麝香風濕跌打膏質量標準研究

王 靜，吳貴華，王 杰

(天津市藥品檢驗所，天津 300070)

麝香風濕跌打膏質量標準研究

王 靜，吳貴華，王 杰

(天津市藥品檢驗所，天津 300070)

目的：建立麝香風濕跌打膏的質量標準。方法：采用薄層色譜法鑒別麝香風濕跌打膏中的川芎；采用氣相色譜法測定制劑中龍腦和薄荷腦的含量。結果：薄層色譜法鑒別色譜特征斑點清晰；氣相色譜法測得龍腦在0.099 06～0.990 62 mg/ml范圍內線性關系良好(r=0.999 9，n=6)，平均回收率為101.9%， RSD為1.9%；薄荷腦在0.141 04～1.410 40 mg/ml范圍內線性關系良好(r=0.999 9，n=6)，平均回收率為103.2%，RSD為1.3%。結論：該方法快速簡便，準確可靠，專屬性強，重復性好，可用于麝香風濕跌打膏的質量控制。

麝香風濕跌打膏，質量標準，龍腦，薄荷腦

麝香風濕跌打膏收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第十九冊，是由乳香、沒藥、麝香、冰片、薄荷腦、川芎等16味藥組成，具有祛風散寒、除濕、活血化瘀、止痛的功效，用于風濕疼痛、受風受寒、肌肉痛、腰背痛、跌打損傷、扭傷等癥。其主要有效成分為揮發(fā)油類物質，主要鎮(zhèn)痛消炎成分為冰片、薄荷腦等。鑒于目前尚無對麝香風濕跌打膏的有效成分進行相關報道的文獻，本試驗建立了麝香風濕跌打膏中川芎的薄層鑒別方法，并建立了冰片及薄荷腦的含量測定方法，以期對麝香風濕跌打膏的質量作出科學的評價，從而為其質量控制提供有效的檢測手段。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 7890A氣相色譜儀，色譜柱:彈性石英毛細管柱 INNOWAX(30 m×0.53 mm，1 μm)；檢測器:氫火焰離子化檢測器；XWK-Ⅲ無油空氣泵(天津市津分分析儀器制造有限公司)；SHC-Ⅱ全自動高純氫氣發(fā)生器(天津市津分分析儀器制造有限公司)；AG-135電子分析天平(瑞士梅特勒公司)；薄層點樣儀(CAMAG公司)。

1.2 試藥 龍腦對照品(供含量測定用，批號110881-201107，純度：99.3%)、薄荷腦對照品(供含量測定用，批號0728-200005)、川芎對照藥材(供薄層鑒別用，批號120918-201411)，均購自中國藥品生物制品檢定所；甲醇為色譜純(天津市康科德科技有限公司)；其余試劑均為分析純。麝香風濕跌打膏(批號C90001、DX07001、DX07002，規(guī)格6.5×9.5 cm，天津同仁堂集團股份有限公司)。

2 方法與結果

2.1 川芎的薄層鑒別 取本品1片，除去蓋襯，剪成小塊，加乙酸乙酯15 ml，超聲處理10 min，傾出溶液，低溫蒸干，殘渣加甲醇10 ml、乙酸乙酯2 ml充分攪拌，離心(轉速為3 000 r/min)10 min，取上清液低溫蒸干，殘渣加甲醇3 ml，充分攪拌，濾過，濾液作為供試品溶液。另取川芎對照藥材0.5 g，加乙酸乙酯10 ml，超聲處理10 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1 ml使溶解，作為對照藥材溶液。按處方配比，取除川芎以外的其他藥味按工藝制得貼膏劑，再按上述供試品溶液制備方法制得川芎陰性樣品溶液。照薄層色譜法(附錄Ⅵ B)試驗，吸取上述溶液各4～6 μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(9∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性樣品無干擾。結果見圖1。

不同薄層板比較(默克板) 不同薄層板比較(煙臺板)

高濕環(huán)境展開 低溫環(huán)境展開

1.樣C90001 6 μl 2.樣DX07001 6 μl 3.樣DX07002 6 μl 4.川芎對照藥材4 μl 5.陰性對照樣品6 μl

圖1 川芎TLC色譜圖

2.2 含量測定

2.2.1 色譜條件 色譜柱：INNOWAX(30 m×0.53 mm，1 μm)；進樣口：200 ℃，分流比：20∶1；檢測器：氫火焰離子化檢測器(FID)，220 ℃；柱溫： 160 ℃。

2.2.2 溶液的制備

2.2.2.1 內標溶液及對照品溶液的制備 取正十四烷適量，精密稱定，加乙酸乙酯制成每1 ml含0.8 mg的溶液，作為內標溶液。另取薄荷腦對照品、龍腦對照品各適量，精密稱定，加內標溶液制成每1 ml含薄荷腦對照品0.7 mg、龍腦對照品0.5 mg的混合溶液，作為對照品溶液。

2.2.2.2 供試品溶液的制備 取同一批號(DX07001)樣品適量，除去蓋襯，剪碎，取約1.5 g，精密稱定，精密加入內標溶液20 ml，搖勻，稱定重量，超聲處理(功率150 W，頻率20 kHz)40 min，取出，立即在冷水中放冷，再稱定重量，用乙酸乙酯補足減失的重量，搖勻，濾過，濾液作為供試品溶液。

2.2.2.3 陰性樣品溶液的制備 按處方分別取除薄荷腦或冰片的各味藥材，按“制法”制得樣品，再按“2.2.2.2”項下供試品溶液制備方法，分別制得薄荷腦陰性樣品溶液和冰片陰性樣品溶液。分別吸取上述溶液1 μl，注入氣相色譜儀，按“2.2.1”項下色譜條件測定。色譜圖見圖2。

1.正十四烷 2.薄荷腦 3.龍腦圖2 薄荷腦對照品(A) 龍腦對照品(B)混合對照品(C)供試品(D) 缺薄荷腦陰性樣品(E)缺冰片陰性樣品(F)氣相色譜圖

2.2.3 標準曲線的制備 取薄荷腦及龍腦對照品適量，精密稱定，加上述內標溶液制成每1 ml含薄荷腦對照品1.410 40 mg和龍腦對照品0.990 62 mg的混合溶液，作為對照品儲備液。分別精密吸取對照品貯備液6、3、2、1.5和1 ml至10 ml量瓶中，用上述內標溶液稀釋至刻度，搖勻。分別吸取對照品貯備液和上述系列對照品溶液各1 μl，注入氣相色譜儀，以龍腦或薄荷腦與內標物峰面積的比值對龍腦或薄荷腦濃度做線性回歸，得龍腦回歸方程為Y=1.018 5X-0.006 8(r=0.999 9)；薄荷腦回歸方程為Y=1.061 7X-0.017 3(r=0.999 9)。結果表明龍腦在0.099 06～0.990 62 mg/ml、薄荷腦在0.141 04～1.410 40 mg/ml范圍內線性關系良好。

2.2.4 精密度試驗 取同一批號(DX07001)樣品適量，除去蓋襯，剪碎，取約1.5 g，精密稱定，按照“2.2.2.2”項下供試品溶液制備操作，按“2.2.1”項下色譜條件分析，連續(xù)進樣6次，測定樣品中薄荷腦和龍腦的含量。結果樣品中薄荷腦平均含量為13.850 1 mg/g，RSD為0.4%；龍腦平均含量為11.284 5 mg/g，RSD為1.0%，符合要求。表明供試品溶液在10 h內穩(wěn)定。

2.2.5 重現(xiàn)性試驗 取同一批號(DX07001)樣品適量，除去蓋襯，剪碎，取約1.5 g，精密稱定，共6份，按照“2.2.2.2”項下供試品溶液制備操作，按“2.2.1”項下色譜條件分析，測定每份樣品中薄荷腦和龍腦的含量。結果樣品中薄荷腦平均含量為13.708 8 mg/g，RSD為0.84%；龍腦平均含量為10.898 1 mg/g，RSD為2.0%，符合要求。

2.2.6 穩(wěn)定性試驗 取同一批號(DX07001)樣品適量，除去蓋襯，剪碎，取約1.5 g，精密稱定，按照“2.2.2.2”項下供試品溶液制備操作，按“2.2.1”項下色譜條件分析，分別在0、2、4、6、8和10 h，測定樣品中薄荷腦和龍腦的含量。結果樣品中薄荷腦平均含量為13.427 0 mg/g，RSD為1.1%；龍腦平均含量為10.232 1 mg/g，RSD為1.9%，符合要求，表明供試品在10 h內穩(wěn)定。

2.2.7 回收率試驗 取同一批號(DX07001)樣品適量，除去蓋襯，剪碎，取約0.75 g，精密稱定，共6份，分別精密加入供加樣回收用對照品乙酸乙酯溶液(薄荷腦濃度為0.513 6 mg/ml，龍腦濃度為0.411 1 mg/ml，正十四烷濃度0.785 65 mg/ml)20 ml，按照“2.2.2.2”項下供試品溶液制備操作，制得供回收率用供試品溶液，按“2.2.1”項下色譜條件分析，計算回收率，結果測得薄荷腦平均回收率為103.2%，RSD為1.3%；龍腦平均回收率為101.9%，RSD為1.9%。符合試驗要求。見表1和表2。

2.2.8 樣品測定 取3個批號的樣品，按照“2.2.2.2”項下供試品溶液制備操作，按“2.2.1”項下色譜條件分析,測定樣品中薄荷腦、龍腦含量。結果見表3和表4。

表1 薄荷腦回收率試驗結果(n=6)

表2 龍腦回收率試驗結果(n=6)

表3 3批樣品薄荷腦含量測定結果(n=2)

表4 3批樣品龍腦含量測定結果(n=2)

3 討論

3.1 TLC鑒別試驗中，本試驗以乙酸乙酯直接提取樣品制備川芎TLC鑒別用的供試品溶液，結果TLC斑點清晰，重現(xiàn)性好，且操作簡單，專屬性強。

3.2 在TLC試驗中，本試驗分別以甲醇[1]、水飽和的正丁醇[2]、三氯甲烷[3]、乙酸乙酯提取供試品中的羌活、獨活、莪術，但是均有斑點干擾，專屬性不強，故未列入TLC中。

3.3 本試驗在對冰片和薄荷腦進行含量測定期間，曾分別采用萘[4]、正十四烷、十八烷、水楊酸甲酯[5]作為內標物，分別對薄荷腦及龍腦進行含量測定，但是只有正十四烷分離效果好，故采取正十四烷作為內標物。

3.4 在龍腦與薄荷腦含量測定方面分別考查了以甲醇、無水乙醇和乙酸乙酯為提取溶劑進行提取，結果顯示使用甲醇和無水乙醇為提取溶劑，含量測定結果較低，且相對偏差(RAD)值較大；采用乙酸乙酯提取，測定的含量最高，故本試驗提取溶劑定為乙酸乙酯。受樣品基質的影響,試驗中采用乙醚或三氯甲烷作為提取溶劑，提出的溶液含膠質多，溶液渾濁，影響含量的測定，故未選擇乙醚或三氯甲烷作為提取溶劑。

3.5 在龍腦與薄荷腦含量測定方面分別考查了采用超聲處理與回流提取不同的提取方式，其測定結果基本相同，不同提取方式對樣品測定結果無明顯影響。為試驗操作方便簡捷，故將超聲提取定為本測定方法的提取方法。

3.6 提取時間分別考查了20、40和60 min，其含量測定結果無明顯差異，故將40 min定為本測定方法的提取時間。

3.7 在龍腦與薄荷腦含量測定方面同時也考查了不同取樣量之間的差別，分別取樣1、1.5和2 g,其測定結果無明顯差別，取樣量為2 g的樣品測定結果稍偏低，且相對偏差(RAD)值較大，可能與取樣量大，影響了提取效能有關。而取樣量為1 g和1.5 g的樣品測定結果無明顯差別，故本試驗將取樣量定為1.5 g。

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4 孫曉梅，代東梅，常雪靈，等.GC法同時測定麝香壯骨膏中樟腦、薄荷腦、冰片和水楊酸甲酯的含量[J].中成藥，2007,29(7): 1004-1008

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Study on quality control of shexiang fengshidieda plaster

Wang Jing，Wu Guihua，Wang Jie

(Tianjin Institute for Drug Control，Tianjin 300070)

Objective: To establish the quality standard for Shexiang Fengshidieda Plaster. Methods: The rhizome of chuanxiong in Shexiang Fengshidieda Plaster was identified by a TLC method. The contents of borneol and menthol were determined by GC. Results: The developed TLC spots were quite clear. Borneol showed a good linear relationship within a range of 0.099 06～0.990 62 mg/ml. The regression equation wasY=1.018 5X-0.006 8(r=0.999 9，n=6). The average recovery was 101.9% and RSD was 1.9%.Menthol showed a good linear relationship within a range of 0.141 04～1.410 40 mg/ml. The regression equation wasY=1.061 7X-0.017 3，(r=0.999 9，n=6). The average recovery was 103.2% and RSD 1.3%. Conclusions: This method is accurate, sensitive, specific and easily handled. It can be applied to quality control of Shexiang Fengshidieda Plaster.

Shexiang Fengshidieda Plaster， quality standard， borneol， menthol

2016-07-22

R927.1

A

1006-5687(2016)06-0018-04