兩種檢測(cè)血清游離前列腺抗原方法效果的比較

朱 妍劉悅澤張麗波*

（1 長(zhǎng)春醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部中心實(shí)驗(yàn)室，吉林 長(zhǎng)春 130031；2 吉林大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院五年制2013級(jí)五班，吉林 長(zhǎng)春 130021；3 吉林省腫瘤醫(yī)院，吉林 長(zhǎng)春 130012）

兩種檢測(cè)血清游離前列腺抗原方法效果的比較

朱 妍1劉悅澤2張麗波3*

（1 長(zhǎng)春醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部中心實(shí)驗(yàn)室，吉林 長(zhǎng)春 130031；2 吉林大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院五年制2013級(jí)五班，吉林 長(zhǎng)春 130021；3 吉林省腫瘤醫(yī)院，吉林 長(zhǎng)春 130012）

目的根據(jù)平行檢測(cè)結(jié)果分析比較采用電化學(xué)發(fā)光發(fā)光法和化學(xué)發(fā)光微粒測(cè)定法檢測(cè)血清游離前列腺特異抗原（f-PSA）的效果，探討一種合理的f-PSA的檢測(cè)方法。方法選取我院于2014年9月至2015年12月期間收治的前列腺疾病男性患者作為研究對(duì)象，其中88例確診為前列腺癌且血清標(biāo)本t-PSA值異常，200例確診為前列腺增生且血清標(biāo)本t-PSA值正常，所有標(biāo)本均采用化學(xué)發(fā)光微粒測(cè)定法（CMAI）和電化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）進(jìn)行檢測(cè)，其中CMAI法作為參比方法，分別測(cè)定f-PSA和t-PSA值并計(jì)算f/tPSA比值，所得兩組數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行處理分析，判斷兩種檢測(cè)結(jié)果的異同。結(jié)果ECLIA法f-PSA測(cè)定的相關(guān)系數(shù)、f-/t-PSA比值測(cè)定的相關(guān)系數(shù)、f-/t-PSA比值的相對(duì)靈敏度以及相對(duì)符合率均高于CMAI參比方法組，且兩組之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），兩種檢測(cè)方法檢測(cè)f-PSA與9種血清常見(jiàn)標(biāo)志物均不存在交叉反應(yīng)，有較好的特異性，但兩組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論電化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）性能基本滿(mǎn)足臨床常規(guī)檢測(cè)的需要且效果優(yōu)于化學(xué)發(fā)光微粒測(cè)定法（CMAI），即具有較好的特異性和靈敏度。

總前列腺特異抗原（t-PSA）；游離前列腺特異抗原（f-PSA）；化學(xué)發(fā)光微粒測(cè)定法（CMAI）；電化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）

前列腺癌高發(fā)于50歲以上男性，嚴(yán)重威脅著患者的身體健康和生存質(zhì)量。由于前列腺癌的早期診斷和早期治療能夠顯著改善患者的預(yù)后，而前列腺特異抗原（prostate specific antigen，PSA）作為一種腫瘤標(biāo)志物，因此其作為臨床重要常規(guī)指標(biāo)用于前列腺良性與惡性疾病的早期診斷、鑒別診斷以及前列腺癌患者術(shù)后隨訪(fǎng)，而且當(dāng)血清PSA檢測(cè)與臨床相結(jié)合時(shí)，能顯著提高前列腺癌診斷的準(zhǔn)確率。PSA并非前列腺癌特異性標(biāo)志物，在前列腺炎、前列腺增生、前列腺缺血性梗死以及前列腺癌等前列腺疾病時(shí)均可升高，因此對(duì)這些疾病的診斷亦有一定的參考價(jià)值[1-3]。目前，臨床上用于檢測(cè)血清PSA的方法有很多，為了評(píng)價(jià)并比較電化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）和化學(xué)發(fā)光微粒測(cè)定法（CMAI）對(duì)前列腺特異抗原檢測(cè)性能并探討一種更為合理的檢測(cè)PSA的檢測(cè)方法，我們對(duì)從我院于2014年9月至2015年12月期間收治的278例前列腺疾病男性患者作為研究對(duì)象，對(duì)于患者的血清樣本均采用這兩種檢測(cè)方法再次進(jìn)行檢測(cè)并分析，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：本次研究選取我院于2014年9月至2015年12月期間收治的278例前列腺疾病男性患者作為研究對(duì)象，患者年齡均在47～73歲，且后續(xù)均經(jīng)穿刺活檢和（或）手術(shù)標(biāo)本病理確診，其中88例患者確診為前列腺癌且血清標(biāo)本t-PSA值異常，200例患者確診為前列腺增生且血清標(biāo)本t-PSA值正常。

1.2 方法：所有患者在空腹抽血之前均未做直腸指檢、前列腺穿刺活檢等影響血清中t-PSA和f-PSA檢測(cè)的一切檢查和治療，收集血液樣本后，分離血清4 ℃儲(chǔ)存，嚴(yán)格遵照兩種檢測(cè)方法所用儀器相關(guān)操作和使用說(shuō)明進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)血清中f-PSA和t-PSA值，設(shè)定f-PSA分界值為10 ng/mL，f-/t-PSA分界值為0.16。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采取SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理分析研究數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行比較，以P＜0.05表示組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

為了篩選一種合理的用于血清f-PSA檢測(cè)的方法，我們對(duì)采用CMAI法和ECLIA法兩種檢測(cè)方法進(jìn)行了比較分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)與參比組CMAI法檢測(cè)結(jié)果相比，ECLIA法f-PSA測(cè)定的相關(guān)系數(shù)（0.9991 vs 0.9877）、f-/t-PSA比值測(cè)定的相關(guān)系數(shù)（0.9756 vs 0.9433）、f-/t-PSA比值的相對(duì)靈敏度（89.63% vs 84.19%）和相對(duì)符合率（88.69% vs 85.24%）均更高，兩組之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。后續(xù)，將9種人血清中共存的常見(jiàn)標(biāo)志物高膽紅素、高脂、溶血、RF因子、CEA、AFP、CA-125、CA-153、CA-199和f-PSA分別以高于各個(gè)指標(biāo)血清正常濃度值的10-100倍濃度加入不含任何標(biāo)志物的血清中制成混合血清，設(shè)置復(fù)孔平行分析，探討其與f-PSA的耦聯(lián)反應(yīng)，f-PSA的檢測(cè)值均遠(yuǎn)低于檢測(cè)范圍最低限，認(rèn)為兩種檢測(cè)方法對(duì)f-PSA均不存在交叉反應(yīng)。提示采用這兩種檢測(cè)方法檢測(cè)f-PSA均具有較好的特異性，但是兩種檢測(cè)方法f-/t-PSA比值的相對(duì)特異性（10.15% vs 9.96%）差異不大（P＜0.05）。綜合以上結(jié)果，表明兩種檢測(cè)方法中選擇ECLIA法對(duì)血清中f-PSA進(jìn)行檢測(cè)可能相對(duì)更為合理。

3 討 論

前列腺癌屬于男性生殖系統(tǒng)常見(jiàn)腫瘤之一，近年來(lái)其發(fā)病率明顯的上升，因此為了有效控制前列腺癌，早期診斷與治療顯得尤為重要。PSA是目前公認(rèn)的前列腺癌的腫瘤標(biāo)志物，其可作為早期診斷前列腺癌的指標(biāo)用于高危人群前列腺癌的普查，它屬于一種蛋白分解酶，主要是由前列腺上皮細(xì)胞分泌，正常情況下主要是以有活性的游離形式（f-PSA）存在于前列腺液或精液中，而在血清中PSA游離形式含量較低，主要是以結(jié)合形式存在，眾多文獻(xiàn)報(bào)道其與其他腫瘤標(biāo)志物相比，具有較高度敏感性，其敏感性通常在90.0%以上。血清PSA測(cè)定具備多項(xiàng)優(yōu)點(diǎn)，包括無(wú)創(chuàng)性、精確度高、重現(xiàn)性好和穩(wěn)定，這對(duì)于前列腺癌的早期診斷、判斷患者對(duì)治療的敏感性、病情好轉(zhuǎn)情況以及復(fù)發(fā)等具有重要意義[1]。

張靜報(bào)道了PSA的生物學(xué)特性并對(duì)多種檢測(cè)方法的基本原理和方法學(xué)特點(diǎn)進(jìn)行了概述，其中包括RIA檢測(cè)法、ELISA檢測(cè)法、LICA檢測(cè)法以及ECLIA檢測(cè)法，并提出目前檢測(cè)血清前列腺特異性抗原的方法種類(lèi)繁多且各具優(yōu)缺點(diǎn)，我們應(yīng)當(dāng)針對(duì)性的選擇方法對(duì)PSA進(jìn)行檢測(cè)[2]。近年來(lái)，電化學(xué)發(fā)光免疫分析法被認(rèn)為是一種較好的檢測(cè)方法，它是集多項(xiàng)技術(shù)為一體的新型標(biāo)記免疫分析技術(shù)。有報(bào)道評(píng)價(jià)該方法與其他幾種標(biāo)記免疫分析技術(shù)相比，主要具備以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：①應(yīng)用范圍較寬泛，凡可采用其他免疫分析法檢測(cè)的項(xiàng)目，均可采用這種方法進(jìn)行檢測(cè)；②檢測(cè)的反應(yīng)可控性以及時(shí)空可控性好；③試劑用量較小，節(jié)約檢測(cè)成本；④儀器基本達(dá)到完全自動(dòng)化，操作簡(jiǎn)單，無(wú)需專(zhuān)業(yè)人士進(jìn)行操作；⑤具有安全性，無(wú)放射性損害；⑥檢測(cè)速度快，大大縮減檢測(cè)時(shí)間，完成單項(xiàng)檢測(cè)僅需10 min左右；⑦靈敏度高且線(xiàn)性范圍寬?；贓CLIA檢測(cè)方法的這一系列優(yōu)點(diǎn)，其應(yīng)用受到廣大臨床醫(yī)務(wù)人員的青睞，并且已有多項(xiàng)針對(duì)該檢測(cè)方法的研究。

周友俊等報(bào)道通過(guò)建立化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)血清中前列腺特異抗原復(fù)合物，研究結(jié)果顯示在經(jīng)摸索的最佳實(shí)驗(yàn)條件下，PSA-ACT濃度在5 ng/mL-40 ng/mL范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好（R2=0.9943），檢出的最低限為0.53 ng/mL，批內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為4.6%～6.6%，批間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為5.7%～8.0%，回收率為95.4%～104.2%，與游離前列腺特異性抗原f-PSA的交叉反應(yīng)率為0.6%，結(jié)果提示該方法簡(jiǎn)單、穩(wěn)定、靈敏且快速，為開(kāi)發(fā)檢測(cè)PSA-ACT的CLEIA試劑盒奠定了基礎(chǔ)[3]。本研究?jī)H對(duì)采用ECLIA法和CMAI法檢測(cè)血清中f-PSA進(jìn)行了分析比較，結(jié)果顯示ECLIA法f-PSA測(cè)定的相關(guān)系數(shù)、f-/t-PSA比值測(cè)定的相關(guān)系數(shù)、f-/t-PSA比值的相對(duì)靈敏度以及相對(duì)符合率均高于參比組CMAI法檢測(cè)結(jié)果，提示采用ECLIA法進(jìn)行血清中f-PSA檢測(cè)效果較好且優(yōu)于參比組CMAI法，這與相關(guān)文獻(xiàn)所得到的結(jié)果較為一致。綜上，采用ECLIA法檢測(cè)血清中f-PSA具有一定的優(yōu)越性，可在一定程度上降低檢測(cè)的假陽(yáng)性率，為臨床醫(yī)務(wù)工作人員準(zhǔn)確選擇合理的檢測(cè)f-PSA方法提供一定的參考價(jià)值，同時(shí)也為今后新型檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)提供思路和突破點(diǎn)。

[1] 周友俊.化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)血清中前列腺特異抗原復(fù)合物[J].分析化學(xué),2016,44(8):1209.

[2] 張靜.前列腺疾病患者血清前列腺特異性抗原檢測(cè)方法的研究[J].價(jià)值工程,2013(26):320.

[3] 王煒.前列腺特異性抗原對(duì)前列腺癌診斷價(jià)值的探討[J].中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2016,45(1):61.

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1671-8194（2017）12-0124-02

*通訊作者