三種豬偽狂犬病疫苗免疫效果的比對(duì)

李順利，胡呈才，譚丹，薛爽，劉增再,※

（1.長(zhǎng)沙普萊柯生物科技有限公司，湖南長(zhǎng)沙410116；2.湖南省長(zhǎng)沙市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，湖南長(zhǎng)沙410013）

三種豬偽狂犬病疫苗免疫效果的比對(duì)

李順利1，胡呈才1，譚丹2，薛爽2，劉增再2,※

（1.長(zhǎng)沙普萊柯生物科技有限公司，湖南長(zhǎng)沙410116；2.湖南省長(zhǎng)沙市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，湖南長(zhǎng)沙410013）

為了比較不同豬偽狂犬病疫苗的免疫效果，選取豬偽狂犬野毒抗體陽(yáng)性場(chǎng)和陰性場(chǎng)各1個(gè)作為本次試驗(yàn)豬場(chǎng)，每個(gè)試驗(yàn)豬場(chǎng)選取40頭體重相當(dāng)?shù)慕】底胸i，隨機(jī)分成A組、B組、C組和對(duì)照組，每組各10頭。試驗(yàn)豬場(chǎng)按照各自免疫程序分別免疫A、B、C三種疫苗，對(duì)照組免疫生理鹽水。在一免前1天、二免前1天和二免后28天采集所有試驗(yàn)仔豬血樣，進(jìn)行豬偽狂犬病gB抗體和gE抗體檢測(cè)，觀察試驗(yàn)組仔豬的抗體水平變化。結(jié)果表明：豬偽狂犬野毒抗體陽(yáng)性場(chǎng)和陰性場(chǎng)試驗(yàn)仔豬一免后gB抗體均小幅下降，二免后抗體水平均明顯上升，其中A疫苗gB抗體水平高于B疫苗和C疫苗。

豬偽狂犬?。灰呙?；免疫效果；對(duì)比

豬偽狂犬病是由皰疹病毒科豬皰疹病毒I型偽狂犬病毒引起的傳染病。該病自2011年來(lái)，全國(guó)各處豬偽狂犬病有反彈抬頭的趨勢(shì)[1]。目前，對(duì)該病尚無(wú)有效的藥物治療，疫苗接種是預(yù)防該病的最有效手段之一，同時(shí)要注意生物安全的重要性。目前，市場(chǎng)上商品化的豬偽狂犬病活疫苗，主要使用有匈牙利Bartha-k61弱毒株、羅馬尼亞Bucharest株、HB-98豬和BUK株[2]，其中Bartha-k61的使用比例最高。同時(shí)，國(guó)外很多國(guó)家使用Bartha-k61弱毒株凈化了偽狂犬病，在國(guó)內(nèi)很多豬場(chǎng)長(zhǎng)期使用也取得了不錯(cuò)的成績(jī)。

為了評(píng)價(jià)豬偽狂犬病疫苗的免疫效果，挑選了3個(gè)廠家生產(chǎn)的豬偽狂犬病疫苗，在豬偽狂犬病野毒感染抗體陽(yáng)性率不同的豬場(chǎng)進(jìn)行了豬偽狂犬病活疫苗的對(duì)比試驗(yàn)，評(píng)價(jià)不同豬偽狂犬病疫苗的免疫效果，為豬偽狂犬病的防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)疫苗和試驗(yàn)動(dòng)物

選擇三家不同廠商生產(chǎn)的豬偽狂犬病疫苗作為試驗(yàn)疫苗，其中：A疫苗（批號(hào)1504004B），由洛陽(yáng)某公司生產(chǎn)；B疫苗（批號(hào)2014041），由上海某公司生產(chǎn)；C疫苗（批號(hào)1501004），由湖南某公司生產(chǎn)。

選擇長(zhǎng)沙附近的兩個(gè)豬場(chǎng)（豬偽狂犬病凈化項(xiàng)目示范場(chǎng)）作為試驗(yàn)豬場(chǎng)，豬偽狂犬病野毒抗體陽(yáng)性場(chǎng)編號(hào)為豬場(chǎng)Ⅰ，豬偽狂犬病野毒抗體陰性場(chǎng)編號(hào)為豬場(chǎng)Ⅱ，每個(gè)試驗(yàn)豬場(chǎng)選取40頭體重相當(dāng)?shù)慕】底胸i作為試驗(yàn)豬。

1.2 試驗(yàn)分組

分別在兩個(gè)豬場(chǎng)選擇母源抗體相近的6頭母豬所產(chǎn)仔豬為試驗(yàn)對(duì)象，共40頭仔豬，分為4組，每組10頭仔豬，分別注射A、B、C疫苗，另設(shè)10頭為試驗(yàn)對(duì)照組，以上試驗(yàn)豬分別標(biāo)記耳標(biāo)跟蹤。

1.3 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)豬場(chǎng)均根據(jù)各自的免疫程序進(jìn)行免疫。所有試驗(yàn)豬分別在免疫前1天、二免前1天和二免后28天全群采血，進(jìn)行豬偽狂犬病gE抗體和gB抗體檢測(cè)。

1.4 檢測(cè)試劑

PR-gE抗體檢測(cè)試劑盒（批號(hào)為99-09836），由美國(guó)IDEXX公司生產(chǎn)；PR-gB抗體檢測(cè)試劑盒（批號(hào)為FS6233），由荷蘭Biocheck公司生產(chǎn)。檢測(cè)方法和結(jié)果判定分別按照試劑盒提供的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.5 試驗(yàn)豬場(chǎng)背景及免疫程序

豬場(chǎng)Ⅰ為豬偽狂犬病野毒感染抗體陽(yáng)性場(chǎng)，陽(yáng)性率為80%，本場(chǎng)商品仔豬的免疫程序?yàn)?6日齡首免，84日齡進(jìn)行二免。

豬場(chǎng)Ⅱ?yàn)樨i偽狂犬病野毒感染抗體陰性場(chǎng)，陽(yáng)性率為0%，本場(chǎng)商品仔豬的免疫程序42日齡首免，70日齡進(jìn)行二免。

2 .結(jié)果與分析

2.1 豬偽狂犬病野毒感染抗體陽(yáng)性場(chǎng)仔豬偽狂犬病gE抗體檢測(cè)結(jié)果

表1 豬場(chǎng)Ⅰ的仔豬偽狂犬病gE抗體陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)結(jié)果

從表1可知，空白組和實(shí)驗(yàn)組的豬群豬偽狂犬病gE抗體的陽(yáng)性率均是下降的，表明豬群沒(méi)有受到豬偽狂犬病野毒感染，疫苗免疫產(chǎn)生了一定的作用，但隨著時(shí)間推移，抗體水平下降，育肥后期是否感染不確定。從檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，豬群是比較穩(wěn)定的，說(shuō)明疫苗免疫在一定程度上能預(yù)防豬偽狂犬野毒的感染。

2.2 陰性場(chǎng)仔豬偽狂犬病gE抗體檢測(cè)結(jié)果

表2 豬場(chǎng)Ⅱ仔豬偽狂犬病gE抗體陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)結(jié)果

從表2可知，所有試驗(yàn)仔豬在不同的階段都為豬偽狂犬病gE抗體陰性，豬偽狂犬病gE抗體陽(yáng)性率均為0。從檢測(cè)結(jié)果可以看出陰性豬場(chǎng)仍然維持陰性，豬群中沒(méi)有豬偽狂犬病野毒感染。

2.3 野毒感染抗體陽(yáng)性場(chǎng)仔豬偽狂犬病gB抗體滴度變化規(guī)律

圖1 豬場(chǎng)Ⅰ仔豬偽狂犬病gB抗體滴度變化規(guī)律

從圖1可知，疫苗一免后的豬偽狂犬病gB抗體沒(méi)有上升，反而下降，但二免之后抗體水平開(kāi)始上升，較一免后有明顯提升，其中免疫A疫苗組的豬只抗體提升最明顯?？瞻捉M豬只的豬偽狂犬病gB抗體一直在下降，S/P值從0.881降到0.286，從豬偽狂犬病gB抗體陽(yáng)性轉(zhuǎn)為陰性。所有試驗(yàn)豬只豬偽狂犬病gE抗體的陽(yáng)性率也一直在下降，由此可以推斷出疫苗免疫在一定程度上降低了豬群的豬偽狂犬病野毒感染率。從二免后28天（112日齡）的檢測(cè)結(jié)果可以看出，3個(gè)疫苗之間的差異，其中A疫苗產(chǎn)生抗體比較明顯，B疫苗和C疫苗相差不明顯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，豬偽狂犬病野毒陽(yáng)性場(chǎng)疫苗免疫兩次是有必要的。同時(shí)，從空白組的豬只推測(cè)，豬偽狂犬病野毒陽(yáng)性場(chǎng)的豬偽狂犬病母源抗體的持續(xù)時(shí)間比較長(zhǎng)，大約持續(xù)到70日左右。

2.4 陰性場(chǎng)仔豬偽狂犬病gB抗體滴度變化規(guī)律

圖2 豬場(chǎng)Ⅱ仔豬偽狂犬病gB抗體滴度變化規(guī)律

從圖2可知，空白組的豬偽狂犬病gB抗體一直在下降，結(jié)合豬偽狂犬病野毒感染抗體陰性場(chǎng)gE抗體的檢測(cè)結(jié)果，目前豬場(chǎng)沒(méi)有野毒感染。同時(shí)從圖2可以看出疫苗一免后抗體沒(méi)有上升，但二免后抗體上升明顯，與豬偽狂犬病野毒感染抗體陽(yáng)性場(chǎng)的結(jié)果是一致的。在豬偽狂犬病野毒感染抗體陰性場(chǎng)進(jìn)行疫苗對(duì)比實(shí)驗(yàn)，排除了豬偽狂犬病野毒的干擾，更能體現(xiàn)出疫苗的效果。檢測(cè)結(jié)果表明，A疫苗誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗體優(yōu)于其他兩種疫苗。豬偽狂犬病野毒感染抗體陰性場(chǎng)同樣建議免疫兩次,這樣能保證育肥后期豬只的抗體水平比較高。同時(shí)，根據(jù)空白組檢測(cè)結(jié)果可以推測(cè)出陰性場(chǎng)的豬偽狂犬病母源抗體持續(xù)時(shí)間可達(dá)到40日齡左右。

3 討論

通過(guò)疫苗試驗(yàn)對(duì)比，從豬偽狂犬病野毒陽(yáng)性場(chǎng)和豬偽狂犬病陰性場(chǎng)的豬偽狂犬病gB和豬偽狂犬病gE抗體的檢測(cè)結(jié)果看，A疫苗的免疫效果明顯優(yōu)于其他2個(gè)廠商。

通過(guò)對(duì)比豬偽狂犬病野毒陽(yáng)性場(chǎng)和豬偽狂犬病陰性場(chǎng)之間的免疫效果發(fā)現(xiàn)，豬偽狂犬病野毒感染嚴(yán)重程度不同，但疫苗免疫效果上的抗體增長(zhǎng)規(guī)律有相似之處，疫苗一免后抗體沒(méi)有上升，二免后抗體上升明顯，但上升幅度不高，可能與試驗(yàn)的檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)有關(guān)，有文獻(xiàn)報(bào)道，免疫后40～60天達(dá)到抗體高峰[3]。豬偽狂犬病gB抗體出現(xiàn)這種先降后升的情況，可能與母源抗體干擾疫苗免疫抗體產(chǎn)生有關(guān)[3]。從豬偽狂犬病陰性場(chǎng)空白組的試驗(yàn)結(jié)果可以看出，豬偽狂犬病母源抗體的持續(xù)時(shí)間比較長(zhǎng)，有文獻(xiàn)提到，最長(zhǎng)可以持續(xù)到56日齡左右[4]。高母源抗體導(dǎo)致疫苗在體內(nèi)增殖受阻，沒(méi)有產(chǎn)生明顯的抗原抗體反應(yīng)，但產(chǎn)生了免疫記憶，所以，疫苗二免后抗體上升明顯。從豬偽狂犬病野毒陽(yáng)性場(chǎng)的檢測(cè)結(jié)果看，疫苗免疫在一定程度能降低豬群的野毒的感染，同時(shí)也間接說(shuō)明疫苗免疫能減少豬群散毒的風(fēng)險(xiǎn)，降低豬群感染壓力[5]。同時(shí)豬偽狂犬病陰性場(chǎng)沒(méi)有野毒的感染壓力，豬只對(duì)疫苗免疫應(yīng)答的反應(yīng)更接近理想情況。

由于養(yǎng)殖環(huán)境復(fù)雜，豬只除免疫偽狂犬疫苗外，還需接種其他相關(guān)傳染病的疫苗。在免疫豬偽狂犬病和其他疫苗時(shí)，應(yīng)根據(jù)本場(chǎng)自身要求，制定合理的免疫程序，同時(shí)避免病原抗原相互干擾而影響豬偽狂犬病疫苗的免疫效果[6]。

[1]畢峻龍,楊培昌,肖俊,等.2009年-2013年云南省楚雄地區(qū)豬偽狂犬病血清流行病學(xué)調(diào)查和防控措施研究[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2015, (4):117-120.

[2]張建永,祖立巖.豬偽狂犬活疫苗基因缺失株綜述[J].北方牧業(yè), 2007,(23):27.

[3]朱玲,郭萬(wàn)柱,徐志文.豬偽狂犬病基因缺失活疫苗(SA215)免疫母豬后仔豬母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律及首免日齡[J].中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào), 2004,24(4):320-322.

[4]孫圣福,陳靜,馬慧玲,等.不同日齡豬偽狂犬抗體跟蹤監(jiān)測(cè)與分析[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī),2011,(4):232-234.

[5]陳陸,郭萬(wàn)柱,徐志文,等.偽狂犬病基因缺失疫苗SA215抗強(qiáng)毒潛伏感染能力[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2005,26(5):52-56.

[6]呼顯生,黃克群,許英.豬瘟、豬偽狂犬病和豬繁殖與呼吸綜合征的免疫程序設(shè)計(jì)[J].吉林畜牧獸醫(yī),2013,(12):11-13.

S852.65

B

1006-4907（2016）05-0041-03

10.3969/j.issn.1006-4907.2016.05.017

2016-08-19

長(zhǎng)沙市科技計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目（K1203180-21）。

李順利（1979～），男，湖南耒陽(yáng)人，大學(xué)本科，獸醫(yī)師，主要從事畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣工作，E-mail:609653130@qq.com。

※通訊作者：劉增再（1980～），男，湖南醴陵人，碩士，主要從事動(dòng)物疫病防控技術(shù)的研究和推廣，E-mail:15378351@qq.com。