胃腺癌中磷脂酶Cε1和基質(zhì)金屬蛋白酶-9表達(dá)及相關(guān)性

史 璇 張 鑫 朱金朋 邸 巍 田 蕾

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院消化內(nèi)科三病區(qū)，遼寧 錦州 121000)

胃腺癌中磷脂酶Cε1和基質(zhì)金屬蛋白酶-9表達(dá)及相關(guān)性

史 璇 張 鑫 朱金朋 邸 巍 田 蕾

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院消化內(nèi)科三病區(qū)，遼寧 錦州 121000)

目的檢測(cè)胃腺癌中磷脂酶Cε(PLCE)1和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9的表達(dá)特征，分析其意義。方法經(jīng)病理醫(yī)師確診為胃腺癌患者57例為觀察組，正常胃黏膜組織18例為對(duì)照組，均留取完整的臨床資料及術(shù)后蠟塊組織。采用免疫組化方法檢測(cè)兩組中PLCE1和MMP-9的表達(dá)。結(jié)果觀察組PLCE1和MMP-9陽性率明顯高于對(duì)照組，觀察組中PLCE1和MMP-9表達(dá)與腫瘤脈管累犯和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，PLCE1表達(dá)與腫瘤細(xì)胞增殖有關(guān)。二者均與腫瘤性別、年齡無明顯相關(guān)性。相關(guān)分析顯示觀察組中PLCE1和MMP-9無明顯相關(guān)性。結(jié)論胃腺癌中PLCE1和MMP-9高表達(dá)對(duì)腫瘤形成和進(jìn)展有一定促進(jìn)作用，二者可能通過各自途徑起作用。

胃腺癌；磷脂酶Cε1；基質(zhì)金屬蛋白酶-9；免疫組化

胃腺癌常見于中老年人，是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，腫瘤具有高增殖性、高侵襲性的特點(diǎn)，其遷移能力強(qiáng)〔1〕，病變形成過程中轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白出現(xiàn)明顯變化。磷脂酶Cε(PLCE)1是PLC基因編碼的蛋白，也是磷脂酰肌醇信號(hào)通路中有明顯作用的關(guān)鍵酶〔2，3〕。學(xué)者在不同的腫瘤中發(fā)現(xiàn)其異常表達(dá)，并對(duì)腫瘤的形成及進(jìn)展有一定作用〔4〕?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9是MMPs的成員之一，具有降解基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)的作用，其高表達(dá)時(shí)可以明顯破壞腫瘤轉(zhuǎn)移的屏障，促進(jìn)腫瘤侵襲和遷移〔5〕。本文關(guān)注PLCE1和MMP-9在胃腺癌中的表達(dá)特征，分析二者相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1一般資料 2012年1月至2016年10月錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院確診為胃腺癌的患者57例為觀察組，均行根治手術(shù)治療，并經(jīng)病理醫(yī)師明確診斷，同時(shí)符合世界衛(wèi)生組織診斷標(biāo)準(zhǔn)。年齡41～80歲，平均61.4歲；高分化10例，中分化15例，低分化32例。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有其他器官惡性腫瘤；②有消化系統(tǒng)發(fā)育異常；③有家族遺傳病史。距腫瘤邊緣>5 cm的非腫瘤性胃黏膜組織18例為對(duì)照組，其中男9例，女9例，年齡43～76歲，平均57.7歲。兩組常規(guī)資料無明顯差異。

1.2兩組中PLCE1和MMP-9表達(dá)的檢測(cè)方法 術(shù)后組織立即應(yīng)用甲醛溶液固定24～36 h，取材(切取2～3 mm厚的組織)、脫水、石蠟包埋，切片后應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)PLCE1和MMP-9的表達(dá)，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，按說明書進(jìn)行操作，做好質(zhì)控。

1.3PLCE1和MMP-9結(jié)果的判讀 PLCE1和MMP-9的陽性表達(dá)部位在細(xì)胞質(zhì)中，以呈現(xiàn)淡黃到棕黃色顆粒樣物為陽性反應(yīng)細(xì)胞。在低倍鏡下選擇上皮細(xì)胞分布集中且染色明顯的區(qū)域進(jìn)行觀察，然后在高倍鏡下選擇5個(gè)視野，計(jì)算陽性率，取平均值。陽性率<10%為陰性，≥10%為陽性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件行χ2檢驗(yàn)和線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組中PLCE1和MMP-9陽性率的比較 觀察組中PLCE1和MMP-9的表達(dá)〔30例(52.6%)，35例(61.4%)〕明顯高于對(duì)照組〔1例(5.67)，0例，P<0.01〕。

2.2觀察組不同臨床病理特征中PLCE1和MMP-9陽性率的比較 觀察組中PLCE1和MMP-9表達(dá)與腫瘤脈管累犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，PLCE1的表達(dá)與腫瘤細(xì)胞的增殖指數(shù)有關(guān)。二者均與患者的性別、年齡無明顯相關(guān)性。見表1。

2.3觀察組中PLCE1和MMP-9的相關(guān)性 PLCE1和MMP-9表達(dá)無明顯相關(guān)性(P>0.05)。

3 討 論

胃腺癌病變形成中涉及較多的遺傳易感因素、基因組學(xué)和蛋白組學(xué)的表達(dá)異?！?〕，進(jìn)一步研究其與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系有重要性。PLCE1基因定位于常染色體10q23.32～q24.1的一個(gè)單拷貝基因，全長334.3 kb，包含34個(gè)外顯子，其編碼的蛋白是一種正向同源蛋白，既可以被上游的Ras家族GTP酶調(diào)節(jié)，又是H-ras效應(yīng)的蛋白質(zhì)分子〔7，8〕，其下游信號(hào)不僅可引起鈣的流動(dòng)和激活蛋白激酶C，還可以作為Ras超家族GTP酶的鳥苷酸交換因子，對(duì)細(xì)胞的生長和分化起重要調(diào)控作用〔9〕。另外PLCE1還可以被各種G蛋白水解，引起細(xì)胞內(nèi)儲(chǔ)存鈣離子的釋放，影響某些基因的表達(dá)水平，對(duì)細(xì)胞的生長、分化和遷移等進(jìn)程進(jìn)行有效調(diào)節(jié)〔10，11〕。MMPs是對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)進(jìn)行降解的一組成員，MMP-9是家族中的經(jīng)典成員，是明膠酶類的蛋白〔12〕，在腫瘤性病變形成和進(jìn)展時(shí)，MMP-9的表達(dá)升高，此時(shí)MMP-9的催化效率更高、對(duì)底物的專一性更強(qiáng)，使腫瘤轉(zhuǎn)移的屏障降解〔13〕。近來研究認(rèn)為MMP-9有3個(gè)作用特征：①轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)；②酶原活化；③活化后的調(diào)節(jié)〔14，15〕。這些作用均與腫瘤的生長及遷移密切相關(guān)。

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果提示PLCE1和MMP-9二者表達(dá)升高可以促進(jìn)胃腺癌的形成過程，二者均為腫瘤生長的促進(jìn)基因。PLCE1和MMP-9二者與腫瘤的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，尤其二者高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞對(duì)脈管的侵犯，同時(shí)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞在脈管內(nèi)播散。PLCE1是促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖的重要蛋白，此時(shí)腫瘤細(xì)胞繁殖活躍，腫瘤細(xì)胞分化程度降低，腫瘤的體積增大。本文結(jié)果提示PLCE1和MMP-9二者無明顯協(xié)同作用，二者雖然對(duì)轉(zhuǎn)移均有一定的促進(jìn)作用，但PLCE1和MMP-9可能是通過各自的調(diào)節(jié)途徑起作用的。MMP-9對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移的作用更為直接，其高表達(dá)時(shí)使腫瘤轉(zhuǎn)移的通道打開，腫瘤細(xì)胞易于離開原發(fā)灶，種植于其他部位形成轉(zhuǎn)移灶，此時(shí)腫瘤的分期增高，預(yù)后差。MMP-9對(duì)腫瘤性進(jìn)展中的作用還表現(xiàn)為對(duì)腫瘤間質(zhì)血管生成的作用，MMP-9可以使間質(zhì)中的小血管內(nèi)皮細(xì)胞繁殖，細(xì)胞的管腔形成能力增強(qiáng)〔16，17〕，為腫瘤通過脈管播散提供了直接的通道。

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R73

A

1005-9202(2017)23-5860-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.23.051

遼寧省科學(xué)技術(shù)廳項(xiàng)目(No.2015020329)

田 蕾(1976-)，女，博士，副主任醫(yī)師，主要從事消化系統(tǒng)疾病研究。

史 璇(1983-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事消化系統(tǒng)疾病研究。

〔2016-11-25修回〕

(編輯 苑云杰)