗中的應用[J].醫(yī)學信息 ,2015(40)∶361-361.
[2]齊紅梅.中藥檢驗中色譜技術的應用實踐及研究進展探析[J].醫(yī)學信息,2016,29(27).
曹佳圓,陜西國際商貿(mào)學院藥學B1302班。