小檗堿對(duì)多囊卵巢綜合征大鼠胰島素抵抗效果觀察*

劉 素，韓鮮梅，陳 曉

1.深圳市寶安區(qū)中心醫(yī)院婦產(chǎn)科 (深圳518000)，2.深圳市寶安中心醫(yī)院固戌社區(qū)健康服務(wù)中心(深圳518000)，3.深圳市寶安中心醫(yī)院桃源居社區(qū)健康中心(深圳518000)

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小檗堿對(duì)多囊卵巢綜合征大鼠胰島素抵抗效果觀察*

劉 素1，韓鮮梅2，陳 曉3

1.深圳市寶安區(qū)中心醫(yī)院婦產(chǎn)科 (深圳518000)，2.深圳市寶安中心醫(yī)院固戌社區(qū)健康服務(wù)中心(深圳518000)，3.深圳市寶安中心醫(yī)院桃源居社區(qū)健康中心(深圳518000)

目的：觀察小檗堿對(duì)多囊卵巢綜合征大鼠胰島素抵抗的改善效果。方法：選取我院臨床試驗(yàn)部門自主培養(yǎng)的健康雌性大鼠126只進(jìn)行臨床研究，其中A組40只，采用皮下注射生理鹽水的方式進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，采用灌胃給蒸餾水的方式對(duì)比試驗(yàn)研究；B組40只，采用Poresky法誘導(dǎo)為多昂卵巢綜合征大鼠，給予皮下注射人絨毛膜促性腺激素，采用灌胃給蒸餾水的方式對(duì)比試驗(yàn)研究；C組40只采用Poresky法誘導(dǎo)為多昂卵巢綜合征大鼠，給予皮下注射人絨毛膜促性腺激素，采用灌胃小檗堿進(jìn)行臨床試驗(yàn)。結(jié)果：三組大鼠體重比較，B組和C組均高于A組，比較差異明顯由統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；三組大鼠脂肪濕重和血清膽固醇組間差異明顯(P<0.05)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；三組大鼠空腹30min血糖值、空腹60min血糖值和胰島素敏感指數(shù)比較，B組與A組和C組組間比較差異明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，A組和C組組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論:小檗堿能夠通過(guò)改善多囊卵巢綜合癥大鼠的空腹30min血糖值和胰島素敏感指數(shù)，改善大鼠生殖功能，并且小檗堿對(duì)大鼠的脂肪濕重和血清膽固醇有輕微改善效果，均有研究和應(yīng)用價(jià)值。

多囊卵巢綜合征是生育年齡婦女常見(jiàn)的一種復(fù)雜內(nèi)分泌及代謝異常疾病，會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)月經(jīng)周期不穩(wěn)定、不孕、多毛、痤瘡等內(nèi)分泌疾病[1-2]。目前，臨床對(duì)多囊卵巢綜合癥的治療方式上仍存在缺陷，不能從根本上改善患者的臨床癥狀，只能依靠藥物調(diào)節(jié)治療[3]。臨床醫(yī)學(xué)研究中利用動(dòng)物誘導(dǎo)模型，對(duì)多囊卵巢綜合癥進(jìn)行臨床研究。因此，本次研究中針對(duì)小檗堿對(duì)多囊卵巢綜合征大鼠胰島素抵抗的改善效果進(jìn)行臨床動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，現(xiàn)研究如下。

材料與方法

1 材 料

1.1 動(dòng)物基本資料:針對(duì)本次研究的研究?jī)?nèi)容，選取我院自主培養(yǎng)的健康雌性大鼠126只，進(jìn)行臨床研究。大鼠年齡為24d，體重為140～460g，平均體重為(148.55±10.25)g。選擇的大鼠飼養(yǎng)環(huán)境為室溫20℃～22℃，平均室溫為(21.01±0.35)℃，室內(nèi)濕度為59%～60%，平均室內(nèi)濕度為(59.01±0.11)%。

1.2 多囊卵巢綜合征大鼠培養(yǎng):將本次研究中選擇的126只大鼠進(jìn)行分組，其中A組43只為正常大鼠組，B組83只為誘導(dǎo)多囊卵巢綜合征組，B組采用Poresky法誘導(dǎo)為多囊卵巢綜合征大鼠，動(dòng)物模型制作成功后，給予B組小檗堿，A組蒸餾水進(jìn)行臨床對(duì)比試驗(yàn)研究。針對(duì)B組83只大鼠進(jìn)行多囊卵巢綜合征動(dòng)物模型誘導(dǎo)，對(duì)每一只大鼠行皮下注射1.5U人絨毛膜促性腺激素(江萊生物)，注射22 d；在前11天內(nèi)基于大鼠皮下注射蛋白鋅重組人胰島素注射液0.5U/d，采用逐漸增加的方式，截止到誘導(dǎo)模型的第11 d大鼠體內(nèi)蛋白鋅重組人胰島素注射液的注射量達(dá)到6U/d，并且保持大鼠體內(nèi)的蛋白鋅重組人胰島素注射液在22 d內(nèi)均為6.0U/D。在對(duì)B組大鼠實(shí)施誘導(dǎo)多囊卵巢綜合征動(dòng)物模型的過(guò)程中同時(shí)給予A組大鼠等量的皮下注射勝利鹽水22 d，并且保證在22 d內(nèi)兩組大鼠的生活喂養(yǎng)條件相同，保障實(shí)驗(yàn)的客觀條件的準(zhǔn)確性。

1.3 大鼠模型誘導(dǎo)成功標(biāo)準(zhǔn):22d后再兩組大鼠中各隨機(jī)抽取3只大鼠進(jìn)行顯微鏡下觀察卵巢組織中的卵泡數(shù)量，判斷誘導(dǎo)的成功性。在鏡下B組大鼠的卵巢組織內(nèi)可見(jiàn)卵巢囊性變，卵泡內(nèi)卵母細(xì)胞消失，顆粒細(xì)胞層數(shù)量減少，卵泡呈擴(kuò)張狀態(tài)，至此模型誘導(dǎo)成功，可以進(jìn)行小檗堿對(duì)多囊卵巢綜合征大鼠胰島素抵抗的改善效果的臨床研究。

2 實(shí)驗(yàn)方法 在B組內(nèi)隨機(jī)抽取40只大鼠作為實(shí)驗(yàn)C組，采取灌胃的方式給予C組190大鼠小檗堿190mg/kg·d，A組和B組等量蒸餾水，給藥時(shí)間為20d。

3 觀察指標(biāo)及方法 本次動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)三組大鼠的體重、脂肪濕重、血清膽固醇進(jìn)行組間比較，對(duì)三組大鼠空腹30min血糖值和胰島素敏感指數(shù)進(jìn)行測(cè)量比較。取大鼠尾靜脈血，按照胰島素敏感指數(shù)對(duì)三組大鼠的胰島素敏感指數(shù)計(jì)算。體重測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)是在實(shí)驗(yàn)結(jié)束禁食禁水24h后測(cè)量。

結(jié) 果

1 三組大鼠體重、脂肪濕重和血清膽固醇值比較 本次以大鼠為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷男￠迚A對(duì)多囊卵巢綜合癥胰島素抵抗效果研究中三組體重比較，B組和C組均高于A組，比較差異明顯由統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；A組、B組和C組組間脂肪濕重和血清膽固醇比較，B組最高，C組最低，三組組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 三組大鼠體重、脂肪濕重和血清膽固醇值比較±s)

注：與B組比較，*P<0.05；與C組比較，?P<0.05；與A組比較，▲P<0.05

2 三組大鼠空腹30 min血糖值、60 min血糖值和胰島素敏感指數(shù)比較 三組大鼠空腹30 min 血糖值比較，B組最高，且B組與A組和C組組間比較差異明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但是A組和C組組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；三組大鼠空腹60 min血糖值比較，B組最高，且B組與A組和C組組間比較差異明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但是A組和C組組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；三組大鼠胰島素敏感指數(shù)比較，B組最高，且B組與A組和C組組間比較差異明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但是A組和C組組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表2。

表2 三組大鼠空腹30 min血糖值、60 min血糖值和胰島素敏感指數(shù)比較

注：與B組比較，*P<0.05；與C組比較，?P<0.05；與A組比較，▲P<0.05

討 論

1 三組大鼠體重、脂肪濕重和血清膽固醇值改善觀察 胰島素是胰臟內(nèi)產(chǎn)生的胰島β細(xì)胞受內(nèi)源性，其除了具有降低血糖的效果外，還能夠促進(jìn)脂肪和蛋白質(zhì)的形成[4-5]。因此，在對(duì)多囊卵巢綜合癥大鼠大鼠胰島素抵抗實(shí)驗(yàn)研究中對(duì)大鼠的體重、脂肪濕重和血清膽固醇數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，能夠側(cè)面的反映出小檗堿對(duì)胰島素抵抗的改善效果[6]。本次研究中三組體重比較，B(298.65±20.15)g組和C(270.15±15.68)g組均高于A(210.12±15.68)g組，比較差異明顯由統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由此能夠看出，使用小檗堿能夠輕微的降低多囊卵巢綜合癥大鼠的體重，但是其改善效果并不明顯，沒(méi)有實(shí)際的研究?jī)r(jià)值。而A組、B組和C組組間脂肪濕重和血清膽固醇比較，B組最高，C組最低，三組組間差異明顯，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這一研究結(jié)果表示C組大鼠使用小檗堿后能夠降低脂肪濕重和血清膽固醇，說(shuō)明多囊卵巢綜合癥大鼠體內(nèi)的胰島素分泌降低，從而降低了體內(nèi)脂肪和蛋白質(zhì)的合成數(shù)量[7-8]。因此，說(shuō)明小檗堿對(duì)多囊卵巢綜合癥大鼠胰島素具有抵抗作用，降低了大鼠體內(nèi)的胰島素分泌量。

2 三組大鼠空腹30 min血糖值、60 min血糖值和胰島素敏感指數(shù)改善觀察 空腹血糖值是反應(yīng)胰島β細(xì)胞功能的主要指標(biāo)，也是胰島素基本分泌功能的判定指標(biāo)。而胰島素敏感指數(shù)是胰島素作用的靶器官對(duì)胰島素敏感度下降的一種抵抗指標(biāo)計(jì)算方式，能夠直觀反應(yīng)胰島素抵抗情況。本次研究中B組大鼠60 min血糖值明顯低于30 min血糖值，說(shuō)明患有多囊卵巢綜合癥的大鼠其胰島素抵抗敏感度較低，而A組與C組大鼠試驗(yàn)后30 min血糖值與60 min血糖值基本無(wú)變化，且三組大鼠空腹30 min血糖值、空腹60 min血糖值和胰島素敏感指數(shù)比較，A組和C組組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。該研究結(jié)果進(jìn)一步證明對(duì)多囊卵巢綜合癥的大鼠使用小檗堿后，能夠明顯的改善大鼠的胰島素敏感指數(shù)和降低大鼠空腹血糖值，提升大鼠胰島素抵抗能力[9]。

綜上所述，小檗堿能夠通過(guò)改善多囊卵巢綜合癥大鼠的空腹30 min血糖值和胰島素敏感指數(shù)，改善大鼠生殖功能，并且小檗堿對(duì)大鼠的脂肪濕重和血清膽固醇有輕微改善效果，均有研究和應(yīng)用價(jià)值。

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[2] 王娜梅.小檗堿對(duì)多囊卵巢綜合征大鼠代謝及生殖作用的研究[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2015，35(05):13-17.

[3] 李慕白，劉 暢，匡洪影，等.小檗堿對(duì)多囊卵巢綜合征患者子宮內(nèi)膜胰島素信號(hào)分子的調(diào)節(jié)作用[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2016，2(4):30-32.

[4] 姚莉娟，徐曉娟，王婧婧，等.體現(xiàn)中醫(yī)病因病機(jī)的多囊卵巢綜合征動(dòng)物模型評(píng)價(jià)及篩選[J].世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2014，10(3):2137-2148.

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[7] 劉成麗，王麗麗，曲鳳占，等.右歸丸聯(lián)合小檗堿對(duì)多囊卵巢綜合征胰島素抵抗的研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2015，20(3):3983-3945.

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[9] CICERO AF，TARTAGNI E. Antidiabetic properties of berberine: from cellular pharmacology to clinical effects[J]. HospPract，2012，40(6): 56-63.

(收稿：2016-08-19)

Effect of berberine on insulin resistance in rats with polycystic ovary syndrome

Liu Su， Han Xianmei, Chen Xiao.

Department of Gynecology and Obstetrics of Bao’an Central Hospital(Shenzhen 518000)

Objective: To observe the effect of berberine on insulin resistance in rats with polycystic ovary syndrome. Methods: Our hospital clinical trials unit independent culture of healthy female rats (n = 126) for clinical research, of which a group of 40, were cultured by subcutaneous injection of saline, by gavage to a comparative experimental study on the way of distilled water; group B (n = 40), by poresky induced Doan ovary syndrome rats, given subcutaneous injection of human chorionic gonadotropin gonadal hormone, by gavage to distilled water contrast experimental research; 40 rats in group C by poresky method induced Doan ovary syndrome rats, given subcutaneous injection of human chorionic gonadotropin gonadal hormone by intragastric administration of berberine for clinical trials. Results: The body weight of the rats in the three groups compared in group B and group C were higher than group A, difference significantly by the statistical significance (P< 0.05); three groups of rats fat wet weight and serum cholesterol group difference,P< 0.05, with statistical significance; three groups of rats 30 min fasting blood glucose value, 60min fasting blood glucose value and insulin sensitive index, group B and group A and group C group significant differences and statistical significance (P< 0.05) and between group A and group C group difference no statistical significance (P> 0.05). Conclusion: Berberine can through the improvement in rats with polycystic ovary syndrome of 30 min fasting blood glucose value and insulin sensitive index, improve the reproductive function of rats, and berberine on rat fat wet weight and serum cholesterol has slight improvement, both research and application value.

Berberine Polycystic ovary syndrome Insulin resistance Rats

*深圳市科技計(jì)劃社會(huì)公益項(xiàng)目(2014151)

小檗堿 多囊卵巢綜合征 胰島素抵抗 大鼠

R711.75

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2017.01.064