醇化時間和條件對不同部位煙葉氨基酸含量的影響

摘要：為研究醇化時間和條件對不同部位煙葉氨基酸含量的影響，采用氨基酸分析儀測定了煙草樣品19種氨基酸的含量，并對結(jié)果進行了分析。結(jié)果表明，不同部位煙葉的氨基酸含量大部分都存在顯著差異；醇化時間對上部煙葉的?；撬?、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、γ-氨基丁酸、異羥賴氨酸、組氨酸、脯氨酸含量影響顯著；對中部煙葉的磷酸絲氨酸、天門冬氨酸、丙氨酸、胱氨酸、異亮氨酸、β-丙氨酸、異羥賴氨酸、精氨酸含量影響顯著；對下部煙葉的磷酸絲氨酸、?；撬?、天門冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、γ-氨基丁酸、異羥賴氨酸、賴氨酸、組氨酸、精氨酸、脯氨酸含量影響顯著。隨醇化時間的延長，不同醇化條件對上部煙葉的氨基酸總量影響逐漸增大，而在醇化12個月時，不同醇化條件對中、下部煙葉的氨基酸總量影響達到最大。

關(guān)鍵詞：醇化時間；醇化條件；煙葉部位；氨基酸含量

中圖分類號：S572 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）19-5133-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.19.062

The Effects of Aging Time and Conditions on the Content of Amino Acid

Abstract： Aiming to study the effects of aging time and conditions on the content of amino acid in different parts of tobacco，nineteen kinds of amino acid contents of tobacco samples were determined by amino acid analyzer，and the determined results were analyzed. Results showed that，there was significant difference among most amino acids content in the different parts of tobacco. The alcoholizing time had significant difference on the content of taurine，threonine，serine，glutamic acid，glycine，alanine，valine，phenylalanine，γ-aminobutyric acid，hydroxy lysine，histidine，proline in upper tobacco leaves； For central tobacco leaves，had significant difference on the content of phosphoserine，aspartic acid，alanine，cystine，isoleucine，β-alanine，hydroxyl lysine，arginine； For lower tobacco leaves，had significant difference on the content of phosphoserine，taurine，aspartic acid，threonine，serine，glutamic acid，glycine，valine，phenylalanine，γ-aminobutyric acid，hydroxyl lysine，lysine，histidine，arginine，proline. With the prolonging of alcoholizing time，the influences of different aging conditions on the total amino acids in the upper leaves gradually increasesd，after alcoholizing for twelve months，the influences of different aging conditions on the total amino acids in central and lower tobacco leaves was the biggest.

Key words： aging time；aging conditions；different parts of tobacco；amino acid content

氨基酸在煙草生長發(fā)育過程中，在氮的代謝和煙株抵御不良環(huán)境的影響中都起到了相當重要的作用[1-3]，而在煙葉復(fù)烤后的醇化[4，5]過程中，氨基酸是引起煙葉褐變，導(dǎo)致煙葉使用價值降低的因素之一[6，7]；但同時氨基酸也會和煙葉中一些具有還原性的物質(zhì)發(fā)生非酶棕化反應(yīng)，生成對煙葉感官品質(zhì)有改善作用的呋喃等化合物[8-10]，從而可以提高煙葉的品質(zhì)。為此，基于氨基酸在煙葉醇化過程中的特殊作用，本試驗對不同醇化時間和醇化條件下不同部位煙葉氨基酸的變化進行了研究，以期為提高煙葉的工業(yè)可用性提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

1）試驗材料。X2F（下部）煙葉、C3F（中部）煙葉、Β2F（上部）煙葉均于2010年采自四川涼山會理煙葉基地。

2）試驗設(shè)備。L-8900高速氨基酸分析儀（日立公司）、原川渝中煙工業(yè)有限責(zé)任公司4個煙葉醇化庫房（庫房編號分別為1#、2#、3#、4#）。

1.2 試驗方法

1）煙葉樣品制備及取樣。將復(fù)烤后的上、中、下部煙葉，各分成4份，分別放入4個醇化庫房進行醇化。在醇化0、6、18、24個月后取樣，并檢測氨基酸含量。

2）檢測方法。利用L-8900高速氨基酸分析儀檢測煙葉樣品中磷酸絲氨酸、?；撬?、天門冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、胱氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、異羥賴氨酸、賴氨酸、組氨酸、精氨酸、脯氨酸等19種氨基酸。

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS軟件[11，12]進行處理與分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 煙草樣品中19種氨基酸含量的總體情況

上、中、下3個部位的煙葉分別存放于4個庫房，分別在醇化0、6、12、18個月后取樣檢測，19種氨基酸含量的總體情況見表1。從變異系數(shù)來看，各種氨基酸含量的變異都比較大，說明煙葉不同部位、不同醇化時間和不同存放條件對于各類氨基酸含量的影響比較大；各氨基酸的峰度系數(shù)都為負數(shù)，說明其數(shù)據(jù)分布為扁平峰，數(shù)據(jù)相對分散；賴氨酸偏度系數(shù)為負值，其數(shù)據(jù)為左偏分布，其他氨基酸的數(shù)據(jù)都是右偏分布。

2.2 不同部位煙葉氨基酸含量的差異性分析

對復(fù)烤后（醇化0個月）上、中、下部煙葉樣品的氨基酸含量進行方差分析。從表2可以看出，方差齊次性檢驗的相伴概率都大于顯著水平0.05，因此認為各指標滿足方差檢驗條件。進一步的單因素方差分析結(jié)果（表3）顯示，除?；撬?、胱氨酸、異亮氨酸外，其他氨基酸的顯著水平都小于0.05，也就是說上、中、下部位煙葉的這些氨基酸差異顯著，具體見多重比較分析結(jié)果（表4）。從表4可以看出，中部和下部煙葉的甘氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、谷氨酸、γ-氨基丁酸含量無顯著差異，而與上部煙葉差異顯著；上部和下部煙葉的磷酸絲氨酸、脯氨酸含量無顯著差異，而與中部煙葉差異顯著；上部和中部煙葉的異羥賴氨酸、精氨酸含量無顯著差異，而與下部煙葉差異顯著；上部和中部煙葉的β-丙氨酸含量差異顯著，而都與下部煙葉無顯著差異；上、中、下部煙葉的絲氨酸、天門冬氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、組氨酸含量，彼此間都差異顯著。

2.3 不同醇化時間對各部位煙葉氨基酸含量的影響

2.3.1 醇化時間對各部位煙葉19種氨基酸含量的影響 對醇化0、6、12、18個月的煙葉樣品氨基酸含量，按煙葉部位分組進行Kruskal Wallis非參數(shù)檢驗，結(jié)果（表5）顯示，上部煙葉，磷酸絲氨酸、天門冬氨酸、胱氨酸、異亮氨酸、β-丙氨酸、賴氨酸、精氨酸含量差異不顯著，其他氨基酸含量差異顯著；中部煙葉，磷酸絲氨酸、天門冬氨酸、丙氨酸、胱氨酸、異亮氨酸、β-丙氨酸、異羥賴氨酸、精氨酸含量差異顯著，而其他氨基酸含量差異不顯著；下部煙葉，丙氨酸、胱氨酸、異亮氨酸、β-丙氨酸、異羥賴氨酸、組氨酸、精氨酸含量差異顯著，而其他氨基酸含量差異不顯著。

2.3.2 醇化時間對各部位煙葉氨基酸總量的影響 各部位煙葉檢測的19種氨基酸，基本包括了煙葉中含量相對較高的所有氨基酸，所以其和可以作為煙葉氨基酸的總含量。從圖1可以看出各部位煙葉的氨基酸總量隨醇化時間的變化情況，其中醇化6個月后，上部、下部氨基酸酸總量有所減少，而中部煙葉氨基酸酸總量有所增加；醇化12個月后，上部、下部氨基酸酸總量有所增加，中部煙葉氨基酸總量減少，且幅度較大；醇化18個月后，中、下部煙葉氨基酸總量降低，而上部煙葉氨基酸酸總量有小幅度的增加。整體來看，醇化6個月，各部位煙葉的氨基酸總量變化幅度都不大，而后隨醇化時間的延長，變化幅度加大，其中中部煙葉的變化幅度最大；醇化18個月與醇化0個月比較，上部、下部氨基酸總量增加，而中部煙葉大幅度降低。依據(jù)不同醇化時間氨基酸總量的變化情況，可以為不同卷煙葉組配方提供參考。

2.4 同一醇化時間不同醇化庫房的煙葉氨基酸總量差異性分析

同一醇化時間不同醇化庫房的煙葉氨基酸總量差異性分析結(jié)果見表6。從變異系數(shù)來看，醇化6個月的煙葉樣品，4個庫房間的上、中、下部位煙葉的氨基酸總量差異不算太大；而醇化12個月的煙葉樣品，中部煙葉的各庫房間氨基酸總量變異系數(shù)達到了31.41%，也就是說此時中部煙葉氨基酸總量受醇化條件的影響很大，而上部和下部煙葉的變異系數(shù)相對于醇化6個月也有所增加；醇化18個月后，上部煙葉氨基酸總量的變異系數(shù)進一步加大，而中、下部煙葉氨基酸總量的變異系數(shù)大幅度減小?？傮w來說，隨醇化時間的延長，上部煙葉各庫房間的煙葉樣品氨基酸總量差異逐漸變大，而中、下部煙葉在醇化12個月時，庫房間樣品的氨基酸總量差異達到最大，而后這種差異又快速縮小。

3 小結(jié)

中部和下部煙葉的甘氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、谷氨酸、γ-氨基丁酸含量無顯著差異，而與上部煙葉差異顯著；上部和下部煙葉的磷酸絲氨酸、脯氨酸含量無顯著差異，而與中部煙葉差異顯著；上部和中部煙葉的異羥賴氨酸、精氨酸含量無顯著差異，而與下部煙葉差異顯著；上部和中部煙葉的β-丙氨酸含量差異顯著，而都與下部煙葉無顯著差異；上、中、下部煙葉的絲氨酸、天門冬氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、組氨酸含量，彼此間都差異顯著。

醇化時間對上部煙葉的牛磺酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、γ-氨基丁酸、異羥賴氨酸、組氨酸、脯氨酸含量有顯著影響；對中部煙葉的磷酸絲氨酸、天門冬氨酸、丙氨酸、胱氨酸、異亮氨酸、β-丙氨酸、異羥賴氨酸、精氨酸含量有顯著影響；對下部煙葉的磷酸絲氨酸、?；撬帷⑻扉T冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、γ-氨基丁酸、異羥賴氨酸、賴氨酸、組氨酸、精氨酸、脯氨酸含量有顯著影響。

隨醇化時間的延長，不同醇化條件對上部煙葉的氨基酸總量影響逐漸增大，而在醇化12個月時，不同醇化條件對中、下部煙葉的氨基酸總量影響達到最大。通過對不同醇化時間和醇化條件對不同部位煙葉氨基酸含量的影響分析，可以對不同醇化時間和庫房的煙葉原料的使用提供參考。

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