2015年國家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)復(fù)方丹參片的質(zhì)量分析

楊建龍 韓 晶 王 輝 徐 丹 蔡廣知 貢濟(jì)宇*

（1長春市食品藥品檢驗(yàn)中心中藥科室，長春130012；2吉林省食品檢驗(yàn)所檢驗(yàn)二部，長春130103；3長春中醫(yī)藥大學(xué)藥物分析實(shí)驗(yàn)室，長春130117）

2015年國家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)復(fù)方丹參片的質(zhì)量分析

楊建龍1韓 晶2王 輝1徐 丹1蔡廣知3貢濟(jì)宇3*

（1長春市食品藥品檢驗(yàn)中心中藥科室，長春130012；2吉林省食品檢驗(yàn)所檢驗(yàn)二部，長春130103；3長春中醫(yī)藥大學(xué)藥物分析實(shí)驗(yàn)室，長春130117）

目的根據(jù)國家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)任務(wù)，對(duì)2015年吉林省全省范圍內(nèi)市場(chǎng)中流通的復(fù)方丹參片進(jìn)行質(zhì)量分析研究。方法根據(jù)《中國藥典》2010年版第一增補(bǔ)本及《藥品補(bǔ)充檢驗(yàn)方法和檢驗(yàn)項(xiàng)目批件號(hào)2008010》對(duì)全省范圍內(nèi)抽檢的46批復(fù)方丹參片進(jìn)行了全項(xiàng)檢驗(yàn)，并對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析與比較。結(jié)果按照現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，樣品合格率為97.8%，但是通過對(duì)片劑中樟腦成分的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，各廠家中樟腦的含量差異參差不齊。結(jié)論吉林省內(nèi)抽檢的46批樣品根據(jù)現(xiàn)行檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，只有1批樣品不合格，根據(jù)檢驗(yàn)依據(jù)和結(jié)果可以認(rèn)為，當(dāng)前吉林省內(nèi)生產(chǎn)、經(jīng)營、流通使用的復(fù)復(fù)方丹參片質(zhì)量較好。但是發(fā)現(xiàn)了不少問題，建議有關(guān)部門加強(qiáng)對(duì)復(fù)方丹參片中冰片投料的監(jiān)管，以保證產(chǎn)品質(zhì)量。

復(fù)方丹參片；國家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)；質(zhì)量控制；藥品管理

復(fù)方丹參片處方由丹參、三七、冰片三味藥組成[1]，主要用于冠心病、心絞痛以及氣滯血瘀所致的胸痹、胸悶、心前區(qū)刺痛等，其中丹參為君藥，三七為臣藥，冰片為佐使藥。此處方由上海中藥二廠于1975年研制成功[2]，1977年版至2015年版《中國藥典》均有收載，并收載于《國家基本藥物目錄》，由于其價(jià)格低廉、療效確切、服用方便，是臨床常用的現(xiàn)代中藥復(fù)方制劑。在國家食品藥品監(jiān)督管理局網(wǎng)站上查詢得知，關(guān)于復(fù)方丹參片的相關(guān)記錄有685條信息。其中有642家獲批生產(chǎn)藥企，可見此藥的銷量之大。本單位按照國家要求，對(duì)吉林省內(nèi)市場(chǎng)中流通的復(fù)方丹參片進(jìn)行國家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)研究，以便全面的了解省內(nèi)藥品的質(zhì)量并發(fā)現(xiàn)找出存在的問題。

1 藥品、試劑與儀器

GR202型電子分析天平（日本AND公司）；POWER I型純水儀（北京普析通用儀器有限公司），Agilent 1260高效液相色譜儀。復(fù)方丹參片（46批），丹參酮IIA（批號(hào)：110766-200619，20 mg，純度：98.9%），丹酚酸B（批號(hào)：111562-201212，20 mg，純度：93.7%），三七皂苷R1（批號(hào)：110745-200617，20 mg），人參皂苷Rg1（批號(hào)：110703-201128，20 mg，純度：93.4%），人參皂苷Rge（批號(hào)：110754-200822，20 mg，純度：88.8%），人參皂苷Rb1（批號(hào)：110704-201223，20 mg，純度：95.9%），異龍腦（批號(hào)：111512-200802，20 mg，純度：97.5%）龍腦（批號(hào)：110881-201107，20 mg，純度：99.3%）樟腦（批號(hào)：110747-201409，20 mg，純度：98.7%），冰片對(duì)照品（批號(hào)：110743-200905），三七對(duì)照藥材（批號(hào)：120941-200506），丹參對(duì)照藥材（批號(hào)：120923-201113），以上均來自中國食品藥品檢定研究院，甲醇和乙腈（色譜純，F(xiàn)isher公司），其他試劑為分析純。

2 抽樣情況

本次評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)共計(jì)抽取復(fù)方丹參片樣品46批。抽樣單位為吉林省內(nèi)各地區(qū)食品藥品監(jiān)督管理局和食品藥品檢驗(yàn)所共17個(gè)單位。被抽樣單位為經(jīng)營企業(yè)29家、制藥企業(yè)7家、醫(yī)療單位10家。生產(chǎn)單位為分布于14個(gè)省的22家企業(yè)。本次抽檢樣品的供貨單位主要來自于廣東、北京、吉林、山東、四川、云南等省市地區(qū)。

3 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

本次國家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)為全項(xiàng)檢驗(yàn)，檢驗(yàn)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)采用《中國藥典》2010年版第一增補(bǔ)本及《藥品補(bǔ)充檢驗(yàn)方法和檢驗(yàn)項(xiàng)目批件號(hào)2008010》。

4 評(píng)價(jià)結(jié)果

4.1 性狀本品為糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后顯棕色至棕褐色；氣芳香，味微苦。46批樣品中，符合規(guī)定46批，其中糖衣片6批，薄膜衣片40批。

4.2 鑒別46批樣品顯微鑒別與薄層鑒別檢驗(yàn)結(jié)果均符合規(guī)定。復(fù)方丹參片的制劑工藝為丹參提取物、三七原粉及冰片原粉混合壓制成片，因此復(fù)方丹參片的顯微特征主要為三七的顯微特征。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，每個(gè)廠家的樣品均能看到樹脂道碎片，所以從46批的復(fù)方丹參片中均能鑒別出三七和冰片，與HPLC測(cè)定三七結(jié)果一致。

4.3 檢查異性有機(jī)物：視野中除三七原藥材顯微特征外，均未檢出其它植物組織，46批樣品均符合規(guī)定。三七莖葉皂苷：46批樣品中，均符合規(guī)定，結(jié)果說明樣品中并沒有違法添加三七莖葉皂苷提取物來替代三七粉。崩解時(shí)限：46批樣品中，均符合規(guī)定。標(biāo)準(zhǔn)中要求60分鐘內(nèi)全部崩解，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)均在30分鐘內(nèi)全部崩解，說明吉林省內(nèi)流通的復(fù)方丹參片能夠較好的崩解。重量差異：46批樣品中，均符合規(guī)定。樟腦:根據(jù)國家藥品補(bǔ)充檢驗(yàn)方法和檢驗(yàn)項(xiàng)目批件號(hào)2008010規(guī)定，本品每片含樟腦(C10H16O)計(jì)，不得大于0.2 mg。43批未檢出樟腦色譜峰，3批檢出樟腦色譜峰，經(jīng)過計(jì)算含量為0.1 mg/片，在限度之內(nèi)。均符合規(guī)定。

4.4 含量測(cè)定丹酚酸B：本品每片含丹參以丹酚酸B (C36H30O16)計(jì)，不得少于5.0 mg。46批樣品中，全部符合規(guī)定，丹酚酸B含量為5.1%～14.6%，其中40批樣品含量在6.0 mg/片以上區(qū)間，有的樣品達(dá)到5.0%以上。天津天士力（遼寧）制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)的復(fù)方丹參片丹酚酸B為14.6 mg/片，吉林省通化博祥藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)的復(fù)方丹參片丹酚酸B為5.1 mg/片，前者幾乎為后者的三倍。企業(yè)原料與生產(chǎn)工藝的不同導(dǎo)致了含量有如此大的差距，企業(yè)應(yīng)該嚴(yán)格控制生產(chǎn)流程，保證生產(chǎn)的穩(wěn)定性。

圖1 丹酚酸B含量比較圖

丹參酮IIA：本品每片含丹參以丹參酮ⅡA (C19H18O3)計(jì)，不得少于0.20 mg。46批樣品中，符合規(guī)定樣品45批，丹參酮IIA含量為0.25～0.77 mg/片，不符合規(guī)定樣品1批，不合格率為2.1%。從檢驗(yàn)結(jié)果可以看出，大部分樣品含量均在限度以上，1批樣品含量不合格可能是原藥材不合格或者生產(chǎn)工藝有問題，丹參酮IIA需要盡量避光才能保證含量達(dá)標(biāo)，也可能丹參原藥材被提取過，也可在生產(chǎn)過程中工藝出現(xiàn)問題。

圖2 丹參酮IIA含量比較圖

三七：本品每片含三七以人參皂苷Rg1 (C42H72O14)、人參皂苷Rb1(C54H92O23)、三七皂苷R1(C47H80O18)及人參皂苷Re(C48H82O18)的總量計(jì)，不得少于6.0 mg。

圖3 三七含量比較

復(fù)方丹參片組方中的三七藥材，其比例僅次于丹參，是復(fù)方丹參片中的重點(diǎn)中藥。在2010年藥典之前復(fù)方丹參片質(zhì)量狀況堪憂，原因是2010年藥典沒有收載三七的含量測(cè)定項(xiàng)目，加上三七藥材比較貴，導(dǎo)致許多不法企業(yè)為了謀求最大利益而偷工減料或者用三七莖葉來代替三七藥材[3]，以劣充優(yōu)，最終通過完善藥典的標(biāo)準(zhǔn)，將三七含量測(cè)定納入到標(biāo)準(zhǔn)、補(bǔ)充檢驗(yàn)方法檢查三七莖葉皂苷提取物，這兩個(gè)項(xiàng)目的大力監(jiān)督，最終推動(dòng)復(fù)方丹參片中三七含量步入正軌。46批樣品均符合規(guī)定。從檢驗(yàn)結(jié)果可以看出，全部樣品含量均在限度以上，且97.8%的樣品含量在7.0 mg/片以上，建議修改三七的含量測(cè)定項(xiàng)目，提高三七的含量測(cè)定限度。

5 拓展研究

5.1 隱丹參酮、丹參酮IIA測(cè)定藥典中只規(guī)定了復(fù)方丹參片中丹參酮IIA的含量限度，而隱丹參酮、丹參酮ⅡA均是復(fù)方丹參片中的主要藥效成分[4]。為了考察復(fù)方丹參片的內(nèi)在質(zhì)量，本研究對(duì)復(fù)方丹參片的藥效成分隱丹參酮、丹參酮ⅡA的含量同時(shí)進(jìn)行測(cè)定，并對(duì)46批復(fù)方丹參片進(jìn)行比較研究。46批樣品中，有46批樣品含量在0.40 mg/片以上，只有2批樣品在0.40 mg/片以下（其中1批丹參酮IIA不符合規(guī)定）。此處建議復(fù)方丹參片中丹參酮IIA檢驗(yàn)項(xiàng)目修改為隱丹參酮與丹參酮IIA的總量作為脂溶性有效成分指標(biāo)。限度暫定為0.40 mg/片。

圖4 隱丹參酮與丹參酮IIA的比較

5.2 冰片含量測(cè)定不同廠家生產(chǎn)的復(fù)方丹參片質(zhì)量和療效存在很大差異。由于其法定標(biāo)準(zhǔn)中只對(duì)丹參的主要成分丹參酮ⅡA和丹酚酸B和三七規(guī)定了含量限度，而未對(duì)冰片中龍腦與異龍腦規(guī)定含量限度，因而不同廠家的產(chǎn)品中冰片含量差別較大。采用氣相色譜法測(cè)定了多家藥廠生產(chǎn)的復(fù)方丹參片中冰片含量，并進(jìn)行了分析比較，為保證其臨床用藥有效性提供參考。

圖5 異龍腦與龍腦含量的比較

從以上測(cè)定結(jié)果可以看出，46批樣品中冰片含量最高2.7 mg/片，最低僅0.15 mg/片，前者是后者的十多倍，差別較大，而按法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)均符合規(guī)定，因此很有必要對(duì)其含量進(jìn)行控制，建議嚴(yán)格監(jiān)管企業(yè)關(guān)于冰片的投料，建議增訂冰片的含量。

5.3 HPLC譜比較針對(duì)46批樣品進(jìn)行了HPLC譜圖比較。

圖6 丹酚酸B的含量測(cè)定譜圖比較

圖7 丹參酮IIA的含量測(cè)定譜圖比較

對(duì)丹參酮IIA和隱丹參酮的含量測(cè)定在測(cè)定丹參酮IIA時(shí)，發(fā)現(xiàn)隱丹參酮的色譜峰較大，且隱丹參酮也屬于丹參中的有效成分，而復(fù)方丹參片現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中缺少隱丹參酮的含量測(cè)定，為此，探索采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定復(fù)方丹參片中丹參酮IIA和隱丹參酮的含量測(cè)定方法，并進(jìn)行了方法學(xué)驗(yàn)證，取得了滿意的結(jié)果。

圖8 三七的含量測(cè)定譜圖比較

圖8中通過直觀觀察，三個(gè)樣品（同一廠家）出現(xiàn)異常色譜峰，其余廠家樣品均沒有出現(xiàn)此樣品峰，經(jīng)過確認(rèn)此色譜峰為薄膜衣表面殘留的色素峰，此色素為何種色素、是否對(duì)人體有害仍需進(jìn)一步研究。即使無害此色譜峰處于人參皂苷Rb1與人參皂苷Rd之間，干擾判斷，建議此廠家更換色素。通過指紋圖譜比較可以判斷該復(fù)方丹參片藥品的基本情況，可以通過指紋圖譜對(duì)復(fù)方丹參片建立譜庫對(duì)樣品進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估，可以對(duì)大批量樣品進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。復(fù)方丹參片的指紋圖譜研究需要進(jìn)一步研究，此處僅供參考。

6 評(píng)價(jià)與建議

依據(jù)檢驗(yàn)依據(jù)判斷，本次評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)共抽取樣品46批，合格45批，不合格1批（丹參酮IIA含量不合格）。當(dāng)前，吉林省內(nèi)流通和使用的復(fù)方丹參片質(zhì)量較好。復(fù)方丹參片處方雖然簡單，但是關(guān)于復(fù)方丹參片的標(biāo)準(zhǔn)從2005年到2015年是一直跟隨市場(chǎng)而變化的，要嚴(yán)格控制好經(jīng)典中成藥的質(zhì)量必須不斷的完善藥品標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)在復(fù)方丹參片標(biāo)準(zhǔn)中雖然只有三味藥，但是已經(jīng)有6個(gè)含量測(cè)定成分，一個(gè)氣相檢查成分（樟腦）。各企業(yè)之間冰片的含量差別較大，而按法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)均符合規(guī)定，因此很有必要對(duì)其含量進(jìn)行控制，建議嚴(yán)格監(jiān)管企業(yè)關(guān)于冰片的投料，建議增訂冰片的含量。三七的限度為6.0 mg/片，限度較低，46批樣品有45批樣品在7.0 mg/片以上。隱丹參酮和丹參酮IIA的色譜峰在測(cè)定時(shí)均比較高，況且隱丹參酮也屬于丹參的有效成分。

[1]中國藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典：2010年版第一增補(bǔ)本[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，201-202.

[2]朱盛山，謝凱，趙磊磊，等.復(fù)方丹參緩釋片脂溶性成分體外釋放度[J].中國中藥雜志，2007(23):2557-2560.

[3]費(fèi)毅琴，楊萍，肖凌，等.HPLC法快速篩查中成藥中三七、人參莖葉代替根和根莖[J].中成藥，2015，37(8):1730-1733.

[4]李國，林小茹，劉湘，等.丹參酮ⅡA和隱丹參酮的藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展[J].廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，32(2)：236-237.

Quality Analysis of National Assessment Programs for Compound Danshen Tablets in 2015

YANG Jianlong1,HAN Jing2,WANG Hui1,XU Dan1,CAI Guangzhi3,GONG Jiyu3*
(1.Chinese Medicine department Changchun Center for Food and Drug Control,Changchun 130012,China; 2.Jilin Institute for Food Control,Changchun 130103,China 3.Drug analysis Laboratories,Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130117,China)

Objective According to evaluation of the national drug sampling and testing tasks,circulating in the market Danshen tablets for quality analysis in Jilin Province in 2015.Methods According to Chinese Pharmacopoeia 2010 first supplement and Drug Testing Methods and Complementary Project Approval Document Number 2008010,a province-wide sampling of 46 batches of Salvia tablets were full term tested,and the test results were statistically analyzed and compared.Results Under the current standard test, the sample pass rate was 97.8%,but by the detection of camphor tablets ingredients found differences in the content of the manufacturers of camphor mixed.Conclusion The 46 batches of samples within a sampling of Jilin Province under the existing test standard test,and only one batch of samples failed.According to test results,and based on the view that the current production of Jilin Province,management,compound Danshen tablets in circulation are of good quality.But we found a lot of problems,and recommend relevant departments to strengthen compound Danshen tablet borneol feeding regulation,to ensure product quality.

compound Danshen tablets;evaluation of national drug sample testing;quality analysis;drug management

10.3969/j.issn.1672-2779.2017.01.064

1672-2779（2017）-01-0139-03

李海燕 本文校對(duì)：謝鵬飛

2016-06-17）

*通訊作者：gjy0431@126.com