高致病性禽流感實(shí)驗(yàn)室檢測的風(fēng)險(xiǎn)分析及預(yù)防

黃金燕

(建始縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,湖北建始 445300)

高致病性禽流感實(shí)驗(yàn)室檢測的風(fēng)險(xiǎn)分析及預(yù)防

黃金燕

(建始縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,湖北建始 445300)

禽流感病毒的實(shí)驗(yàn)室分析對(duì)于禽流感的科學(xué)防控具有極為重要的作用和意義。但是，基于這項(xiàng)工作的特殊性，為了生物安全，一定要做好實(shí)驗(yàn)操作風(fēng)險(xiǎn)分析，通過科學(xué)預(yù)防可以將風(fēng)險(xiǎn)降到最低，以保證各項(xiàng)工作的順利進(jìn)行，以保證實(shí)驗(yàn)人員的安全。作者分析了高致病性禽流感實(shí)驗(yàn)室檢測的風(fēng)險(xiǎn)，并就實(shí)驗(yàn)室禽流感檢測風(fēng)險(xiǎn)預(yù)防做了深入、細(xì)致的研究與分析，供讀者參考。

高致病禽流感 實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測風(fēng)險(xiǎn) 分析 預(yù)防

高致病性禽流感，簡稱HPAI，是一種以禽類感染為主的急性傳染病，其主要的病原就是正粘病毒科A型流感病毒，傳播迅速、危害嚴(yán)重、死亡率高，世界衛(wèi)生組織將其列為一類動(dòng)物疫病。近些年來，在家禽分離出了H7N9亞型高致病性禽流感病毒，各地的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室也加快了對(duì)高致病性禽流感的血清學(xué)及病原學(xué)的檢測工作?；谶@項(xiàng)工作的特殊性，從事檢測工作的實(shí)驗(yàn)室人員一定要做好自身的防護(hù)，保證自身不被感染。

1 安全級(jí)別以及檢驗(yàn)活動(dòng)的具體要求

通常情況下，實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)水平是根據(jù)執(zhí)行操作生物因子的潛在危害程度以及能夠采取的防護(hù)措施而進(jìn)行等級(jí)劃分的，根據(jù)相關(guān)的條例和準(zhǔn)則來看，從事高致病性禽流感實(shí)驗(yàn)室檢測工作必須要嚴(yán)格執(zhí)行生物安全I(xiàn)I級(jí)的要求，尤其是在進(jìn)行核酸檢測工作時(shí)，所有的樣本必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，任何超出實(shí)驗(yàn)室安全等級(jí)的操作活動(dòng)都不可以進(jìn)行。

2 風(fēng)險(xiǎn)分析和預(yù)防措施

目前，高致病性禽流感的主要檢測項(xiàng)目就是血凝實(shí)驗(yàn)和血凝抑制試驗(yàn)，而圍繞著上述兩項(xiàng)檢測，可能涉及的感染風(fēng)險(xiǎn)包括個(gè)人的防護(hù)、實(shí)驗(yàn)過程中實(shí)驗(yàn)人員和實(shí)驗(yàn)樣本、實(shí)驗(yàn)樣本和實(shí)驗(yàn)環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)樣本之間的污染風(fēng)險(xiǎn)等。

2.1 個(gè)人防護(hù)

生物安全是實(shí)驗(yàn)室安全的核心，而檢測人員自身的安全自然是居于首要位置。對(duì)于高致病性禽流感而言，呼吸道傳染是最為主要的傳染途徑，這就意味著在實(shí)際進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作的過程中，一旦出現(xiàn)帶有病毒液體的飛濺或有氣溶膠形成的話，很容易讓操作人員居于感染的風(fēng)險(xiǎn)之下，因此，在進(jìn)行檢測的時(shí)候一定要佩戴好防護(hù)性能良好的手套、口罩以及帽子和眼睛瞪，如果條件允許的話，最好是能夠佩戴上防化學(xué)飛濺面罩。等到實(shí)驗(yàn)完成之后，要將上述用品及時(shí)摘掉同時(shí)放入到垃圾袋中，進(jìn)行集中的高壓滅菌處理，所穿的工作服要在紫光燈下進(jìn)行嚴(yán)格消毒。另外需要注意的是，在實(shí)驗(yàn)內(nèi)要長期準(zhǔn)備有濃度適當(dāng)?shù)木凭约凹本认涞龋⑶叶ㄆ谶M(jìn)行檢查，看其是否保存良好，是否在保存期內(nèi)。

2.2 樣本的接收、處理和保存

樣本需要進(jìn)行接收和轉(zhuǎn)運(yùn)，這樣就對(duì)包裝提出了嚴(yán)格的要求，一旦出現(xiàn)密封不好或者是包裝不嚴(yán)的現(xiàn)象，就很容易造成液體的泄露，導(dǎo)致一些感染性材料等具有危險(xiǎn)性的因子進(jìn)入到實(shí)驗(yàn)室中去。因此，我們?cè)趯?duì)樣本進(jìn)行處理的時(shí)候，一定要嚴(yán)格按照相關(guān)的操作規(guī)程來執(zhí)行，通過專門的傳遞窗口做好樣本的轉(zhuǎn)運(yùn)處理。還有一點(diǎn)特別需要注意的是，轉(zhuǎn)運(yùn)的專用窗口需要定期進(jìn)行殺菌消毒，一般是采用紫外線的消毒方式。

另外，在進(jìn)行樣本制作的時(shí)候，必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，不僅僅要做好詳細(xì)的記錄，同時(shí)要將其置于4℃的冰箱進(jìn)行保存，如果需要留樣的話，一定要保證盛放樣本的容器蓋擰緊，將其置于-20℃的冰箱中保存。等到操作完成以后，需要用含有適量氯的消毒劑對(duì)地面和臺(tái)面進(jìn)行消毒。

2.3 血凝試驗(yàn)和血凝抑制試驗(yàn)

在實(shí)驗(yàn)的過程中，如果樣本呈現(xiàn)陽性，操作不當(dāng)?shù)脑?，很容易?dǎo)致血清的外溢，進(jìn)而造成某種程度的污染。因此，在操作的過程中，對(duì)血清樣本進(jìn)行稀釋的話，要嚴(yán)格控制好力度，盡量避免氣溶膠的產(chǎn)生。等到實(shí)驗(yàn)結(jié)束之后，就要進(jìn)行必要的消毒處理。

2.4 核酸檢測

主要方法就是PCR檢測儀檢測，主要的步驟包括提取核酸、PCR反應(yīng)體系的配置、運(yùn)行以及對(duì)結(jié)果的分析等。操作人員除了要嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)定，還要做好工作服分區(qū)，在不同的實(shí)驗(yàn)區(qū)域內(nèi)穿特定的工作服，避免交叉感染。

在進(jìn)行核酸提取的時(shí)候，檢測之間要進(jìn)行旋渦震蕩，時(shí)間大約為2分鐘到3分鐘，至于組織樣本需要實(shí)驗(yàn)之前進(jìn)行研磨，必須在生物安全柜內(nèi)完成操作，以免導(dǎo)致不必要的污染。

在配置PCR體系的時(shí)候，一定要嚴(yán)格按照相關(guān)的規(guī)程進(jìn)行操作，否則，很容易導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室環(huán)境受到嚴(yán)重的污染，導(dǎo)致嚴(yán)重的不良影響。

此外，如果PCR管的密封不好，那么很容易造成液體的泄露，進(jìn)而造成儀器污染，因此，在選用PCR管的時(shí)候，一定要選擇質(zhì)量好的產(chǎn)品，在上機(jī)操作之前，務(wù)必要保證其實(shí)密封完好的。

2.5 做好廢棄物質(zhì)的處理和實(shí)驗(yàn)室的消毒工作

對(duì)于廢棄物質(zhì)，一定要集中進(jìn)行規(guī)范處理，對(duì)于儀器建議采用噴霧消毒劑消毒，地面消毒首先從外向內(nèi)進(jìn)行噴灑，之后再從內(nèi)向外重復(fù)進(jìn)行一次噴灑。

[1] 吳越.在德行與恐懼的邊界——防治禽流感的思考[J].當(dāng)代人，2006，（3）：47-49.

[2] 田振祥，劉道亮，吳麗卿，等.對(duì)高致病性禽流感疫情防范對(duì)策的探討[J].檢驗(yàn)檢疫學(xué)刊，2006，16（2）：68-69.

[3] 楊永平，高波.臨床上高致病性禽流感類癥鑒別診斷[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2006，（5）：23.