乙型肝炎病毒血清標志物的檢測分析

彭 俏

（吉林省遼源市中心醫(yī)院檢驗科，吉林 遼源 136200）

乙型肝炎病毒血清標志物的檢測分析

彭 俏

（吉林省遼源市中心醫(yī)院檢驗科，吉林 遼源 136200）

目的對乙型肝炎血清標志物通過使用酶聯(lián)免疫吸附試驗、時間分辨免疫熒光法、化學發(fā)光法免疫分析法進行檢測并進行判斷其檢測方式的精準度。方法通過采用ELISA、ECLIA及TRFIA 3種方法對172例血清樣本進行平行測定乙型肝炎病毒，根據(jù)DNA定量檢測陽性患者的HBSAG水平，判定靈敏度和精密度。結果當進行低濃度HBSAG檢測時，ECLIA的陽性檢出率與ELISA吸附試驗和TRFIA的檢出比率高，差異較為明顯，具有一定的統(tǒng)計學意義。結論采用ELISA法檢驗進行HBV血清流行病學的調查中，具有較高的靈感度，對HBSAG進行檢驗時，發(fā)現(xiàn)其呈陽性較高，故ELISA法在對低濃度HBSAG檢測值得在臨床進行推廣及應用。

腫瘤血清標志物；乙型肝炎；檢測分析

乙型肝炎表面抗原血清標志物由Blumberg在1963年澳大利亞土著人的血清中發(fā)現(xiàn)的，曾被稱為澳大利亞抗原，《乙型肝炎表面抗原》是1974年被正式命名。HBSAG實際上也是肝炎病毒的外殼一部分之一，一般血清檢測時，它不含病毒顆粒，并不能反映病毒的有無復制性，或者復制程度還有傳染性強弱性。故選用血清檢測HBSAG呈陽性作為HBV感染的標志。

根據(jù)我院收治的172例患者，使用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）、ECLIA （化學發(fā)光法免疫分析法）[1]對乙型肝炎病毒的DNA定量檢測的陽性患者的HBSAG水平進行檢測，并判定這3種方法的靈敏度和精密度，進而對臨床應用價值進行分析。

1 材料與方法

1.1 測試資料：根據(jù)我院收治的172例患者，采集其血清樣本后，使用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）、ECLIA （化學發(fā)光法免疫分析法）對乙型肝炎病毒的DNA定量檢測的陽性患者的HBSAG水平進行檢測。其中男性79例，女性93例，年齡15～78歲。

1.2 研究方法

1.2.1 樣本采集： 空腹采血作為對檢查者初步檢測方式，檢驗師在第一時間分離血清，并將放置于- 18～- 20 ℃的冰箱或冷凍室內，并確保檢驗在2 d內完成。

1.2.2 檢測方法：將ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）、ECLIA （化學發(fā)光法免疫分析法）3種腫瘤血清標志物按照試劑盒說明書，進行酶聯(lián)免疫吸附試驗測定，同時按照全自動電化學發(fā)光儀和配套試、酶標儀等儀器設備的使用說明書進行操作。

1.2.3 靈敏度實驗：將血清稀釋成不同的濃度，ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）、ECLIA （化學發(fā)光法免疫分析法）分別進行5次重復測驗，根據(jù)每次測定結果進行研究分析。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計學：利用PSS1.7統(tǒng)計數(shù)據(jù)分析軟件對所有收集數(shù)據(jù)進行處理，進行t或卡方檢驗，P＜0.05具有統(tǒng)計學差異。

2 結 果

2.1 靈敏度檢測：3種方法相比較，ECLIA（化學發(fā)光法免疫分析法）靈敏度及精密都要相對其他兩組監(jiān)測高。

2.2 ECLIA（化學發(fā)光法免疫分析法）與ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）測定HBSAG水平各模式的結果：利用3種檢測方式對我院收治的172例血液樣本檢測，ECLIA檢測出138例，檢測出的比率為80.2%，ELISA檢測出125例，檢測出的比率為72.6%。通過資料分析：發(fā)現(xiàn)ECLIA法的低濃度HBSAG檢出率較高，具有統(tǒng)計學意義。

3 討 論

現(xiàn)今全球大概有將近3億乙型肝炎病毒的攜帶者，僅我國就有將近1億的乙型肝炎病毒攜帶者，而且我國也是世界上乙型肝炎的高發(fā)國之一。以乙型肝炎血清標志物作為臨床診斷乙型肝炎患者的診斷標準，受到臨床技術人員的高度重視，從早期癌患的免疫程度試驗、從免疫電泳實驗發(fā)展到現(xiàn)在的ECLIA（化學發(fā)光法免疫分析法）與ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）[2]。

通過數(shù)據(jù)結果發(fā)現(xiàn)，當前使用最為廣泛的ELISA與ECLIA 在HBEAG項目上出現(xiàn)極強的一致性，但是說明盡管ELISA在臨床上進行改進，從而使其滿足臨床檢測需要，ELISA在HBSAG項目上出現(xiàn)9例漏洞，說明其敏感度不足，同時還受判斷結果影響。但ELISA還有試劑成本低、收費低、適用于普通患者等不可代替的優(yōu)點[3]。

通過ECLIA對HBSAG的檢測，已經具備相應的全自動化，且該方法使用簡便，具有良好的精密度和敏感度，但是它只能使用在經確診為乙型肝炎的患者或者當其他方法學不能確定結果時，然而溯源一致的項目可以通過定量結果的回歸分析判定檢測的一致性，并對處于病毒復制期或者可能發(fā)生病毒變異的患者進行HBV、DNA和進行相關分析，便于明確臨床價值和局限性。使用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）、ECLIA （化學發(fā)光法免疫分析法）3種采用單位及溯源性不同，出現(xiàn)較大的數(shù)據(jù)差異，可以正確檢驗報告進行治療，相關評價的相互性也就決定不同方法會產生不同的檢驗結果[4]。

采用使用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）、ECLIA （化學發(fā)光法免疫分析法）3種血清標志物檢測方式對低濃度HBSAG樣本進行檢測的結果表明：發(fā)現(xiàn)ECLIA法較ELISA法與TRFIA法對于低濃度的HBSAG檢出率較高。為醫(yī)療安全保證讓低濃度HBSAG的檢出，臨床應盡可能采用ECLIA法檢測。

[1] 陳佑明,黃敬,熊符,等.時間分辨熒光免疫分析法和免疫放射分析法檢測HBSAG的對比分析[J].標記免疫分析與臨床,2006,13 (1):51.

[2] 張瑩.ELISA和ECLIA檢測乙型肝炎病毒血清標志物的檢測結果分析[J].中國醫(yī)學工程,2012,20(11):85.

[3] 周迎春,陳輝,關平.3種方法測定低濃度乙型肝炎病毒表面抗原效果評價[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2007,4(11):1070-1071.

[4] 楊凡,單詠梅,周宏,等.不同方法學檢測乙型肝炎血清標志物結果的評價分析[J].檢驗醫(yī)學,2010,25(9):723-726.

R512.6+2；R446.1

：B

：1671-8194（2017）21-0149-01