鄰苯二甲醛和強化戊二醛對污染乙型肝炎病毒胃鏡的消毒效果比較

秦娟文，盧杰夫，鄭超偉，李 生，王興麗，梁小鳳

鄰苯二甲醛和強化戊二醛對污染乙型肝炎病毒胃鏡的消毒效果比較

秦娟文，盧杰夫，鄭超偉，李 生，王興麗，梁小鳳

[目的]觀察鄰苯二甲醛和強化戊二醛對乙型肝炎病毒污染的胃鏡消毒效果及消毒時間比較，為臨床選用合適的內(nèi)鏡消毒液、消毒時間提供理論依據(jù)。[方法]收集乙型病毒性肝炎病人使用后的胃鏡240套，根據(jù)2004年4月國家衛(wèi)生部頒布的《內(nèi)鏡清洗消毒技術(shù)操作規(guī)范》進行清洗后，隨機分為兩組，分別采用鄰苯二甲醛和強化戊二醛浸泡消毒，于清洗前后及消毒后3 min、5 min、10 min進行內(nèi)鏡腔內(nèi)采樣，觀察兩種消毒液及其不同消毒時間的消毒效果。[結(jié)果]應(yīng)用強化戊二醛和應(yīng)用鄰苯二甲醛清洗后、消毒3 min和10 min時胃鏡內(nèi)腔定性和定量PCR檢測HBV-DNA平均含量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);消毒5 min時兩組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。[結(jié)論]應(yīng)用鄰苯二甲醛消毒乙型肝炎病毒病人使用后的胃鏡，消毒效果優(yōu)于應(yīng)用強化戊二醛消毒。

胃鏡；鄰苯二甲醛；強化戊二醛；乙型病毒性肝炎；乙型肝炎病毒；消毒

近年來，在臨床上消化內(nèi)鏡檢查對于消化道疾病的診斷和治療已在大中小醫(yī)院普遍開展。但其在診斷和治療過程中，不可避免地接觸到病人的體液、血液而受到污染。我國經(jīng)濟較落后的醫(yī)院內(nèi)鏡數(shù)量嚴(yán)重不足，而需檢查的病人較多，內(nèi)鏡使用過度頻繁，這些因素導(dǎo)致臨床內(nèi)鏡消毒不到位，從而易引發(fā)較為嚴(yán)重的醫(yī)源性感染[1]。而病毒性肝炎是世界上最常見的傳染病之一。據(jù)報道，全世界感染乙型肝炎病毒(HBV)者約占全球人口的5%，而廣西地區(qū)乙型病毒性肝炎病人數(shù)量據(jù)我國前列[2]。然而國內(nèi)外對胃鏡消毒液的選擇尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。因而探討一種消毒效果好且需時較短的內(nèi)鏡消毒液非常重要。本研究通過觀察鄰苯二甲醛和強化戊二醛對污染乙型肝炎病毒的胃鏡消毒效果和消毒時間比較，為臨床選用合適的內(nèi)鏡消毒液、消毒時間，為有效預(yù)防因內(nèi)鏡消毒不合格而引發(fā)的醫(yī)院感染提供理論依據(jù)。現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 資料 2014年4月—2015年5月我院門診及住院已確診的乙型肝炎病毒感染[血清乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)陽性]病人240例，其中男166例，女74例，年齡61.68歲±3.23歲。病例排除標(biāo)準(zhǔn)：1周內(nèi)已服用相關(guān)治療本病的藥物；合并其他流行性感染或細菌、病毒感染，如丙型病毒性肝炎、艾滋病、重度肺炎等；不符合納入標(biāo)準(zhǔn)，因資料不全影響療效判斷或根本無法判斷療者。以符合納入標(biāo)準(zhǔn)的病人胃鏡檢查后的胃鏡為觀察對象，所有胃鏡按隨機數(shù)字表法隨機分為觀察組和對照組，每組120套。

1.2 材料及設(shè)備

1.2.1 消毒液 鄰苯二甲醛(原產(chǎn)國英國，上海強生醫(yī)療器材有限公司經(jīng)銷，正-鄰苯二甲醛含量0.55%，其他含量范圍為0.5%～0.6%)。強化戊二醛(2%強化戊二醛，主要成分戊二醛含量為2.0%～2.2%，由茂名市消毒用品有限公司生產(chǎn))。

1.2.2 儀器設(shè)備 邁爾消化內(nèi)鏡清洗工作站，日本Olympus260主機及胃鏡，Lighteyeler熒光定量PeR儀，HeraeusBgerrese超速離心機，DNA擴增儀，F(xiàn)D201穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀。乙型肝炎病毒核酸陽性血清由本院胃鏡室聯(lián)合實驗室提供，含量達到106IU/mL～107IU/mL。

1.2.3 試劑 ACON HBsAg膠體金法檢測試劑，艾博生物醫(yī)藥(杭州)有限公司生產(chǎn)；PCR反應(yīng)試劑(Taq酶、dNTPs、MgC12、10×Buffer)、TaqDNA聚合酶(測序級，美國Promega公司產(chǎn)品)、DEPC為美國Sigma公司產(chǎn)品。

1.3 清洗與消毒 為確保試驗前的胃鏡為無病毒污染，在每次檢查前均按2004年4月國家衛(wèi)生部頒布的《內(nèi)鏡清洗消毒技術(shù)操作規(guī)范》要求，先用2%強化戊二醛消毒胃鏡20 min，然后采集標(biāo)本并檢測，結(jié)果為陰性。兩組消化內(nèi)鏡使用后均按《內(nèi)鏡清洗消毒技術(shù)操作規(guī)范》(2004版)要求，嚴(yán)格按以下流程處理:床側(cè)清洗→初洗→酶洗→次洗→消毒→終洗→干燥，兩組酶洗均使用內(nèi)鏡專用RUHOF全效型多酶。觀察組采用鄰苯二甲醛溶液消毒，對照組采用強化戊二醛溶液浸泡消毒。對乙型肝炎病毒感染病人行胃鏡檢查后，對胃鏡清洗后進行分組消毒，時間設(shè)置為3 min、5 min、10 min。

1.4 標(biāo)本采集 分別于清洗前、清洗后及消毒后3 min、5 min、10 min進行內(nèi)鏡腔內(nèi)采樣。用5 mL生理鹽水(清洗前、清洗后)或相應(yīng)中和劑(消毒后)注入胃鏡活檢孔道，用無菌試管在胃鏡前端收集內(nèi)腔沖洗液，2 h內(nèi)送檢。

1.5 標(biāo)本檢測 PCR定性、定量檢測由臨床檢驗技師完成。

1.5.1 HBsAg檢測 用于胃鏡檢查前檢測。用膠體金免疫層析分析技術(shù)進行，按說明書操作。

1.5.2 乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)PCR定性檢測 按HBV-DNA基因組P區(qū)基因序列，選2599bp-2877bp區(qū)域設(shè)計引物進行PCR。引物1:5’-GTGGGCCCTCTCACTG-TAAA-3’，引物2:5’-GTTTTGATGACCAACCTC-3’，擴增長度：278 bp。擴增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳，紫外線燈下觀察結(jié)果，與陽性對照處同一水平有擴增帶者為陽性，每次PCR檢測時均設(shè)有陰性對照。

1.5.3 HBV-DNA熒光定量PCR

1.5.3.1 HBV PCR反應(yīng)液 PCR Buffer 18 μL、Taq酶1U、Ung酶0.05 μL混勻。

1.5.3.2 加樣 將上述配制好的反應(yīng)液18 μL和已提取好的模板2 μL加入毛細反應(yīng)管3 000 r/min離心5s混勻，再排入Lightcycler熒光定量 PCR儀內(nèi)擴增。

1.5.3.3 檢測 擴增程序為37 ℃ 3 min，使Ung充分反應(yīng)，92 ℃ 1 min變性，然后60 ℃、20 s，40個循環(huán)。在60 ℃時熒光收集方式為“single”，儀器檢測通道選擇Fl/F2。結(jié)果由PCR儀自帶分析軟件確定標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本的HBV-DNA含量。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 計數(shù)資料采用χ2檢驗分析，計量資料符合正態(tài)分布者采用t檢驗分析，統(tǒng)計結(jié)果以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。所有數(shù)據(jù)均通過SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果

2.1 定性PCR檢測HBV-DNA平均含量(見表1)

表1 定性PCR檢測胃鏡內(nèi)腔HBV-DNA平均含量比較 IU/mL

2.2 熒光定量PCR檢測HBV-DNA平均含量(見表2)

表2 熒光定量PCR檢測胃鏡內(nèi)腔HBV-DNA平均含量比較 IU/mL

3 討論

近年來，消化內(nèi)鏡微創(chuàng)技術(shù)迅速發(fā)展，普通的內(nèi)鏡檢查和診斷在臨床廣泛應(yīng)用。由于內(nèi)鏡結(jié)構(gòu)復(fù)雜，精密度高，材質(zhì)特殊，不耐高溫，使用后徹底的清洗消毒一直是臨床上的一大難題，是醫(yī)院感染控制部門關(guān)注的重點。同時由于內(nèi)鏡費用較貴，國內(nèi)大部分醫(yī)院不可能配置更多的內(nèi)鏡，故在二三線城市的醫(yī)院普遍存在內(nèi)鏡少、需求量大，致使內(nèi)鏡使用頻繁，導(dǎo)致由于消毒時間倉促導(dǎo)致消毒不徹底、干燥時間短等情況。2006年調(diào)查表明，我國一般人群HBsAg陽性者為7.18%，其中廣西高達12%[3],嚴(yán)重危害病人健康。而胃鏡檢查的人中常出現(xiàn)HBsAg陽性的病人，如消毒不夠徹底極可能造成交叉感染而引發(fā)肝炎傳播。故加強對內(nèi)鏡的消毒與管理在預(yù)防控制醫(yī)院感染工作中顯得尤為重要[4]。

目前,國內(nèi)外對胃鏡消毒液的選擇和消毒時間尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。按2004年版《內(nèi)鏡清洗消毒技術(shù)操作規(guī)范》，如采用2%堿性戊二醛浸泡，消毒時間不少于20 min，沖洗和干燥后才可用于病人診療。如按上述要求醫(yī)院應(yīng)配備足夠周轉(zhuǎn)的內(nèi)鏡數(shù)量，方能滿足良好的消毒效果。為此，尋求一種消毒效果好、需時較短的內(nèi)鏡消毒液以提高內(nèi)鏡清洗消毒效率，滿足臨床所需尤為關(guān)鍵。本研究結(jié)果顯示：通過定性和定量PCR檢測HBV-DNA平均含量，采用鄰苯二甲醛和強化戊二醛消毒比較，清洗前和清洗后、消毒3 min和10 min時HBV-DNA平均含量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);而消毒5 min時兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。此結(jié)果與國內(nèi)外類似研究報道相一致[5]，說明采用此兩種消毒液消毒效果均安全可靠，但采用鄰苯二甲醛消毒時間上具有優(yōu)勢。若能將二者消毒液共同合理的使用將滿足廣大病人的需求，還能很大程度上提高消毒內(nèi)鏡的工作效能。

[1] 榮秋華,張瑩.消化內(nèi)鏡清洗消毒過程中存在的問題與對策[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2012,22(16):3597 -3599.

[2] 宋向陽,李武平,馬春麗,等.三種消毒劑對胃鏡污染乙肝病毒去除效果的實驗研究[J].中國消毒學(xué)雜志,2015,32 (3):232-234.

[3] 莊輝.病毒性肝炎流行病學(xué)研究進展[J].中國繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育,2010,2(3):1-5.

[4] 周麗華,鄧瓊,陽云超,等.應(yīng)用2%堿性戊二醛與鄰苯二甲醛在消化內(nèi)鏡消毒中的綜合研究[J].四川醫(yī)學(xué),2013,34(8)：1137-1138.

[5] 史瑜媛,鄭美英,張美玲.戊二醛和鄰苯二甲醛胃鏡消毒效果的比較[J].當(dāng)代護士,2011(12)：91-92.

(本文編輯李亞琴)

Comparison of disinfection effect of phthalaldehyde and fortified glutaraldehyde on hepatitis B virus contaminated contaminated endoscopy

Qin Juanwen,Lu Jiefu,Zheng Chaowei,etal(the First Affiliated Hospital of Guangxi University

of Traditional Chinese Medicine,Guangxi 530023 China)

廣西壯族自治區(qū)教育廳高?？蒲许椖?，編號：LX2014172。

秦娟文，副主任護師，本科，單位:530023，廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院；盧杰夫、鄭超偉、李生、王興麗、梁小鳳單位：530023，廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院。引用信息 秦娟文，盧杰夫，鄭超偉，等.鄰苯二甲醛和強化戊二醛對污染乙型肝炎病毒胃鏡的消毒效果比較[J].護理研究，2017，31(1)：97-99.

R472.1

B

10.3969/j.issn.1009-6493.2017.01.026

1009-6493(2017)01-0097-03

2016-03-24；

2016-12-13)