2型糖尿病合并腎性高血壓模型的建立及評價

萬 斌，孫麗薇，張巧香，張世玉，羅烘權(quán)，顧為望*

(1.南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心，廣東廣州 510515；2.中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)教研室，廣東廣州 510080；3.南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院超聲科，廣東廣州 510515)

2型糖尿病合并腎性高血壓模型的建立及評價

萬 斌1，孫麗薇2，張巧香1，張世玉3，羅烘權(quán)1，顧為望1*

(1.南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心，廣東廣州 510515；2.中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)教研室，廣東廣州 510080；3.南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院超聲科，廣東廣州 510515)

制備一種發(fā)病過程類似于人類2型糖尿病合并腎性高血壓疾病的大鼠模型。大鼠高脂高糖膳食4周后，予快速腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)溶液28 mg/kg，制作成2型糖尿病模型。2周后，連續(xù)3 d均測得空腹血糖(FBG)≥7.8 mmoL/L或隨機血糖(RBG)≥16.7 mmol/L，為2型糖尿病成模標(biāo)準(zhǔn)。待血糖穩(wěn)定后，再用改良的“兩腎一夾法”結(jié)扎腎動脈，造成一側(cè)腎動脈狹窄，形成腎性高血壓。 2周后，連續(xù)3 d均測得大鼠收縮壓(SBP)≥140 mmHg,同時FBG≥7.8 mmol/L或RBG≥16.7 mmol/L，確定為2型糖尿病合并腎性高血壓模型制作成功。4周后，模型大鼠血糖、血壓穩(wěn)定。與空白對照組相比，復(fù)合模型組大鼠出現(xiàn)體重減輕、空腹血糖升高、糖化血紅蛋白值升高(P<0.01)，血壓升高(P<0.01)；與糖尿病組和假手術(shù)組相比，復(fù)合模型組大鼠血肌酐，尿素氮變化不明顯(P>0.05)，但血壓明顯升高(P<0.01)；同時，彩超結(jié)果顯示,復(fù)合模型組大鼠左側(cè)腎臟、腎動脈直徑均變小，血流速增快。大鼠高脂高糖膳食后，用低劑量鏈脲佐菌素(STZ)溶液腹腔注射，再用改良的“二腎一夾”法制備的2型糖尿病合并腎性高血壓大鼠模型，在一定程度上較好地模擬出該疾病的發(fā)病特點，可為2型糖尿病合并腎性高血壓后的臨床及試驗研究提供一個穩(wěn)定、實用、有效的新模型。

高脂高糖； 鏈脲佐菌素(STZ )；2型糖尿??；腎性高血壓；大鼠

糖尿病(DM)是一種慢性代謝性疾病，主要以慢性高血糖為主要表現(xiàn)。按發(fā)病類型，臨床上一般將糖尿病分為1型和2型兩大類。2型糖尿病又被稱為非胰島素依賴型糖尿病，幾乎占了糖尿病患者的90%以上。持續(xù)高血糖和長期代謝紊亂可導(dǎo)致全身組織器官，特別是眼、腎、心血管、神經(jīng)系統(tǒng)的損害及其功能障礙，而最嚴(yán)重的屬動脈粥樣硬化后形成血栓，堵塞人體的重要血管。血栓停留在腎動脈將導(dǎo)致腎動脈主干或分支狹窄或阻塞，使腎血流量減少而引起腎性高血壓[1]。

目前單純制備2型糖尿病模型、腎性高血壓模型的文獻較多，但是還缺少能建立兩者復(fù)合模型的方法。因此，本研究采用先建立大鼠糖尿病模型，再在糖尿病模型的基礎(chǔ)上手術(shù)結(jié)扎大鼠單側(cè)腎動脈，造成腎動脈狹窄，最后制作出了2型糖尿病合并腎性高血壓模型。該模型與臨床上2型糖尿病合并腎性高血壓病病人的癥狀體征較吻合，且具有經(jīng)濟、方便、實用等優(yōu)點，更適合應(yīng)用于2型糖尿病合并腎性高血壓病的臨床治療及基礎(chǔ)研究?，F(xiàn)將模型制作的方法及評價詳述如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 8月齡～10月齡、體重為360 g±20 g的SPF級Wistar雄性大鼠，50只，由南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供(許可證號：SCXK[粵]2011-0015)，符合國際動物倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。大鼠飼養(yǎng)于南方醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心SPF級動物實驗室，室溫20℃～26℃，相對濕度55%～70%，自由飲水、飲食。

1.1.2 主要試劑及藥品 鏈脲佐菌素(STZ)，Sigma公司產(chǎn)品；膽固醇、膽酸鈉、蛋黃粉等，河南祥盛食品添加劑有限公司產(chǎn)品；糖化血紅蛋白(GHbA1c)試劑盒，上海廣銳生物科技有限公司產(chǎn)品。

1.1.3 主要儀器及設(shè)備 0.25 mm針灸針，北京漢醫(yī)醫(yī)療器械中心產(chǎn)品；穩(wěn)豪型血糖儀及試紙，美國強生公司產(chǎn)品；pH計，德國賽多利斯產(chǎn)品；酶標(biāo)儀，美國賽默飛公司產(chǎn)品；CODA無創(chuàng)血壓測定分析系統(tǒng)Kent scientific 公司產(chǎn)品；iu22彩色多普勒超聲診斷儀及12-5探頭，德國飛利浦公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 模型建立及分組

1.2.1.1 2型糖尿病大鼠模型制作 按如下配方比例配置高脂高糖飼料，用于造模大鼠的常規(guī)飼養(yǎng)。蔗糖15%、膽固醇3.5%、膽酸鈉0．3%、豬油14%、蛋黃粉5%、基礎(chǔ)飼料62.2%，混合、攪拌均勻，加水適量，裝機塑性烘干。將50只雄性Wistar大鼠隨機抽取10只，作為空白對照組，余下40只大鼠均用于造模。造模大鼠給予高脂高糖膳食，空白對照組大鼠給予普通膳食。4周后對造模大鼠進行口服葡萄糖耐量試驗(OGTT) ，待其形成胰島素抵抗后，按STZ溶液28 mg/kg劑量腹腔注射(冰浴避光下，將STZ溶于pH4.2～4.5的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液中，配置濃度為10 g/L)[2-5]?？瞻讓φ战M大鼠注射等體積的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。2周后，連續(xù)3 d均測得FBG≥7.8 mmol/L或RBG≥16.7 mmol/L[6]，為2型糖尿病模型成模標(biāo)準(zhǔn)，最后穩(wěn)定成模大鼠共36只。

1.2.1.2 2型糖尿病合并腎性高血壓大鼠模型制作及試驗分組 將上述2型糖尿病模型大鼠隨機分為糖尿病組(即糖尿病大鼠)、假手術(shù)組(即糖尿病開腹未手術(shù)的大鼠)、復(fù)合模型組(即糖尿病后腎動脈結(jié)扎手術(shù)的大鼠)，每組各12只。復(fù)合模型組大鼠麻醉后固定，保持右側(cè)臥位，消毒備皮后鋪巾。在左側(cè)肋弓下緣平行于脊柱約1 cm處向下剪開約2.0 cm左右切口，逐層剪開至腹腔，將生理鹽水打濕后的紗布包裹裸露的腎臟。充分暴露腎臟及腹主動脈，同時確保腎蒂不能出現(xiàn)扭轉(zhuǎn)，用棉簽輕輕擦拭包裹腎動、靜脈外側(cè)的筋膜，然后在腹主動脈與腎動脈的分叉處用玻璃分針將腎動、靜脈分開，剝離約0.5 cm～1.0 cm的長度，穿單線備用，把0.25 mm直徑的針灸針置于腎動脈一側(cè)并與腎動脈平行，用3-0號縫合線結(jié)扎腎動脈后抽出針灸針，術(shù)后常規(guī)抗炎一周[7-8]。假手術(shù)組除不結(jié)扎左腎動脈外，其余操作均同復(fù)合模型組。2周后，連續(xù)3 d均測得大鼠SBP≥140 mmHg[9],同時FBG≥7.8 mmol/L或RBG≥16.7 mmol/L，確定為2型糖尿病合并腎性高血壓模型制作成功(圖1)。

1～5.分別代表左腎、左腎靜脈、左腎動脈、0.25 mm針灸針、縫合線

1-5. Which represent respectively the left kidney,left renal vein,left renal artery,0.25 mm acupuncture needle and sutures

圖1 具體的解剖位置

Fig.1 Specific anatomical location

1.2.2 一般行為觀察 所有大鼠均用干性飼養(yǎng)籠飼養(yǎng)，觀察大鼠精神狀態(tài)、體重變化、大小便情況。造模完成后計算大鼠存活率及成模率。

1.2.3 體重測量 測定各組大鼠在造模前、高脂高糖膳食4周后及糖尿病模型完成后的體重變化。

1.2.4 口服葡萄糖耐量(OGTT)、FBG及糖化血紅蛋白(GHbA1c)值測定 高脂高糖膳食4周后,所有大鼠均進行口服葡萄糖耐量試驗。OGTT試驗：禁食12 h后，250 g/L葡萄糖溶液按1 g/kg劑量灌胃，測 0、0.5、1、2 h的尾靜脈血糖濃度；糖尿病成模2周后，測所有大鼠FBG和GHbA1c值。FBG測定：禁食12 h后，尾靜脈采血后經(jīng)血糖儀測得；GHbA1c值的測定：麻醉大鼠后，眼眶靜脈叢采血1 mL左右，分離血清用作待測樣品。GHbA1c ELISA檢測試劑盒用于待測樣品的分析，酶標(biāo)儀測得樣品OD值后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算各大鼠血清GHbA1c濃度。

1.2.5 血壓值測定 復(fù)合模型完成2周后，采用CODA無創(chuàng)血壓測定分析系統(tǒng)測量各組大鼠的血壓值。將大鼠放于配套的大鼠固定器內(nèi)，置于37℃預(yù)熱箱上使大鼠適應(yīng)10 min，待大鼠安靜后，再選擇合適的血流阻斷套管和脈搏感受套管，將血流阻斷套管套住大鼠尾根部，脈搏感受套管套住大鼠尾中部固定，打開無創(chuàng)血壓測量軟件，設(shè)置15個循環(huán)和5 min的檢測時間后開始測量。當(dāng)5個循環(huán)后規(guī)律性的脈搏波出現(xiàn)，則系統(tǒng)自動計數(shù)。當(dāng)加壓套內(nèi)壓力升高到脈搏波完全消失時，儀器自動放氣，出現(xiàn)第一個脈搏波時所對應(yīng)的壓力值即為收縮壓(SP)，當(dāng)兩波型交叉時所對應(yīng)的壓力值即為舒張壓(DP)，每只大鼠血壓均重復(fù)測量3次后取其平均值。

1.2.6 彩超檢查 復(fù)合模型完成2周后，各組大鼠進行彩超檢查。麻醉大鼠后，使大鼠保持俯臥位，檢查部位剃毛(背部及兩側(cè)腹部)并涂上耦合劑，超聲探頭探查雙側(cè)腎臟大小及腎動脈血流速度。

1.2.7 血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)值測定 待所有試驗結(jié)束，從每組隨機抽取6只大鼠，用30 g/L戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后，開腹從下腔靜脈采血3 mL，分離血清。全自動血液生化分析儀測得各組大鼠血肌酐、尿素氮值。

1.2.8 組織病理學(xué)觀察 將以上6只大鼠行心臟灌注，待血液基本排出，采集胰腺、左腎組織，用100 mL/L甲醛固定后制作石蠟切片，進行HE染色。觀察各組大鼠胰腺和左腎臟組織病理學(xué)變化[10]。

2 結(jié)果

2.1 一般行為觀察

空白對照組大鼠，毛發(fā)順滑干凈有光澤，精神狀態(tài)良好，體重隨飼養(yǎng)周期變化明顯增大；與空白對照組相比，其他3組大鼠采食、飲水及大小便均增多，體重增長較緩慢，部分出現(xiàn)體重減輕。與糖尿病組和假手術(shù)組大鼠相比，復(fù)合模型組大鼠精神較緊張，毛色缺少光澤，局部毛發(fā)變黃易脫落，抓持時遺尿排便現(xiàn)象較普遍，大便質(zhì)軟甚至稀便，腐臭味明顯，尿量及糞量均增加。

2.2 大鼠體重變化

造模前各組大鼠體重?zé)o差異，當(dāng)給予造模大鼠高脂高糖膳食后，其體重較普通飼料飼養(yǎng)的空白對照組大鼠有明顯增加(P<0.05)。STZ造模后，空白對照組大鼠體重繼續(xù)增加,造模大鼠體重則逐漸降低，各組間差異顯著(P<0.05)(圖2)。

2.3 OGTT，F(xiàn)BG及GHbA1c值的變化

空白對照組大鼠0.5、1、2 h血糖先升高后降低，2 h后血糖降為正常值，造模大鼠血糖也是先升高后降低，2 h血糖也降為正常，但造模大鼠不同時間點的血糖有差異(P<0.05)(圖3)。 大鼠FBG的變化：造模前及高脂高糖膳食4周后，兩組大鼠空腹

血糖均無明顯差異(P>0.05)；STZ造模后，造模組血糖較空白對照組明顯升高，兩者之間有顯著性差異(P<0.01)(表1)。大鼠GHbA1c的變化： 所有大鼠眼眶靜脈采血后，分離血清測定糖化血紅蛋白濃度。造模大鼠較空白對照組大鼠糖化血紅蛋白濃度值明顯升高(P<0.01)(圖4)。

圖2 STZ造模前后各組大鼠的體重比較

Fig.2 Comparison of rats' weight before and after the establishment of model using STZ

圖3 STZ造模前后各組大鼠口服葡萄糖耐量變化

Fig.3 Comparison of rats’ ogtt before and after the establishment of model using STZ

表1 STZ造模前后各組大鼠空腹血糖變化(mmol·L-1)

Table 1 Fasting blood glucose of rats in each group before and after STZ(mmol·L-1)

組別Groups造模前Beforeestablishmentofmodel高脂高糖4周后4weeksafterhighfatandhighsugardietSTZ造模后AfterestablishmentofmodelusingSTZ空白對照組Blankcontrolgroup4.78±0.394.55.±0.404.50±0.51造模組Modelestab-lishmentgroup4.59±0.564.48±0.39*15.51±5.66

注：與空白對照組相比，“*”P<0.01。

Note:Compared with blank control group，“*”P<0.01.

圖4 STZ造模前后各組大鼠糖化血紅蛋白值比較

Fig.4 The comparison of rats’ GHbA1c before and after the establishment of model using STZ

2.4 血壓測量結(jié)果

與前3組相比，復(fù)合模型組大鼠收縮壓和舒張壓數(shù)值明顯升高(P<0.01)；而空白對照組、糖尿病組及假手術(shù)組之間收縮壓和舒張壓均無明顯差異(P>0.05)(圖5)。

2.5 彩超檢查

A、B、C、D的腎臟大小分別為2.19 cm×1.01 cm，2.32 cm×1.08 cm，2.15 cm×1.06 cm和1.39 cm×0.70 cm；明顯前3組的腎臟大小大于復(fù)合模型組，提示復(fù)合模型組大鼠腎動脈結(jié)扎后腎臟出現(xiàn)萎縮變小。編號E、F、G、H中PSV、EDV為血流速度，RI為血管阻力，前3組血流速度大于復(fù)合模型組，而血管阻力則小于復(fù)合模型組，提示復(fù)合模型組大鼠結(jié)扎腎動脈后，腎動脈血管直徑變小，血流量減少(圖6)。

2.6 血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)值比較

所有大鼠采血后測定Cr，BUN值。各組之間的腎功能(Cr、BUN)均無明顯差異(P>0.05)(表2)。

2.7 病理學(xué)觀察

2.7.1 胰腺HE染色 結(jié)果顯示(編號ABCD)：空白對照組胰島為橢圓形細(xì)胞團，細(xì)胞數(shù)量較多，胞漿豐富；其余3組均發(fā)現(xiàn)胰島細(xì)胞體積增大，且均出現(xiàn)不同程度的空泡變性，部分細(xì)胞發(fā)生核固縮壞死(圖7)。

2.7.2 左腎的HE染色 結(jié)果顯示(編號EFGH)：復(fù)合模型組腎小管及腎小球均出現(xiàn)不同程度的萎縮，以腎小管萎縮較明顯，同時伴有腎間質(zhì)纖維化；而其余3組均未見明顯的腎小管及腎小球萎縮現(xiàn)象。

圖5 各組血壓值比較

Fig.5 Comparison of blood pressure among groups

A、E.空白對照組;B、F.糖尿病組;C、G.假手術(shù)組;D、H.復(fù)合模型組。A～D.左腎大小;E～H.腎動、靜脈脈血流速

A and E. Blank control group;B and F. Diabetes group;C and G. Sham group;D and H. Complex model group; A-D. Left renal size;E-H. Blood flow velocity of renal artery and vein

圖6 彩超檢查結(jié)果

Fig.6 The results of color doppler ultrasonography

表2 不同組別的大鼠腎功能指標(biāo)變化

Table 2 Renal function changes in each groups of rats

組別GroupsBUN/(mmol·L-1)Cr/(mmol·L-1)空白對照組Blankcontrolgroup6.658±0.48532.664±7.472糖尿病組Type2diabetesmellitusgroup6.384±0.85930.637±4.694假手術(shù)組Shamgroup6.640±0.78530.037±5.862復(fù)合模型組Complexmod-elgroup6.360±1.02332.475±3.996

2.8 大鼠存活率及成模率

本試驗研究觀測持續(xù)到造模完成后4周末，12只復(fù)合模型大鼠中存活11只，成模10只。其中1只麻醉過深術(shù)后24 h內(nèi)即死亡，考慮為麻醉過度；1只術(shù)后4周血壓恢復(fù)至正常水平，為未成模，成模大鼠收縮壓穩(wěn)定在 22.26 kPa±3.12 kPa，舒張壓穩(wěn)定在18.07 kPa±2.21 kPa。經(jīng)計算復(fù)合模型組大鼠存活率和成模率分別為91.7%和83.3%。

A～D.分別代表空白對照組、糖尿病組、假手術(shù)組和復(fù)合模型組大鼠的胰腺HE染色結(jié)果；E～H.分別代表空白對照組、糖尿病組、假手術(shù)組和復(fù)合模型組大鼠的左腎HE染色結(jié)果

A-D.Represent HE staining results of rat pancreas in the blank control group,diabetes group,sham group and complex model group,respectively;E-H.Represent HE staining results of rat left kidney in the blank control group,diabetes group,sham group and complex model group,respectively

圖7 胰腺和左腎組織HE染色結(jié)果(200×)

Fig.7 The HE staining results of pancreas and left kidney tissues(200×)

3 討論

國際糖尿病聯(lián)盟(IDF)統(tǒng)計，2011年全球糖尿病患病人數(shù)已達3.66 億，比2010年增加了近30%；IDF最新預(yù)測,世界糖尿病患者在2030年將達到近5億。而在糖尿病的發(fā)病人群中，又以2型糖尿病為主，它常見于中老年人人群，是臨床常見的內(nèi)分泌疾病，近年來糖尿病的發(fā)病率正在逐年上升，發(fā)病年齡在持續(xù)下降[5]。

2型糖尿病常會導(dǎo)致多種并發(fā)癥,如高血壓、白內(nèi)障、微血管及大血管病變等。在這些并發(fā)癥中，又以大血管病變的危害性最大。糖尿病并發(fā)大血管病變后形成血栓，極易造成腎動脈堵塞，形成腎性高血壓并快速發(fā)展為腎衰竭，威脅患者的生命。臨床上單純糖尿病和高血壓病的治療，通過規(guī)律服藥基本能夠控制。但是，當(dāng)糖尿病合并高血壓或伴其他血管病病變時，治療起來卻極其麻煩，這就迫切需要建立一個動物模型用于此類疾病的研究，從基礎(chǔ)研究中來達到控制疾病的目的，并最終達到增加患者生存率及生活質(zhì)量，減少威脅患者生命的并發(fā)癥發(fā)生。

試驗中選用8月齡～10月齡的中年大鼠進行試驗，與大多數(shù)2型糖尿病造模文獻中選用的2月齡～3月齡大鼠相比更能模擬出人類2型糖尿病發(fā)病年齡的特點。同時本試驗通過給予大鼠高脂高糖膳食4周后，再予低劑量STZ溶液腹腔注射，最后形成的2型糖尿病模型較其他直接腹腔注射高劑量STZ溶液制作的糖尿病模型更加穩(wěn)定，且大鼠死亡量更低。同時，又與其他造模方法得出的2型糖尿病模型的典型癥狀一致，大鼠都表現(xiàn)出“三多一少”的主要癥狀和血糖升高。另外，試驗結(jié)果表明本試驗選用的2K1C(一側(cè)腎動脈狹窄，另一側(cè)腎保留)結(jié)扎法較1K1C(一側(cè)腎動脈狹窄，另一側(cè)腎切除)結(jié)扎法和2K2C(雙腎動脈均狹窄)結(jié)扎法所制備的大鼠腎性高血壓模型的存活率及成模率更高[11-12]。另外，腎動脈狹窄制備腎性高血壓的方法眾多，如U型銀夾夾合和針灸針結(jié)扎等方法，但是通過反復(fù)的預(yù)試驗，最后確定從腹部開口絲線結(jié)扎左腎動脈來制作腎性高血壓大鼠模型的制作方法效果更好。除此之外，由于U型夾價格昂貴，且動物血管個體差異大，其直徑難以控制，造模過程中很容易造成腎動脈狹窄過度或狹窄過松而導(dǎo)致成模率下降；而用絲線結(jié)扎，不僅材料容易獲得，而且絲線沒有伸縮性，結(jié)扎之后使腎動脈血流量比較恒定，成模率更高。

綜上所述，本試驗方法制作的2型糖尿病合并腎性高血壓模型，一定程度上較好地模擬出該疾病的發(fā)病特點，同時表現(xiàn)出與臨床病人一致的癥狀和體征，各種檢測結(jié)果也均與糖尿病合并腎性高血壓病病人相符合。所以本試驗方法的確立，可為2型糖尿病合并腎性高血壓疾病的臨床研究和試驗研究提供一個穩(wěn)定、實用、有效的新模型。

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Establishment and Assessment of Model of Type 2 Diabetes Mellitus(T2DM) Complicated Renal Hypertension

WAN Bin1，SUN Li-wei2，ZHANG Qiao-xiang1，ZHANG Shi-yu3，LUO Hong-quan1，GU Wei-wang1

(1.LaboratoryAnimalCenter，SouthernMedicalUniversity，Guangzhou,Guangdong，510515，China；2.DepartmentofMedicalGenetics，ZhongshanMedicalCollegeofSunYat-senUniversity，Guangzhou，Guangdong,510080，China；3.DepartmentofUltrasound，NanfangHospitalofSouthernMedicalUniversity，Guangzhou，Guangdong，510515，China)

The rat model was induced to simulate the pathogenic process of type 2 diabetes mellitus(T2DM) complicated renal hypertension of human.The type 2 diabetic model of rats was prepared by the quick intraperitoneal injection of STZ at 28 mg/kg after high calorie and high sugar diet for 4 weeks.The type 2 diabetic model was established by the measurement FBG≥7.8 mmol/L or RBG≥16.7 mmol/L for successive 3 days after 2 weeks. After the blood sugar reached a steady value,the modeled of renal hypertention was prepared by using the improved method of "tow kidney one clip" to produce the renal artery stenosis of one side. The model of type 2 diabetes mellitus(T2DM) complicated renal hypertension was successfully replicated by the 3 days′ measurement,which showed that the rats′ blood pressure SBP≥140 mmhg and FBG≥7.8 mmol/L or RBG≥16.7 mmol/L two weeks latter. After 4 weeks,the blood sugar and blood pressure of the model rats reached a steady level. Compared with the blank control group,the body weight of the complex model group were decreased,and the fasting glucose,GHbA1c and blood pressure significantly rosed (P<0.01). Compared with the diabetes group and the sham group,serum creatinine and urea nitrogen of the complex group showed no significant changes(P>0.05),but a significant increase occurred in blood pressure occurred(P<0.01).The result of color ultrasonography showed a shrink of the left kidney and renal artery and a faster blood flow velocity.The model of type 2 diabetes mellitus (T2DM) complicated renal hypertension established by injecting low-dose STZ intraperitoneally after high fat and high glucose feed and by applying the improved method of "tow kidney one clip" can simulate the pathogenic characteristics of disease and provide a stable,practical and effective model for the clinic and experiment researches of type 2 diabetes mellitus(T2DM) complicated renal hypertension.

high fat and high glucose；STZ；T2DM；renal hypertension；rat

2015-11-16

廣東省科技基礎(chǔ)條件建設(shè)項目(2013B060300001)

萬 斌(1989-)，男，湖南常德人，碩士研究生，主要從事人類疾病動物模型研究。*通訊作者

S852.3

A

1007-5038(2016)05-0053-07