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    淺談高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)中的體現(xiàn)

    2016-12-31 00:00:00賁新琰
    科技創(chuàng)新與應(yīng)用 2016年16期

    摘 要:目的:分析在藥品檢驗(yàn)過程中應(yīng)用高效液相普法的檢驗(yàn)效果。方法:將銀杏葉中提取的銀杏黃銅藥物當(dāng)作研究的對象,均分成研究組與常規(guī)組,稱取0.2克的樣品量,常規(guī)組通過薄層的色譜(TLC)方式來檢測,研究組通過高效液相色譜方法(HPLC)來檢測,對比分析兩種檢驗(yàn)方法下,產(chǎn)品的回收率、分離率以及純度。結(jié)果:研究組中槲皮素、山萘素以及異鼠李素的分離率、純度明顯高于常規(guī)組,對比差異顯著(P<0.05);常規(guī)組中山萘素加入量為2毫克,檢測量為1.7毫克,回收率為85.0%,研究組中山萘素加入量為2毫克,檢測量為1.99毫克,回收率99.5%,研究組中山萘素回收率明顯比常規(guī)組高,對比差異顯著(P<0.05)。結(jié)論:高效液相色譜方法可以高效率、有效與準(zhǔn)確的測定藥品含量,同時(shí)可以檢查藥物中的相關(guān)物質(zhì);并且在藥物回收率、精準(zhǔn)度以及純度方面的檢測效果比較好,具有應(yīng)用的價(jià)值。

    關(guān)鍵詞:高效相色譜法;藥品檢驗(yàn);應(yīng)用效果

    現(xiàn)階段高效液相色譜方式在藥物分析過程中較為常用,這種分析方式主要優(yōu)勢是比較快捷與高效。在長時(shí)間發(fā)展過程中,高效液相譜方法在操作的自動(dòng)化、分析速度、檢測的靈敏度以及分離效能方面均得到較好的發(fā)展,同時(shí)還保留經(jīng)典的液相色譜法中:方便色譜制備、樣品的適用范圍比較廣以及流動(dòng)相比較多等優(yōu)勢,廣泛應(yīng)用在石油化工、生物工程、食品工業(yè)以及制藥工業(yè)等領(lǐng)域中。在高效液相色譜的技術(shù)不斷發(fā)展的背景下,漸漸用于藥品的檢驗(yàn)中,并且作用也日漸彰顯,在大多數(shù)藥品檢驗(yàn)中都應(yīng)用這種檢驗(yàn)的方式。文章分析了在藥品檢驗(yàn)過程中應(yīng)用高效液相普法的檢驗(yàn)效果,總結(jié)如下:

    1 主要的試劑以及儀器

    1.1 主要試劑、藥品

    選取銀杏葉的提取物,該藥物主要生產(chǎn)于EGb德國威瑪舒培博士的藥廠中,其注冊的證號主要是H20090296;重蒸水,這種水經(jīng)過超純水儀器濾膜的過濾;甲醇,分析純AR,該藥物生產(chǎn)于深圳市華昌化工的有限公司;磷酸,分析純,這種藥物主要生產(chǎn)于深圳市華昌化工的有限公司;黃酮貳元中槲皮素的對照品,生產(chǎn)于上海亞培生物科技的有限公司。

    1.2 儀器

    高效液相色譜的儀器SP8800泵,生產(chǎn)于美國光譜的物理公司;54400型的積分儀、ChromDe的脫氣機(jī),Spheri-5RP-18(5um)的色譜柱(220mm×4.6毫米),配10uL定量管的進(jìn)樣器。

    1.3 檢驗(yàn)的方法

    將銀杏葉中提取物銀杏黃銅藥物當(dāng)作研究的對象,均分成研究組以及常規(guī)組,稱取0.2克的樣品量。常規(guī)組使用薄層色譜(TLC)方式實(shí)施檢測,研究組通過高效液相譜方法(HPLC)實(shí)施檢測,經(jīng)檢測以后,對兩組研究對象山萘素的產(chǎn)品回收情況、分離率、精密度以及純度進(jìn)行分析。

    1.4 制備樣品

    稱取銀杏葉的提取物0.2克,然后加入甲醇40毫升,輕微震蕩混合均勻,確保提取物徹底溶解,加入40毫升濃度為1.5mol/L鹽酸溶液,輕微搖勻,放在37攝氏度水浴鍋之中進(jìn)行加熱,加熱時(shí)間為兩個(gè)小時(shí)。加熱完成并冷卻以后,放在50毫升的容量瓶之中,應(yīng)用甲醇定容,然后放置在室溫下備用。

    1.5 高效液相色譜方法(HPLC)的條件

    流動(dòng)相:0.4%磷酸溶液與甲醇比為45:55;流速:每分鐘流動(dòng)的量為1毫升;柱溫為25攝氏度;進(jìn)樣的體積為10uL;波長為360納米。

    1.6 統(tǒng)計(jì)的方法

    應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件來分析與處理數(shù)據(jù),用均數(shù)±的標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)來表示計(jì)數(shù)資料,并用x2來檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料,用P<0.05表示差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)方面的意義。

    2 結(jié)果

    2.1 兩組檢測方式下精密度、分離率以及純度比較

    常規(guī)組中槲皮素的分離率為89.8%、純度為89.2%;山萘素的分離率為92%、純度為89.0%;異鼠李素的分離率為88%、純度為89.1%。研究組中槲皮素的分離率為99.2%、純度為99.8%;山萘素的分離率為99.1%、純度為99.9%;異鼠李素的分離率為98.9%、純度為99.9%。研究組中槲皮素、山萘素以及異鼠李素的分離率、純度明顯高于常規(guī)組,對比差異顯著(P<0.05)。

    2.2 在兩種檢測方式下山萘素回收率

    常規(guī)組中山萘素加入量為2毫克,檢測量為1.7毫克,回收率為85.0%,研究組中山萘素加入量為2毫克,檢測量為1.99毫克,回收率99.5%,研究組中山萘素回收率明顯比常規(guī)組高,對比差異顯著(P<0.05)。

    3 討論

    3.1 高效液相普方法的特點(diǎn)

    高效液相色譜法主要將液體當(dāng)作流動(dòng)相,同時(shí)應(yīng)用高壓輸液的系統(tǒng)進(jìn)行檢測,是色譜方法中的一個(gè)重要分支[1]。高效液相譜方法使用高壓的輸液泵,把不同比例成分的混合溶劑、不同極性的溶劑等流動(dòng)相,泵進(jìn)固定相色譜柱中,經(jīng)過進(jìn)樣閥將檢測樣品注入其中,經(jīng)流動(dòng)相進(jìn)入柱內(nèi),當(dāng)柱內(nèi)各個(gè)成分被完全分離以后,再依次泵入檢測器中進(jìn)行相關(guān)的檢測,以便分析試樣中的化學(xué)成分。就原理方面來講,高效液相色譜與經(jīng)典的相色譜法相比,并沒有本質(zhì)區(qū)別,但是高效液相普法使用了高效微粒的固定相、新型高壓的輸液泵以及高靈敏度的檢測器。高效液相色譜方式使用了極細(xì)小高效色譜的填料以及小口徑柱,應(yīng)用高壓的輸液泵讓溶劑高速流過色譜柱,與經(jīng)典柱的色譜法相比,速度比較快,并且有高靈敏度、高壓、高效以及高速的特點(diǎn)[2]。

    3.2 高效液相色譜在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

    近年來,高效液相色譜法(HPLC)逐漸應(yīng)用在食品、藥品等監(jiān)測的工作中,這種方式在曲安奈德與頭炮拉定等藥物的鑒別中有著良好效果。此外,在難以區(qū)分相似藥名時(shí),經(jīng)常會(huì)使用液相色譜方法進(jìn)行監(jiān)測,例如:云防風(fēng)、水防風(fēng)以及川防風(fēng)等藥物名字差異不大,但是臨床的藥理具有巨大差異[3]。尤其近年來一些保健品以及藥品中會(huì)添加違禁藥品,嚴(yán)重影響了患者生命安全,因此,需要使用高效液相色譜方法對這些藥品進(jìn)行監(jiān)測,有效保障藥物的安全性。而文章主要通過高效液相色譜方法來分析銀杏葉中提取銀杏黃銅藥物,而且,高效液相色譜方式監(jiān)測,可以清楚了解黃銅藥物中的各個(gè)組成部分。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),研究組中槲皮素、山萘素以及異鼠李素的分離率、純度明顯高于常規(guī)組,對比差異顯著(P<0.05)。常規(guī)組中山萘素加入量為2毫克,檢測量為1.7毫克,回收率為85.0%,研究組中山萘素加入量為2毫克,檢測量為1.99毫克,回收率99.5%,研究組中山萘素回收率明顯比常規(guī)組高,對比差異顯著(P<0.05)。

    綜上,高效液相色譜方法可以高效率、有效與準(zhǔn)確的測定藥品含量,同時(shí)可以檢查藥物中的相關(guān)物質(zhì),嚴(yán)格監(jiān)測抗生素以及藥物中的違禁成分;并且在藥物回收率、精準(zhǔn)度以及純度方面的檢測效果比較好,值得進(jìn)一步在臨床上推廣與應(yīng)用。

    參考文獻(xiàn)

    [1]劉平懷,吳曉娜,陳晨.高效液相色譜法測定藥品中的乙二醇二乙醚二胺四乙酸[J].色譜,2015,12(4):419-422.

    [2]王婧菲,于泓,卜文.離子液體作高效液相色譜流動(dòng)相添加劑分離測定芳香族羧酸[J].分析測試學(xué)報(bào),2014,21(5):533-538.

    [3]筆雪艷,張勝波,張清波.用超高效液相色譜蒸發(fā)光散射檢測桔梗流浸膏指紋圖譜的研究[J].藥學(xué)實(shí)踐雜志,2015,12(3):153-155.

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