友誼型細(xì)針穿刺器及細(xì)胞塊在淋巴瘤診斷中的運(yùn)用

陳青 羅艷

1 贛州市人民醫(yī)院 病理科 （江西 贛州 341000）

2 贛縣區(qū)人民醫(yī)院 （江西 贛州 341100）

友誼型細(xì)針穿刺器及細(xì)胞塊在淋巴瘤診斷中的運(yùn)用

陳青1羅艷2

1 贛州市人民醫(yī)院 病理科 （江西 贛州 341000）

2 贛縣區(qū)人民醫(yī)院 （江西 贛州 341100）

目的：探討細(xì)胞塊在淋巴瘤診斷中的意義。方法：收集贛州市人民醫(yī)院從2015年6月～2017年6月細(xì)胞塊診斷為淋巴瘤（細(xì)胞學(xué)涂片+細(xì)胞塊HE及免疫組化）的患者30例，其中20例經(jīng)過淋巴結(jié)活檢證實(shí)。結(jié)果：20例活檢診斷結(jié)果與細(xì)胞塊診斷結(jié)果均一致。其中彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤10例，漿細(xì)胞骨髓瘤3例，套細(xì)胞淋巴瘤2例，B小細(xì)胞淋巴瘤2例，濾泡性淋巴瘤1例，血管免疫母細(xì)胞淋巴瘤2例。結(jié)論：細(xì)胞塊結(jié)合免疫表型可用于標(biāo)準(zhǔn)診斷淋巴瘤及其分類。

細(xì)胞塊 免疫組化 診斷 淋巴瘤

淋巴瘤是淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤的統(tǒng)稱，是常見的惡性腫瘤之一，在我國惡性腫瘤發(fā)病率中位居第十，病死率位居第八，而在發(fā)達(dá)國家發(fā)病率位居第六，病死率位居第十一，由此可見我國淋巴瘤的發(fā)病率低于發(fā)達(dá)國家，而病死率卻高于發(fā)達(dá)國家。大部分淋巴瘤如果早期被發(fā)現(xiàn)及診斷，進(jìn)行規(guī)范化治療，是可以被治愈的。而在我國，患者常因未能及時診斷及治療而死亡。細(xì)針穿刺（ fi ne-needle aspiration，F(xiàn)NA）在很多系統(tǒng)已經(jīng)得到廣泛的運(yùn)用，特別是近些年，隨著微創(chuàng)學(xué)及分子生物學(xué)的發(fā)展，細(xì)針穿刺細(xì)胞塊診斷已經(jīng)開始應(yīng)用到診斷難度系數(shù)大的淋巴瘤的診斷中。2008版淋巴造血系統(tǒng)WHO分類中提出[1]，淋巴瘤的診斷不僅著重淋巴瘤的總體結(jié)構(gòu)，而是更側(cè)重于細(xì)胞形態(tài)、免疫表型及分子遺傳學(xué)的改變。

1.材料與方法

1.1 材料

收集贛州市人民醫(yī)院從2015年6月～2017年6月共30例細(xì)胞塊診斷為淋巴瘤的病例（細(xì)胞涂片+細(xì)胞塊HE及免疫組化），其中胸水10例，腹水10例，淋巴結(jié)穿刺10例，其中男性16例，女性14例。年齡46～81歲。

1.2 主要儀器

蔡司AX10顯微鏡；萊卡ASP300S脫水機(jī)；萊卡RM2235切片機(jī)；麥新全自動免疫組化儀PathcomSS1；友誼型細(xì)針穿刺器。

1.3 試劑：所用的免疫組化試劑均購于福州邁新生物技術(shù)有限公司，運(yùn)用全自動免疫組化儀按實(shí)驗(yàn)步驟及試劑說明書操作。

1.4 方法：（1）收集患者胸、腹水，先靜置1h左右，如果量多，先棄去部分上清液，留取50～200mL沉淀液，再進(jìn)行離心（2000r/min，10min）；（2）離心后棄去上清液，留下沉淀物先做細(xì)胞學(xué)涂片；腫物穿刺直接涂片，剩余組織直接用紗布或擦鏡紙包裹，制作成細(xì)胞塊，跟活檢小標(biāo)本一起脫水；（3）細(xì)胞涂片瑞氏染色，由2名5年以上閱片經(jīng)驗(yàn)的細(xì)胞病理醫(yī)師用顯微鏡進(jìn)行閱片，發(fā)出細(xì)胞學(xué)報告；（4）往剩余沉淀細(xì)胞內(nèi)加入20mL量的10%中性福爾馬林固定液，10～20min后離心沉淀（5000r/min，10min）；（5）離心后靜置2～3h或直接棄去固定液，將沉淀物用紗布或擦鏡紙包裹與常規(guī)小標(biāo)本一起進(jìn)行脫水制作成細(xì)胞塊；（6）常規(guī)石蠟包埋，使用切片機(jī)進(jìn)行切片，切片厚度為3mm，蘇木精-伊紅染色后中性樹膠封固；（7）由病理主治醫(yī)師進(jìn)行細(xì)胞塊HE閱片，選用抗體：LCA、CD20、CD3、CD5、CD4、CD8、CD56、TIA-1、CD10、BCL-2、BCL-6、CD23、CycliD1、KI-67、TDT、PAX-5、CD7、CD21、CD68、C-MYC、MUM-1、CXCL-13、PD-1、SOX-11、LEF-1、Calretinin等；（8）結(jié)合細(xì)胞學(xué)、HE形態(tài)及免疫表現(xiàn)進(jìn)行分析及診斷。

2.結(jié)果

30例淋巴瘤中，其中男性16例，女性14例。年齡46～81歲，其中20例經(jīng)過淋巴結(jié)活檢證實(shí)與細(xì)胞塊診斷結(jié)果均一致。其中彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤10例，漿細(xì)胞骨髓瘤3例，套細(xì)胞淋巴瘤2例，B小細(xì)胞淋巴瘤2例，濾泡性淋巴瘤1例，血管免疫母細(xì)胞淋巴瘤2例。

3.討論

目前，淋巴結(jié)切除活檢是淋巴瘤診斷的金標(biāo)準(zhǔn)[1-4]，但是近年來隨著穿刺技術(shù)的提高及分子檢測的應(yīng)用。穿刺活檢已經(jīng)廣泛運(yùn)用于臨床淋巴瘤的診斷，特別是北京、上海等大城市的三甲醫(yī)院，一些淋巴瘤專家也開始應(yīng)用穿刺細(xì)胞塊及免疫組化來診斷淋巴瘤[5-7]，本研究即是穿刺細(xì)胞塊結(jié)合免疫組化診斷淋巴瘤。

細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)常常是使用5～10mL的一次性注射器進(jìn)行穿刺，因其成本低，使用方便。但因近年來隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，臨床需要更多的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行免疫組化檢測及分子檢測。成而出現(xiàn)多種細(xì)針穿刺器，其中以友誼型細(xì)針穿刺器運(yùn)用最為廣泛，因其操作簡便、靈巧，負(fù)壓穩(wěn)定，定位準(zhǔn)確，能吸取較多的腫瘤細(xì)胞行細(xì)胞塊檢測，部分穿刺組織還能顯示一定的排列結(jié)構(gòu)，因而更進(jìn)一步有利于診斷。制作完細(xì)胞塊后，穿刺器內(nèi)可用生理鹽水進(jìn)行沖洗，沖洗液內(nèi)腫瘤細(xì)胞可用于流式細(xì)胞學(xué)檢測[8-9]。

總之，隨著微創(chuàng)技術(shù)及分子技術(shù)的發(fā)展，細(xì)胞塊在臨床的運(yùn)用越來越廣泛。細(xì)胞塊可用于淋巴瘤的診斷，但是部分早期病變診斷率有待提高，需要進(jìn)一步研究。

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[4] 張明,石遠(yuǎn)凱,韓曉紅.淋巴瘤診斷及預(yù)后分子標(biāo)志物研究進(jìn)展[J].中華血液學(xué)雜志,2015,36(4):354-357.

[5] 陳光勇,余小蒙,劉軍,等.介紹一種細(xì)針吸取標(biāo)本的細(xì)胞塊制作方法[J].中華病理學(xué)雜志,2011,40(8):558-559.

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1006-6586(2017)22-0011-02

R739.62

A

2017-10-20

贛州市科技局（GZ2017ZSF104）。