• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于廣西普通野生稻染色體片段代換系的落粒性QTL鑒定及相關(guān)主效QTL定位

    2020-07-07 09:33:59袁睿智黃澤鍵羅亮趙能陳媛梁燕青萬(wàn)瑤劉芳李容柏
    關(guān)鍵詞:廣西

    袁睿智 黃澤鍵 羅亮 趙能 陳媛 梁燕青 萬(wàn)瑤 劉芳 李容柏

    摘要:【目的】挖掘廣西普通野生稻(Oryza rufipogon Griff.)蘊(yùn)藏的落粒性基因,為廣西普通野生稻進(jìn)化及栽培稻起源等研究提供參考依據(jù)?!痉椒ā客ㄟ^(guò)雜交、回交和分子標(biāo)記輔助選擇(MAS)等方法構(gòu)建廣西普通野生稻DP30和DP15的染色體單片段代換系(CSSLs)群體(DP30-CSSLs和DP15-CSSLs),對(duì)CSSLs群體進(jìn)行落粒性鑒定和數(shù)量性狀位點(diǎn)(QTL)分析;并以篩選出的強(qiáng)落粒性代換系Y99(CSSL-Y99)與受體親本93-11雜交構(gòu)建次級(jí)F2群體,對(duì)落粒性相關(guān)QTL進(jìn)行定位?!窘Y(jié)果】構(gòu)建出由144個(gè)CSSLs組成的DP30-CSSLs群體和由59個(gè)CSSLs組成的DP15-CSSLs群體。DP30-CSSLs群體代換片段累計(jì)全長(zhǎng)737.5 Mb,對(duì)DP30全基因組的覆蓋率約為94.71%;DP15-CSSLs群體代換片段累計(jì)全長(zhǎng)337.36 Mb,對(duì)DP15全基因組的覆蓋率約為73.11%。從2個(gè)廣西普通野生稻CSSLs群體中鑒定出12個(gè)落粒性CSSLs(CSSL-Y104、CSSL-Y68、CSSL-Y83、CSSL-Y328、CSSL-Y235、CSSL-Y64、CSSL-Y63-2、CSSL-Y303、CSSL-Y99、CSSL-Y106-3、CSSL-Z37和CSSL-Z38),檢測(cè)出6個(gè)落粒性QTLs(qSH2.1、qSH4.1、qSH5.1、qSH9.1、qSH11.1和qSH11.2)。其中,qSH11.1的加性效應(yīng)(-37.5)和表型貢獻(xiàn)率(-23.4%)最高。利用在qSH11.1所在區(qū)間內(nèi)開(kāi)發(fā)的6對(duì)InDel分子標(biāo)記(M1、M2、M3、M4、M5和M6)對(duì)從次級(jí)F2群體進(jìn)行基因型分析,篩選出4個(gè)重組單株(43、167、128和136),并將落粒性主效QTL qSH11.1定位于第11染色體M5~M6間約1.5 Mb的范圍內(nèi)?!窘Y(jié)論】從構(gòu)建的廣西普通野生稻核心種質(zhì)資源(DP30和DP15)CSSLs群體中檢測(cè)出6個(gè)落粒性QTLs,主效QTL qSH11.1定位于第11染色體M5~M6間約1.5 Mb的范圍內(nèi),是新發(fā)現(xiàn)的落粒性QTL。

    關(guān)鍵詞: 普通野生稻;落粒性;染色體片段代換系(CSSLs);數(shù)量性狀位點(diǎn)(QTL);廣西

    中圖分類號(hào): S511.9? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號(hào):2095-1191(2020)05-1004-09

    Abstract:【Objective】Based on exploitation of the shattering genes from Guangxi common wild rice(Oryza rufipogon Griff.), in order to provide a reference for the study of the evolution of Guangxi common wild rice and the origin of cultivated rice (O. sativa L.). 【Method】DP30-CSSLs and DP15-CSSLs, two chromosome segment substitution lines (CSSLs) populations of Guangxi common wild rice were constructed respectively by hybridization, backcrossing and molecular marker-assisted selection(MAS), which were used for shattering identification and quantitative trait loci(QTL) analysis. The secondary F2 population was constructed by crossing the strong shattering substitution line Y99 (CSSL-Y99) with the recipient parent 93-11 to map the shattering-related QTL. 【Result】DP30-CSSLs population consisted of 144 DP30-CSSLs and DP15-CSSLs population consisted of 59 DP15-CSSLs were obtained. The total length of DP30-CSSLs population was 737.5 Mb, covering 94.71% of DP30 genome; while the total length of DP15-CSSLs population was 337.36 Mb, covering 73.11%. of DP15 genome. Twelve CSSLs(CSSL-Y104,CSSL-Y68,CSSL-Y83,CSSL-Y328, CSSL-Y235,CSSL-Y64,CSSL-Y63-2,CSSL-Y303,CSSL-Y99,CSSL-Y106-3,CSSL-Z37 and CSSL-Z38) showed shattering trait and six grain-shattering QTLs(qSH2.1, qSH4.1, qSH5.1, qSH9.1, qSH11.1 and qSH11.2) were identified from the two Guangxi common wild rice CSSLs populations. Among them, qSH11.1 had the highest additive effect(-37.5) and phenotypic contribution rate(-23.4%). Six pairs of InDel molecular markers(M1, M2, M3, M4, M5 and M6) were developed in the interval of qSH11.1 to analyze the genotypes from the secondary F2 population, and four recombinant plants(43,167,128 and 136) were selected. A major grain-shattering QTL qSH11.1 from CSSL Y99 was mapped to the approximately 1.5 Mb region between M5-M6 on chromosome 11. 【Conclusion】Six shattering QTLs are detected from DP30-CSSLs and DP15-CSSLs. Among them, the major QTL qSH11.1 is located in the range of about 1.5 Mb between the M5-M6 on chromosome 11, which is a newly discovered shattering QTL.

    Key words:common wild rice(Oryza rufipogon Griff.); grain shattering; chromosome segment substitution lines (CSSLs); quantitative trait loci (QTL); Guangxi

    Foundation item: Guangxi Innovation Driven Development Special Project (Guike AA17204070)

    0 引言

    【研究意義】普通野生稻(Oryza rufipogon Griff.)是水稻育種的種質(zhì)資源寶庫(kù),具有許多與栽培稻(O. sativa L.)存在顯著差異的優(yōu)良性狀(Huang et al.,2012;Stein et al.,2018)。栽培稻在長(zhǎng)期的人工馴化過(guò)程中,丟失了許多優(yōu)良性狀且遺傳基礎(chǔ)變窄(Doebley et al.,2006;江川等,2018),優(yōu)良數(shù)量性狀位點(diǎn)(QTL)的丟失極大限制了栽培稻產(chǎn)量和品質(zhì)的進(jìn)一步提高(Wu et al.,2020)。因此,加強(qiáng)普通野生稻農(nóng)藝及抗逆等優(yōu)良性狀的研究與利用,對(duì)揭示水稻的馴化起源及提高栽培稻的產(chǎn)量和品質(zhì)均具有重要意義。【前人研究進(jìn)展】經(jīng)人工馴化后,許多不同物種間的相同性狀被固定下來(lái),如分蘗角度、株型及種子落粒性變化等(Yu et al.,2008;Zhang et al.,2009;Wu et al.,2013)。落粒性對(duì)水稻種子傳播有積極作用,但不利于人們收獲。相對(duì)于野生稻而言,栽培稻種子成熟時(shí)仍保留在穗部(Zhang et al.,2009)。因此,不落粒性作為水稻馴化過(guò)程中一個(gè)人為選擇的重要性狀,有效保證了水稻的收獲產(chǎn)量,而開(kāi)展落粒性研究對(duì)了解水稻起源演化具有重要意義(Zhao et al.,2015)。水稻落粒性是一個(gè)復(fù)雜的生物學(xué)性狀,其中離層(Abscission zone,AZ)形成和斷裂是控制落粒的主要原因(Zhou et al.,2012)。AZ是小枝梗與種子間的連接部位,由一層或數(shù)層形態(tài)相似的致密細(xì)胞組成(Yan et al.,2015)。在前人的相關(guān)研究中,已有多個(gè)控制水稻落粒性的QTLs被檢測(cè)出來(lái),并克隆獲得SH1、SHAT1和GL4等落粒性基因(Lin et al.,2007;Zhang et al.,2009;Huang et al.,2012;Zhou et al.,2012;Wu et al.,2017)。其中,SH1基因位于第1染色體上,cDNA序列全長(zhǎng)2450 bp,包含4個(gè)外顯子,編碼612個(gè)氨基酸殘基。qSH1基因開(kāi)放閱讀框12 kb的5'端調(diào)節(jié)區(qū)存在一個(gè)單核苷酸多態(tài)性(SNP)位點(diǎn),在Kasalath中為G,在日本晴中則為T(mén)(Zhang et al.,2009)。qSH1基因編碼一個(gè)BEL1類型的同源異型蛋白,主要影響水稻AZ的發(fā)育。qSH1基因在花器官分化期及花序軸和枝??焖偕扉L(zhǎng)期的花序原基表達(dá),還在花藥和小穗基部將要形成脫離層的區(qū)域表達(dá);花序軸形成期在不落粒品種日本晴的花序原基也有表達(dá),但在花器官分化期及花序軸和枝??焖偕扉L(zhǎng)期的小穗基部將要形成脫離層的區(qū)域并未表達(dá)(Huang et al.,2012)。SH4基因是一個(gè)影響水稻落粒性的主效QTL,且編碼一個(gè)未知功能的轉(zhuǎn)錄因子,而影響水稻AZ形成(Xiong et al.,1999)。Lin等(2007)從栽培稻克隆獲得的SHAT1基因與SH4基因是等位基因,二者的不同之處在于SHAT1基因并不影響AZ形成。SHAT1基因編碼的APETALA2轉(zhuǎn)錄因子是落粒性形成的必需條件,并參與AZ發(fā)育(Lin et al.,2007)。SHAT1基因在亞洲栽培稻中廣泛存在,對(duì)其進(jìn)行研究有助于探索水稻的秈粳分化機(jī)理(Zhou et al.,2012)。在水稻的馴化過(guò)程中,SH4非落粒等位基因被人為選擇保留下來(lái)(Zhang et al.,2009)。除了SH1和SHAT1基因外,GL4基因通過(guò)調(diào)控外穎和內(nèi)穎縱向細(xì)胞的伸長(zhǎng),而控制非洲栽培稻的粒長(zhǎng),同時(shí)能調(diào)控種子落粒性,主要在幼穗中表達(dá),其次是莖部,在葉片和根部不表達(dá);GL4基因發(fā)生單核苷酸突變時(shí)提前產(chǎn)生終止密碼子,致使種子粒長(zhǎng)寬變小、落粒性喪失,進(jìn)而影響水稻產(chǎn)量(Wu et al.,2017)。【本研究切入點(diǎn)】染色體單片段代換系(CSSLs)是基因挖掘的理想群體,可從普通野生稻CSSLs群體中挖掘出更多新的落粒性基因。廣西野生稻遺傳多樣性豐富,但至今鮮見(jiàn)有關(guān)廣西普通野生稻落粒性基因挖掘的研究報(bào)道?!緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】通過(guò)構(gòu)建CSSLs群體發(fā)掘廣西普通野生稻中與落粒性相關(guān)QTL,為落粒性基因精細(xì)定位和克隆打下基礎(chǔ),同時(shí)為廣西普通野生稻進(jìn)化及栽培稻起源等研究提供參考依據(jù)。

    1 材料與方法

    1. 1 試驗(yàn)材料

    試驗(yàn)材料包括普通野生稻DP30和DP15及栽培稻品種93-11。其中,DP30和DP15是廣西普通野生稻核心種質(zhì),由亞熱帶農(nóng)業(yè)生物資源保護(hù)與利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供,易落粒;93-11為測(cè)序品種,是優(yōu)良栽培秈稻中的常用恢復(fù)系,不易落粒。

    1. 2 普通野生稻CSSLs群體構(gòu)建

    參考T?rjék等(2008)的研究方法,通過(guò)雜交、回交和分子標(biāo)記輔助選擇(MAS)等方法構(gòu)建廣西普通野生稻DP30和DP15的CSSLs群體(DP30-CSSLs和DP15-CSSLs)。93-11與DP30和DP15分別雜交獲得F1。93-11作輪回親本,與雜交后代連續(xù)回交,從BC1F1開(kāi)始每個(gè)世代均通過(guò)MAS跟蹤目標(biāo)DNA片段,選擇含有目標(biāo)DNA片段植株再繼續(xù)回交;直至獲得高世代回交群體BC4F2、BC5F2、BC6F2和BC7F2,從BC4F1開(kāi)始通過(guò)MAS檢測(cè)目標(biāo)片段植株的遺傳背景,篩選出攜帶少數(shù)幾個(gè)或1個(gè)供體親本片段的CSSLs(圖1)。由此構(gòu)建獲得DP30-CSSLs群體和DP15-CSSLs群體。

    1. 3 落粒性表型調(diào)查

    在2018年晚稻(7—11月)栽培條件下,采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)(RCBD)每3 d在廣西大學(xué)試驗(yàn)田(東經(jīng)108°13′,北緯22°38′)記錄1次表型數(shù)據(jù)。具體方法:所有表型數(shù)據(jù)記錄重復(fù)3次,取平均值,每次重復(fù)選取15株種植材料進(jìn)行表型調(diào)查。參考Zhou等(2012)關(guān)于落粒/非落粒的判定方法,即種子完熟后,自然條件下每穗脫落種子數(shù)量占每穗種子總數(shù)的百分比,80%以上記為落粒,10%以下為不落粒。參考呂樹(shù)偉(2018)的方法判斷落粒性強(qiáng)弱,即種子開(kāi)花至種子完熟間各階段采用永紅牌拉力儀測(cè)量拉力值。具體步驟:夾子掛在拉力儀掛鉤上,用夾子固定穎殼中部,在水平方向上對(duì)其進(jìn)行拉拽,使種子與小枝梗分離,記錄測(cè)得的最大拉力值,重復(fù)3次,記錄平均值。表型值(TV)選取拉力值大幅變化時(shí),即第6 d的拉力值(Zhao et al.,2019)。

    1. 4 基因組測(cè)序及分子標(biāo)記開(kāi)發(fā)

    采用Illumina HiSeq 2500?提取試劑盒制備DP30和DP15基因組樣品,并委托北京諾禾致源生物信息科技有限公司進(jìn)行測(cè)序。樣品制備和測(cè)序均遵循標(biāo)準(zhǔn)的Illumine方案,參考已公布的93-11基因組序列(Kechin et al.,2017)。使用FastQC和Adapt進(jìn)行測(cè)序結(jié)果質(zhì)量檢測(cè)(Pared質(zhì)量評(píng)分),參數(shù)為-O 5和-m 32(Zhao et al.,2016);以Burrow-Wheeler Aligner(BWA)進(jìn)行基因組比對(duì)分析(McKenna et al.,2010)。通過(guò)GATK檢測(cè)1~50 bp的插入或缺失情況,并提取測(cè)序深度高(DP,≥50倍)的InDel區(qū)大片段(≥2 bp)設(shè)計(jì)InDel分子標(biāo)記,所得候選分子標(biāo)記經(jīng)數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)搜索,篩選出最終的分子標(biāo)記(Wu et al.,2017)。

    1. 5 基因組DNA提取及PCR

    采用CTAB法提取基因組DNA,PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)7%聚丙烯酰胺變性凝膠分離后,用銀染法顯色(Zhou et al.,2012);參照Yoon等(2015)的方法確認(rèn)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳條帶和基因分型。

    1. 6 QTL定位與數(shù)據(jù)分析

    以Graphical Geno-Types 2(GGT 2.0)繪制CSSLs群體基因型圖譜(van Berloo,2008)。參考Brondani等(2002)的方法分析CSSLs群體中普通野生稻DNA代換片段長(zhǎng)度。采用重疊群QTL分析法檢測(cè)CSSLs群體的QTL,具體方法:若具有重疊代換片段的幾個(gè)CSSLs表型相同,相關(guān)QTL可能位于其重疊代換片段上(Furuta et al.,2014)。利用QTL IciMapping 4.1.0的復(fù)合區(qū)間作圖法(CIM)進(jìn)行QTL定位,根據(jù)排列(組合)進(jìn)行檢驗(yàn),排列=1000,P=0.001,若LOD值≥2.5,則在P≤0.001水平上認(rèn)定一個(gè)可能的QTL。參考Zhao等(2019)的方法判定QTL加性效應(yīng)(A)和表型貢獻(xiàn)率(AP),具體計(jì)算公式如下:

    2 結(jié)果與分析

    2. 1 全基因組測(cè)序及CSSLs群體構(gòu)建情況

    利用Illumina高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)廣西普通野生稻DP30和DP15進(jìn)行測(cè)序,結(jié)果(圖2)表明,DP30和DP15與93-11間的SNPs分別為1900132和1894103 bp。針對(duì)DP30-CSSLs群體和DP15-CSSLs群體分別開(kāi)發(fā)285和254對(duì)親本間具有多態(tài)性的分子標(biāo)記。相鄰分子標(biāo)記的平均間距分別為4.92和5.62 cM,經(jīng)數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)搜索篩選,最終構(gòu)建出由144個(gè)CSSLs組成的DP30-CSSLs群體和由59個(gè)CSSLs組成的DP15-CSSLs群體。DP30-CSSLs群體代換片段累計(jì)全長(zhǎng)737.5 Mb,對(duì)DP30全基因組的覆蓋率約為94.71%;DP15-CSSLs群體代換片段累計(jì)全長(zhǎng)337.36 Mb,對(duì)DP15全基因組的覆蓋率約為73.11%。

    2. 2 DP30-CSSLs群體和DP15-CSSLs群體的落粒性鑒定結(jié)果

    分別調(diào)查CSSLs群體和親本的落粒性,從開(kāi)花當(dāng)天(第0 d)到種子成熟(第21 d)期間每隔3 d對(duì)CSSLs群體和親本的種子拉力值進(jìn)行測(cè)量,結(jié)果表明種子拉力值與其落粒性呈負(fù)相關(guān)(表1)。93-11種子未脫落,不具落粒性,在整個(gè)觀察期間的落粒率為0,拉力值維持在155~165 g;而DP30、DP15及12個(gè)CSSLs群體(CSSL-Y104、CSSL-Y68、CSSL-Y83、CSSL-Y328、CSSL-Y235、CSSL-Y64、CSSL-Y63-2、CSSL-Y303、CSSL-Y99、CSSL-Y106-3、CSSL-Z37和CSSL-Z38)除空癟粒外,其余種子均已完全脫落,具有落粒性。從第6 d起DP30、DP15及12個(gè)CSSLs群體的拉力值開(kāi)始下降,第9 d的拉力值持續(xù)下降,至第12 d各拉力值均降為0 g。其中,CSSL-Y99(圖3)在第0~3 d不落粒,其拉力值維持在200 g左右;從第6 d起開(kāi)始出現(xiàn)脫落,落粒率約30%,拉力值下降至80 g;至第9 d種子大量脫落,落粒率約75%,拉力值下降至0 g;第9 d除空癟粒外種子幾乎完全脫落,落粒率約94%??梢?jiàn),相對(duì)于其余11個(gè)CSSLs群體,CSSL-Y99的落粒率最高,拉力值下降最快。

    2. 3 次級(jí)F2群體表型鑒定及遺傳分析結(jié)果

    CSSL-Y99是CSSLs群體中表型最強(qiáng)的CSSLs,為進(jìn)一步明確其種子落粒性,故選取CSSL-Y99和93-11構(gòu)建次級(jí)F2群體。遺傳分析結(jié)果表明,雜交后代F1均具有落粒性,且相關(guān)分子標(biāo)記顯示供試F1的基因型均為雜合型。經(jīng)自交一代后,共獲得F2群體188株,其中落粒141株、不落粒47株,分離比為3∶1[χ2=1.630<χ2(0.05,1)=3.84],符合一對(duì)基因分離規(guī)律,說(shuō)明CSSL-Y99與93-11的落粒性差異是受單個(gè)顯性基因控制。

    2. 4 落粒性QTL檢測(cè)結(jié)果

    由表2和圖4可知,在2個(gè)CSSLs群體中共發(fā)現(xiàn)12個(gè)落粒性CSSLs,依據(jù)重疊群QTL分析檢測(cè)出6個(gè)不同的落粒性QTLs(qSH2.1、qSH4.1、qSH5.1、qSH9.1、qSH11.1和qSH11.2),分別分布在第2、4、5、9和11染色體上。其中,qSH2.1位于第2染色體的C2-21~ C2-22,3.28 Mb區(qū)間,表型貢獻(xiàn)率為-7.8%;qSH4.1位于第4染色體的C4-22~C4-23,2.01 Mb區(qū)間,表型貢獻(xiàn)率為-10.9%,通過(guò)與前人的相關(guān)研究結(jié)果比較,發(fā)現(xiàn)該區(qū)間含有已克隆的SH4基因(Li et al.,2006);qSH5.1位于第5染色體的RM3227~5M13153,4.41 Mb區(qū)間,表型貢獻(xiàn)率為-15.6%,通過(guò)與前人的相關(guān)研究結(jié)果比較,發(fā)現(xiàn)該區(qū)間含有已克隆的SH5基因(Yoon et al.,2015);qSH9.1位于第9染色體的C9-8~C9-9,1.25 Mb區(qū)間,貢獻(xiàn)率為-10.9%;qSH11.1和qSH11.2分別位于第11染色體的C11-5~C11-8和C11-16~C11-17,4.5 Mb和0.5 Mb區(qū)間,貢獻(xiàn)率分別為-23.4%和-15.6%。其中,qSH11.1的加性效應(yīng)最強(qiáng)(-37.5),因而用于進(jìn)行連鎖分析。

    2. 5 落粒性QTL qSH11.1連鎖分析結(jié)果

    CSSL-Y99與93-11的落粒性存在明顯差異,是一個(gè)完全落粒性的CSSLs,所攜帶的qSH11.1表型貢獻(xiàn)率(-23.4%)在6個(gè)落粒性QTLs中最高。CSSL-Y99的代換片段位于第11染色體的C11-4~C11-11區(qū)間,通過(guò)與CSSL-Y303、CSSL-Y106-3和CSSL-Y274的代換片段重疊而將qSH11.1縮小至CSSL-Y99、CSSL-Y303和CSSL-Y106-3的重疊片段上,即第11染色體的C11-5~C11-8區(qū)間。參考測(cè)序結(jié)果,本研究在qSH11.1所在區(qū)間內(nèi)開(kāi)發(fā)6對(duì)InDel分子標(biāo)記(M1、M2、M3、M4、M5和M6)(表3),從構(gòu)建的次級(jí)F2群體分析中篩選出4個(gè)重組單株(43、167、128和136),基于重組單株的基因型和表型,可將qSH11.1定位于InDel分子標(biāo)記M5和M6間約1.5 Mb的范圍內(nèi)(圖5),LOD值為25.0。

    3 討論

    至今,針對(duì)廣西普通野生稻各類性狀的QTL定位已有較多研究報(bào)道(桑洪玉,2014;潘英華等,2017;劉劍鑌,2018),但落粒性狀QTL定位相對(duì)滯后。本研究從廣西普通野生稻DP30-CSSLs群體和DP15-CSSLs群體中篩選出12個(gè)具有落粒性的CSSLs,檢測(cè)出6個(gè)落粒性QTLs(qSH2.1、qSH4.1、qSH5.1、qSH9.1、qSH11.1和qSH11.2),且均呈負(fù)效應(yīng),對(duì)應(yīng)的表型貢獻(xiàn)率分別為-7.8%、-10.9%、-15.6%、 -10.9%、-23.4%和-15.6%。其中,qSH11.1的效應(yīng)最強(qiáng),qSH4.1與SH4基因(34231186~34233373 bp)在同一染色體區(qū)間內(nèi)(Li et al.,2006),qSH5.1與SH5基因(22353997~22358568 bp)在染色體相同位置(Yoon et al.,2015)。在利用CSSLs構(gòu)建次級(jí)F2群體定位落粒性QTL方面,鄭麗媛(2017)以日本晴為受體親本、優(yōu)良恢復(fù)系R225為供體親本,通過(guò)回交并結(jié)合MAS,鑒定了一個(gè)攜帶主效易落?;虻乃綜SSL(Z481),并將SH6(t)定位于RM253~ZLY722,其物理距離在69 kb區(qū)間內(nèi);宗玉龍(2015)從236個(gè)植株中篩選出6個(gè)交換株,并將qSH4初步定位于RM6441~ RM1113,其物理距離為377 kb。本研究選取落粒性強(qiáng)、表型貢獻(xiàn)率大的CSSL-Y99與93-11進(jìn)行雜交,構(gòu)建次級(jí)F2群體,從181個(gè)植株中篩選出4個(gè)交換株,將qSH11.1初步定位在第11染色體M5~M6間約1.5 Mb的區(qū)間內(nèi)。由于該區(qū)間內(nèi)未見(jiàn)已報(bào)道的落粒性基因,故推測(cè)其是一個(gè)新的落粒性基因。

    本研究在DP30-CSSLs群體和DP15-CSSLs群體中新發(fā)現(xiàn)的QTL,可為后續(xù)精準(zhǔn)定位新基因打下基礎(chǔ)。除了精細(xì)定位外,CSSLs/SSSLs在QTL的聚合上也有廣泛應(yīng)用。譚全亞(2016)利用66個(gè)SSSLs對(duì)水稻柱頭外露率QTL進(jìn)行鑒定和聚合。徐建軍和梁國(guó)華(2011)研究證實(shí),通過(guò)遺傳背景相同的CSSLs雜交可將不同代換片段上的多個(gè)優(yōu)良基因聚合在一起,而培育出具有更多優(yōu)良性狀的新品種。本研究結(jié)果表明,12個(gè)攜帶落粒性QTL的CSSLs群體遺傳背景中輪回親本的回復(fù)率較高,且其他性狀與93-11相似。由于93-11作為我國(guó)廣泛栽培的優(yōu)良品種,故這些CSSLs可直接搭配雜交組合。

    數(shù)量性狀遺傳復(fù)雜,通過(guò)CSSLs群體進(jìn)行QTL定位可消除遺傳背景干擾,將復(fù)雜性狀分解為單個(gè)孟德?tīng)栆蜃舆M(jìn)行研究,避免不同QTL間的干擾(Brondani et al.,2002;Zhao et al.,2015),使基于CSSLs群體的QTL定位結(jié)果相對(duì)于利用F2初級(jí)作圖群體的QTL定位結(jié)果更可靠(張向陽(yáng)等,2014;汪欲鵬等,2016)。CSSLs群體是將親本間的差異性狀分離到各CSSLs中,降低各性狀間的相互干擾,使得表型鑒定更直觀。本研究對(duì)2個(gè)普通野生稻CSSLs群體進(jìn)行全基因組深度測(cè)序,全面掌握其代換片段和遺傳背景的信息,為落粒性QTL鑒定和基因克隆、QTL互作分析及雜種優(yōu)勢(shì)機(jī)理研究等提供了重要參考依據(jù)。

    4 結(jié)論

    從構(gòu)建的廣西普通野生稻核心種質(zhì)資源(DP30和DP15)CSSLs群體中檢測(cè)出6個(gè)落粒性QTLs,其中主效QTL qSH11.1定位于第11染色體M5~M6間約1.5 Mb的范圍內(nèi),是新發(fā)現(xiàn)的落粒性QTL。

    參考文獻(xiàn):

    江川,朱業(yè)寶,張丹,鄭蘋(píng)立,王金英. 2018. 稻種資源收集、保存和更新中存在的問(wèn)題及對(duì)策[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),30(9):16-20. [Jiang C,Zhu Y B,Zhang D,Zheng P L,Wang J Y. 2018. Existent problems in collection,preservation and regeneration of rice germplasm resources and their countermeasure[J]. Acta Agriculturae Jiangxi,30(9):16-20.]

    劉劍鑌. 2018. 廣西普通野生稻苗期耐冷QTL qCTS12精細(xì)定位及其調(diào)控模式研究[D]. 南寧:廣西大學(xué). [Liu J B. 2018. The fine mapping and regulation model research of common wild rice in Guangxi QTL qCTS12,a locus positively responses chill in rice seedling stage[D]. Nanning:Guangxi University.]

    呂樹(shù)偉. 2018. 非洲野生稻落粒基因SH3的克隆及其分子演化[D]. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué). [Lü S W. 2018. Cloning and molecular evolution of ObSH3 controlling seed shattering in African wild rice(Oryza barthii A. Chev.)[D]. Beijing:China Agricultural University.]

    潘英華,溫國(guó)泉,徐志健,梁云濤. 2017. 利用野栽雜交分離群體定位水稻結(jié)實(shí)率QTLs[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),30(7):1473-1478. [Pan Y H,Wen G Q,Xu Z J,Liang Y T. 2017. Mapping of QTLs for seed setting rate using hybrid popu-lation of Oryza rufipogon Griff. ×cultivated rice[J]. Southwest Journal of Agriculture Sciences,30(7):1473-1478.]

    桑洪玉. 2014. 廣西普通野生稻育性恢復(fù)基因Rf3、Rf4的恢復(fù)效應(yīng)及Rf3基因的定位[D]. 南寧:廣西大學(xué). [Sang H Y. 2014. Research on effects of restorer genes Rf3 and Rf4 from Guangxi common wild rice(Oryza rufipogon Griff.) and mapping of Rf3[D]. Nanning:Guangxi University.]

    譚全亞. 2016. 基于SSSL水稻柱頭外露率QTL的鑒定和聚合效應(yīng)分析[D]. 廣州:華南農(nóng)業(yè)大學(xué). [Tan Q Y. 2016. Identification and pyramiding of QTL related to stigma exsertion rate based on SSSL in rice[D]. Guangzhou:South China Agricultural University.]

    汪欲鵬,段里成,龍啟樟,徐林典,武志峰,萬(wàn)建林,石慶華,潘曉華,吳自明. 2016. 大穗型水稻穗部性狀的QTL定位[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),47(9):1445-1449. [Wang Y P,Duan L C,Long Q Z,Xu L D,Wu Z F,Wan J L,Shi Q H,Pan X H,Wu Z M. 2016. QTL analysis of panicle traits in large panicle rice[J]. Journal of Southern Agriculture,47(9):1445-1449.]

    徐建軍,梁國(guó)華. 2011. 水稻染色體片段代換系群體的構(gòu)建及應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),39(4):1935-1938. [Xu J J,Liang G H. 2011. Research progress of construction and application of rice(Oryza sativa L.) chromosome segment substitution lines[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences,39(4):1935-1938.]

    張向陽(yáng),張紅宇,徐培洲,陳曉瓊,田永航,王志,黃廷友,吳先軍. 2014. 重穗型水稻穗部性狀及劍葉寬的QTL定位[J]. 雜交水稻,29(6):56-61. [Zhang X Y,Zhang H Y,Xu P Z,Chen X Q,Tian Y H,Wang Z,Huang T Y,Wu X J. 2014. QTL mapping of flag leaf width and panicle traits of heavy-panicle rice[J]. Hybrid Rice,29(6):56-61.]

    鄭麗媛. 2017. 水稻落粒染色體片段代換系Z481的鑒定及SH6(t)定位[D]. 重慶:西南大學(xué). [Zheng L Y. 2017. Identification of rice chromosome segment substitution line Z481 with seed shattering and fine mapping of the SH6(t)[D]. Chongqing:Southwest University.]

    宗玉龍. 2015. 水稻易落粒突變體的鑒定與基因定位[D]. 南京:南京農(nóng)業(yè)大學(xué). [Zong Y L. 2015. Evaluation and gene mapping of a grain shatting mtuttant in rice(Oryza sativa L.)[D]. Nanjing:Nanjing Agricultural University.]

    Brondani C,Rangel P,Brondani R,F(xiàn)erreira M. 2002. QTL mapping and introgression of yield-related traits from Oryza glumaepatula to cultivated rice(Oryza sativa) using microsatellite markers[J]. Theoretical and Applied Gene-tics,104(6-7):1192-1203.

    Doebley J F,Gaut B S,Smith B D. 2006. The molecular genetics of crop domestication[J]. Cell,127(7):1309-1321.

    Furuta T,Uehara K,Angeles-Shim R B,Shim J,Ashikari M,Takashi T. 2014. Development and evaluation of chromosome segment substitution lines(CSSLs) carrying chromosome segments derived from Oryza rufipogon in the genetic background of Oryza sativa L[J]. Breeding Scien-ce,63(5):468-475.

    Huang X H,Kurata N,Wei X H,Wang Z X,Wang A H,Zhao Q,Zhao Y,Liu K Y,Lu H Y,Li W J,Guo Y L,Lu Y Q,Zhou C C,F(xiàn)an D L,Weng Q J,Zhu C R,Huang T,Zhang L,Wang Y C,F(xiàn)eng L,F(xiàn)uruumi H,Kubo T,Miyabayashi T,Yuan X P,Xu Q,Dong G J,Zhan Q L,Li C Y,F(xiàn)ujiyama A,Toyoda A,Lu T T,F(xiàn)eng Q,Qian Q,Li J Y,Han B. 2012. A map of rice genome variation reveals the origin of cultivated rice[J]. Nature,490(7421):497-501.

    Kechin A,Boyarskikh U,Kel A,F(xiàn)ilipenko M. 2017. CutPri-mers:A new tool for accurate cutting of primers from reads of targeted next generation sequencing[J]. Journal of Computational Biology,24(11):1138-1143.

    Li C B,Zhou A L,Sang T. 2006. Rice domestication by reducing shattering[J]. Science,311(5769):1936-1939.

    Lin Z W,Griffith M E,Li X R,Zhu Z F,Tan L B,F(xiàn)u Y C,Zhang W X,Wang X K,Xie D X,Sun C Q. 2007. Origin of seed shattering in rice(Oryza sativa L.)[J]. Planta,226(1):11-20.

    McKenna A,Hanna M,Banks E,Sivachenko A,Cibulskis K,Kernytsky A,Garimella K,Altshuler D,Gabriel S,Daly M,DePristo M A. 2010. The genome analysis toolkit:A mapreduce framework for analyzing next-generation DNA sequencing data[J]. Genome Research,20(9):1297-1303.

    Stein J C,Yu Y,Copetti D,Zwickl D J,Zhang L,Zhang C J,Chougule K,Gao D Y,Iwata A,Goicoechea J L,Wei S,Wang J,Liao Y,Wang M H,Jacquemin J,Becker C,Kudrna D,Zhang J W,Londono C E M,Song X,Lee S,Sanchez P,Zuccolo A,Ammiraju J S S,Talag J,Dano-witz A,Rivera L F,Gschwend A R,Noutsos C,Wu C C,Kao S M,Zeng J W,Wei F J,Zhao Q,F(xiàn)eng Q,Baidouri M E l,Carpentier M C,Lasserre E,Cooke R,da Rosa Farias D,da Maia L C,Dos Santos R S,Nyberg K G,McNally K L,Mauleon R,Alexandrov N,Schmutz J,F(xiàn)lowers D,F(xiàn)an C,Weigel D,Jena K K,Wicker T,Chen M S,Han B,Henry R,Hsing Y I C,Kurata N,de Oliveira A C,Panaud O,Jackson S A,Machado C A,Sanderson M J,Long M Y,Ware D,Wing R A. 2018. Genomes of 13 domesticated and wild rice relatives highlight genetic conservation,turnover and innovation across the genus Oryza[J]. Nature Genetics,50(2):285-296.

    T?rjék O,Meyer R C,Zehnsdorf M,Teltow M,Strompen G,Witucka-Wall H,Blacha A,Altmann T. 2008. Construction and analysis of 2 reciprocal arabidopsis introgression line populations[J]. The Journal of Heredity,99(4):396-406.

    van Berloo R. 2008. GGT 2.0:Versatile software for visualization and analysis of genetic data[J]. The Journal of Heredity,99(2):232-236.

    Wu W G,Liu X Y,Wang M H,Meyer R S,Luo X J,Ndjion-djop M N,Tan L B,Zhang J W,Wu J Z,Cai H W,Sun C Q,Wang X K,Wing R A,Zhu Z F. 2017. A single-nucleo-tide polymorphism causes smaller grain size and loss of seed shattering during African rice domestication[J]. Nature Plants,3:17064. doi:/10.1038/nplants.2017.64.

    Wu X R,Tang D,Li M,Wang K J,Cheng Z K. 2013. Loose plant architecture1,an indeterminate domain protein involved in shoot gravitropism,regulates plant architecture in rice[J]. Plant Physiology,161(1):317-329.

    Wu Y B,Li G,Zhu Y J,Cheng Y C,Yang J Y,Chen H Z,Song X J,Ying J Z. 2020. Genome-wide identification of QTLs for grain protein content based on genotyping-by-resequencing and verification of qGPC1-1 in rice[J]. International Journal of Molecular Sciences,21(2):408. doi:10.3390/ijms21020408.

    Xiong L Z,Liu K D,Dai X K,Xu C G,Zhang Q F. 1999. Identification of genetic factors controlling domestication-related traits of rice using an F2 population of a cross between Oryza sativa and O. rufipogon[J]. Theoretical and Applied Genetics,98(2):243-251.

    Yan H X,Ma L,Wang Z,Lin Z M,Su J,Lu B R. 2015. Multiple tissue-specific expression of rice seed-shattering gene SH4 regulated by its promoter pSH4[J]. Rice,8:12. doi:10.1186/s12284-015-0047-4.

    Yoon J M,Cho L H,Kim S L,Choi H,Koh H J,An G. 2015. The BEL1-type homeobox gene SH5 induces seed shatte-ring by enhancing abscission-zone development and inhi-biting lignin biosynthesis[J]. The Plant Journal,79(5):717-728.

    Yu B S,Lin Z W,Li H X,Li X J,Li J Y,Wang Y H,Zhang X,Zhu Z F,Zhai W X,Wang X K,Xie D X,Sun C Q. 2008. TAC1,a major quantitative trait locus controlling tiller angle in rice[J]. The Plant Journal,52(5):891-898.

    Zhang L B,Zhu Q H,Wu Z Q,Ross I J,Gaut B S,Ge S,Sang T.2009. Selection on grain shattering genes and rates of rice domestication[J]. The New Phytologist,184(3):708-720.

    Zhao L,Tan L B,Zhu Z F,Xiao L T,Xie D X,Sun C Q. 2015. PAY1 improves plant architecture and enhances grain yield in rice[J]. The Plant Journal,83(3):528-536.

    Zhao H W,Sun L L,Xiong T Y,Wang Z Q,Liao Y,Zou T,Zheng M M,Zhang Z,Pan X P,He N,Zhang G Q,Zhu H T,Liu Z Q,He P,F(xiàn)u X L. 2019. Genetic characterization of the chromosome single-segment substitution lines of O. glumaepatula and O. barthii and identification of QTLs for yield-related traits[J]. Molecular Breeding,39:51. doi:10.1007/s11032-019-0960-0.

    Zhao S S,Wang C H,Ma J,Wang S,Tian P,Wang J L,Cheng Z J,Zhang X,Guo X P,Lei C L. 2016. Map-based cloning and functional analysis of the chromosome gene C in rice(Oryza sativa L.)[J]. Journal of Plant Bio-logy,59(5):496-505.

    Zhou Y,Lu D F,Li C Y,Luo J H,Zhu B F,Zhu J J,Shangguan Y Y,Wang Z X,Sang T,Zhou B,Han B. 2012. Genetic control of seed shattering in rice by the APETALA2 transcription factor shattering abortion 1[J]. The Plant Cell,24(3):1034-1048.

    (責(zé)任編輯 蘭宗寶)

    猜你喜歡
    廣西
    廣西貴港
    夢(mèng)圓廣西
    黃河之聲(2022年5期)2022-06-21 07:57:38
    壯美廣西
    黃河之聲(2022年4期)2022-06-21 06:54:48
    《廣西戲曲》
    海外星云(2021年9期)2021-10-14 07:25:50
    毛主席來(lái)到我廣西
    歌海(2018年5期)2018-06-11 07:02:15
    廣西寧明
    廣西廣西
    歌海(2017年1期)2017-05-30 13:07:40
    廣西尼的呀
    歌海(2016年6期)2017-01-10 01:35:52
    廣西:“免補(bǔ)”舉措 造福婦幼健康
    廣西出土的商代銅卣
    大眾考古(2014年3期)2014-06-26 08:30:46
    免费大片黄手机在线观看| 久久精品久久久久久噜噜老黄| av国产免费在线观看| 九色成人免费人妻av| 国模一区二区三区四区视频| 99热这里只有精品一区| 日韩国内少妇激情av| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 97超视频在线观看视频| 性色avwww在线观看| 久久久久久久国产电影| 久久毛片免费看一区二区三区| 亚洲av日韩在线播放| 日本vs欧美在线观看视频 | 一区二区三区四区激情视频| 中文字幕亚洲精品专区| 成人免费观看视频高清| av免费观看日本| 麻豆国产97在线/欧美| 高清欧美精品videossex| 免费看日本二区| 久久av网站| 男人舔奶头视频| 黑人猛操日本美女一级片| 久久久久网色| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 久久精品人妻少妇| 2018国产大陆天天弄谢| 黄色视频在线播放观看不卡| 免费看不卡的av| 午夜福利高清视频| 搡老乐熟女国产| 欧美精品亚洲一区二区| 午夜免费观看性视频| 欧美xxⅹ黑人| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 久久国内精品自在自线图片| 涩涩av久久男人的天堂| 国产免费福利视频在线观看| 色哟哟·www| 女性被躁到高潮视频| 免费黄频网站在线观看国产| 身体一侧抽搐| 久久久精品94久久精品| 国产69精品久久久久777片| 成人无遮挡网站| 国产美女午夜福利| 91精品一卡2卡3卡4卡| 日韩一本色道免费dvd| 多毛熟女@视频| 男人爽女人下面视频在线观看| 国产高清三级在线| 日韩欧美 国产精品| xxx大片免费视频| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 国产69精品久久久久777片| 国产伦在线观看视频一区| 蜜臀久久99精品久久宅男| 国产精品爽爽va在线观看网站| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产伦在线观看视频一区| 中文欧美无线码| 丰满迷人的少妇在线观看| 韩国av在线不卡| 欧美高清成人免费视频www| 亚洲精品亚洲一区二区| 久久久久人妻精品一区果冻| 韩国av在线不卡| 欧美日本视频| 99热国产这里只有精品6| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 中文字幕免费在线视频6| 岛国毛片在线播放| 又大又黄又爽视频免费| 精品久久久精品久久久| 国产淫语在线视频| 一区二区三区精品91| 在线观看国产h片| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲国产日韩一区二区| 色婷婷av一区二区三区视频| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 在线观看一区二区三区激情| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产精品欧美亚洲77777| 午夜激情福利司机影院| 黄色一级大片看看| 99热网站在线观看| 麻豆成人午夜福利视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 免费少妇av软件| 三级国产精品欧美在线观看| 国产综合精华液| 男人狂女人下面高潮的视频| 日本免费在线观看一区| a级毛片免费高清观看在线播放| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国产在线男女| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲欧美清纯卡通| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 交换朋友夫妻互换小说| 午夜免费鲁丝| 亚洲美女搞黄在线观看| 在线看a的网站| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 成年人午夜在线观看视频| 99久久精品一区二区三区| 男人舔奶头视频| 午夜免费鲁丝| 成人美女网站在线观看视频| 欧美日韩在线观看h| 天堂8中文在线网| 亚洲精品第二区| 亚洲国产欧美人成| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲第一区二区三区不卡| 一区在线观看完整版| 一区二区av电影网| 91久久精品国产一区二区三区| 一本久久精品| 欧美3d第一页| 欧美变态另类bdsm刘玥| 国产av码专区亚洲av| 亚洲av二区三区四区| 国产免费一级a男人的天堂| 欧美日韩精品成人综合77777| 大码成人一级视频| 免费观看无遮挡的男女| 少妇熟女欧美另类| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲中文av在线| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 一级片'在线观看视频| 国产免费视频播放在线视频| 水蜜桃什么品种好| 国产成人精品一,二区| 亚洲经典国产精华液单| 国产 一区精品| 亚洲国产精品一区三区| 国产精品久久久久久精品古装| 91精品一卡2卡3卡4卡| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产av国产精品国产| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 日韩av在线免费看完整版不卡| 免费大片18禁| av在线老鸭窝| 黄片无遮挡物在线观看| 大香蕉97超碰在线| 精品少妇黑人巨大在线播放| 亚洲自偷自拍三级| 一级黄片播放器| 亚洲最大成人中文| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 国产欧美亚洲国产| 一本色道久久久久久精品综合| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 亚洲国产精品专区欧美| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 亚洲美女视频黄频| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 能在线免费看毛片的网站| 国产乱人偷精品视频| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 亚洲怡红院男人天堂| 校园人妻丝袜中文字幕| 简卡轻食公司| 亚洲av在线观看美女高潮| 亚洲国产日韩一区二区| 亚洲真实伦在线观看| 老熟女久久久| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 身体一侧抽搐| 97超视频在线观看视频| 能在线免费看毛片的网站| 免费看日本二区| 色5月婷婷丁香| 亚洲av国产av综合av卡| 成人无遮挡网站| 国产av一区二区精品久久 | 国产成人a∨麻豆精品| 精品一区二区三卡| 日韩精品有码人妻一区| 下体分泌物呈黄色| 国产精品一区二区在线观看99| 精品久久国产蜜桃| 国产在线一区二区三区精| 在线观看av片永久免费下载| 精品久久久久久久末码| 久久久欧美国产精品| 欧美bdsm另类| 热99国产精品久久久久久7| 亚洲精品一二三| 日本wwww免费看| 下体分泌物呈黄色| 国产熟女欧美一区二区| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产一区有黄有色的免费视频| 久久99蜜桃精品久久| 能在线免费看毛片的网站| 国产精品不卡视频一区二区| 日韩中文字幕视频在线看片 | 精品久久久久久电影网| 啦啦啦啦在线视频资源| 两个人的视频大全免费| 91精品国产国语对白视频| 亚洲丝袜综合中文字幕| 最近最新中文字幕免费大全7| 少妇人妻精品综合一区二区| 九九在线视频观看精品| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 成人综合一区亚洲| 亚洲av男天堂| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 国产精品一区二区性色av| 日本av手机在线免费观看| av在线老鸭窝| 亚洲美女视频黄频| 一级av片app| 午夜福利网站1000一区二区三区| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 99久久精品一区二区三区| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 99热全是精品| av.在线天堂| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 日本欧美视频一区| 日本wwww免费看| 麻豆乱淫一区二区| 男的添女的下面高潮视频| 嫩草影院入口| 久久久久国产网址| 成人特级av手机在线观看| 久久久久久久国产电影| 国产精品福利在线免费观看| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 久久久精品94久久精品| 中文字幕久久专区| 日本wwww免费看| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 亚州av有码| 国产精品蜜桃在线观看| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲四区av| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 久久人人爽人人爽人人片va| av在线app专区| 国产精品成人在线| 久久久久精品性色| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产精品国产av在线观看| 亚洲伊人久久精品综合| 免费黄网站久久成人精品| 日日啪夜夜撸| a 毛片基地| 欧美日韩综合久久久久久| 18禁在线播放成人免费| 成年av动漫网址| 日韩在线高清观看一区二区三区| 极品教师在线视频| 国产探花极品一区二区| 欧美xxⅹ黑人| a级毛片免费高清观看在线播放| 欧美极品一区二区三区四区| 人妻夜夜爽99麻豆av| 视频中文字幕在线观看| 成人美女网站在线观看视频| 日本免费在线观看一区| 亚洲精品乱久久久久久| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 久久久久久人妻| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 777米奇影视久久| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 欧美人与善性xxx| av免费观看日本| 亚洲欧美清纯卡通| h视频一区二区三区| 国产极品天堂在线| 一区二区三区四区激情视频| 在线观看人妻少妇| 精品国产露脸久久av麻豆| 国产男女内射视频| 麻豆乱淫一区二区| 三级经典国产精品| 九色成人免费人妻av| 婷婷色av中文字幕| 在线天堂最新版资源| 有码 亚洲区| 久久99热6这里只有精品| 色网站视频免费| 色哟哟·www| 久热久热在线精品观看| 久久国产精品大桥未久av | 国产精品一区二区在线不卡| 国产精品蜜桃在线观看| 久久人妻熟女aⅴ| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 一本一本综合久久| 少妇的逼水好多| 少妇人妻一区二区三区视频| av卡一久久| 中文字幕久久专区| 国产精品无大码| 插阴视频在线观看视频| 联通29元200g的流量卡| 日日啪夜夜撸| 六月丁香七月| 日韩一区二区视频免费看| 欧美日韩视频精品一区| 大片免费播放器 马上看| 精品一区二区三卡| 国产男人的电影天堂91| 国产免费又黄又爽又色| 日韩三级伦理在线观看| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产爽快片一区二区三区| 亚洲欧洲日产国产| 国产大屁股一区二区在线视频| 亚洲美女视频黄频| 伊人久久国产一区二区| 国产精品av视频在线免费观看| 免费看av在线观看网站| 亚洲天堂av无毛| 色视频www国产| 国产黄色免费在线视频| 狂野欧美激情性bbbbbb| 精品人妻偷拍中文字幕| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 一区二区三区乱码不卡18| 看十八女毛片水多多多| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产成人freesex在线| 青青草视频在线视频观看| 亚洲精品一二三| 亚洲精品国产成人久久av| 亚洲丝袜综合中文字幕| 成人特级av手机在线观看| 在线观看免费视频网站a站| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 亚洲成色77777| 夫妻午夜视频| 九九爱精品视频在线观看| 在线观看av片永久免费下载| 欧美zozozo另类| 极品少妇高潮喷水抽搐| 男女边摸边吃奶| 国产黄片视频在线免费观看| 直男gayav资源| 日日啪夜夜撸| 一级毛片我不卡| 亚洲精品一二三| 十分钟在线观看高清视频www | 成人无遮挡网站| 人妻一区二区av| 五月玫瑰六月丁香| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 欧美三级亚洲精品| 日本av手机在线免费观看| 欧美97在线视频| 免费观看a级毛片全部| 国产淫片久久久久久久久| 国产在线视频一区二区| 一级毛片 在线播放| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 色5月婷婷丁香| 午夜激情久久久久久久| 少妇 在线观看| 亚洲国产高清在线一区二区三| 美女内射精品一级片tv| 成人免费观看视频高清| 插阴视频在线观看视频| 国产精品一区二区性色av| 国产淫片久久久久久久久| 边亲边吃奶的免费视频| 国产黄色视频一区二区在线观看| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 少妇 在线观看| 午夜福利在线在线| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产一区二区在线观看日韩| 伊人久久国产一区二区| 一本色道久久久久久精品综合| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲国产欧美在线一区| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲精品国产成人久久av| 熟女av电影| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 99国产精品免费福利视频| 色视频在线一区二区三区| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产av国产精品国产| 久久久久久久久久久免费av| 成人无遮挡网站| 欧美三级亚洲精品| 最近2019中文字幕mv第一页| 欧美精品一区二区免费开放| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 2022亚洲国产成人精品| 久久久色成人| 国产爱豆传媒在线观看| 日韩 亚洲 欧美在线| av福利片在线观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 老司机影院毛片| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲第一区二区三区不卡| 久久久久精品性色| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 老司机影院成人| 国产精品一区二区在线观看99| 国产高清有码在线观看视频| 最近中文字幕2019免费版| 日韩免费高清中文字幕av| 黄色日韩在线| 18禁在线播放成人免费| 国产又色又爽无遮挡免| 黑人高潮一二区| 男女下面进入的视频免费午夜| 精品久久久久久电影网| 我要看黄色一级片免费的| 91精品一卡2卡3卡4卡| 久久99热这里只有精品18| 国产美女午夜福利| 黄色日韩在线| 欧美一区二区亚洲| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 美女视频免费永久观看网站| 这个男人来自地球电影免费观看 | 免费少妇av软件| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产v大片淫在线免费观看| 蜜臀久久99精品久久宅男| 国产人妻一区二区三区在| 全区人妻精品视频| 一二三四中文在线观看免费高清| 国产伦理片在线播放av一区| 有码 亚洲区| 国产色爽女视频免费观看| 欧美bdsm另类| av播播在线观看一区| 中国国产av一级| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 最近手机中文字幕大全| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 日本av手机在线免费观看| 日韩在线高清观看一区二区三区| 国产亚洲欧美精品永久| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 搡女人真爽免费视频火全软件| 国产v大片淫在线免费观看| 街头女战士在线观看网站| 国产人妻一区二区三区在| 男女免费视频国产| 插阴视频在线观看视频| 三级经典国产精品| 一区二区三区四区激情视频| 全区人妻精品视频| 老司机影院成人| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 99热网站在线观看| 另类亚洲欧美激情| 久久6这里有精品| 亚洲电影在线观看av| 熟女人妻精品中文字幕| 日韩中字成人| 国产高清三级在线| 色哟哟·www| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产亚洲欧美精品永久| 欧美另类一区| 欧美极品一区二区三区四区| av播播在线观看一区| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 日韩中字成人| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 一个人看的www免费观看视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产精品国产av在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 久久久成人免费电影| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 看非洲黑人一级黄片| 直男gayav资源| 色吧在线观看| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 少妇人妻 视频| 中文字幕免费在线视频6| 最新中文字幕久久久久| 嘟嘟电影网在线观看| 国产真实伦视频高清在线观看| 韩国av在线不卡| 日产精品乱码卡一卡2卡三| a级毛色黄片| av播播在线观看一区| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 日本av免费视频播放| 婷婷色av中文字幕| 一区在线观看完整版| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 日韩伦理黄色片| 中文字幕免费在线视频6| 在线观看一区二区三区| 精品亚洲成a人片在线观看 | 成人免费观看视频高清| 简卡轻食公司| 久久久久精品久久久久真实原创| h视频一区二区三区| 免费观看无遮挡的男女| 午夜福利高清视频| 丝瓜视频免费看黄片| 欧美另类一区| 老司机影院毛片| 99热6这里只有精品| 日韩制服骚丝袜av| 18+在线观看网站| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产免费一级a男人的天堂| 国产精品蜜桃在线观看| 精品久久久久久久久av| 伦理电影大哥的女人| 国产 精品1| 亚洲欧洲国产日韩| 日韩欧美一区视频在线观看 | 日日啪夜夜爽| 丰满迷人的少妇在线观看| 九九在线视频观看精品| 美女高潮的动态| 日韩三级伦理在线观看| 国产成人freesex在线| 成年人午夜在线观看视频| 看非洲黑人一级黄片| 99热这里只有是精品50| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 乱码一卡2卡4卡精品| 少妇人妻久久综合中文| 久久久久久久久久久丰满| www.色视频.com| 国产大屁股一区二区在线视频| 国产成人精品婷婷| 少妇的逼水好多| 精品少妇久久久久久888优播| 老司机影院毛片| 最近手机中文字幕大全| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 简卡轻食公司| 成人黄色视频免费在线看| av在线app专区| 日韩av免费高清视频| 国产成人一区二区在线| 国产精品久久久久久av不卡| 免费观看av网站的网址| 在线免费十八禁| 久久久久久伊人网av| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国产精品福利在线免费观看| 欧美 日韩 精品 国产| 国产精品av视频在线免费观看| 老熟女久久久| 亚洲自偷自拍三级| 午夜免费观看性视频| 一级毛片久久久久久久久女| 国产成人精品福利久久| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 久久人妻熟女aⅴ| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产精品福利在线免费观看| 久久久久久久国产电影| 最近最新中文字幕免费大全7| 秋霞伦理黄片| 五月玫瑰六月丁香| 国产成人午夜福利电影在线观看| 黄色怎么调成土黄色| 国产高清不卡午夜福利| 国产亚洲精品久久久com| 插逼视频在线观看| 五月天丁香电影| 免费人妻精品一区二区三区视频| 成人二区视频| 日韩制服骚丝袜av| 在线观看免费视频网站a站| 久久综合国产亚洲精品| 麻豆成人av视频| 简卡轻食公司| 七月丁香在线播放| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 色婷婷av一区二区三区视频| 亚洲在久久综合| 狂野欧美激情性bbbbbb| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 久久久久国产网址| 久久精品国产亚洲网站| 国产亚洲91精品色在线| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 色视频www国产| 色哟哟·www| 亚洲国产高清在线一区二区三| 中文字幕亚洲精品专区| 国产精品一区二区在线不卡| 高清黄色对白视频在线免费看 | 熟女av电影| 亚洲国产精品成人久久小说|