椰子油微膠囊對斷奶仔豬生長性能、血清生化指標及其腸道菌群的影響

■楊亞強蔣蘇穎杜 妮熊 華*

（1.南昌大學食品科學與技術國家重點實驗室，江西南昌330047；2.江西邁吉生化營養(yǎng)有限公司，江西南昌330029）

椰子油是一種源于椰子果肉的植物性飽和油脂，含中短鏈脂肪酸比例達80%以上，其中C12脂肪酸含量占60%，有超過15%的C6、C8、C10脂肪酸。椰子油不僅含有亞油酸、亞麻酸等必需脂肪酸，而且還能改善飼料的適口性，具有高的消化率。隨著現(xiàn)代養(yǎng)豬業(yè)日益規(guī)?；?、集約化的發(fā)展,需要在有限的配方容量里配制出更高營養(yǎng)水平的飼料，有效緩解仔豬斷奶綜合癥，提高仔豬成活率，增加養(yǎng)豬業(yè)生產效益。研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加椰子油雖然對豬的生長性能無影響，但增加了血清中膽固醇的含量，改變了脂肪組織的組成。斷奶仔豬飼糧中添加椰子油可以顯著提高料重比和血清高密度脂蛋白含量，但對日增重和日采食量均無顯著影響。在早期斷奶仔豬飼糧中用大米糖漿替代乳糖對生長性能和胰島素生長因子軸均沒有影響，有促進腸道吸收膽固醇的作用，但對脂肪和蛋白代謝沒有影響。有文獻報道大米蛋白肽能顯著提高育成豬的日增重、能量代謝率、蛋白代謝率和飼料效率，也能使豬血液中的總蛋白、血糖和丙氨酸轉移酶含量提高，并明顯降低豬的腹瀉率、血液中的尿素氮和乳酸脫氫酶的濃度。大米蛋白肽可以直接從腸道吸收,吸收速度比游離氨基酸更快，而且具有多方面的營養(yǎng)與生理功能。本課題組前期以稻米經過淀粉高溫酶解之后得到的副產品米渣為原料，通過復合酶酶解制備高純度大米蛋白肽，隨后制備大米蛋白肽-糖漿為壁材的功能性椰子油微膠囊。目前，有關大米蛋白肽、糖漿和椰子油對仔豬生長性能影響研究主要集中在單獨添加，而有關三者組合使用對斷奶仔豬生長性能影響的研究報道甚少。鑒于此，本試驗通過與以大米糖漿為壁材的椰子油微膠囊和基礎飼料組為對比，考察大米蛋白肽-糖漿為壁材的功能性椰子油微膠囊對斷奶仔豬生長性能、養(yǎng)分表觀消化率、血清生化指標及其腸道菌群的影響，以探討飼料中添加大米蛋白肽對斷奶仔豬的影響，為其在斷奶仔豬上的應用提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設計

本試驗采用單因素完全隨機試驗設計，選取90頭25日齡斷奶的“杜×長×大”三元雜交仔豬，按體重、性別完全隨機設計分為3組,每組3個重復，每個重復10頭。3組分別飼喂基礎飼糧（對照組CON組）、基礎飼糧+3%以大米糖漿為壁材的椰子油微膠囊（A組）、基礎飼糧+3%以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊（B組）。試驗預飼期7 d，正試期37 d。

1.2 試驗飼料與飼養(yǎng)管理

試驗基礎飼糧為豬場實際配制飼糧，基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗使用椰子油微膠囊均由實驗室自制。正試期每天飼喂四次,分別在08：00、12：00、16：00、20：00，每次添加飼糧直至槽內有少量余料為止。自由飲水和采食,每日清掃圈一次。每隔3 d對圈舍周圍用百毒殺噴霧消毒。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平

1.3 考察指標及方法

1.3.1 生長性能的測定

日增重：在試驗期間第1 d、第37 d清晨08：00稱量仔豬空腹體重。并計算試驗全期平均日增重（ADG）。

采食量：試驗期間以組為單位準確測定和記錄每天飼料喂量,并計算試驗全期的平均日采食量(ADFI)。

料重比：根據(jù)試驗全期的平均日采食量與平均日增重之比來計算各個階段的料重比(F/G)。

1.3.2 養(yǎng)分表觀消化率的測定

飼養(yǎng)試驗進行到第3周開展為期4 d的消化試驗，消化試驗期每天用收糞夾收集新鮮未污染糞樣（20 g），糞樣稱重后，按照糞樣重量的5%的比例加入10%濃硫酸或鹽酸，置于-20℃冰箱保存，4 d消化試驗結束后將各組試驗豬的糞樣混勻，65℃烘箱中烘至恒重，室溫下回潮24 h，稱重，粉碎過40目篩，裝密封袋保存于-20℃冰箱冷凍待測。

粗蛋白質利用半自動凱氏定氮儀測定;粗脂肪參照GB/T6433—94的方法進行;營養(yǎng)成分表觀消化率計算公式如下所示：

某營養(yǎng)成分表觀消化率(%)=(采食量×料中成分-糞量×糞中成分)/采食量×料中成分×100

1.3.3 血清生化指標測定

在試驗第37 d，從每組中隨機挑選1頭仔豬（體重與窩平均體重相近）空腹稱重，然后再前腔靜脈取血15 ml，將采取的新鮮血液注入試管中，采用3 000 r/min離心10 min，制備血清樣品,吸取血清至2.5 ml的EP管中，置于-20℃保存待測血清生化指標。血清總蛋白、白蛋白、球蛋白、葡萄糖、甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇用全自動生化分析儀測定。

1.3.4 腸道菌群測定

大腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌濃度：在試驗第37 d，從每組中隨機挑選1頭仔豬屠宰，分別在空腸、回腸和結腸中部截扎長5 cm的腸段，將截扎段剪下，立即放入盛有冰塊的疫苗箱中運回實驗室，在無菌操作臺上取0.5 g內容物于無菌小瓶中，加無菌稀釋液4.5 ml，震蕩3～5 min，靜置10 min，吸取上清液0.5 ml于盛有4.5 ml無菌稀釋液的小瓶中進行10-2稀釋，振蕩3～5 min靜置10 min，依次進行10-3～10-8稀釋。將各腸段內容物稀釋液50 μl分別接種于麥康凱培養(yǎng)基、LBS培養(yǎng)基、BLb培養(yǎng)基上，每個稀釋度3個重復。大腸桿菌37℃有氧培養(yǎng)24 h進行菌落計數(shù)。雙歧桿菌和乳酸桿菌37℃厭氧培養(yǎng)48 h進行菌落計數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

數(shù)據(jù)采用EXCEL 2007進行初步處理，用SPSS 18.0軟件進行單因素方差分析（one-way ANOVA）并進行差異顯著性檢驗，當差異顯著時用Duncan's法進行多重比較，結果以“平均值±標準差”表示。

2 結果與分析

2.1 椰子油微膠囊對斷奶仔豬生長性能的影響(見表2)

表2 椰子油微膠囊對斷奶仔豬生長性能的影響

由表2可知，飼糧中添加椰子油微膠囊對斷奶仔豬的平均日增重、平均日采食量均有顯著性影響（P＜0.05），對料重比無顯著性影響（P＞0.05）。但處理組中平均日增重以B組最高，分別高出對照組和A組24.00%、5.08%；處理組中平均日采食量B組最高，分別高出對照組和A組14.81%、3.33%，有降低料重比的趨勢。表明飼糧中添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊能促進斷奶仔豬的日增重、日采食量，降低料重比。

2.2 椰子油微膠囊對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響(見表3)

表3 添加椰子油微膠囊對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響(%)

由表3可知，飼糧中添加椰子油微膠囊對干物質、粗脂肪和粗蛋白的表觀消化率均有顯著性影響（P＜0.05）。處理組間，干物質表觀消化率最高的是B組，對照組最低；粗脂肪和粗蛋白的表觀消化率也呈同樣的趨勢。B組中干物質、粗脂肪和粗蛋白的表觀消化率與對照組相比分別高出4.51%、17.34%、18.76%。B組干物質、粗脂肪和粗蛋白的表觀消化率均高于A組（P＜0.05）。表明飼糧中添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊能提高斷奶仔豬對粗脂肪和粗蛋白質的利用效率。

2.3 椰子油微膠囊對斷奶仔豬血清生化指標的影響(見表4)

表4 椰子油微膠囊對斷奶仔豬血清生化指標的影響

由表4可知，斷奶仔豬飼糧中添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊相對對照組升高了血清總蛋白、白蛋白、球蛋白的含量，降低了甘油三酯的含量，B組改善效果顯著(P＜0.05)；對血清葡萄糖、膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白均無顯著性影響。這說明飼糧中添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊能增加血清中總蛋白、白蛋白、球蛋白濃度，降低甘油三酯濃度。

2.4 椰子油微膠囊對斷奶仔豬腸道菌群的影響（見表5）

表5 椰子油微膠囊對斷奶仔豬糞中微生物數(shù)量的影響(lgCFU/g)

從表5可知，飼糧中添加椰子油微膠囊對斷奶仔豬空腸、回腸、結腸中大腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌的數(shù)量均無顯著性影響（P＞0.05）。

3 討論與結論

3.1 椰子油微膠囊對斷奶仔豬生長性能的影響

本試驗結果表明，斷奶仔豬飼糧中添加椰子油微膠囊可以提高日增重和日采食量，對料重比無影響。有大量研究表明，仔豬飼糧中單一地添加椰子油和大米糖漿對生長性能無顯著影響，添加大米蛋白肽對生長性能有顯著影響。Hou等研究發(fā)現(xiàn)，用10%大米蛋白替代早期斷奶仔豬飼糧中添加的乳蛋白能夠顯著提高日增重和日采食量，與本試驗結果相同。但也有文獻報道添加大米蛋白和米糠蛋白對仔豬生長性能無影響。本試驗結果表明，添加3%椰子油微膠囊對仔豬生長性能有顯著影響，可能是因為該試驗添加椰子油微膠囊壁材為大米蛋白肽-糖漿復合壁材，與椰子油產生協(xié)同效應。蛋白質和碳水化合物是微膠囊化的主要壁材，但在傳統(tǒng)壁材中，這兩種生物大分子是以物理連接的方式形成壁材的，蛋白質作為兩親物質吸附在界面形成對欲包埋功能因子與連續(xù)相的隔離，碳水化合物借助其空間穩(wěn)定能力幫助形成具有一定厚度的、致密的微膠囊壁。

3.2 椰子油微膠囊對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響

仔豬對飼料的表觀消化率受多種因素的影響，比如豬的品種、環(huán)境、飼養(yǎng)管理等。何若鋼等在飼糧中添加不同的蛋白水平能夠顯著提高豬的粗蛋白質、干物質等消化率。Cho等研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加椰子油對斷奶仔豬粗脂肪的消化率有顯著提高，對干物質和消化能無顯著性影響。本試驗發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加椰子油微膠囊對斷奶仔豬的粗脂肪、粗蛋白質和干物質均有顯著性提高，表明添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊能夠促進仔豬對各營養(yǎng)物質的吸收。

3.3 椰子油微膠囊對斷奶仔豬血清生化指標的影響

血清總蛋白由血清白蛋白和血清球蛋白組成，血清白蛋白主要在肝臟合成蛋白質中起作用，血清球蛋白可以反應動物的一個免疫水平和抵抗力。血清總蛋白是動物體內反應蛋白質水平及代謝的一個風向標，總蛋白含量高說明動物的蛋白質合成代謝速度快。本試驗結果表明，斷奶仔豬飼糧中添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊后對血清總蛋白、白蛋白、球蛋白均有顯著提高。這說明該椰子油微膠囊能夠促進仔豬體內蛋白質的合成和增強免疫能力。血清甘油三酯反應體內脂質代謝的情況，本試驗發(fā)現(xiàn)，添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊后甘油三酯含量顯著降低，對血清葡萄糖、膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白無顯著影響，這與Le等的研究結果一致，這說明添加椰子油微膠囊能夠促進體內脂肪的代謝和利用，從而降低了血清TG含量。膽固醇含量有降低趨勢，這與熊尉杰的研究相同，大米蛋白肽能夠有效降低人體血清膽固醇，還有免疫調節(jié)、抗氧化等多種生理功能。有報道發(fā)現(xiàn)小肽分子比游離氨基酸和蛋白質更容易消化吸收。

3.4 椰子油微膠囊對斷奶仔豬糞中微生物數(shù)量的影響

斷奶對仔豬是一個很大的應激，影響仔豬生理功能，特別是腸道菌群失調，進而影響?zhàn)B分消化率、生長性能。本試驗結果顯示，A、B兩組空腸、回腸中大腸桿菌數(shù)量均低于對照組，雙歧桿菌、乳酸桿菌數(shù)量均高于對照組，但差異不顯著。這個趨勢與王留等在飼糧中添加大棗多糖的效果相同。有研究發(fā)現(xiàn)，斷奶仔豬飼糧中添加益生菌有降低大腸桿菌的作用，并且可以提升仔豬生長性能，這與添加以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊有類似效果，這說明添加該椰子油微膠囊可能會調節(jié)斷奶仔豬空腸、回腸的pH值，利于雙歧桿菌、乳酸桿菌繁殖，又能有效抑制大腸桿菌。

本試驗在斷奶仔豬飼糧中添加3%以大米蛋白肽-糖漿為壁材的椰子油微膠囊后顯著提高了仔豬生長性能和養(yǎng)分表觀消化率,對血清總蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯有顯著影響，對腸道菌群有改善趨勢。這說明該椰子油微膠囊可能是仔豬飼料的一種新的添加劑，為科學制定仔豬蛋白、油脂需要模式，為大米蛋白肽在生產中的應用提供科學依據(jù)。