營養(yǎng)與免疫干預(yù)的非酒精性脂肪性肝病動(dòng)物模型研究進(jìn)展①

侯 露 張 娟 彭曉蔓 劉朝奇

(三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院，宜昌443002)

營養(yǎng)與免疫干預(yù)的非酒精性脂肪性肝病動(dòng)物模型研究進(jìn)展①

侯 露 張 娟 彭曉蔓 劉朝奇

(三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院，宜昌443002)

隨著人們生活水平的不斷提高，生活習(xí)慣和環(huán)境等多種因素的改變，非酒精性脂肪性肝病(Nonal-coholic fatty liver disease,NAFLD)的發(fā)病率逐年升高，發(fā)病年齡也越來越年輕化，除中老年人以外，年輕人也成為發(fā)病的高危人群；非酒精性脂肪肝已嚴(yán)重威脅著人類的公共健康。進(jìn)行 NAFLD 的發(fā)病機(jī)制和防治基礎(chǔ)研究，都需要一種理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。本文通過查閱文獻(xiàn)資料，對目前廣泛研究及前沿性的NAFLD多種動(dòng)物模型的研究進(jìn)行綜述，為研究防治 NAFLD 提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。

NAFLD是一種無過量飲酒史的以肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞脂肪變性和脂肪貯積為特征的臨床病理綜合征，疾病譜隨病程的進(jìn)展而表現(xiàn)不一，包括單純性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎(Nonalcoholic steatohepatitis,NASH)、肝硬化甚至肝細(xì)胞癌，是導(dǎo)致慢性肝病最常見的原因[1]。隨著人們飲食結(jié)構(gòu)、生活方式的改變，NAFLD的發(fā)病率大幅上升。NAFLD和代謝綜合征關(guān)系密切，NAFLD是代謝綜合征的肝臟表現(xiàn)。同時(shí)，在2型糖尿病(Diabetes mellitus,DM)患者中NAFLD的患病率高達(dá)75%，己成為危害人類健康最常見的肝病[2]。因此，NAFLD及伴隨代謝性疾病的高發(fā)病率己成為全球關(guān)注的醫(yī)學(xué)研究熱點(diǎn)。

NAFLD的分子機(jī)制尚未清楚，可能的機(jī)制是“二次打擊”學(xué)說。其假說是第一次打擊涉及肝細(xì)胞內(nèi)脂類的積累(脂肪變性)，從而激活免疫細(xì)胞；二次打擊涉及肝臟炎癥，導(dǎo)致NASH和其他嚴(yán)重的表現(xiàn)，而炎癥反應(yīng)是NAFLD及代謝綜合征的共有特征。

肝臟是天然免疫系統(tǒng)的重要部位，它有各種各樣的免疫細(xì)胞，如淋巴細(xì)胞、 Kupffer細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、自然殺傷(NK)細(xì)胞和NKT細(xì)胞。肝臟也合成參與天然免疫的多種急性期蛋白、補(bǔ)體因子及模式識別受體(PRRs)，調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫反應(yīng)。游離脂肪酸水平升高，氧化損傷，肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的死亡，腸通透性改變都能激發(fā)肝臟相應(yīng)部位的免疫反應(yīng)；Kupffer細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、T細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞激活，釋放出細(xì)胞因子刺激肝臟星狀細(xì)胞，從而啟動(dòng)了組織纖維化修復(fù)反應(yīng)，促進(jìn)了NAFLD的發(fā)生和發(fā)展。 由組織損傷誘導(dǎo)的NAFLD激活了大量免疫細(xì)胞，導(dǎo)致非酒精性的脂肪性肝炎，進(jìn)一步會(huì)導(dǎo)致肝纖維化、肝硬化、肝細(xì)胞癌等疾病的發(fā)展,同時(shí)也與心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān)[3]。

為了研究NAFLD的發(fā)生發(fā)展機(jī)制，各種動(dòng)物模型已廣泛應(yīng)用，一方面從高營養(yǎng)引起代謝紊亂制作模型即營養(yǎng)模型，是國內(nèi)學(xué)者研究較多的造模方法，但存在造模周期長，成本高，不符合臨床特征等缺點(diǎn)。越來越多的研究者通過基因操作方法建立NAFLD模型，也是當(dāng)下研究的熱門，尤其是對免疫細(xì)胞相關(guān)基因進(jìn)行敲除或過表達(dá)，改變肝臟免疫細(xì)胞的功能，同時(shí)進(jìn)行營養(yǎng)干預(yù)，使造模的準(zhǔn)確度和效率可明顯提升即免疫缺陷聯(lián)合營養(yǎng)模型，對此我們分別對如下兩個(gè)方面進(jìn)行綜述。

1 營養(yǎng)誘導(dǎo)NAFLD模型

代謝綜合征是NAFLD的前驅(qū)癥狀和誘導(dǎo)因素，因此通過飲食干預(yù)導(dǎo)致代謝紊亂誘導(dǎo)NAFLD模型是目前最為常見的動(dòng)物模型，其主要原理是通過攝入過多熱量，引起肥胖，導(dǎo)致肝細(xì)胞脂肪變性。

1.1 高脂飲食 脂肪提供總能量的比例為45%～75%。高脂飲食是造成代謝綜合征的直接且有效的方式，誘導(dǎo)的模型在病因、病理及發(fā)病背景方面與人類 NAFLD 發(fā)病機(jī)制最相似。該模型具有肥胖、高脂血癥、胰島素抵抗等代謝綜合征表現(xiàn)，鏡下可見大細(xì)胞性脂肪變性、肝小葉炎癥、氣球樣變性、纖維化、Mallory 小體。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，肥胖和糖尿病是非酒精性脂肪性肝炎和肝細(xì)胞癌發(fā)展的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。高脂模型(脂肪、碳水化合物和蛋白質(zhì)提供總能量的比例分別為71%、11%和18%)在生化方面較高程度地模擬了人NASH。有研究顯示模型產(chǎn)生了氧化應(yīng)激及重要致炎因子TNF-α表達(dá)增強(qiáng)。當(dāng)然，模型的缺點(diǎn)是許多NASH所具有的病理形態(tài)特點(diǎn)不明顯，如炎癥病灶較分離，脂肪變性的程度較輕，最重要的是無法觀察到肝組織的纖維化。Xu等[4]改良了模型飲食的成分與方法，采取豬油與膽固醇飲食，在第4周出現(xiàn)肝脂肪變性，第12～48周檢測到肝炎變現(xiàn)，具有一定效果，在第24周可觀察到明顯的肝竇周纖維化。

缺乏肝纖維化表現(xiàn)和造模時(shí)間長是目前此模型面臨的最大挑戰(zhàn)。采取胃內(nèi)插管，顯著改善了高脂食物的攝取率及利用率，采用這種方法，模型會(huì)出現(xiàn)一系列癥狀，如高血糖、高胰島素血癥、高瘦素血癥、葡萄糖耐受不良以及胰島素抵抗。但組織病理學(xué)分析顯示肝臟僅有輕度的脂肪變性。加入反式脂肪，模型的病理變化與人NASH的特征有更多的相似之處，極大地提高了病理水平的模擬度。但此類模型存在一大缺點(diǎn)：從飲食攝入方式的角度來說，乳劑完全由人工直接灌入胃中，因而在臨床和病因?qū)W方面模擬程度差?？偟膩碇v，在嚙齒動(dòng)物中高脂肪飲食可以很好地復(fù)制代謝參數(shù)的改變來觀察人類脂肪肝,但肝臟病理結(jié)果并不是那么嚴(yán)重[5]。值得注意的是，Kohli等[6]在高脂肪飲食中加入一定比例的碳水化合物，喂養(yǎng)的小鼠肝臟氧化應(yīng)激增強(qiáng),肝組織巨噬細(xì)胞浸潤、纖維化的發(fā)展也都明顯優(yōu)于單純的高脂飲食建模的小鼠。隨后，飲食中加入果糖運(yùn)用類似的模式獲得肝細(xì)胞損傷、炎癥和纖維化的NASH的小鼠模型也被報(bào)道[7]。

1.2 果糖飲食 果糖不同于葡萄糖，它分布于全身的組織并被廣泛利用，果糖主要在肝臟代謝，并且它能促進(jìn)氧化損傷和脂質(zhì)過氧化。一方面，其中的不飽和脂質(zhì)氧化降解為炎癥部位的各種介質(zhì)。另一方面脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的最終產(chǎn)物是4-羥基壬烯酸(4-hydroxynonenal，4-HNE)，其表現(xiàn)出對中性粒細(xì)胞趨化活性。有研究發(fā)現(xiàn)長期適量的果糖攝入能使從腸道進(jìn)入門靜脈的脂多糖的轉(zhuǎn)運(yùn)增加，此外，還能引起細(xì)菌過度生長以及腸滲透性的增加。這可能會(huì)導(dǎo)致肝Kupffer細(xì)胞活化，在肝臟中形成活性氧(ROS)，并通過核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)誘導(dǎo)肝的TNF-α表達(dá)。TNF-α可以通過與肝細(xì)胞膜上的TNF-α Ⅰ型受體結(jié)合，促進(jìn)肝細(xì)胞的凋亡，還可以抑制磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)活性，降低葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)子(GLUT)的基因表達(dá)，誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生胰島素抵抗，使機(jī)體空腹血糖含量增加。

在小鼠飲食中增加了30%的果糖，8周后顯示甘油三酯水平增加4倍，體重也有顯著增加，并且肝細(xì)胞發(fā)生脂肪變性[8]。雖然沒有明確的動(dòng)物模型研究表明果糖可以改變和NASH有關(guān)的代謝指標(biāo),但果糖被證實(shí)改變的生化指標(biāo)與促進(jìn)胰島素抵抗密切相關(guān)[9]。

有實(shí)驗(yàn)在果糖和脂肪的基礎(chǔ)上，加入膽固醇的飼料，得到了更好的小鼠模型：由脂肪占總能量的40%(12%的飽和脂肪酸,0.2%的膽固醇)和含有高果糖玉米糖漿的飲用水(42 g/L的濃度)組成，這個(gè)營養(yǎng)建模也被稱為高脂肪、果糖和膽固醇(FFC)飲食。FFC與高脂飲食相比[脂肪占總能量的60% (1%的飽和脂肪酸)]，兩種飲食都能夠引起特征性的代謝綜合征癥狀：肥胖、胰島素抵抗和脂肪變性，但是高脂飲食沒有肝纖維化的改變，F(xiàn)FC飲食小鼠病理結(jié)果展示了肝細(xì)胞有明顯的氣球樣變和進(jìn)行性的纖維化，同時(shí)與纖維化、炎癥、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及脂性凋亡相關(guān)基因的表達(dá)也有增加[10]。FFC飲食強(qiáng)調(diào)了果糖和膽固醇膳食成分的添加對高脂飲食建立NAFLD和NASH模型的巨大貢獻(xiàn)[10]。因此在小鼠NASH模型的建立中，增加果糖到營養(yǎng)過剩的飲食能夠促進(jìn)肝臟纖維化、肝細(xì)胞氣球樣病變、脂肪組織炎癥[11]。

自然界中的果糖以游離形式大量存在于水果漿汁和蜂蜜中。20世紀(jì) 70 年代高果糖玉米糖漿(HFCS)引入食品加工業(yè)后，果糖大量存在于軟飲料、糖果等食品中，如可樂HFCS熱量比高達(dá)50%，果糖的攝入量逐年增高，特別是一些青少年以軟飲料代水飲用。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)高果糖攝入與肥胖、血脂異常、代謝綜合征發(fā)病相關(guān)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明，高果糖飲食可致血脂異常、血糖增高、腹型肥胖以及血壓升高，表現(xiàn)為典型的代謝綜合征[12]。

1.3 蛋氨酸-膽堿缺乏飲食(Methionine and choline deficiency,MCD) 脂肪和蔗糖提供總能量的比例分別為10%和40%，蛋氨酸和膽堿在肝臟 β-氧化和VLDL生產(chǎn)的過程中起十分重要的作用。MCD飲食通過增加游離脂肪酸攝取和降低極低密度脂蛋白合成而導(dǎo)致肝內(nèi)脂肪蓄積，造成肝細(xì)胞脂質(zhì)積累和VLDL減少綜合征。MCD飲食會(huì)造成小鼠體重下降，肝臟脂肪變性，周圍組織伴發(fā)炎癥或壞死。MCD鼠表現(xiàn)出的強(qiáng)烈的炎性反應(yīng)，NF-κB在其中起重要作用，另外還可以檢測到一些細(xì)胞因子的表達(dá)，如：TNF-α、IL-6 、TGF-β以及一些黏附分子的高表達(dá)，如：ICAM-1、VCAM-1和MCP-1，它們與免疫系統(tǒng)的活化密切相關(guān)。而有些炎性因子，例如肝細(xì)胞Cox-2的表達(dá)，可降低由MCD飲食引起的非酒精性脂肪肝炎癥和肝纖維化[13]。

MCD模型在分子機(jī)制上可較好模擬人NASH，但仍存在一系列問題，與肥胖的NAFLD/NASH 臨床患者相比，MCD飲食模型的甘油三酯和膽固醇水平降低；胰島素、葡萄糖和瘦素水平也降低，而這些會(huì)對NASH帶來的效應(yīng)產(chǎn)生抵抗，從而影響造模。另外在病因?qū)W上，此模型也不具備很好的說服力。

2 免疫缺陷聯(lián)合營養(yǎng)模型

炎癥是非酒精性脂肪肝病發(fā)展中最重要的病理改變之一，也是肝臟從簡單的脂肪變性到非酒精性脂肪肝炎的標(biāo)志。在非酒精性脂肪肝炎中，炎癥因子的水平(例如NLRPs、caspase-1、IL-1beta和 IL-18)均有升高。在肝臟，炎癥復(fù)合物主要是在免疫細(xì)胞中表達(dá)，先天免疫的激活是觸發(fā)和放大NAFLD/NASH相關(guān)病理改變的關(guān)鍵因素[14,15]。因此，弄清楚NAFLD/NASH所涉及的主要免疫細(xì)胞類型以及它們?nèi)绾巫R別有關(guān)模式分子，或者弄清楚其模式分子通過結(jié)合表面模式識別受體，啟動(dòng)級聯(lián)信號放大炎癥反應(yīng)的過程，可以為研究新的治療策略提供幫助[16]?；谶@樣的思路，很多的實(shí)驗(yàn)利用基因敲除等技術(shù)制備免疫缺陷小鼠進(jìn)行建模，結(jié)合傳統(tǒng)的營養(yǎng)建模方法，極大提高了建模的效率，成為先進(jìn)的NAFLD/NASH建模方法。

2.1 TLR-2敲除聯(lián)合CD/MCDD模型 TLRs大量表達(dá)于Kupffer細(xì)胞膜表面，與NAFLD有密切關(guān)系。TLR-2通過運(yùn)輸?；鞍自谥|(zhì)運(yùn)輸中起到了一定的作用。TLR-2基因敲除可提高實(shí)驗(yàn)小鼠患非酒精性脂肪性肝炎的概率[17]。在研究TLR-2對NASH發(fā)病機(jī)理的實(shí)驗(yàn)中，給 TLR-2-/-小鼠喂養(yǎng)CD或MCDD飲食8周后，對小鼠肝脂肪變性、炎癥和壞死組織各部分進(jìn)行評估。組織學(xué)評分顯示，與野生型小鼠相比，TLR-2-/-小鼠的肝細(xì)胞損傷更嚴(yán)重。從冷凍肝臟樣本中提取總RNA和信使RNA，對TNF-α、膠原蛋白α1、IL-10、過氧物酶體PPAR-γ、CD14進(jìn)行實(shí)時(shí)定量熒光PCR及蛋白質(zhì)水平分析。生化檢查與組織學(xué)研究結(jié)果一致，與野生型相比，TLR-2-/-小鼠TNF-α的mRNA表達(dá)升高了大約3倍；而PPAR-γ的表達(dá)有所降低。實(shí)驗(yàn)研究表明，TLR-2缺陷小鼠高脂飲食更易誘導(dǎo)NAFLD的機(jī)制可能與相應(yīng)的信號通路的改變有關(guān)。

2.2 CD1d基因敲除聯(lián)合高脂飲食模型 自然殺傷T(NKT)細(xì)胞是一種先天性免疫細(xì)胞，肝臟中的含量尤其豐富，約占肝臟淋巴細(xì)胞的30%，容易被脂類抗原激活，他們是固有免疫和適應(yīng)性免疫的橋梁，也是炎癥反應(yīng)的重要監(jiān)控細(xì)胞[18,19]。 缺乏NKT細(xì)胞的小鼠通過高脂肪的飲食喂養(yǎng)更容易發(fā)生代謝紊亂。用CD1d-/-敲除的NKT細(xì)胞小鼠在喂養(yǎng)高脂肪食物之后更容易導(dǎo)致體重增加和脂肪肝。同時(shí)，CD1d-/-鼠在實(shí)驗(yàn)中所表現(xiàn)的肝臟中炎癥基因大量表達(dá)的現(xiàn)象，說明了該品系的小鼠有更易發(fā)生NAFLD的趨勢。運(yùn)用量熱法(Calorimetry)研究也證明了該品系小鼠對比于野生型小鼠有顯著的食物攝取量的增加和代謝率下降的趨勢。以上結(jié)果提示NKT細(xì)胞發(fā)揮炎癥監(jiān)管作用，有助于防止食源性肥胖和代謝功能障礙，同時(shí)NKT細(xì)胞可能在肝臟代謝和免疫系統(tǒng)之間的相互調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用，通過調(diào)節(jié)能量平衡，以保證肝臟的正常功能[20]。

2.3 CD40基因敲除聯(lián)合高脂飲食 肥胖和2型糖尿病的病理生理學(xué)特點(diǎn)在嚙齒動(dòng)物和人類上的體現(xiàn)是脂肪組織和肝臟的慢性炎癥，而CD40受體及其配體CD40L啟動(dòng)免疫細(xì)胞信號促進(jìn)炎癥反應(yīng)。有研究發(fā)現(xiàn)缺少CD40的小鼠給予高脂肪飲食，結(jié)果顯示了肝臟細(xì)胞因子水平的降低，但表現(xiàn)出肝脂肪變性、胰島素抵抗和葡萄糖耐受降低。進(jìn)一步應(yīng)用血糖-高血胰島素鉗夾技術(shù)也發(fā)現(xiàn)CD40-null小鼠葡萄糖利用率降低和胰島素抵抗。但是在CD40缺乏小鼠的脂肪組織有明顯細(xì)胞因子水平的升高和炎性細(xì)胞的浸潤，尤其是巨噬細(xì)胞和CD8(+)效應(yīng)性T細(xì)胞。這些結(jié)果表明：①CD40-null小鼠的肝臟炎癥反應(yīng)降低，但出現(xiàn)肝脂肪變性；②CD40在抑制脂肪組織炎癥上具有重要作用,從而防止肝脂肪變性[21,22]。

2.4 IFR-9基因敲除聯(lián)合高脂飲食的模型 干擾素調(diào)節(jié)因子(IRFs)是一類調(diào)控干擾素轉(zhuǎn)錄的因子，有九種類型(IRF-1～I(xiàn)RF-9)，參與天然免疫與病原體的防御。干擾素調(diào)節(jié)因子9(IRF-9)是一個(gè)主要的調(diào)節(jié)干擾素轉(zhuǎn)錄的因子，有研究發(fā)現(xiàn) IRF-9 的表達(dá)在肥胖小鼠體內(nèi)明顯降低。應(yīng)用 IFR-9基因敲除小鼠，給予長期慢性高脂食物飼養(yǎng)，小鼠表現(xiàn)為肥胖、胰島素抵抗及肝脂肪變性和炎癥反應(yīng)。而應(yīng)用食源性或基因型(ob/ob)肥胖小鼠，通過腺病毒載體介導(dǎo) IRF-9 的過表達(dá)，可明顯增加小鼠的肝胰島素敏感性，有效改善肝脂肪變性和炎癥反應(yīng)。進(jìn)一步采用酵母雙雜交文庫篩選系統(tǒng)研究IRF-9與輔酶因子之間的相互作用，發(fā)現(xiàn)IRF-9與過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR-α)具有相互作用，PPAR-α是一個(gè)重要的代謝相關(guān)的核受體，它能夠激活下游目標(biāo)基因，降低胰島素耐受和改善IRF9缺乏的小鼠肝脂肪變性和炎癥。由此得出結(jié)論 IRF-9 通過與 PPAR-α 相互作用能夠降低肝臟的IR、脂肪變性和炎癥反應(yīng)[23]。而IFR-9基因敲除小鼠在構(gòu)建免疫缺陷聯(lián)合營養(yǎng)NALFD模型上提供了很好的條件。

2.5 精氨酸酶2基因敲除聯(lián)合高脂飲食 精氨酸酶是催化水解L-精氨酸生成鳥氨酸與尿素的反應(yīng)酶。分為1和2型，1型主要表達(dá)于肝細(xì)胞，而2型主要表達(dá)于免疫細(xì)胞，尤其是巨噬細(xì)胞。精氨酸酶2可與誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)競爭底物，這兩種酶的平衡在調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)和巨噬細(xì)胞的激活中起著至關(guān)重要的作用。天然免疫包括巨噬細(xì)胞的激活在肝臟脂肪變性到脂肪性肝炎這一疾病進(jìn)展中具有重要作用。

Navarro等[24]利用Arg2-/-小鼠建模，通過高脂肪喂養(yǎng)，來檢驗(yàn)缺乏精氨酸酶2能夠促進(jìn)小鼠從單純的肝脂肪變性進(jìn)展為脂肪性肝炎這一假設(shè)。精氨酸酶2-因子敲除Arg2-/-小鼠經(jīng)短期(7周)喂養(yǎng)高脂肪飲食后，發(fā)現(xiàn)小鼠肝臟以顯著的脂肪變性為特征。這些變化與全身的代謝無關(guān)，而與參與肝脂肪從頭合成的基因的mRNA水平顯著提高有關(guān)，肝損傷和炎癥伴隨著血清ALT的升高，標(biāo)志著F4/80陽性細(xì)胞的浸潤，炎癥因子的基因表達(dá)水平增加。另外，Arg2-/-小鼠接受尾靜脈注射包裹了氯膦酸二鈉的脂質(zhì)體(CLOD)，選擇性耗竭肝巨噬細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)肝臟脂質(zhì)沉積明顯減少，合成脂肪的mRNA表達(dá)趨于正?；?。這些結(jié)果顯示精氨酸酶2通過巨噬細(xì)胞介導(dǎo)肝脂質(zhì)沉積和肝損傷，提示精氨酸酶2在脂肪性肝炎中的重要作用[24]。

3 展望

人類疾病動(dòng)物模型在醫(yī)學(xué)發(fā)展中起著重要作用，以自然發(fā)生作為人類疾病研究的模型已經(jīng)不能滿足科學(xué)研究的需要。最“準(zhǔn)確”營養(yǎng)膳食模式包含了所有的西方飲食的膳食組成部分，包括脂肪、果糖和膽固醇，這樣的飲食復(fù)制NASH的組織病理學(xué)特征周期需要持續(xù)20周及以上。

通過基因改造構(gòu)建的NASH模型，雖然先天免疫系統(tǒng)的激活介導(dǎo)的無菌性炎癥反應(yīng)是一個(gè)非酒精性脂肪肝炎的關(guān)鍵特性，但是單純炎癥的建模會(huì)導(dǎo)致缺乏代謝疾病這樣一個(gè)關(guān)鍵的特征,在病因上，與人類由代謝綜合征引起的疾病有絕對的差異,這個(gè)方面是導(dǎo)致這類模型建模受限的主要原因。

隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，復(fù)合模型結(jié)合了基因和飲食模型的雙重特征，可以縮短造模時(shí)間，最大程度上模擬人類NAFLD，有著廣闊的應(yīng)用前景。

一個(gè)合格的動(dòng)物模型應(yīng)該具有所有人類NAFLD/NASH的特征性，包括：肥胖、胰島素抵抗、肝脂肪變性、炎癥和纖維化。理想狀態(tài)下，模型動(dòng)物基因的轉(zhuǎn)錄的變化也要和人類NAFLD/NASH的一致，然而目前還并沒有一種理想狀態(tài)的小鼠模型建模，當(dāng)前多數(shù)小鼠模型不能完全概括人類的全部特征[5]。相關(guān)文獻(xiàn)提出了一些參與無菌性炎癥應(yīng)答的通路與NASH有關(guān),凸顯了脂肪組織失調(diào)是人類NASH的關(guān)鍵特性[25，26]。

綜上，未來 NAFLD 動(dòng)物模型應(yīng)致力于：①為了最大程度的模擬 NAFLD的疾病進(jìn)展尋找最佳的基因和飲食混合模型；②建立統(tǒng)一的模型評價(jià)標(biāo)準(zhǔn);③對于高脂飲食模型應(yīng)尋找一個(gè)重復(fù)性較好且能將食源性肥胖與肝臟和脂肪組織功能障礙相結(jié)合的模型,如FFC飲食；④除了關(guān)注實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的肝脂肪變性、炎癥和纖維化，也應(yīng)該多關(guān)注脂肪組織炎癥；⑤隨著對發(fā)病機(jī)制的研究逐步深入，篩選出與NASH相關(guān)性高的易感基因或者影響脂肪代謝途徑的相關(guān)基因和代謝通路，以培育出更多特殊品系的動(dòng)物，逐步縮小動(dòng)物模型與人類 NAFLD 間的差距。

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[收稿2016-08-15 修回2016-10-21]

(編輯 倪 鵬)

10.3969/j.issn.1000-484X.2017.04.032

①本文受國家自然科學(xué)基金(81473461)資助。

侯 露(1995年-)，女，主要從事臨床醫(yī)學(xué)研究，E-mail：1026044915@qq.com。

及指導(dǎo)教師：劉朝奇(1962年-)，男，博士，教授，主要從事免疫學(xué)方面研究，E-mail：ctgulcq@163.com。

R575.5

A

1000-484X(2017)04-0630-05