依普利酮片的有效成分檢測(cè)

任 紅

（吉林省藥物研究院，吉林 長春 130061）

由輝瑞/法瑪西亞公司聯(lián)合進(jìn)行開發(fā)的依普利酮片是一種新型的具有選擇性阻斷醛固酮受體的阻斷劑，也是第一個(gè)獲得上市準(zhǔn)許的醛固酮受體選擇性阻斷劑[1]。依普利酮對(duì)醛固酮受體的選擇性很高，避免了相互作用在孕激素受體和雄激素受體上，因此采用該種藥品可以避免或減少各種不良反應(yīng)的發(fā)生，在臨床上應(yīng)用的前景良好。依普利酮片良好的降血壓作用和持久的作用特性也能夠有效的控制高血壓、預(yù)防心血管疾病對(duì)靶器官的損害，減輕心血管由于醛固酮受體受到的不利影響[2]。本文通過采用HPLC法對(duì)依普利酮片的有效成分進(jìn)行測(cè)定，進(jìn)而能夠能依普利酮片的質(zhì)量進(jìn)行有效的控制?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 儀器與試劑

儀器：采用日本島津公司生產(chǎn)的LC-10AT高效液相色譜儀和德國賽多利斯股份公司生產(chǎn)的Sartorius BS 21S電子天平[3]。

試劑：采用本院提供的純度為99.8%的依普利酮對(duì)照品、依普利酮原料藥品以及本院提供的規(guī)格為25 mg的依普利酮片。色譜純?yōu)橐译妫治黾優(yōu)槌译嫱獾钠渌噭?/p>

2 方法與結(jié)果

2.1 確定檢測(cè)波長

取依普利酮片溶解稀釋制成含量為10 μg/ml的溶液，采用200～400 nm的波長用紫外-可見分光光度法掃描處理好的溶液。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在波長為244 nm時(shí)本產(chǎn)品的吸收度最大。

2.2 試驗(yàn)色譜條件與系統(tǒng)的適用性

在色譜柱柱溫為20℃，乙腈與水的比例為30:70，液體流速為1.0 ml/min，檢測(cè)波的波長為244 nm，進(jìn)樣20 μl的條件下，計(jì)算依普利酮峰的理論板數(shù)結(jié)果大于2000。

2.3 線性實(shí)驗(yàn)

精密地稱量適量依普利酮對(duì)照品進(jìn)行溶解稀釋，分別制成20.144 μg/ml、60.432 μg/ml、100.720 μg/ml、141.008 μg/ml與201.440 μg/ml的溶液，每種溶液分別取20 μl，將去取出的溶液倒入液相色譜儀中并記錄結(jié)果色譜圖，并得到以C（依普利酮濃度）和A（峰面積）為變量的線性回歸方程為A=8721.3C+355.01（r=0.9999）。通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知在20.144～201.44 μg/ml的依普利酮濃度范圍內(nèi)時(shí)，峰面積和樣品濃度有良好的線性關(guān)系。

2.4 空白試驗(yàn)

向100 ml的量瓶中置入精密稱取的適量的空白輔料，溶解稀釋至量瓶的刻度線處，取適量的濾液按照“2.7樣品測(cè)定”的操作方法記錄結(jié)果的色譜圖。結(jié)果發(fā)現(xiàn)空白輔料對(duì)測(cè)定結(jié)果無干擾。

2.5 精密度與穩(wěn)定性

取批號(hào)相同的供試品制成溶液，先進(jìn)性6次的重復(fù)性進(jìn)樣，此時(shí)測(cè)出的依普利酮含量的RSD=0.38%；同樣取這個(gè)批號(hào)的供試品制成溶液，在0 h、2 h、4 h、6 h和8 h分別進(jìn)樣，測(cè)得RSD=0.22%。檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)在8 h之內(nèi)依普利酮供試品有良好的穩(wěn)定性。

2.6 回收率實(shí)驗(yàn)

分別向100 ml的量瓶中置入9份按照處方精密稱取共140 mg空白輔料，在其中3份中加入精密稱取的20 mg依普利酮對(duì)照品，其中3份則加入精密稱取的25 mg依普利酮對(duì)照品，最后3份則加入精密稱取的30 mg依普利酮對(duì)照品。按照同樣的方法配制供試品的溶液。結(jié)果測(cè)得平均回收率為99.1%，RSD為0.65%。

2.7 樣品測(cè)定

取20片本次試驗(yàn)的依普利酮片，研磨并精密地稱取適量粉末置入容量大小為25 ml的量瓶中，溶解稀釋至刻度線，向25 ml量瓶中置入精密稱取的5 ml的濾液，并稀釋至刻度，用作供試品。隨后精密地量取20 μl該溶液注入液相色譜儀記錄結(jié)果色譜圖；此外按照同種方法測(cè)定依普利酮對(duì)照品。測(cè)得所測(cè)得3個(gè)批次的依普利酮的含量值為99.3%、99.2%和99.5%，RSD為0.6%、0.6%和0.8%。

3 討 論

分別采用高效液相色譜法（HPLC）和紫外-可見分光光度法檢測(cè)依普利酮片的含量有基本一致的測(cè)量結(jié)果，但HPLC法結(jié)果更準(zhǔn)確且有較好的重現(xiàn)性。在溫度為40℃±2℃，RH75%±5%的條件下將本次測(cè)定的依普利酮片進(jìn)行6個(gè)月的加速實(shí)驗(yàn)，在溫度為25℃±2℃，RH60%±10%的條件下留樣12個(gè)月進(jìn)行長期考察，均發(fā)現(xiàn)依普利酮片中有關(guān)物質(zhì)以及溶液的含量和pH值變化不明顯，表明在這兩種情況下貯存依普利酮片有較好的穩(wěn)定性。

綜上所述，運(yùn)用HPLC法能夠有效的檢測(cè)依普利酮片的有效成分，操作簡便，結(jié)果可靠，可應(yīng)用在控制依普利酮片的質(zhì)量上，因此采用此種方式不失為一種行之有效的方法，值得應(yīng)用。

[1]杜明犖,連 瑩.HPLC法測(cè)定依普利酮片含量及有關(guān)物質(zhì)[J].醫(yī)藥論壇雜志,2017,(7).28

[2]陳 靜,潘春燕,王 璐,等.人血漿中依普利酮的LC-MS/MS測(cè)定研究[J].藥物分析雜志,2016,(11):1925-1930.