■徐進(jìn)棟 朱連勤
(1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)與信息科學(xué)學(xué)院,山東青島 266109;2.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院,山東青島 266109)
黃曲霉毒素(AFB1)具有較強(qiáng)的毒性,具有致癌、致畸和致突變性,對動物和人類健康危害較嚴(yán)重,因此把AFB1含量作為飼料和食品質(zhì)量評價(jià)的重要指標(biāo)。由于產(chǎn)生AFB1的霉菌在土壤、空氣中存在較為普遍,當(dāng)溫度為25~30℃,飼料原料的水分含量為17%~18%時(shí)就可以導(dǎo)致黃曲霉的大量生長、繁殖,而污染飼料[1]。王建林等[2]對2016年上半年我國原料及飼料毒素檢測分析,我國原料及飼料中黃曲霉毒素污染較嚴(yán)重,檢出率均為100%,且有不同程度的超標(biāo)。2015年本實(shí)驗(yàn)室對山東省飼料原料的黃曲霉毒素污染情況進(jìn)行了調(diào)查,結(jié)果顯示,飼料原料AFB1的檢出率為2.94%~100.00%,超標(biāo)率為1.85%~60.00%,整體污染水平低于全國[3]。鑒于每年的氣候特點(diǎn)不一,黃曲霉毒素污染情況會各有差異,為了實(shí)時(shí)準(zhǔn)確了解山東省飼料中黃曲霉毒素污染情況,本實(shí)驗(yàn)室繼續(xù)對2016年山東省內(nèi)的飼料原料及配合飼料進(jìn)行抽樣調(diào)查,為養(yǎng)殖業(yè)和飼料加工業(yè)提供科學(xué)的依據(jù),保障飼料質(zhì)量安全,促進(jìn)畜牧生產(chǎn)的穩(wěn)定發(fā)展。
本試驗(yàn)所用樣品,采集時(shí)間為2016年1~12月份,來源于山東省各地規(guī)?;瘎游镳B(yǎng)殖場、飼料廠,樣本總數(shù)量1 037份,詳見表1。樣品采集方法按GB/T 14699.1—2005進(jìn)行。樣品采集后,用四分法縮減取樣約200 g,粉碎過20目篩后,裝入自封袋內(nèi),貼好標(biāo)簽,標(biāo)明樣品名稱、采樣時(shí)間、采樣地點(diǎn),置于-20℃冰箱保存,備用。
利用直接競爭酶聯(lián)免疫吸附法測定飼料中AFB1值,采用Agra Quant?黃曲霉毒素B1檢測試劑盒提供的方法檢測,其定量限和檢出限均為2.0 μg/kg。按照試劑盒中固體樣品前處理方法進(jìn)行樣品的萃取,保證樣品萃取液的pH值在6~8之間,除了玉米蛋白粉和DDGS萃取液偏酸性,需用1 mol的NaOH將pH值調(diào)至7外,其他樣品均在要求范圍之內(nèi)。本方法對不同原料的回收率分別是:玉米91%~102%;大豆87%~114%;小麥87%~103%。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)分析CV≤10%(n=45)。MK3酶標(biāo)儀為美國Thermo公司生產(chǎn)。
參考《GB 13078—2001》飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn),AFB1在飼料原料中玉米、花生餅(粕)、棉籽餅(粕)、菜籽餅(粕)中的限量值為≤50 μg/kg,豆粕≤30 μg/kg,沒有AFB1限量標(biāo)準(zhǔn)的其它原料均參照玉米的標(biāo)準(zhǔn)。小雞、小鴨、小豬配合飼料及濃縮飼料、奶牛精料補(bǔ)充料≤10 μg/kg,大雞、大豬配合飼料及濃縮飼料≤20 μg/kg,大鴨配合飼料及濃縮飼料≤15 μg/kg,肉牛精料補(bǔ)充料≤50 μg/kg。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS9.3軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì),描述性統(tǒng)計(jì)量采用means過程,頻數(shù)統(tǒng)計(jì)采用freq過程。
玉米中AFB1污染率為29.33%,含量為2.04~161.71 μg/kg,平均值為34.64 μg/kg,中值為16.90 μg/kg,超標(biāo)率為27.71%。
玉米副產(chǎn)品中AFB1污染率最高的為玉米胚芽粕,檢出率為82.43%,含量為2.04~76.26 μg/kg,平均值為18.11 μg/kg,中值為13.36 μg/kg,超標(biāo)率為4.92%。污染率較高的為玉米蛋白粉,檢出率為60.00%,含量為 4.46~50.00 μg/kg,平均值為 18.59 μg/kg,中值為15.57 μg/kg,不超標(biāo)。污染率最低的為DDGS,檢出率為24.18%,含量為2.30~71.06 μg/kg,平均值為12.84 μg/kg,中值為4.25 μg/kg,超標(biāo)率為6.90%。
表2 玉米及副產(chǎn)品中AFB1檢測結(jié)果
麥類及副產(chǎn)品中,包括9份大麥、14份小麥及次粉,AFB1均未檢出。
表3 餅粕類飼料中AFB1的測定結(jié)果
芝麻粕AFB1檢出率最高,為100.00%,含量為2.63~5.30 μg/kg,平均值為3.98 μg/kg,中值4.00 μg/kg,不超標(biāo)?;ㄉ?粕)AFB1檢出率為85.95%,含量為 2.08~175.96 μg/kg,平 均 值 為 37.08 μg/kg,中值 36.21 μg/kg,超標(biāo)率為23.27%。棉粕AFB1檢出率為 45.46%,含量為 2.29~5.93 μg/kg,平均值為3.95 μg/kg,中值3.01 μg/kg,不超標(biāo)。豆粕AFB1未檢出。
表4 米糠中AFB1的測定結(jié)果
米糠中AFB1檢出率為17.65%,含量為2.07~4.86 μg/kg,平均值為 3.24 μg/kg,中值 2.79 μg/kg,不超標(biāo)。
表5 配合飼料中AFB1的測定結(jié)果
生長鴨配合飼料AFB1檢出率最高,為71.88%,含量為 2.23~30.85 μg/kg,平均值為 8.79 μg/kg,中值6.36 μg/kg,超標(biāo)率為13.04%。其次是小鴨、生長雞、小雞配合飼料,AFB1檢出率分別為68.35%、54.24%、52.54%,含量分別為 2.02~54.58、2.12~48.69、2.07~63.34 μg/kg,平均值分別為8.83、9.46、10.89 μg/kg,中值 分 別 為 4.07、4.58、4.20 μg/kg,超 標(biāo) 率 分 別 為22.22%、15.63%、25.81%。蛋雞配合飼料、奶牛精料補(bǔ)充料、蛋鴨配合飼料檢出率相對較低,分別為36.84%、35.00%、22.22%,含量分別為2.11~69.49、2.50~9.60、4.52~22.58 μg/kg,平均值分別為 17.47、6.11、11.50 μg/kg,中值分別為4.00、6.60、9.45 μg/kg,超標(biāo)率分別為28.57%、0.00%、25.00%。
黃俊恒等[4]對2016年采集于全國20省市的玉米及其副產(chǎn)物中黃曲霉毒素B1污染檢測結(jié)果得出,2016年玉米副產(chǎn)物中玉米胚芽粕污染情況最為嚴(yán)重,檢出率高達(dá)100%,超標(biāo)率為28.60%,含量最低值為 67.60 μg/kg,最高值為351.50 μg/kg。其次是玉米和DDGS,玉米檢出率為81%,超標(biāo)率為6.20%;DDGS檢出率為100%,超標(biāo)率為3.70%。玉米蛋白粉檢出率為85.70%,最高含量為1.80 μg/kg,未超標(biāo),表明其污染程度較輕。本次調(diào)查結(jié)果表明,玉米副產(chǎn)物中AFB1污染情況最為嚴(yán)重的也是玉米胚芽粕,檢出率為82.43%,超標(biāo)率為4.92%,含量為2.04~76.26 μg/kg,其次是玉米和DDGS,檢出率分別為29.33%和24.18%,超標(biāo)率分別為27.71%和6.90%,玉米檢出率雖然低于全國水平,但其最高含量達(dá)到161.71 μg/kg,平均值達(dá)到34.64 μg/kg,污染情況需被重視。玉米蛋白粉AFB1檢出率為60.00%,其最高含量為50.00 μg/kg,雖未超標(biāo),但接近臨界線。結(jié)合數(shù)據(jù)對比,山東省玉米及其副產(chǎn)物AFB1污染率低于全國水平,但玉米及DDGS AFB1污染程度高于全國水平[4]。與2015年山東省調(diào)查結(jié)果比,玉米、玉米胚芽粕以及DDGS AFB1污染狀況有所加重[3],主要原因是受山東省2016年氣溫高、降水多氣候的影響。其次,采樣過程中發(fā)現(xiàn)脫粒后的玉米籽粒部分破碎,據(jù)報(bào)道,籽粒原料粉碎后使原有樣品接觸空氣的面積更大,易于曲霉菌定居和繁殖及后期產(chǎn)毒[5]。
餅粕類飼料AFB1污染最嚴(yán)重的是花生餅粕,檢出率為85.95%,超標(biāo)率為23.27%,最高含量達(dá)175.96 μg/kg,污染程度重于 2015 年的調(diào)查數(shù)據(jù)[3]。從以往的調(diào)查結(jié)果來看,花生的AFB1污染程度較高?;ㄉ亲钸m合黃曲霉生長的作物之一,而山東省又是全國種植花生的大省,花生產(chǎn)量較高,囤積的比率較大,貯藏、加工過程極易受到黃曲霉的污染,因此花生餅粕污染情況嚴(yán)重有理可尋。芝麻粕檢出率高達(dá)100%,但未出現(xiàn)超標(biāo)情況,由于樣品較少,近幾年黃曲霉毒素B1調(diào)查涉及芝麻粕的較少,可參考數(shù)據(jù)較少,不能據(jù)此做出確切的定論,在以后的調(diào)查中,將會加大樣品采集,確保樣品的代表性。AFB1污染情況較輕的為棉粕,檢出率為45.46%,未超標(biāo),比較安全。麥類及其副產(chǎn)品中,檢測的樣品包括大麥和小麥及次粉,均未檢出黃曲霉毒素B1,表明污染情況較去年有所改善。米糠檢出率為17.65%,最高含量為4.86 μg/kg,未超標(biāo),較為安全。
據(jù)謝文梅等[6]對2016年全國1~6月份飼料及原料霉菌毒素B1污染狀況調(diào)查結(jié)果顯示,配合飼料的AFB1的檢出率為100%,最高含量為9.61 μg/kg,未超標(biāo)。在本次調(diào)查結(jié)果顯示,被檢配合飼料的檢出率為22.22%~71.88%,含量為2.02~69.49 μg/kg。其中奶牛精料補(bǔ)充料未超標(biāo),禽類配合飼料超標(biāo)率為13.04%~28.57%。尤其值得關(guān)注的是蛋雞和蛋鴨的配合飼料超標(biāo)率分別為28.57%、25.00%。表明山東省配合飼料黃曲霉毒素B1污染程度高于全國水平,同時(shí)也高于2015年的調(diào)查結(jié)果,值得引起重視。經(jīng)綜合分析,可能是由于2016年7~9月氣溫較以往偏高,同時(shí)降水也較多,貯藏、運(yùn)輸?shù)韧緩奖晃廴镜母怕试龃?,致使污染水平高于往年。配合飼料污染情況嚴(yán)重,需要引起飼料加工企業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)的高度重視。
山東省飼料原料AFB1污染較去年重,超標(biāo)率:玉米27.71%、花生餅粕23.27%、DDGS 6.90%、玉米胚芽粕4.92%,其他原料均不超標(biāo)。配合飼料除了奶牛精料補(bǔ)充料不超標(biāo)外,家禽配合飼料超標(biāo)率在13.04%~28.57%,需重點(diǎn)關(guān)注。