脂質(zhì)體紫杉醇聯(lián)合卡培他濱對晚期乳腺癌患者DBC1及SIRT1表達的影響

李紅，劉付寶

(1.安徽省亳州市人民醫(yī)院，安徽 亳州 236800； 2.安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院 普外科，安徽 合肥 230000)

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·論 著·

脂質(zhì)體紫杉醇聯(lián)合卡培他濱對晚期乳腺癌患者DBC1及SIRT1表達的影響

李紅1，劉付寶2

(1.安徽省亳州市人民醫(yī)院，安徽 亳州 236800； 2.安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院 普外科，安徽 合肥 230000)

目的:探討脂質(zhì)體紫杉醇聯(lián)合卡培他濱對晚期乳腺癌患者干預(yù)后患者組織中DBC1及SIRT1的表達情況，為患者預(yù)后評價提供理論依據(jù)。方法：選取2013年7月至2015年7月收治的80例晚期乳腺癌患者作為研究對象，使用脂質(zhì)體紫杉醇(力樸素)聯(lián)合卡培他濱進行治療，患者第1天使用135～175 mg·m-2力樸素，然后每天使用2 000 mg·m-2卡培他濱進行治療，以21 d為1個療程，患者連續(xù)治療2～6個療程后對療效進行評價。比較脂質(zhì)體紫杉醇聯(lián)合卡培他濱干預(yù)前后患者病灶組織中SIRT1和DBC1表達水平差異，并分析不同病理類型中SIRT1及DBC1的表達差異，記錄患者使用藥物干預(yù)后不良反應(yīng)發(fā)生情況。結(jié)果：治療后患者SIRT1及DBC1表達陽性率均明顯低于治療前，差異具有統(tǒng)計學意義(χ2=65.83，P=0.000；χ2=53.43，P=0.000)；經(jīng)治療后不同病理類型患者的病灶組織中SIRT1和DBC1表達的陽性指數(shù)差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；患者所出現(xiàn)的均為可逆性不良反應(yīng)，大多數(shù)表現(xiàn)為以Ⅰ級或Ⅱ級不良反應(yīng)為主的血液學毒性，其次為手足綜合征和消化道反應(yīng)，采取相應(yīng)的對癥治療后均可依照原定計劃完成化療，并未出現(xiàn)明顯的肝腎功能損傷及過敏反應(yīng)。結(jié)論：對晚期乳腺癌患者使用脂質(zhì)體紫杉醇聯(lián)合卡培他濱干預(yù)后可顯著降低其DBC1和SIRT1的陽性表達，且具有較好的安全性。

脂質(zhì)體紫杉醇； 卡培他濱； 晚期乳腺癌； 乳腺癌缺失基因1； 沉默信息調(diào)節(jié)因子1

乳腺癌是目前較為常見的惡性腫瘤之一，局部病灶的復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移是其主要的致死因素，盡管診療技術(shù)取得了長足發(fā)展，但仍無法有效控制乳腺癌通過血管和淋巴道轉(zhuǎn)移[1]。精準評估乳腺癌的進展情況是提高患者生存率、改善患者預(yù)后的關(guān)鍵，伴隨著對乳腺癌的分子機制及生物學特性研究的不斷深入，利用分子生物學手段評估乳腺癌患者的預(yù)后越來越為人們所重視[2]。乳腺癌缺失基因1(DBC1)是參與乳腺癌細胞凋亡、增殖等過程的重要因子，也是腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要調(diào)節(jié)因子之一[3]。沉默信息調(diào)節(jié)因子1(SIRT1)是廣泛存在于真核生物中的壽命調(diào)節(jié)因子，其在人諸多惡性病變細胞中異常高表達[4]。脂質(zhì)體紫杉醇(力樸素)及卡培他濱是目前應(yīng)用較廣的一線抗腫瘤藥物，研究發(fā)現(xiàn)其治療晚期乳腺癌時具有較理想的臨床效果。本研究旨在探討脂質(zhì)體紫杉醇聯(lián)合卡培他濱對晚期乳腺癌患者干預(yù)后患者組織中DBC1及SIRT1的表達情況，為患者預(yù)后評價提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準，選取2013年7月至2015年7月間收治的80例晚期乳腺癌患者作為研究對象?；颊吣挲g31～75歲，平均(44.9±7.4)歲；腫瘤病灶區(qū)直徑(2.8±1.1) cm；其中浸潤性導(dǎo)管癌65例，乳頭狀癌2例，浸潤性小葉癌12例，髓樣癌1例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移38例，未出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癥狀42例；遠處轉(zhuǎn)移病灶4例，未出現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移病灶76例。

1.2 入組標準

(1) 患者在手術(shù)治療前未接受過內(nèi)分泌治療、放療、化療；(2) 術(shù)前檢查確認患者可手術(shù)治療并有至少1個以上的目標病灶；(3) 患者心、肝、脾、肺、腎功能正常；(4) 有完整的臨床資料，患者對本次研究知情并簽署知情同意書。

1.3 排除標準

(1) 病灶屬于非原發(fā)性乳腺癌；(2) 身體狀態(tài)差，術(shù)后無法耐受化療；(3) 患者處于妊娠期或哺乳期；(4) 患者臨床病理分型模糊。

治療后患者SIRT1及DBC1表達陽性率均明顯低于治療前，差異具有統(tǒng)計學意義(χ2=65.83，P=0.000；χ2=53.43，P=0.000)，見表1。

剃頭師傅的頭發(fā)花白，卻不顯老，可能是不下地干活的緣故，也可能確實還不老。剃頭師傅的話也不多，你進店，不主動問話，他也不會開口問你，不像城里的理發(fā)店那么熱情，一進門就上前招呼你。

患者使用力樸素聯(lián)合卡培他濱進行治療，第1天使用135～175 mg·m-2力樸素，然后每天使用2 000 mg·m-2卡培他濱進行治療，持續(xù)治療21 d為1個療程，依照患者病情變化連續(xù)治療2～6個療程后對患者的療效進行評價。17例患者進行了2個療程的治療，其余患者進行了2個療程以上的治療。依照藥物說明書患者在使用力樸素治療前使用西咪替丁、苯海拉明及地塞米松進行干預(yù)，防止過敏反應(yīng)的發(fā)生。此外，使用生血細胞藥物、胃黏膜保護藥、止嘔藥等藥物進行對癥治療。

1.5 評價指標

2.3 患者不良反應(yīng)發(fā)生情況

1.6 評分標準

使用免疫組化法對所有臨床標本進行染色處理，使用SIRT1及DBC1抗體進行孵育(Santa Cruz)。比較使用力樸素聯(lián)合卡培他濱干預(yù)前后患者病灶組織中SIRT1和DBC1表達水平差異，及不同病理類型中兩者表達差異。此外，記錄患者使用藥物干預(yù)后不良反應(yīng)發(fā)生情況。

使用半定量法對SIRT1及DBC1的表達情況進行評估，細胞核中出現(xiàn)黃棕色顆粒則判定為陽性細胞。陽性細胞數(shù)<5%判定為(-)，計0分；陽性細胞數(shù)5%～25%判定為(+)，計1分；陽性細胞數(shù)26%～50%判定為(++)，計2分；陽性細胞數(shù)51%～75%判定為(+++)，計3分；陽性細胞數(shù)>75%判定為(++++)，計4分。依照熒光強度不同分為：陰性，計0分；弱，計1分；中等，計2分；強烈，計3分。后將陽性腫瘤細胞的百分數(shù)與熒光強度分數(shù)的乘積計為陽性指數(shù)。

2)流程改造后入選細度的大幅增加，大幅改善選別指標，在精礦品位差別不大的情況下，精礦產(chǎn)率提高6.62個百分點，回收率提高12.61個百分點，每年經(jīng)濟效益增加2 053.73萬元/a。本研究成果在昆鋼集團內(nèi)部建立了混合鐵礦的磨選示范工程，并對公司內(nèi)部及國內(nèi)類似礦山混合鐵礦選廠提供可借鑒的實踐經(jīng)驗。

1.7 統(tǒng)計學處理

初鉆時，以低擋慢速鉆進，使護筒刃腳處形成堅固的泥皮護壁；鉆至護筒刃腳下2～4 m，速度控制在每小時1.5 m左右，這樣既能保護孔壁完好，又有利于保持循環(huán)泥漿鉆渣含量基本穩(wěn)定，使排渣順暢、均勻。正常鉆進時，合理調(diào)整鉆進速度但不隨意提動孔內(nèi)鉆具，并減小鉆具的晃動。

2.2 不同病理分型患者干預(yù)后SIRT1和DBC1表達情況

2 結(jié) 果

【解讀】 關(guān)于遺傳病基因檢測報告，國內(nèi)尚無統(tǒng)一標準和規(guī)范。由于醫(yī)患之間專業(yè)信息高度不對稱，因此，為了最大程度地改善溝通效果，建議在不影響科學性前提下，盡量以簡潔通俗易懂的用語和措辭將基因診斷和產(chǎn)前診斷結(jié)果報告給孕婦及其家屬，并根據(jù)檢測結(jié)果給予病患家屬充分的解釋和遺傳咨詢。

1.4 治療方法[5- 7]

表1 患者治療前后SIRT1和DBC1表達陽性率的比較 例

注：括號內(nèi)為百分率

緊湊的展廳內(nèi)，富有設(shè)計感的大牌包裝紙袋、紙盒交錯而立，令到訪者仿若誤入了一間奢侈品商店。毫無疑問，這些堪稱工藝品的佳作都是出自創(chuàng)業(yè)人之手。桂銀太向我們一一展示關(guān)鍵工藝與設(shè)計思路。據(jù)他透露，創(chuàng)業(yè)人自從將自己定位為“做最好的精細包裝解決方案提供商”后，就著力在創(chuàng)意設(shè)計與工藝開發(fā)上下功夫，每年創(chuàng)業(yè)人都會撥出專門的研發(fā)經(jīng)費，供研發(fā)人員“自由發(fā)揮”；組織員工赴海外參加各種專業(yè)展覽，尋找設(shè)計靈感，等等。功夫不負有心人，創(chuàng)業(yè)人的研發(fā)創(chuàng)新實力最終得到了高端客戶市場的認可，創(chuàng)業(yè)人以此為敲門磚，揚名于業(yè)界。2016年4月，創(chuàng)業(yè)人在新三板正式掛牌，憑借資本市場的助力，踏上了更大的舞臺。

經(jīng)治療后不同病理類型患者組織中SIRT1和DBC1表達的陽性指數(shù)差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表2。

表2 不同病理分型患者干預(yù)后SIRT1和DBC1表達情況

類 型n陽性指數(shù)SIRT1DBC1髓樣癌15.155.22乳頭狀癌25.25±0.805.45±0.87浸潤性小葉癌126.03±0.956.15±0.92浸潤性導(dǎo)管癌656.62±1.026.84±1.21

閩東特色文化是中華優(yōu)秀文化、革命文化的重要組成部分，在中國特色社會主義文化建設(shè)中具有獨特價值和實踐意義。在漫長的歷史進程中，它充分體現(xiàn)了閩東人民“自強不息、艱苦奮斗、銳意進取、善良質(zhì)樸”精神風貌。在建設(shè)中國特色社會主義事業(yè)的新時代，閩東特色文化仍以跨越時空、源遠流長的價值功能而彰顯魅力，成為震撼心靈、催人奮進的精神力量。高校作為培養(yǎng)社會主義合格建設(shè)者和可靠接班人的主陣地，充分挖掘閩東特色文化的價值功能并加以運用，不僅可以為思想政治教育提供優(yōu)質(zhì)的教育資源，促進大學生社會主義核心價值觀的養(yǎng)成，而且有利于扎實辦好中國特色社會主義高校，助推社會主義文化強國建設(shè)。

2.1 治療前后SIRT1和DBC1表達陽性率的比較

患者所出現(xiàn)的均為可逆性不良反應(yīng)，表現(xiàn)為以Ⅰ級與Ⅱ級不良反應(yīng)為主的血液學毒性，其次為手足綜合征和消化道反應(yīng)，采取相應(yīng)的對癥治療后均可依照原定計劃完成化療，并未出現(xiàn)明顯的肝腎功能損傷及過敏反應(yīng)，見表3。

表3 患者不良反應(yīng)發(fā)生情況 例

3 討 論

乳腺癌是全球范圍內(nèi)嚴重威脅女性健康的高發(fā)惡性腫瘤之一。隨著分子生物學技術(shù)的發(fā)展，利用分子生物學技術(shù)對患者的基因譜及預(yù)后進行分析評估日益受到重視。在乳腺癌的診斷及評價過程中，類似于HER- 2、黃體酮受體及雌激素受體等分子標志日益受到關(guān)注，其在指導(dǎo)乳腺癌的病理分期、組織類型等方面具有十分重要的意義。

NAD依賴性組蛋白去乙?；窼IRT1具有組蛋白修飾作用，具有多功能的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，在細胞氧化應(yīng)激、能量代謝、DNA的損傷及修復(fù)等生理病理過程中發(fā)揮重要作用[8]。在生物模型研究中發(fā)現(xiàn)，SIRT1可以通過沉默染色質(zhì)以及調(diào)控能量代謝等實現(xiàn)生命的延長以及對細胞周期的調(diào)控。然而，很多學者對于SIRT1應(yīng)用于乳腺癌的治療仍有爭議，一些人認為SIRT1可以抑制乳腺癌的發(fā)展，而另一些學者則認為其會促進腫瘤的發(fā)展。DBC1是Rho GTPases信號分子家族中的一員，該家族基因在細胞的新陳代謝、轉(zhuǎn)錄凋亡等過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。此類因子的突變或者異常會使細胞血管增生、過度增殖，并最終引發(fā)腫瘤。目前的研究大多認為SIRT1可以調(diào)節(jié)細胞周期中的一些分子以及細胞凋亡中的凋亡蛋白進而實現(xiàn)脫乙酰作用，最終使細胞存活而促進腫瘤的發(fā)展[9]。SIRT1對于腫瘤的生長以及老化也發(fā)揮著巨大作用。而DBC1對于SIRT1有特異性抑制作用，可拮抗P53的乙?；?，從而促進細胞的凋亡。然而，在很多腫瘤細胞中DBC1也表現(xiàn)出較高的表達，因此，其也有可能促進癌變。近年來，根據(jù)微陣列的研究也表明，DBC1和其他正常的細胞相比，其在乳腺癌中的表達也是顯著上調(diào)的[10]。

研究表明，紫杉醇類單藥治療乳腺癌的有效率高達60%?？诜奏ゎ愃幦缈ㄅ嗨麨I，是治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌的一線藥物，其治療有效率高達35%，紫杉醇類以及蒽環(huán)類治療乳腺癌失敗者卡培他濱二線單藥的有效率為20%～27%，且能顯著延長患者生命時間[11]。有研究顯示，紫杉醇類配伍卡培他濱可以促進乳腺癌患者的康復(fù)。紫杉醇在應(yīng)用于臨床時，由于其水溶性差，需用激素以及有機溶劑等進行預(yù)處理，此外也可以利用藥物載體進行裝載運輸。目前，在國內(nèi)已經(jīng)上市的載體有脂質(zhì)體紫杉醇，在國外還有白蛋白紫杉醇[12- 13]。此類藥物載體不僅規(guī)避了藥物溶媒導(dǎo)致的超敏反應(yīng)，還降低了藥物毒副作用如骨髓抑制等，極大地增加患者機體耐藥量[14]。研究顯示，相較于30 mg·kg-1紫杉醇的最大耐受量，靜脈注射脂質(zhì)體紫杉醇的最大耐受量高達195 mg·kg-1。近年來的臨床數(shù)據(jù)表明，脂質(zhì)體紫杉醇的最大耐受量能夠到達185 mg·cm-2，而且對于一些使用過紫杉醇且對其耐受的患者依舊有治療效果[15]。

本組資料顯示，治療后患者SIRT1和DBC1表達陽性率均明顯低于治療前，不同病理類型患者組織中SIRT1和DBC1表達的陽性指數(shù)無顯著性差異。此外，本組患者所出現(xiàn)的均為可逆性不良反應(yīng)，表現(xiàn)為以Ⅰ級與Ⅱ級不良反應(yīng)為主的血液學毒性，其次為手足綜合征和消化道反應(yīng)，采取相應(yīng)的對癥治療后均可依照原定計劃完成化療，并未出現(xiàn)明顯的肝腎功能損傷及過敏反應(yīng)。分析認為，紫杉醇類藥物能夠引發(fā)并促進微管蛋白聚集以及微管的組裝，使得細胞有絲分裂階段無法形成紡錘體以及紡錘絲，最終導(dǎo)致細胞滯留在G2期以及M期，從而達到腫瘤抑制的目的。

人行道系統(tǒng)在過橋列車的動荷載激勵下，呈明顯的動力反應(yīng)特征，托架對列車激勵有較大的動力放大效應(yīng)，螺栓在交變荷載作用下，承受更大的反復(fù)應(yīng)力作用，產(chǎn)生疲勞損傷，出現(xiàn)裂紋而不斷擴展，最終發(fā)生脆斷。因此，人行道托架螺栓在列車荷載的作用下受反復(fù)動應(yīng)力作用產(chǎn)生疲勞破壞是導(dǎo)致螺栓折斷的主要原因[4]。

綜上所述，在對晚期乳腺癌患者使用脂質(zhì)體紫杉醇聯(lián)合卡培他濱干預(yù)后，可顯著降低其DBC1和SIRT1的陽性表達，且具有較好的安全性。但本次研究采用小樣本自身對照研究，諸多因素均可能影響研究結(jié)果，因而有待進一步擴大臨床樣本數(shù)進行深入研究。

[1] 高月，張清媛.化生性乳腺癌的研究進展[J].臨床腫瘤學雜志，2014，15(8):759- 762．

[2] 徐青，遠麗，李青，等.乳腺癌康復(fù)治療現(xiàn)狀與進展[J].中國康復(fù)理論與實踐，2014，21(2):101- 104．

[3] NIN V，ESCANDE C，CHINI C C，et al.Role of deleted in breast cancer 1(DBC1)protein in SIRT1 deacetylase activation induced by protein kinase A and AMP- activated protein kinase[J].J Biol Chem，2012，287(28):23489- 23501．

[4] JIANG K W，LYU L，SHEN Z L，et al.Overexpression of SIRT1 is a poor prognostic factor for advanced colorectal cancer[J].中華醫(yī)學雜志:英文版，2014，127(11):2021- 2024．

[5] 王宏羽，張湘茹.脂質(zhì)體紫杉醇聯(lián)合卡鉑與紫杉醇聯(lián)合卡鉑一線治療晚期非小細胞肺癌的療效和安全性的比較[J].中國醫(yī)學科學院學報，2014，36(3):305- 308．

[6] 孫榮剛，鄭安平，張光斌.多西他賽與紫杉醇在食管癌放化療中的對照研究[J].現(xiàn)代醫(yī)學，2014，42(9):1067- 1070．

[7] 羅海濤，鄒靜荷，古偉光，等.卡培他濱維持治療對聯(lián)合化療有效的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移三陰乳腺癌的臨床觀察？[J].重慶醫(yī)學，2015，16(24):3357- 3359．

[8] CHINI C C，ESCANDE S，CARLOS N，et al.DBC1(deleted in breast cancer 1)modulates the stability and function of the nuclear receptor Rev- erb alpha[J].Biochem J，2013，451(Pt.3):453- 461．

[9] 李云芬，楊曉娟，張婷，等.乳腺癌組織中乳腺癌缺失基因1的表達研究進展[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學，2013，21(8):1888- 1891．

[10] HUBBARD B P，LOH C，GOMES A P，et al.Carboxamide SIRT1 inhibitors block DBC1 binding via an acetylation- independent mechanism[J].Cell Cycle，2013，12(14):2233- 2240．

[11] 李科，李楊，楊繼嵐，等.脂質(zhì)體紫杉醇單藥或聯(lián)合卡培他濱治療晚期乳腺癌42例臨床觀察[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學，2013，21(1):72- 74．

[12] 錢柏鋒，尹鑫，石欣.乳腺癌循環(huán)腫瘤細胞臨床研究進展[J].東南大學學報:醫(yī)學版，2015，34(3):476- 478．

[13] 何秀琴，李國慶，尚紅娟，等.脂質(zhì)體紫杉醇聯(lián)合卡鉑治療老年晚期頭頸部腫瘤的臨床觀察[J].實用癌癥雜志，2014，23(12):1653- 1654，1657．

[14] 李小明，胡愛虹，張帆，等.吉西他濱聯(lián)合奧沙利鉑或卡培他濱治療晚期胰腺癌的臨床療效及安全性評價[J].中國臨床藥理學雜志，2015，19(8):612- 614．

[15] 張家銘，顏家琪，江學慶，等.卡培他濱聯(lián)合奧曲肽對人乳腺癌細胞MCF- 7增殖的影響[J].中華實驗外科雜志，2015，32(5):996- 997．

Effect of liposomal paclitaxel combined with capecitabine for advanced breast cancer patient’s DBC1 and SIRT1 expression

LI Hong1，LIU Fu- bao2

(1.BozhouPeople’sHospital，Bozhou236800，China； 2.DepartmentofGeneralSurgery,theFirstAffiliatedHospitalofAnhuiMedicalUniversity,Hefei230000,China)

Objective： To investigate the expression of DBC1 and SIRT1 in advanced breast cancer patients treated by paclitaxel liposome combined with capecitabine， and to provide theoretical basis for the prognosis evaluation. Methods: 80 cases with advanced breast cancer treated in our hospital between July 2013 and July 2015 were chosen as research subjects. Patients were treated with paclitaxel liposome and capecitabine， first day patients were treated with 135-175 mg·m-2paclitaxel liposome， after that they were treated with capecitabine 2 000 mg·m-2， 21 days as a course of treatment. After treated with 2-6 courses， the expression levels of SIRT1 and DBC1 in the lesions of the patients and in different pathological types were compared， and the adverse reactions were recorded. Results: After treatment the positive rates of SIRT1 and DBC1 expression were significantly lower than before treatment， and the difference was statistically significant(χ2=65.83，P=0.000;χ2=53.43，P=0.000). There was no significant difference in the expression of SIRT1 and DBC1 in different pathological tissues after treatment(P>0.05). The reversible adverse reactions were grade Ⅰ and Ⅱ of hematologic toxicity， hand foot syndrome and digestive tract reaction. By taken the corresponding symptomatic treatment they could be completed in accordance with the original plan chemotherapy， and did not show the liver and kidney function damage and allergic reaction. Conclusion: Patients with advanced breast cancer treated by paclitaxel liposome combined with capecitabine can significantly reduce the positive expression of DBC1 and SIRT1， and has a better security．

liposomal paclitaxel; capecitabine; advanced breast cancer; beleted in breast cancer 1; silent information regulator1

2016- 04- 19

2016- 07- 17

李紅(1979-)，女，安徽亳州人，副主任醫(yī)師。E- mail:A2475155@qq.com

劉付寶 E- mail:liufubao88@163.com

李紅，劉付寶.脂質(zhì)體紫杉醇聯(lián)合卡培他濱對晚期乳腺癌患者DBC1及SIRT1表達的影響[J].東南大學學報:醫(yī)學版，2016，35(6)：961- 964.

R737.9

A

1671- 6264(2016)06- 0961- 04

10.3969/j.issn.1671- 6264.2016.06.027