志賀菌檢驗(yàn)技術(shù)的新進(jìn)展

姜羽亭

志賀菌檢驗(yàn)技術(shù)的新進(jìn)展

姜羽亭

志賀菌在我國(guó)臨床上非常常見，患者出現(xiàn)志賀菌感染后的主要臨床癥狀為消化系統(tǒng)疾病，并且以細(xì)菌性痢疾為主，對(duì)人體健康造成巨大的威脅，在發(fā)病原因中，患者由于飲用水、食物產(chǎn)生的感染在所有患者中居首位，患者發(fā)病后需要通過實(shí)驗(yàn)室檢查觀察病菌類型以及感染情況，可見志賀菌的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，在臨床上的應(yīng)用十分關(guān)鍵，志賀菌的檢驗(yàn)技術(shù)經(jīng)過臨床不斷的研究和發(fā)展，已經(jīng)取得了飛速的進(jìn)步，能夠在臨床上采用多種檢驗(yàn)技術(shù)進(jìn)行判斷，現(xiàn)就目前志賀菌的檢驗(yàn)技術(shù)進(jìn)行研究。

志賀菌；檢驗(yàn)技術(shù)；優(yōu)勢(shì)分析；進(jìn)展

志賀菌即痢疾桿菌，在人群中具有極高的傳染性，對(duì)人體的消化系統(tǒng)產(chǎn)生損傷，志賀菌感染后，患者會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱、腹痛、腹瀉等癥狀，俗稱“痢疾”，痢疾發(fā)病主要有志賀菌進(jìn)入人體腸道后，侵入腸道的上皮細(xì)胞，造成患者健康受到影響[1]。臨床研究證實(shí)，全球由于痢疾死亡的患者為1.1萬人左右，且多數(shù)為兒童患者，尤其在發(fā)展中國(guó)家中，醫(yī)療條件、飲食衛(wèi)生性均存在差異，造成痢疾頻發(fā)，我國(guó)屬于發(fā)展中國(guó)家的一員，對(duì)痢疾預(yù)防與治療十分重視，預(yù)防呈現(xiàn)出一定的效果，但在臨床診斷與治療過程中，對(duì)志賀菌的檢驗(yàn)技術(shù)依舊與發(fā)達(dá)國(guó)家存在差異，本文就目前志賀菌的檢驗(yàn)技術(shù)進(jìn)行分析，總結(jié)志賀菌臨床檢驗(yàn)技術(shù)特點(diǎn)。

1 志賀菌的生物學(xué)分析

志賀菌屬于革蘭陰性桿菌，具有短小、無芽胞、莢膜、鞭毛的特點(diǎn)，志賀菌具有多菌毛的特征，在人體中對(duì)于生存的營(yíng)養(yǎng)要求較低，在人體的腸道中十分適合生存，志賀菌能夠分解葡萄糖，并產(chǎn)生酸，在人體中的破壞性較大，臨床采用抗原檢驗(yàn)和分析后發(fā)現(xiàn)，志賀菌具有4個(gè)血清群，分別包括痢疾志賀菌、福氏志賀菌、鮑氏志賀菌以及宋內(nèi)志賀菌[2]。隨著臨床對(duì)志賀菌的了解逐步加深，臨床上由于志賀菌感染產(chǎn)生的疾病確診和治療效果也隨之得到改善，在我國(guó)臨床研究中證明，至2003年，我國(guó)的細(xì)菌性痢疾發(fā)病率降至3.9%，我國(guó)人民的細(xì)菌性痢疾發(fā)病率明顯降低，雖然取得了較高的臨床效果，但較發(fā)達(dá)國(guó)家的發(fā)病率仍舊有一定的差距[3]，志賀菌屬于通過食物、飲用水等傳播的病菌，在日常生活中的發(fā)病率較低，可以通過公共衛(wèi)生進(jìn)行控制，但在出現(xiàn)大量公共衛(wèi)生安全事件時(shí)的影響較大，因此臨床對(duì)志賀菌的檢驗(yàn)和診斷十分重視。

2 志賀菌主要臨床檢驗(yàn)技術(shù)分析

2.1 生化鑒定檢驗(yàn)方法

常規(guī)生化鑒定檢驗(yàn)方法的主要操作技術(shù)，是利用生化培養(yǎng)方式進(jìn)行檢驗(yàn)，包括增殖培養(yǎng)、分離純化、生化試驗(yàn)以及血清試驗(yàn)。在檢驗(yàn)過程中需對(duì)上述步驟進(jìn)行依次完成，檢驗(yàn)的步驟多、操作次數(shù)多，工作時(shí)間長(zhǎng)，在臨床檢驗(yàn)當(dāng)中的應(yīng)用價(jià)值較低，且隨著我國(guó)其他迅速、準(zhǔn)確的檢驗(yàn)鑒定方法逐步開發(fā)和應(yīng)用，常規(guī)生化鑒定檢驗(yàn)的應(yīng)用率逐漸降低，但生化鑒定檢驗(yàn)方法的優(yōu)勢(shì)在于，該方法的檢驗(yàn)結(jié)果更加直觀，準(zhǔn)確性強(qiáng)，假陽性、假陰性率低，能夠?qū)ζ渌麢z驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行判斷，屬于基本的檢驗(yàn)鑒定方法。我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法當(dāng)中規(guī)定，常規(guī)生化鑒定方法檢測(cè)志賀菌的時(shí)間在4～5 d。其中王迎慶[4]等采用4種檢驗(yàn)培養(yǎng)基進(jìn)行志賀菌的檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)SS培養(yǎng)基對(duì)于志賀菌的檢驗(yàn)準(zhǔn)確率最高，作為檢驗(yàn)培養(yǎng)基效果明顯。

2.2 聚合酶鏈反應(yīng)檢驗(yàn)

該方法的優(yōu)勢(shì)在于，能夠?qū)ρ逯械闹举R菌進(jìn)行準(zhǔn)確、快速的檢驗(yàn)，在臨床應(yīng)用時(shí)，主要應(yīng)用在公共衛(wèi)生事件的判斷和檢驗(yàn)當(dāng)中，采用熒光PCR和酶聯(lián)免疫PCR均能得到準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果[5]。志賀菌的病毒變化特點(diǎn)決定了患者的體內(nèi)存在大量的志賀毒素，并造成患者出現(xiàn)嚴(yán)重的臨床癥狀，但如果患者的血清中膽紅素、膽酸鹽指標(biāo)較高，則對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響，在檢驗(yàn)前需要通過對(duì)標(biāo)本進(jìn)行處理，才能得到準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果，處理方法包括低速離心、高速離心或不同孔徑過濾，通過上述方法進(jìn)行處理，能夠迅速取得合格標(biāo)本[6]，并投入志賀菌的檢驗(yàn)當(dāng)中，在臨床應(yīng)用當(dāng)中的速度較快，操作方便，王琳琳[7]等利用PCR檢驗(yàn)進(jìn)行志賀菌和大腸埃希菌的檢驗(yàn)，兩種病菌檢驗(yàn)結(jié)果均十分準(zhǔn)確，尤其在福氏志賀菌的基因分型和鑒定中效果十分明顯。

2.3 酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)技術(shù)

酶聯(lián)免疫技術(shù)屬于免疫學(xué)檢驗(yàn)手段，其應(yīng)用原理是采用抗原、抗體的特異性反應(yīng)對(duì)志賀菌培養(yǎng)后產(chǎn)生的酶對(duì)底物進(jìn)行催化結(jié)合處理，該方法具有敏感性高的特點(diǎn)，在臨床應(yīng)用中的特異性較強(qiáng)，并且屬于自動(dòng)化檢測(cè)方法的一種，酶聯(lián)免疫技術(shù)的特異性雖然較高，但在準(zhǔn)確性方面具有一定的劣勢(shì)，尤其出現(xiàn)較高的假陽性率，因此在檢驗(yàn)過程中主要對(duì)志賀菌的特異性進(jìn)行檢測(cè)，在臨床疾病的確診過程中，仍需要其他檢驗(yàn)方法進(jìn)行輔助檢驗(yàn)。秦巧玲等采用間接酶聯(lián)免疫技術(shù)進(jìn)行志賀菌的檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，志賀菌的檢出限最高能夠達(dá)到106 CFU/ml，在臨床上的應(yīng)用效果極高[8]。

2.4 蛋白質(zhì)印跡法

蛋白印跡法在臨床上的應(yīng)用時(shí)間較長(zhǎng)，于上個(gè)世紀(jì)80年代開始即進(jìn)行臨床應(yīng)用，該方法的優(yōu)勢(shì)在于，能夠通過檢測(cè)蛋白質(zhì)的特異性進(jìn)行志賀菌的檢出，檢驗(yàn)過程中對(duì)檢驗(yàn)樣本中的微量抗原檢出率高，且對(duì)于出現(xiàn)多克隆抗體的樣本中進(jìn)行單克隆抗體的檢測(cè)效果顯著。在檢驗(yàn)過程中，通過對(duì)固相膜上的免疫印記進(jìn)行觀察，能夠在糞便中有效捕捉到大腸埃希菌和志賀菌，準(zhǔn)確率高、敏感度高、特異性高，是目前臨床上應(yīng)用價(jià)值最高的檢驗(yàn)手段之一，且操作方法簡(jiǎn)單，結(jié)果保存時(shí)間長(zhǎng)。張敬平[9]等利用該方法進(jìn)行志賀菌檢驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，其檢驗(yàn)準(zhǔn)確性與PCR檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性相似，陳軾等采用蛋白印跡法與生化鑒定檢驗(yàn)方法分別進(jìn)行檢驗(yàn)，兩種檢驗(yàn)方法的檢驗(yàn)結(jié)果無明顯差異，能夠觀察到蛋白印跡法的檢驗(yàn)?zāi)芰^高。

綜上所述，志賀菌對(duì)我國(guó)人民的健康影響巨大，在臨床上的檢驗(yàn)方法也相對(duì)較多，除常規(guī)生化鑒定檢驗(yàn)方法外，蛋白檢驗(yàn)、基因檢驗(yàn)、免疫學(xué)檢驗(yàn)方法的發(fā)展也十分迅速，并逐步替代或輔助生化鑒定檢驗(yàn)方法對(duì)志賀菌進(jìn)行檢驗(yàn)，在臨床上應(yīng)用上述檢驗(yàn)方法，能夠有效提高志賀菌的檢驗(yàn)效果，提高檢驗(yàn)速度。

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醫(yī)學(xué)論文中統(tǒng)計(jì)分析方法的選擇

對(duì)于定量資料，應(yīng)根據(jù)所采用的設(shè)計(jì)類型、資料所具備的條件和分析目的，選用合適的統(tǒng)計(jì)分析方法，不應(yīng)盲目套用t檢驗(yàn)和單因素方差分析；對(duì)于定性資料，應(yīng)根據(jù)所采用的設(shè)計(jì)類型、定性變量的性質(zhì)和頻數(shù)所具備的條件以及分析目的，選用合適的統(tǒng)計(jì)分析方法，不應(yīng)盲目套用χ2檢驗(yàn)。對(duì)于回歸分析，應(yīng)結(jié)合專業(yè)知識(shí)和散布圖，選用合適的回歸類型，不應(yīng)盲目套用簡(jiǎn)單直線回歸分析，對(duì)具有重復(fù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的回歸分析資料，不應(yīng)簡(jiǎn)單化處理;對(duì)于多因素、多指標(biāo)資料，要在一元分析的基礎(chǔ)上，盡可能運(yùn)用多元統(tǒng)計(jì)分析方法，以便對(duì)因素之間的交互作用和多指標(biāo)之間的內(nèi)在聯(lián)系作出全面、合理的解釋和評(píng)價(jià)。

New Progress of Inspection Techniques for Shigella

JIANG Yuting Clinical Laboratory Department, Heilongjiang Mulan Center for Disease Control and Prevention, Mulan Heilongjiang 151900, China

Shigella is very common in our clinical patients, the main clinical symptoms of shigella infection of digestive system disease, and bacterial dysentery, caused a great threat to human health, in the cause of disease, patients with food to produce drinking water, infection rate was the highest in all patients through laboratory tests, observation of pathogen type and infection to patients after the onset of visible laboratory of shigella, clinical application is crucial, shigella examination technology through research and development of clinical time, has made rapid progress, can use a variety of inspection techniques in clinical judgment, this paper the shigella test technology progress.

shigella; test technology; advantage analysis; progress

R446

A

1674-9308（2017）01-0064-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2017.01.037

黑龍江省木蘭縣疾病預(yù)防控制中心檢驗(yàn)科，黑龍江 木蘭151900