大腸桿菌對抗菌藥物耐藥情況的檢測

蘇 萍

(山東省安丘市大漢河畜牧獸醫(yī)管理站,山東安丘 262100)

大腸桿菌對抗菌藥物耐藥情況的檢測

蘇 萍

(山東省安丘市大漢河畜牧獸醫(yī)管理站,山東安丘 262100)

本文主要通過對某農(nóng)場分離出來的大腸桿菌運用Kirby-Bauer藥敏紙片法測試在獸醫(yī)臨床中的常用抗菌藥共21種，得到的結(jié)果顯示具有非常嚴重的耐藥現(xiàn)象。在大腸桿菌中普遍存在多種耐藥性，磺胺類、四環(huán)素類、喹諾酮類等抗菌藥的耐藥率均比較高?？咕幬锬退幥闆r的出現(xiàn)會直接影響治療效果，需要給予高度重視并進行充分探索。

抗菌藥物 大腸桿菌 耐藥

抗菌藥可對各種動物疾病進行有效預(yù)防和治療，與此同時其還能夠有效促進動物生長，故廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)中。但是，隨著獸醫(yī)臨床濫用抗菌藥的現(xiàn)象越來越嚴重，大量耐藥菌的出現(xiàn)成了嚴重影響人類健康和畜牧業(yè)發(fā)展的危險因素[1]。本文通過測試和分析大腸桿菌的耐藥性，希望可以為獸醫(yī)臨床合理應(yīng)用抗菌藥提供借鑒。

1 材料與方法

（1）試驗菌和培養(yǎng)基：試驗菌來源于中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所檢測技術(shù)研究室，共分離出8株大腸桿菌；采用中國藥品生物制品檢定所的CMCC44113（大腸桿菌質(zhì)控菌株ATCC25922）和MH瓊脂（普通瓊脂和水解酪蛋白）。（2）藥敏紙片的來源和應(yīng)用：中國藥品生物制品檢定所提藥敏紙片，共選擇21種，其中專門制備的4種為氟苯尼考、二氟沙星、沙拉沙星、達氟沙星。喹諾酮類藥物主要包括：氧氟沙星、環(huán)丙沙星、諾氧沙星等。氯霉素類藥物主要包括：奧格門丁、氨芐西林、阿莫西林。頭孢類藥物主要包括：頭孢曲松、頭孢噻吩。四環(huán)素類藥物主要包括：四環(huán)素；氨基糖苷類藥物不僅包括慶大霉素和阿米卡星，同時還包括鏈霉素和卡那霉素?；前奉愃幬镏饕ǎ簭?fù)方新諾明、磺胺甲基異惡唑。（3）具體試驗方法：采用Kirby-Bauer藥敏紙片法，其具有操作方便、難度小等優(yōu)點，與實驗室要求的快速測定、大批量測定等要求完全符合。（4）確定5種獸醫(yī)專用藥物的藥敏紙片濃度：應(yīng)用經(jīng)過專門程序制備得到的紙片，先確定紙片中具體藥物量，然后創(chuàng)建與之相符合的標準后，依據(jù)上述5種藥物的最低抑菌濃度，參考同類藥品的紙片藥物頷聯(lián)，其中氟苯尼考的紙片藥物量為30μg，二氟沙星、恩諾沙星均為10μg，沙拉沙星、達氟沙星均為5μg。（5）確定藥敏判斷標準：按照NCCLS提供的判斷標準確定所有藥物的藥敏標準。（6）測定各種菌對藥物的耐藥性，依據(jù)的耐藥性機制為國際上對藥敏實驗的規(guī)定，測定具有代表性意義的藥物種類，依據(jù)代表性藥物的敏感程度，判定同類藥物的具體藥物敏感性情況。（7）通過WHO制定的數(shù)據(jù)統(tǒng)計軟件統(tǒng)計分析涉及的全部數(shù)據(jù)，并進行充分討論。

2 試驗結(jié)果

2.1 大腸桿菌耐藥發(fā)生性率排序

萘啶酸排名第1位，四環(huán)素排名第2位，磺胺甲基異惡唑排名第3位，復(fù)方新諾明排名第4位，喹諾酮類（第2、3代）排名第5位，氨芐西林排名第6位，阿莫西林排名第7位，氯霉素排名第8位，鏈霉素排名第9位，卡那霉素排名第10位，頭孢噻吩排名第11位，慶大霉素排名第12位，奧格門丁與氟苯尼考分別排名第13位和第14位，第15位則是阿米卡星與頭孢曲松。排名前5的耐藥率分別為19.7%、18.6%、16.1%、14.9%、13.7%。

2.2 抗生素的耐藥情況

僅1株對24種抗菌藥菌敏感，其他菌株則表現(xiàn)出≥二重耐藥現(xiàn)象；除阿米卡星和頭孢曲松之外，有2株對22種抗菌藥耐藥；初氟苯尼考、頭孢曲松、阿米卡星外，有4株對21種抗菌藥耐藥；除克拉維酸、氟苯尼考、阿米卡星、頭孢曲松外，有8株對20種抗菌藥耐藥；有10株對第3代喹諾酮類敏感；有9株對第2代喹諾酮敏感。

3 結(jié)語

由本次研究可知，從用藥農(nóng)場中分離出來的大腸桿菌均具有較高的耐藥性。相比于同類喹諾酮類藥物，大腸桿菌對諾氟沙星和氧氟沙星的耐藥率更高[2]。入選的24種抗菌藥中，耐藥率≥70%的抗菌藥應(yīng)暫停所使用；耐藥率在30%～70%范圍內(nèi)的抗菌藥可作為次選藥物；耐藥率≤30%的抗菌藥中包括頭孢曲松鈉，在獸醫(yī)臨床中不宜使用頭孢類的第3代新藥，作為人畜共用藥，克拉維酸和阿米卡星可積極使用和推廣。氟苯尼考是獸醫(yī)的專用藥之一，其亦是治療常見病的首選藥物，但是用過程中必須掌握方法和劑量。雖然本品應(yīng)用時間較短，但已經(jīng)出現(xiàn)耐藥性[3]。獸醫(yī)臨床用藥中的耐藥性問題需要引起高度重視，并將其作為臨床考察項目之一，以提高藥物治療效果。此外，飼料中盡量減少抗菌藥，治療過程中必須按照科學(xué)合理的要求給藥，盡可能在食品動物養(yǎng)殖中減少或避免濫用抗菌藥物的現(xiàn)象[4]。在針對ESBLs（超光譜β內(nèi)酰胺酶）大腸桿菌治療中，以往選擇的氟喹諾酮藥物已經(jīng)無法滿足實際要求，產(chǎn)ESBLs菌株的檢出率和氟喹諾酮藥物用量表現(xiàn)出正相關(guān)。同時，由于種種客觀因素的制約，導(dǎo)致藥物濫用問題變得愈加嚴峻?；诖?，需要謹慎使用抗菌藥物，盡可能的抑制細菌耐藥性的發(fā)展速度。

選擇頭孢吡肟聯(lián)合碳氫霉烯藥物治療中，由于碳氫霉烯藥物更多的是應(yīng)用在大腸埃希菌感染治療中，大腸桿菌中產(chǎn)ESBLs菌株的檢出率和用量表現(xiàn)為正相關(guān)。ESBLs通過接合和轉(zhuǎn)化形式，促使細菌內(nèi)部耐藥基因大范圍擴散，在一定程度上加劇醫(yī)院交叉感染概率。

[1] 李新正，張桂枝，楊隴.常用抗菌藥物對雞致病性大腸桿菌的抑菌效果研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2012，（2）：103-104.

[2] 郭瀟木，楊銅，賀丹丹，等.廣東地區(qū)豬源大腸桿菌耐藥性及其系統(tǒng)發(fā)育群的研究[J].中國畜牧獸醫(yī)，2014，41（1）：182-186.

[3] 刁有江，范學(xué)政.山東省部分地區(qū)禽源致病性大腸桿菌的血清流行病學(xué)調(diào)查與耐藥性檢測[J].中國獸藥雜志，2014，48（2）：14-19.

[4] 何敏，陳敏，黃立.大腸桿菌對抗菌藥物耐藥機制的研究進展[J].養(yǎng)禽與禽病防治，2010，（9）：4-7.

[5] 司紅彬，吳永繼，黃麗云，等.黃檗與抗菌藥聯(lián)合抗耐藥大腸桿菌的作用研究[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，44（2）：123-126.