超高效液相色譜法在中獸藥檢測中的應(yīng)用

孫 思 王安波 楊 梅 汪 儉 劉文鋒

(黔東南州農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中心,貴州凱里 556000)

超高效液相色譜法在中獸藥檢測中的應(yīng)用

孫 思 王安波 楊 梅 汪 儉 劉文鋒*

(黔東南州農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中心,貴州凱里 556000)

中獸藥有著綠色天然、安全低毒、同時(shí)兼有營養(yǎng)及藥用雙重價(jià)值的優(yōu)點(diǎn)，廣泛地應(yīng)用于畜禽生產(chǎn)中。但中獸藥成分復(fù)雜、難以分離、基質(zhì)干擾大，而超高效液相色譜法以其超高靈敏度和選擇性的特點(diǎn)在中獸藥分析方法中越來越受到重視。本文綜述了超高效液相色譜法在中獸藥測定方面的應(yīng)用。

中獸藥 超高效液相色譜法 檢測

中獸藥是我國傳統(tǒng)醫(yī)術(shù)指導(dǎo)畜禽疾病防治以及養(yǎng)殖下產(chǎn)生的應(yīng)用藥物，大部分來源于純天然植物。我國中藥材資源豐富，中獸藥的功效優(yōu)勢不斷被開發(fā)，對(duì)于中獸藥的研究越來越受到關(guān)注。目前，中獸藥的研究在我國仍屬于新興學(xué)科，對(duì)中獸藥重要理論、成分分析及現(xiàn)代藥理學(xué)應(yīng)用等的研究缺失較大，藥物成分相互干擾嚴(yán)重、分離時(shí)間長、分離難度大等問題尚不能完全解決。近年來，超高效液相色譜法（UPLC）因其快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)，被眾多中獸藥藥物分析者青睞，已成為中獸藥藥物分析中檢測藥品內(nèi)在質(zhì)量的關(guān)鍵。

1 中獸藥研究現(xiàn)狀

從20世紀(jì)90年代開始，西方學(xué)者不斷發(fā)掘出中草藥在治療人和畜禽疾病方面的潛力，在中藥開發(fā)上取得了巨大發(fā)展。美國研究者將紅豆杉中提取出的紫杉醇運(yùn)用于動(dòng)物腫瘤治療，效果良好，同時(shí)還從蘆薈中提取乙酰甘露聚糖作為雞馬立克氏病疫苗佐劑，現(xiàn)已投產(chǎn)；荷蘭學(xué)者從牛至草中提取的揮發(fā)油配置成牛至油預(yù)混劑可治療家禽痢疾并促進(jìn)生長。

我國啟動(dòng)“無公害食品行動(dòng)計(jì)劃”后，中獸藥的應(yīng)用范圍就在不停地調(diào)整，以適應(yīng)畜牧業(yè)高質(zhì)量發(fā)展的要求。張素梅等[1]將黃芪散劑添加入斷奶仔豬飼料中，發(fā)現(xiàn)不僅可以預(yù)防仔豬疾病還可以提高生產(chǎn)效率；還有學(xué)者用黃芩、黃芪、石膏等制成二黃散，可抑制雞體內(nèi)法氏囊傳染性病毒；由白術(shù)、黨參等組成的催乳?？瞪⒖梢燥@著降低奶牛隱性乳腺炎的發(fā)病率。

2 UPLC概述

2004年，液相色譜技術(shù)突飛猛進(jìn)，儀器和色譜技術(shù)的創(chuàng)新顯著改進(jìn)了色譜的分離度、速度和靈敏度。在HPLC的基礎(chǔ)上將性能再次提高到一個(gè)新的層次，設(shè)計(jì)出了填有1.7μm小顆粒的色譜柱和能夠承受15000 psi流動(dòng)相的壓力裝置，打造出了一個(gè)全新的液相色譜系統(tǒng)—UPLC。如今，UPLC應(yīng)用極為廣泛，其中包括化學(xué)化工、醫(yī)藥學(xué)、生物、環(huán)境及食品等領(lǐng)域。近年來，許多國家都在研究開發(fā)新的檢測技術(shù)，進(jìn)一步擴(kuò)大了UPLC在中藥分析檢測生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用。

3 UPLC在中獸藥檢測中的應(yīng)用

UPLC克服了早期高效液相色譜法速度慢，柱效低的缺陷，更能適應(yīng)中藥、中成藥的多樣性、復(fù)雜性、分離難度大等分析特點(diǎn)，因而UPLC在中藥化學(xué)成分分析方面得到了迅速的推廣，成為一種非常有效和普遍適用的中藥分析方法，對(duì)于UPLC在中獸藥檢測方面的應(yīng)用更是迅速發(fā)展。

UPLC更能準(zhǔn)確、高效地測定中獸藥的含量。謝進(jìn)等[2]比較了UPLC與HPLC在測定二黃散中不同小檗堿時(shí)的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)UPLC整個(gè)測定只要3 min，進(jìn)樣量只需0.5 μl，得到的峰型完整、分離度好，縮短了樣品檢測時(shí)間，減少了流動(dòng)相的消耗，在穩(wěn)定性及重復(fù)性上均優(yōu)于HPLC法。吳立蓉等[3]采用UPLC的方法檢測了復(fù)方丹參片中皂苷類的成分，結(jié)果表明，相較于HPLC法，UPLC極大地縮減了檢測時(shí)間，僅在12 min內(nèi)就可以將中4種活性成分完全分離，提高了分析效率，可代替常規(guī)HPLC法進(jìn)行檢測。

UPLC還可用于中獸藥制劑中非法添加化學(xué)物質(zhì)及抗生素的檢測。賈振民等[4]利用UPLC檢測中獸藥制劑中9種氟喹諾酮類藥物，回收率為76.77%～90.31%，RSD為0.45%～4.86%，可實(shí)現(xiàn)完全分離，定量測定準(zhǔn)確，重現(xiàn)性較好；還同時(shí)建立了中獸藥制劑中檢測四種喹噁啉類藥物的方法，結(jié)果滿意，適合中獸藥制劑中喹噁啉類藥物的測定；吳荔琴等[5]通過UPLC檢測了止痢散、白頭翁散、蒼術(shù)香連散三種中藥中隱形存在的氟苯尼考，回收率＞95%、定量準(zhǔn)確。李應(yīng)超等[5]采用UPLC檢測了銀翹散、健胃散、止痢散、白頭翁散、荊防敗毒散及蒼術(shù)香連散六種中藥違規(guī)添加的替米考星和泰樂菌素，其試驗(yàn)所建立的UPLC檢測方法操作簡單、快速而準(zhǔn)確，適合大批量檢測可從源頭杜絕由于大環(huán)內(nèi)酯類藥物違規(guī)添加引起的動(dòng)物源食品安全問題。

4 小結(jié)

自我國2005年頒布第一版藥典，液相色譜法就逐漸成為中藥檢測中最常用的分析手段。中獸藥不僅可以治療疾病、促進(jìn)動(dòng)物生長，又不會(huì)產(chǎn)生危害人體健康的藥物殘留，必將在養(yǎng)殖業(yè)中得到更大范圍的推廣與應(yīng)用。隨著各種先進(jìn)檢測儀器與方法、聯(lián)用檢測技術(shù)及自動(dòng)化技術(shù)不斷改進(jìn)，UPLC法會(huì)以更高效高敏感度和自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)在中藥成分分離與測定中發(fā)揮其他分析方法無與倫比的優(yōu)勢。

[1] 張素梅，崔保安，楊明凡，等.黃芪散劑與顆粒劑對(duì)仔豬生長性能及免疫力影響的比較[J].畜牧與獸醫(yī)，2006，38（8）：46-47.

[2] 謝進(jìn)，韓晉，張?jiān)婟?，?黃連不同部位5種生物堿的含量比較[J].解放軍醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2011，27（2）：124-127.

[3] 吳立蓉，王秀鳳，高衛(wèi)東，等.超高效液相色譜法快速測定復(fù)方丹參片中皂苷成分的含量[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2016，32（1）：32-35.

[4] 賈振民，陳薔，宋志超，等.中獸藥制劑中氟喹諾酮類藥物檢測方法的研究[J].2010，37（10）：190-193.

[5] 劉丹，齊雙輝，馬海英.UPLC在中藥組分分析及代謝組學(xué)中的應(yīng)用進(jìn)展[J].中國藥房，2016，（7）：973-975.

孫思（1989-），女，技術(shù)員，從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測工作。

劉文鋒（1969-），男，農(nóng)業(yè)推廣研究員，從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測工作。