5種中草藥提取物對(duì)菇蠅的毒殺活性

王謙，史聰穎，張正，黃紫飄，宋倩

(河北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院食藥用真菌研究所,河北保定 071002)

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5種中草藥提取物對(duì)菇蠅的毒殺活性

王謙，史聰穎，張正，黃紫飄，宋倩

(河北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院食藥用真菌研究所,河北保定 071002)

采用藥膜法，以清水為陰性對(duì)照，測(cè)定了5種中草藥提取物對(duì)菇蠅的毒殺活性，結(jié)果顯示：在供試的5個(gè)濃度下，百部和苦參對(duì)菇蠅的毒殺活性顯著，在50 mg/mL質(zhì)量濃度下，處理12 h后，百部、苦參對(duì)菇蠅的毒殺活性分別是85.00%和81.67%，處理24 h，均達(dá)到了100.00%.川楝子、龍膽草、透骨草次之.通過(guò)LC50的測(cè)定，結(jié)果顯示，百部、苦參24 h毒殺LC50分別是13.790 mg/mL和18.668 mg/mL.田間防效試驗(yàn)表明：百部和苦參提取物對(duì)菇蠅具有良好的藥效，用藥3天的防效分別達(dá)到73.66%和71.27%，用藥7天后維持在75.00 %左右，與清水對(duì)照相比防效顯著.建議在生產(chǎn)中輪流使用50 mg/mL的百部提取物和75 mg/mL的苦參提取物，在菇蠅發(fā)生初期及時(shí)噴霧防治.

中草藥；菇蠅；毒殺活性

在食用菌栽培過(guò)程中，菇蠅經(jīng)常發(fā)生[1-2]，其攜帶大量的病毒和病菌，在培養(yǎng)料或菇體上取食或產(chǎn)卵時(shí)，會(huì)傳播病毒病菌，病害侵染基質(zhì)和菇體，從而造成多種病蟲害交叉感染，影響了產(chǎn)量[3-4].為了提高產(chǎn)量,增加收益，大部分菇農(nóng)通過(guò)農(nóng)藥來(lái)抑制蟲害的發(fā)生[5-6],其中包括國(guó)家已經(jīng)明令禁止使用的農(nóng)藥如艾氏劑、狄氏劑、毒殺酚等.這些農(nóng)藥屬于有機(jī)氯農(nóng)藥和殺蟲劑，分解慢，極易在環(huán)境和食品中殘留，不僅影響人體健康，還影響外貿(mào)出口[7-8].因此，通過(guò)研究植物源材料[9-13]開發(fā)出環(huán)境友好型農(nóng)藥以提高生態(tài)效應(yīng)成為熱點(diǎn).為此，進(jìn)行了5種中草藥提取物對(duì)菇蠅的毒殺活性研究，以期對(duì)食用菌生產(chǎn)中菇蠅的防治工作起到一定的技術(shù)支撐作用.

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 昆蟲

菇蠅，由河北大學(xué)食藥用真菌研究所實(shí)驗(yàn)教學(xué)基地提供.

1.2 材料

百部、透骨草、龍膽草、川楝子、苦參(市購(gòu))，詳見表1.

表1 實(shí)驗(yàn)植物樣品名錄

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 中草藥提取物的制備

將一定量的中草藥干品用10倍體積的水浸提，煮沸后采用文火繼續(xù)浸提15 min，過(guò)濾，收集濾液.將濾渣用8倍體積的水再次浸提，過(guò)濾收集濾液[14-16].合并2次過(guò)濾所得濾液，濃縮得到1 g/mL中草藥提取溶液，置于4 ℃低溫環(huán)境保存，備用.

2.2 中草藥提取物對(duì)菇蠅毒殺活性的觀察

菇蠅被有活性的化合物處理后，表現(xiàn)出中毒反應(yīng).其具體表現(xiàn)為：首先活動(dòng)頻率增大增強(qiáng)；接著活動(dòng)力減弱，漂浮于水面不動(dòng)，對(duì)針觸反應(yīng)敏捷；隨后顯示活力不足，幼蟲沉于水底，對(duì)針觸反應(yīng)遲鈍；最后幼蟲軀體顏色發(fā)黑，身體萎縮，沉于水底不動(dòng)，對(duì)針觸無(wú)反應(yīng)，即死亡[17-18].

2.3 活性初篩 (藥膜法)

采用藥膜法[19]，在50 mL錐形瓶中加入5 mL稀釋好的藥液，迅速滾動(dòng)形成均勻的藥膜，將剩下的藥液倒出.在出菇大棚內(nèi)，用捕蟲網(wǎng)隨機(jī)捕蟲，挑選20只形狀體重接近的菇蠅，放在盛有不同處理液的器皿內(nèi)，以清水做對(duì)照，每處理各重復(fù)3次，分別于12 h和24 h后觀察并記錄試蟲的狀態(tài)和死亡數(shù)，并計(jì)算試蟲的死亡率.

2.4 LC50的測(cè)定

依據(jù)初篩實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選擇活性較高的中草藥進(jìn)行LC50的測(cè)定[20].應(yīng)用SPSS 19.0對(duì)殺蟲活性的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行毒力回歸分析，求得LC50等值.如果測(cè)試組的空白死亡率<5%，則實(shí)驗(yàn)組死亡率不進(jìn)行校正；如果測(cè)試組的空白死亡率>5%，則采用 Abbott 公式對(duì)各實(shí)驗(yàn)組死亡率進(jìn)行校正.

試蟲的死亡率和校正死亡率按照下列公式進(jìn)行計(jì)算：

死亡率 =(死亡蟲數(shù)/總蟲數(shù))×100%[21],

校正死亡率 =(處理死亡率-對(duì)照死亡率)/(1-對(duì)照死亡率)×100%[21].

2.5 田間藥效試驗(yàn)

田間藥效試驗(yàn)在河北大學(xué)食藥用真菌研究所實(shí)驗(yàn)教學(xué)基地平菇出菇棚進(jìn)行.對(duì)初篩篩選出的藥劑進(jìn)行田間藥效試驗(yàn).每種藥劑選擇 1 個(gè)田間推薦劑量，另設(shè)清水為空白對(duì)照.小區(qū)面積(5 m ×4 m)，每處理重復(fù)4次.分別將各藥劑對(duì)水?dāng)嚢杈鶆?，用工農(nóng)16-型背負(fù)式手動(dòng)噴霧器進(jìn)行均勻噴霧1次.藥前采用5點(diǎn)取樣法進(jìn)行取樣，每點(diǎn)選取2個(gè)平菇菌袋，做上標(biāo)記，調(diào)查記錄活菇蠅蟲數(shù)，作為蟲口基數(shù)，藥后 3、7、10天統(tǒng)計(jì)標(biāo)記菌袋菇蠅數(shù)量.計(jì)算蟲口減退率和校正防效.

蟲口減退率 = (施藥前蟲數(shù)-施藥后蟲數(shù))/施藥前蟲數(shù)×100%[22]，

校正防效 =(處理區(qū)蟲口減退率-對(duì)照區(qū)蟲口減退率)/(1-對(duì)照區(qū)蟲口減退率)×100%[22].

3 結(jié)果與分析

3.1 5種中草藥提取液對(duì)菇蠅的毒殺作用

采用藥膜法測(cè)定5種中草藥提取物對(duì)菇蠅的毒殺活性，具體情況如下.

表2是百部提取液對(duì)菇蠅的殺蟲活性結(jié)果.由表2可知，不同質(zhì)量濃度的百部對(duì)菇蠅均具有殺蟲活性，隨著質(zhì)量濃度的升高殺蟲活性增強(qiáng)，且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)也增強(qiáng).處理12 h后，質(zhì)量濃度在100 mg/mL 下試蟲就全部死亡，殺蟲活性達(dá)到了100.00%；50 mg/mL下，殺蟲活性為85.00%，但是處理24 h后試蟲全部死亡，殺蟲活性達(dá)到了100.00%.綜上所述，在供試質(zhì)量濃度內(nèi)，用50 mg/mL的百部提取液處理菇蠅24 h，殺蟲活性即可達(dá)到100.00%.

由表3可知，在供試質(zhì)量濃度內(nèi)，用50 mg/mL的苦參提取液處理菇蠅24 h，殺蟲活性即可達(dá)到100.00%.

表2 百部提取液的殺蟲活性

表中數(shù)據(jù)均為3次重復(fù)的平均值.

表3 苦參提取液的殺蟲活性

表中數(shù)據(jù)均為3次重復(fù)的平均值.

同上，由表4可知，在供試質(zhì)量濃度內(nèi),用75 mg/mL的川楝子提取液處理菇蠅24 h，殺蟲活性即可達(dá)到100.00%.

由表5可知，在供試質(zhì)量濃度內(nèi),用75 mg/mL的龍膽草提取液處理菇蠅24 h，殺蟲活性即可達(dá)到100.00%.

表4 川楝子提取液的殺蟲活性

表中數(shù)據(jù)均為3次重復(fù)的平均值.

表5 龍膽草提取液的殺蟲活性

表中數(shù)據(jù)均為3次重復(fù)的平均值.

同上，由表6可知，在供試質(zhì)量濃度內(nèi),用100 mg/mL的透骨草提取液處理菇蠅24 h，殺蟲活性即可達(dá)到100.00%.

表6 透骨草提取液的殺蟲活性

表中數(shù)據(jù)均為3次重復(fù)的平均值.

綜上所述，在供試的5個(gè)質(zhì)量濃度下，百部和苦參對(duì)菇蠅的毒殺活性顯著，在50 mg/mL下，處理12 h后，百部、苦參對(duì)菇蠅的毒殺活性分別是85.00%、81.67%，處理24 h，均達(dá)到了100.00%.川楝子、龍膽草、透骨草次之.

3.2 百部、苦參提取物對(duì)菇蠅的毒力測(cè)定

測(cè)定百部、苦參24 h對(duì)菇蠅的LC50，結(jié)果見表7.由表7可以看出，百部對(duì)菇蠅具有較高的殺蟲活性，24 h的LC50為13.790 mg/mL，苦參的為18.668 mg/mL.

表7 百部、苦參提取物對(duì)菇蠅24 h 的毒力

3.3 田間防治效果

在平菇菇蠅發(fā)生期，將百部、苦參提取物按設(shè)計(jì)劑量?jī)端畤娛┢焦匠龉酱?，噴藥后于不同天?shù)進(jìn)行調(diào)查，結(jié)果經(jīng)整理、計(jì)算，列于表8.

表8 百部、苦參提取物防治菇蠅田間藥效試驗(yàn)結(jié)果

由表8可以看出，50 mg/mL的百部提取物在藥后3、7、10天的蟲口減退率分別是70.43%、76.81%、57.89%，校正防效分別是73.66%、78.95%、63.05%；75 mg/mL的苦參提取物在藥后3、7、10天的蟲口減退率分別是67.74%、70.32%、56.35%，校正防效分別是71.27%、73.06%、61.70%；百部提取物的防效均高于苦參提取物.但是二者在藥后10天均出現(xiàn)了防效降低的現(xiàn)象.與清水對(duì)照相對(duì)比，百部、苦參對(duì)菇蠅均有較強(qiáng)的防效.

4 結(jié)論

不同中草藥對(duì)菇蠅的毒殺作用不同，隨著質(zhì)量濃度的增大毒殺作用增強(qiáng).本實(shí)驗(yàn)報(bào)道了應(yīng)用中草藥對(duì)菇蠅進(jìn)行防治的研究.結(jié)果表明：在藥膜法測(cè)定中，百部、苦參對(duì)菇蠅的毒殺活性最高，24 h毒殺LC50分別是13.790 mg/mL和18.668 mg/mL.川楝子、龍膽草、透骨草次之.

田間防效試驗(yàn)表明：百部和苦參提取物對(duì)菇蠅具有良好的藥效，用藥3天的防效分別達(dá)到73.66%和71.27%，用藥7天后維持在75.00%左右，與清水對(duì)照相比防效顯著.建議在生產(chǎn)中使用50 mg/mL的百部提取物和75 mg/mL的苦參提取物，在菇蠅發(fā)生初期及時(shí)噴霧防治.為避免長(zhǎng)期使用一種藥物使菇蠅產(chǎn)生抗藥性，因此建議百部和苦參輪流使用.

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(責(zé)任編輯：趙藏賞)

Insecticidal acticity of the botanical extracts from 5 Chinese herbs against phorid flies

WANG Qian,SHI Congying,ZHANG Zheng,HUANG Zipiao,SONG Qian

(Institute of Edible and Medicinal Fungi,College of Life Science,Hebei University,Baoding 071002,China)

Using the residue method,with water as the negative control,we measured the insecticidal acticity of the botanical extracts from 5 Chinese herbs against phorid flies.The results showed that in the selected five concentrations,the insecticidal activity ofStemonajaponicaandSophoraflavescensis significant,under 50 mg/mL mass concentration,12 h after treatment,the insecticidal activity were 85.00%,81.67%,after 24 h,reached 100.00%.Meliatoosendan、Gentianascabra,Phrymaleptostachya,take second place.Through LC50determination,the results showed that the 24 h LC50ofSt.japonicaandSo.flavescenswere 13.790 mg/mL and 18.668 mg/mL.Field control effect test showed that the extract ofSt.japonicaandSo.flavescenshas good efficacy against phorid flies,the control effect is 73.66% and 71.27% after three days,around 75.00% after 7 days,compared with clear water control.We recommend in production to use 50 mg/mLSt.japonicaand 75 mg/mLSo.flavescensalternatively, at the beginning of the phorid flies season.

Chinese herbs; phorid flies; insecticidal acticity

10.3969/j.issn.1000-1565.2016.06.011

2016-04-25

河北省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系食用菌創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目

王謙(1962-)，男，北京人，河北大學(xué)研究員，主要從事食藥用真菌研究與開發(fā)工作.E-mail:wq6203_cn@126.com

Q93-335

A

1000-1565(2016)06-0635-06