BpAP1轉(zhuǎn)基因白樺中開花相關(guān)基因的時(shí)序表達(dá)1)

黃海嬌 李慧玉 姜靜

(林木遺傳育種國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(東北林業(yè)大學(xué))，哈爾濱，150040)

BpAP1轉(zhuǎn)基因白樺中開花相關(guān)基因的時(shí)序表達(dá)1)

黃海嬌 李慧玉 姜靜

(林木遺傳育種國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(東北林業(yè)大學(xué))，哈爾濱，150040)

為揭示白樺(Betulaplatyphylla×B.pendula)中BpAP1轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控機(jī)理，以BpAP1過表達(dá)、抑制表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺以及非轉(zhuǎn)基因?qū)φ瞻讟?NT)為試材，對(duì)前期獲得的BpAP1轉(zhuǎn)基因白樺中的6條開花相關(guān)基因(BpPI、BpMADS4、BpMADS5、FT、TFL1和LFY)進(jìn)行了定量PCR分析，探討了白樺BpAP1轉(zhuǎn)錄因子與這6條開花基因的表達(dá)調(diào)控關(guān)系以及它們對(duì)白樺提早開花的影響。結(jié)果表明：非轉(zhuǎn)基因?qū)φ张cBpAP1抑制表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺葉片中BpAP1、BpPI、BpMADS4、BpMADS5、FT、TFL1和LFY的相對(duì)表達(dá)量在不同發(fā)育時(shí)期變化均不顯著。BpAP1過表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺葉片和雄花序中這7條基因的表達(dá)量在不同發(fā)育時(shí)期均顯著高于NT和BpAP1抑制表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺。在BpAP1過表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺中，除BpAP1和TFL1外，其他5條基因在各個(gè)時(shí)期的雄花序中表達(dá)量均為最高，多數(shù)基因的表達(dá)高峰出現(xiàn)在6月15日；另外，BpAP1、BpMADS4、BpMADS5和BpPI在8月15日的雄花序中表達(dá)量也很高；TFL1的相對(duì)表達(dá)量在9月1日的葉片中顯著上調(diào)；LFY基因在生長發(fā)育最旺盛的6、7月份的雄花序中達(dá)到了表達(dá)高峰。BpAP1與BpPI、BpMADS4、BpMADS5、FT、TFL1、LFY這6條開花相關(guān)基因之間均呈極顯著的正相關(guān)。

白樺；BpAP1；開花相關(guān)基因；表達(dá)特性；定量PCR

We used quantitative real-time PCR (qRT-PCR) of several flowering related genes inBpAP1 transgenic birch to study the regulation relationship between BpAP1 transcription factor and other six flowering related genes for revealing regulation mechanism of BpAP1 transcription factor. By qRT-PCR,BpAP1 overexpression lines,BpAP1 suppression lines and non-transgenic line (NT) were used to analyze the expression ofBpAP1,BpPI,BpMADS4,BpMADS5,FT,TFL1 andLFYat the eight developmental stages, and the correlation analysis were employed to reveal the regulation relationship betweenBpAP1 and other six flowering genes for their effect on early flowering in birch. There was no significant change in expression ofBpAP1,BpPI,BpMADS4,BpMADS5,FT,TFL1 andLFYin leaves of NT andBpAP1 suppression lines at different developmental stages. However, expression of these seven genes in leaves and male inflorescences ofBpAP1 overexpression lines was significantly higher than that in NT andBpAP1 suppression lines at different developmental stages.BpMADS4,BpMADS5,FT,BpPIandLFYall ectopically expressed in male inflorescences at the eight developmental stages, and the expression peak of most of genes appeared in 15th June. The expression ofBpAP1,BpMADS4,BpMADS5 andBpPIwas dramatically increased in male inflorescences in 15th August. Relative expression ofTFL1 was significantly upregulated in leaves in 1st September. Expression ofLFYin male inflorescences appeared peak in June and July. There is a significant positive correlation betweenBpAP1 andBpPI,BpMADS4,BpMADS5,FT,TFL1,LFY.

開花是植物從營養(yǎng)生長到生殖生長的一個(gè)重要轉(zhuǎn)折點(diǎn)，花的形成經(jīng)歷了一系列組織分化的過程，在這個(gè)過程中有諸多基因的參與，其中AP1基因編碼一個(gè)MADS-box轉(zhuǎn)錄因子，該基因在控制植物花分生組織特性與花器官的形成過程中起著至關(guān)重要的作用，是調(diào)控植物花發(fā)育的熱點(diǎn)基因之一[1-8]。人們最早研究MADS-box基因家族是通過擬南芥(Arabidopsisthaliana)、矮牽牛(Petuniahybrida)和金魚草(Antirrihiummajus)等經(jīng)典的模式植物進(jìn)行的。根據(jù)MADS-box基因?qū)ㄆ鞴傩纬傻恼{(diào)控作用，提出了著名的花器官發(fā)育ABC模型，后經(jīng)補(bǔ)充發(fā)展成為ABCDE模型[9]，AP1基因是其中的A類基因。自ap1突變體的獲得和AP1基因的成功克隆以來[3,10]，研究者們對(duì)該基因進(jìn)行了20多年的研究，特別是近些年來，隨著研究技術(shù)和研究手段的不斷更新和豐富，人們對(duì)AP1基因的研究更為系統(tǒng)，逐漸形成了一個(gè)以AP1基因?yàn)橹行牡某苫ㄕ{(diào)控網(wǎng)絡(luò)。

擬南芥中，AP1和LFY之間存在正反饋調(diào)節(jié)作用。在lfy突變體中，AP1的起始表達(dá)被推遲，說明LFY對(duì)AP1有正向調(diào)節(jié)作用，反過來，當(dāng)AP1基因過量表達(dá)時(shí)，LFY基因的表達(dá)會(huì)提前，表明AP1基因能夠正向調(diào)節(jié)LFY基因的表達(dá)[11-13]。另外，過量表達(dá)AP1基因能夠降低TFL1基因的表達(dá)。LFY基因和AP1基因之間正反饋調(diào)節(jié)的促進(jìn)作用和TFL1對(duì)這兩條基因的抑制作用能夠共同作用于植物的成花誘導(dǎo)[11]。

AP1能夠正向調(diào)控PI和AP3的表達(dá)，以轉(zhuǎn)錄激活因子的方式?jīng)Q定花瓣特性[14-15]，反過來，PI能與AP3一起，直接結(jié)合到AP1的啟動(dòng)子上，這表明AP1與PI之間的調(diào)控作用是直接的[16]。

歐洲白樺(Betulapendula)中有一些關(guān)于MADS-box基因的報(bào)道，BpMADS2，BpMADS4，BpMADS5和BpAP1同屬于白樺中的MADS-box基因，其中BpMADS2是PI的同源基因，該基因在雄花序中表達(dá)明顯，隨著雄花序的發(fā)育，其表達(dá)逐漸增強(qiáng)；雌花序中表達(dá)微弱甚至檢測不到[17]。BpMADS4、BpMADS5與擬南芥中的FUL基因序列相似，BpMADS4在花、芽和根中均有表達(dá)，其中花序分生組織起始的早期、頂端分生組織和幼嫩的苞片中均有很高的表達(dá)[18]，BpMADS4和BpMADS5在煙草(Nicotianatabacum)中過量表達(dá)均能使轉(zhuǎn)基因植株提前開花[19]，BpMADS4基因在蘋果(Maluspumila)中超量表達(dá)，也能使蘋果提前開花[20]。

本研究團(tuán)隊(duì)前期獲得了BpAP1過表達(dá)和抑制表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺[21-22]，對(duì)轉(zhuǎn)基因白樺組培苗中BpAP1基因及開花相關(guān)基因的表達(dá)情況進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)株系中BpAP1基因的表達(dá)量顯著提高，且BpMADS4、BpMADS5和BpMADS8的表達(dá)量明顯提高，而在抑制表達(dá)株系中，除了BpMADS8外其他開花基因的表達(dá)量均降低，其中BpMADS1、BpMADS5、BpMADS6和BpMADS7最為明顯[23]。另外，對(duì)2年生過表達(dá)白樺和對(duì)照白樺中BpAP1基因的組織表達(dá)特異性進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，該基因在雄花序中的表達(dá)豐度顯著高于其他組織部位[21]。本研究在此基礎(chǔ)上，結(jié)合轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果從開花網(wǎng)絡(luò)途徑中選取了3條與AP1關(guān)系比較緊密的3條基因LFY、FT、TFL1和3條AP1的同族基因BpPI、BpMADS4和BpMADS5(圖1)，以BpAP1過表達(dá)、BpAP1抑制表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺以及非轉(zhuǎn)基因?qū)φ瞻讟鍨樵嚥?，?duì)BpAP1基因和這6條開花相關(guān)基因在不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)情況進(jìn)行了分析，探討白樺BpAP1轉(zhuǎn)錄因子與上述基因的調(diào)控關(guān)系，為揭示白樺BpAP1轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控機(jī)理提供參考。

1 材料與方法

1.1 植物材料

2年生BpAP1過表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺(A2、A5株系)、BpAP1抑制表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺(FA10、FA11株系)以及非轉(zhuǎn)基因?qū)φ瞻讟?NT)。

1.2 取材方法

于2012年6月至9月每月初和每月中旬(6月1日，6月15日，…，9月15日)分別取BpAP1過表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺的葉片和雄花序、抑制表達(dá)白樺以及非轉(zhuǎn)基因?qū)φ瞻讟宓娜~片為材料進(jìn)行RNA的提取，葉片均為從植株頂端向下數(shù)第3或第4片葉，為剛剛完全展開的成熟葉片。

圖1 開花調(diào)控網(wǎng)絡(luò)[24]

1.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR

采用CTAB法分別提取各個(gè)時(shí)期BpAP1過表達(dá)、抑制表達(dá)白樺以及NT的總RNA[25]，使用ReverTre Ace?qPCR RT Kit(Toyobo，Osaka，Japan)將提取的總RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。反轉(zhuǎn)錄體系為,RNA 0.5 g，65 ℃變性5 min；加入4×DNA Master Mix 2 L，37 ℃反應(yīng)5 min；再加入5×RT Master Mix 2 L，使總體系為10 L。反應(yīng)程序?yàn)?37 ℃，15 min；50 ℃，5 min；98 ℃，5 min。逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物稀釋10倍，用作定量PCR的模板，以18SrRNA和α-Tubulin為內(nèi)參基因，對(duì)選取的開花基因進(jìn)行定量驗(yàn)證。PCR反應(yīng)體系為：2×SYBR Green Realtime PCR Master Mix 10 L(Toyobo，Osaka，Japan)、模板2 L、上游引物和下游引物(10 mol·L-1)各1 L、用去離子水補(bǔ)足體積20 L。反應(yīng)程序?yàn)?94 ℃ 30 s，94 ℃ 12 s、60 ℃ 1 min，循環(huán)45次，溫度由60 ℃開始至95 ℃終止，繪制熔解曲線。在ABI 7500實(shí)時(shí)定量PCR儀上完成qRT-PCR，重復(fù)3次，用2-ΔΔCt方法對(duì)定量結(jié)果進(jìn)行分析[26]，引物序列見表1。

1.4 表達(dá)量的相關(guān)性分析

采用SPSS16.0對(duì)BpAP1基因及其他6個(gè)開花相關(guān)基因的表達(dá)量進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié)果與分析

根據(jù)以往研究者們在擬南芥中建立的開花調(diào)控網(wǎng)絡(luò)和轉(zhuǎn)基因白樺的轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果，選取了BpPI、BpMADS4、BpMADS5、FT、TFL1、LFY這6條開花相關(guān)基因以及BpAP1基因進(jìn)行了8個(gè)不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)分析。

表1 qRT-PCR引物序列

2.1 BpAP1和6條開花相關(guān)基因的時(shí)序表達(dá)特性

分別以ds1時(shí)期非轉(zhuǎn)基因?qū)φ瞻讟?NT)葉片中BpAP1、BpPI、BpMADS4、BpMADS5、FT、TFL1和LFY基因的表達(dá)量為對(duì)照，對(duì)參試株系不同發(fā)育時(shí)期的葉片及雄花序中這7條基因的相對(duì)表達(dá)量進(jìn)行比較。結(jié)果表明：NT與抑制表達(dá)白樺葉片中BpAP1基因的相對(duì)表達(dá)量在不同發(fā)育時(shí)期的變化不顯著，BpAP1相對(duì)表達(dá)量為0.048～20.46；而BpAP1過表達(dá)白樺的2個(gè)株系則不同，其葉片及雄花序中BpAP1基因的表達(dá)量各時(shí)期均顯著高于NT和BpAP1抑制表達(dá)白樺，并且該基因在不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)規(guī)律基本相同，其中A2株系的雄花序中BpAP1表達(dá)量在6月15日顯著上調(diào)，分別是NT和BpAP1抑制表達(dá)株系的1 406.28、1 491.88倍(圖2)。

NT.非轉(zhuǎn)基因?qū)φ瞻讟?；A2、A5.BpAP1過表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺；FA10、FA11.BpAP1抑制表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺；L.葉片；F.雄花序。

圖2BpAP1基因在不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)量

BpPI、BpMADS4、BpMADS5與BpAP1同屬于MADS-box基因家族中的成員，其中PI是開花ABC模型中的B類基因，主要控制花瓣和雄蕊的發(fā)育。從圖3A中可以看出：不同發(fā)育時(shí)期的NT、BpAP1抑制表達(dá)白樺與BpAP1過表達(dá)白樺葉片中BpPI的相對(duì)表達(dá)量(0.36～52.30)變化不顯著；而BpAP1過表達(dá)白樺雄花序中BpPI相對(duì)表達(dá)量各時(shí)期均顯著高于NT、BpAP1抑制表達(dá)白樺和BpAP1過表達(dá)白樺葉片(7月1日和8月1日除外)，并且BpAP1過表達(dá)白樺雄花序中BpPI的相對(duì)表達(dá)量在6月15日、8月15日和9月1日顯著上調(diào)，分別是NT的79.05、186.98、204.35倍。

BpMADS4和BpMADS5這2條基因的表達(dá)模式趨于一致：8個(gè)發(fā)育時(shí)期中NT與BpAP1抑制表達(dá)白樺葉片中BpMADS4和BpMADS5基因的相對(duì)表達(dá)量變化不顯著；而BpAP1過表達(dá)白樺雄花序中這2條基因的相對(duì)表達(dá)量均顯著高于NT和BpAP1抑制表達(dá)白樺(8月1日和9月15日除外)，且在6月15日，A2株系雄花序中這2條基因的相對(duì)表達(dá)量均達(dá)到最高，BpMADS4基因的表達(dá)量是NT的139.44倍；BpMADS5基因的表達(dá)量是NT的414.91倍(圖3B、C)。

NT與BpAP1抑制表達(dá)白樺葉片中FT、TFL1和LFY基因的相對(duì)表達(dá)量在不同發(fā)育時(shí)期的變化均不顯著，分別為0.69～69.79、0.46～9.70和0.33～15.51(圖3D、E、F)；而BpAP1過表達(dá)白樺葉片和雄花序中FT的相對(duì)表達(dá)量均顯著高于NT和BpAP1抑制表達(dá)白樺(8月1日除外)，并且在生長發(fā)育最旺盛的6月15日和7月15日出現(xiàn)表達(dá)高峰，在6月15日A2株系雄花序中FT的相對(duì)表達(dá)量最高，分別是NT和BpAP1抑制表達(dá)白樺中該基因表達(dá)量的630.51、617.71倍(圖3D)；A2株系葉片中TFL1的相對(duì)表達(dá)量在6月中旬和9月1日均顯著高于NT和BpAP1抑制表達(dá)株系，9月1日最為明顯，分別是NT和BpAP1抑制表達(dá)株系的39.67、13.78倍(圖3E)；BpAP1過表達(dá)白樺雄花序中LFY基因的相對(duì)表達(dá)量要高于NT和BpAP1抑制表達(dá)白樺(8月1日和9月15日除外)，其中A2株系雄花序中LFY基因的表達(dá)量在6月1日和9月1日顯著上調(diào)，分別是NT的32.53、10.71倍(圖3F)。

2.2 開花相關(guān)基因的表達(dá)相關(guān)性

BpAP1基因的過量表達(dá)引起了白樺的提早開花(圖4)[21]，為了更好地了解BpAP1基因與其他6條開花相關(guān)基因之間的關(guān)系，對(duì)這7條基因的相對(duì)表達(dá)量進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：BpAP1與其他6條基因之間均呈極顯著的正相關(guān)，其中與FT基因的相關(guān)性最高(r=0.611；P<0.01；n=168)，說明BpAP1基因的過量表達(dá)提高了FT基因的表達(dá)量；另外，除BpMADS4與TFL1相關(guān)性不顯著，BpMADS5與TFL1、FT與LFY、TFL1與BpPI以及BpPI與LFY之間呈顯著的正相關(guān)以外，其他兩兩之間均呈極顯著的正相關(guān)，說明這些開花基因不僅與AP1之間存在著緊密的聯(lián)系，而且它們彼此之間也存在聯(lián)系，這些基因共同影響了白樺的提早開花(表2)。

NT.非轉(zhuǎn)基因?qū)φ瞻讟澹籄2、A5.BpAP1過表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺；FA10、FA11.BpAP1抑制表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺；L.葉片，F(xiàn).雄花序。

A.轉(zhuǎn)基因白樺組培瓶中開花；B.轉(zhuǎn)基因白樺移栽2個(gè)月后開出雄花；C.轉(zhuǎn)基因白樺的果穗；D.非轉(zhuǎn)基因?qū)φ瞻讟濉?/p>

開花相關(guān)基因BpAP1BpMADS4BpMADS5FTTFL1BpPILFYBpAP11．0000．594??0．565??0．611??0．431??0．399??0．601??BpMADS4─1．0000．844??0．419??0．1410．653??0．448??BpMADS5──1．0000．484??0．264?0．673??0．547??FT───1．0000．404??0．378??0．284?TFL1────1．0000．271?0．518??BpPI─────1．0000．292?LFY──────1．000

注：** 為0.01水平上極顯著相關(guān)；*為0.05水平上顯著相關(guān)。

3 結(jié)論與討論

本研究通過對(duì)BpAP1以及BpPI、BpMADS4、BpMADS5、FT、TFL1、LFY基因在BpAP1過表達(dá)、抑制表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺以及非轉(zhuǎn)基因?qū)φ瞻讟逯械谋磉_(dá)情況進(jìn)行分析，探討了這幾條基因之間的表達(dá)調(diào)控關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，BpAP1過表達(dá)株系葉片和雄花序中這7條基因的表達(dá)量在不同發(fā)育時(shí)期均顯著高于NT和BpAP1抑制表達(dá)轉(zhuǎn)基因白樺，且BpAP1基因在各個(gè)時(shí)期過表達(dá)株系的葉片和雄花序中均處于高表達(dá)水平；除BpAP1和TFL1外，其他5條基因的表達(dá)高峰均出現(xiàn)在6月中旬的雄花序中；BpAP1基因與其他6條開花相關(guān)基因之間均呈極顯著的正相關(guān)。總之，AP1基因的過量表達(dá)引起了白樺的提早開花，同時(shí)促使FT、PI、MADS4和MADS5基因的表達(dá)量在多數(shù)發(fā)育時(shí)期有著明顯地上調(diào)表達(dá)。

花序分生組織和花分生組織特異基因在木本植物中的研究很少，其中AP1、TFL1、LFY在果樹中有一些研究表明，AP1、LFY與開花呈正相關(guān)，而TFL1則與開花呈負(fù)相關(guān)[27-29]。本研究發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)株系中AP1基因的表達(dá)量較NT有明顯地提高；過表達(dá)株系中LFY基因的表達(dá)量在大部分時(shí)期要高于NT和BpAP1抑制表達(dá)株系；TFL1基因的表達(dá)量除在9月初較NT和BpAP1抑制表達(dá)株系上調(diào)之外，其他時(shí)期的表達(dá)量變化均不顯著；因此認(rèn)為這些基因表達(dá)量的變化可能對(duì)于白樺在生長發(fā)育旺盛的6月至9月起到了重要的作用。

有很多研究表明，F(xiàn)T是一個(gè)能直接從葉片運(yùn)送到莖尖的長距離蛋白[30]，它一般會(huì)通過與FD形成一個(gè)復(fù)合體在莖尖特異表達(dá)，同時(shí)也能激活下游的MADS-box基因，如AP1[31-32]。有研究表明，F(xiàn)T基因的過量表達(dá)能夠促進(jìn)擬南芥提早開花[33]。BpAP1過表達(dá)株系中FT基因的表達(dá)發(fā)生了明顯的上調(diào)，而BpAP1抑制表達(dá)株系中FT的表達(dá)量則明顯下降，這表明AP1雖然位于FT的下游，但該基因在白樺中的過量表達(dá)對(duì)于FT可能也會(huì)有影響，因此認(rèn)為二者的高表達(dá)都可能縮短白樺的童期，引起早花現(xiàn)象。

PISTILLATA是ABC模型中的B類基因，在擬南芥中主要控制花瓣和雌蕊的發(fā)育；玉米中的PI基因在種子、葉片和根中均有表達(dá)[34]；而葡萄中的PI基因在不同發(fā)育時(shí)期的花序中均有表達(dá)，但果實(shí)、根和葉片中檢測不到該基因的表達(dá)，定量PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn)葡萄花序中PI基因的表達(dá)量很高，是葉片和根中表達(dá)量的400倍[35]；BpMADS2在歐洲白樺雄花序中表達(dá)明顯，隨著雄花序的發(fā)育，BpMADS2的表達(dá)逐漸增強(qiáng)，雌花序中表達(dá)很弱甚至檢測不到[17]。本研究對(duì)BpPI基因進(jìn)行表達(dá)分析發(fā)現(xiàn)，該基因在白樺生長發(fā)育的8個(gè)時(shí)期中雄花序中表達(dá)量均為最高(圖2B)；雌、雄花序發(fā)育的3個(gè)時(shí)期中，BpAP1過表達(dá)白樺中BpPI的表達(dá)量高于相應(yīng)時(shí)期WT中該基因的表達(dá)量[22]，這表明BpPI基因是花器官特征基因，能夠控制白樺雄蕊的發(fā)育。

盡管人們對(duì)花的形態(tài)結(jié)構(gòu)和建成有了相當(dāng)?shù)恼J(rèn)識(shí)，但對(duì)植物由營養(yǎng)生長向生殖生長轉(zhuǎn)變機(jī)理認(rèn)識(shí)還很少，尤其是木本植物，開花過程中基因間的相互關(guān)系很多還僅僅基于遺傳學(xué)的假設(shè)。本研究主要對(duì)BpAP1基因和BpPI、BpMADS4、BpMADS5、FT、TFL1、LFY這6條開花相關(guān)基因在不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)情況進(jìn)行了分析，探討白樺BpAP1轉(zhuǎn)錄因子與上述基因的調(diào)控關(guān)系，為揭示白樺BpAP1轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控機(jī)理提供參考。當(dāng)然，植物生長發(fā)育過程中涉及到的代謝途徑和基因之間的關(guān)系是極其復(fù)雜的，后續(xù)將采用CHIP技術(shù)和轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)對(duì)BpAP1轉(zhuǎn)基因白樺進(jìn)行研究，構(gòu)建轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，進(jìn)一步了解AP1基因的功能。

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Quantitative Expression Analysis of Several Flowering-related Genes inBpAP1 Transgenic Birch (Betulaplatyphylla×Betulapendula)//

Huang Haijiao, Li Huiyu, Jiang Jing

(State Key Laboratory of Tree Genetics and Breeding, Northeast Forestry University, Harbin 150040, P. R. China)//Journal of Northeast Forestry University，2017,45(1)：1-6.

Birch;BpAP1; Flowering-related genes; Expression pattern; qRT-PCR

1)國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31570647)。

黃海嬌，女，1985年10月生，林木遺傳育種國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(東北林業(yè)大學(xué))，工程師。E-mail：haijiao_sea@163.com。

姜靜，林木遺傳育種國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(東北林業(yè)大學(xué))，教授。E-mail：jiangjing1960@126.com。

2016年11月3日。

S792.153；Q344+.13

責(zé)任編輯：程 紅。