黑蝶貝苗種中間培育技術(shù)的初步研究

陳明強，李有寧，郭華陽，嚴俊賢，吳開暢，張殿昌，王 雨

( 中國水產(chǎn)科學研究院 南海水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點實驗室，廣東 廣州 510300 )

黑蝶貝苗種中間培育技術(shù)的初步研究

陳明強，李有寧，郭華陽，嚴俊賢，吳開暢，張殿昌，王 雨

( 中國水產(chǎn)科學研究院 南海水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點實驗室，廣東 廣州 510300 )

以黑蝶貝野生群體人工繁育苗種為研究材料，探索了大、小兩種規(guī)格和不同吊養(yǎng)深度對黑蝶貝苗海區(qū)中間培育的影響。將殼長、體質(zhì)量分別為(4.12±0.019) mm、(0.07±0.008) g，(2.02±0.012) mm、(0.03±0.005) g兩種規(guī)格黑蝶貝吊養(yǎng)于2 m、4 m、5 m區(qū)，每組黑蝶貝500枚，養(yǎng)殖水溫23.09～29.77 ℃，養(yǎng)殖海區(qū)水深8～10 m。每隔30 d隨機抽取50枚貝苗測量殼高、殼長、殼寬、體質(zhì)量。經(jīng)180 d中間培育，殼長(4.12±0.019) mm的黑蝶貝生長速度明顯大于殼長(2.02±0.012) mm的黑蝶貝，表明殼長(4.12±0.019) mm的黑蝶貝出池移入海區(qū)養(yǎng)殖較理想。同一規(guī)格貝苗在2 m、4 m、5 m養(yǎng)殖水層的成活率差異不顯著(P>0.05)，而3個不同養(yǎng)殖水層中不同規(guī)格貝苗養(yǎng)殖成活率差異顯著(P<0.05)。該研究結(jié)果為進一步開展黑蝶貝苗種人工繁育提供了重要參考。

黑蝶貝；苗種；中間培育；成活率

黑蝶貝(Pinctadamargaritifera)又名珠母貝，它與合浦珠母貝(P.fucata)、大珠母貝(P.maxima)同為一屬，但其所產(chǎn)珍珠的色彩為黑亮，是唯一能生產(chǎn)黑珍珠的貝種[1]。黑蝶貝主要棲息在熱帶、亞熱帶海區(qū)，在紅海、印度洋、南太平洋，夏威夷群島、日本以及東南亞等海域均有分布；在我國主要分布于海南省、廣東的鹵洲島、廣西的潿洲島、臺灣的澎湖群島等沿海一帶[2-3]。目前在南太平洋一帶通常是采集野生黑蝶貝苗種進行養(yǎng)殖與育珠。20世紀80年代，中國水產(chǎn)科學研究院南海水產(chǎn)研究所開展了黑蝶貝人工苗繁育和養(yǎng)殖的研究，8個月，黑蝶貝平均殼長為32 mm，11個月，殼長可達53～87 mm[1]。鄧陳茂等[4]開展了內(nèi)灣性、開放性、半開放性海區(qū)養(yǎng)殖人工繁育的黑蝶貝苗種試驗，養(yǎng)殖11個月，黑蝶貝殼高分別為69.8 mm、64.5 mm、51.4 mm。梁飛龍等[5]開展了黑蝶貝人工苗網(wǎng)箱式中間培育試驗，比較了內(nèi)灣性、開放性、半開放性海區(qū)的傳統(tǒng)式和網(wǎng)箱式培育等不同養(yǎng)殖方式貝苗生長情況。Ky等[6]研究了季節(jié)變化和小片貝對黑蝶貝育珠的留珠率和死亡率的影響；Caroline等[7]證明了溫度和餌料投喂量對黑蝶貝的貝殼生長產(chǎn)生的影響，在餌料較充足且一定范圍內(nèi)溫度較高的情況下，貝殼的生長較快；Mehdi等[8]研究了不同化學物質(zhì)對黑蝶貝貝苗附著的促進作用；嚴俊賢等[9]研究了野生黑蝶貝表型性狀對體質(zhì)量的影響，體質(zhì)量、殼長、殼高、殼寬均與黑蝶貝的生長速度密切相關(guān)；Yukihira等[10]研究了不同溫度對黑蝶貝的能量收支影響，認為黑蝶貝的最適生長溫度為23～28 ℃。

與大珠母貝相似，近幾年黑蝶貝人工苗種移入海區(qū)養(yǎng)殖后成活率較低，死亡較嚴重，致死原因除了發(fā)現(xiàn)外套膜萎縮病和黑心肝病(亦稱多毛蟲寄生病繼發(fā)性膿瘍)外[11-14]，其他死因尚未查明。由于黑蝶貝人工苗種養(yǎng)殖成活率低，難以實現(xiàn)黑蝶貝大規(guī)模養(yǎng)殖和珍珠培育，嚴重制約了我國黑珍珠養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。因此，開展黑蝶貝苗種中間培育試驗，查明影響人工養(yǎng)殖成活率的因素，對實現(xiàn)黑蝶貝大規(guī)模養(yǎng)殖和珍珠培育具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗于2010年7月至2011年1月進行，野生黑蝶貝親貝采自海南省三亞市亞龍灣海區(qū)，苗種繁育在中國水產(chǎn)科學研究院南海水產(chǎn)研究所熱帶水產(chǎn)研究開發(fā)中心試驗基地，室內(nèi)培育兩種規(guī)格苗種的殼長、殼高、殼寬、體質(zhì)量分別為(4.12 ± 0.019) mm、(3.98 ± 0.023) mm、(0.61 ± 0.015) mm、(0.07 ± 0.008) g和(2.02 ± 0.012) mm、(1.92 ± 0.017) mm、(0.35 ± 0.008) mm、(0.03 ± 0.005) g。

1.2 試驗方法

中間培育以筏架吊養(yǎng)方式進行，試驗于海南省陵水縣新村港內(nèi)的南海水產(chǎn)研究所陵水試驗基地?；\具為直徑40 cm的雙圈圓籠，吊養(yǎng)行距80 cm。試驗設(shè)置分為大規(guī)格[殼長(4.12 ± 0.019) mm]貝苗和小規(guī)格[殼長(2.02 ± 0.012) mm]貝苗試驗組，每組設(shè)2 m、4 m、5 m 3個不同吊養(yǎng)深度組，每組放養(yǎng)500枚，并設(shè)置3個平行。養(yǎng)殖期間，每30 d根據(jù)苗種的生長情況和附著生物的附著程度進行養(yǎng)殖籠具的清洗與更換、清除附著生物與敵害生物。養(yǎng)殖期間保持養(yǎng)殖管理方法一致。

養(yǎng)殖海區(qū)水深8～10 m，養(yǎng)殖期間海水水溫為23.09～29.77 ℃，海水相對密度為1.019～1.022。

貝苗移入海區(qū)吊養(yǎng)后，每隔30 d從各組隨機抽取50枚貝苗進行測量。測量前清除貝殼上的附著生物與污垢，然后用毛巾吸干表面水分。采用游標卡尺(精確度0.01 mm)進行殼長、殼高、殼寬的測量，用電子天平(精確度0.01 g)稱量體質(zhì)量。同時，統(tǒng)計各組成活率。

日生長量按下式計算：

D=(y2-y1)/(t2-t1)

式中，D為日生長量；y1和y2分別為某一生長階段起始測量值和結(jié)束測量值(mm或g)；t1與t2則為某一生長階段的起始時間和結(jié)束時間(d)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理，Excel作圖，利用t檢驗進行差異顯著性檢驗。

2 結(jié)果與分析

2.1 中間培育期間水溫和相對密度變化

中間培育期間，通過每天測量海區(qū)水溫和海水相對密度，以30 d的平均值作圖(圖1)。海水水溫呈緩慢下降趨勢(23.09～29.77 ℃)。而海水相對密度變化相對較大(圖1)，原因在于因臺風影響，降雨較多，導致海水相對密度有所下降。

2.2 不同規(guī)格貝苗中間培育的日增長量比較

隨著養(yǎng)殖日齡的增加，兩種規(guī)格貝苗的殼長、殼高以及殼寬3個形態(tài)性狀的日增長量總體表現(xiàn)出下降趨勢(圖2)。其中，30～60 d，兩種規(guī)格貝苗殼高的日增長量有所上升，而殼長、殼寬的日增長量呈下降趨勢；60～150 d，殼長、殼高以及殼寬的日增長量均呈下降趨勢；150～180 d，殼長、殼高的日增長量均有所上升，殼寬的日增長量仍在下降。而體質(zhì)量的日增長量在150 d養(yǎng)殖期間呈先升后降趨勢，在150 d以后，體質(zhì)量的日增長量又有所升高。在不同養(yǎng)殖期，兩種規(guī)格貝苗的日增長量亦存在一定差異。在整個養(yǎng)殖過程中，大規(guī)格貝苗的殼長、殼高、殼寬和體質(zhì)量的平均日增長量分別達到0.0707 mm/d、0.0657 mm/d、0.0186 mm/d和0.0081 g/d，小規(guī)格貝苗的殼長、殼高、殼寬和體質(zhì)量的平均日增長量分別為0.0685 mm/d、0.0617 mm/d、0.0148 mm/d和0.0049 g/d，由此可見大規(guī)格的貝苗移入海區(qū)養(yǎng)殖更為適宜。

圖1 試驗期間海區(qū)水溫和相對密度變化

圖2 黑蝶貝人工苗中間培育殼長、殼高、殼寬和體質(zhì)量日增長量

2.3 不同規(guī)格貝苗中間培育的成活率比較

在不同養(yǎng)殖日齡下，貝苗的養(yǎng)殖成活率均隨吊養(yǎng)深度的增大而上升(表1)。養(yǎng)殖30、90、120、150、180 d 的大規(guī)格苗種2 m吊養(yǎng)水層的成活率與4 m、5 m吊養(yǎng)水層的成活率差異顯著(P<0.05)，而4 m、5 m吊養(yǎng)水層間的成活率差異不顯著(P>0.05)。養(yǎng)殖60 d的大規(guī)格苗種2 m吊養(yǎng)水層成活率與4 m吊養(yǎng)水層間無顯著性差異(P>0.05)，而與5 m吊養(yǎng)水層的成活率間存在顯著性差異(P<0.05)。在120 d養(yǎng)殖的小規(guī)格苗2 m吊養(yǎng)水層的成活率與4 m、5 m吊養(yǎng)水層的成活率間存在顯著性差異(P<0.05)，而4 m、5 m吊養(yǎng)水層間的成活率差異不顯著(P>0.05)，而在養(yǎng)殖120 d以后，各吊養(yǎng)水層成活率間均差異不顯著(P>0.05)。由此可見，黑蝶貝苗種適合的養(yǎng)殖吊養(yǎng)水層深度依次為5 m>4 m>2 m。

隨著養(yǎng)殖時間的增長，兩種規(guī)格苗種的養(yǎng)殖成活率逐漸下降。養(yǎng)殖90 d，2種規(guī)格苗種養(yǎng)殖成活率均小于30%，而養(yǎng)殖180 d，兩種規(guī)格苗種養(yǎng)殖成活率均不足10%(表1)。不同吊養(yǎng)水層下大規(guī)格苗種的養(yǎng)殖成活率均大于小規(guī)格苗種。經(jīng)t檢驗，不同吊養(yǎng)水層下大規(guī)格苗種的養(yǎng)殖成活率與小規(guī)格苗種成活率間均存在顯著性差異(P<0.05)(表2)。由此可見，相對于小規(guī)格苗種，大規(guī)格苗種更適合轉(zhuǎn)移至海區(qū)養(yǎng)殖。

表1 兩種規(guī)格苗種在不同吊養(yǎng)水深下養(yǎng)殖成活率比較 %

注：上標字母相同表示無顯著性差異(P>0.05)，不同時表示存在顯著性差異(P<0.05).

表2 兩種規(guī)格苗種在不同日齡下不同吊養(yǎng)深度養(yǎng)殖成活率的t檢驗結(jié)果

3 討 論

3.1 海區(qū)環(huán)境對黑蝶貝貝苗生長的影響

海區(qū)養(yǎng)殖的黑蝶貝貝苗其生長受到海區(qū)環(huán)境理化因子的影響。本試驗中的貝苗養(yǎng)殖120～150 d，期間處于11—12月，此時氣溫下降明顯且降水增加，氣溫下降至25 ℃以下，海區(qū)環(huán)境因子變化較大，貝苗生長速度減慢；然而翌年1月，即養(yǎng)殖180 d，雖然水溫比上月更低，但海水相對密度穩(wěn)定，貝苗各生長性狀呈現(xiàn)加快上升的趨勢，說明黑蝶貝貝苗受到海水相對密度的影響較為明顯。海水相對密度變化的時候，貝類幼苗滲透壓也會發(fā)生改變，心跳速率減慢，濾食性能下降，對貝苗生長起抑制作用[15-16]。本試驗在海水相對密度低至1.020以下時，殼長(4.12±0.019) mm的黑蝶貝貝苗的日增長量與謝仁政等[17]的結(jié)果一致，約為0.05 mm/d。但溫度對貝苗的整體生長速率也產(chǎn)生了一定的影響，殼長、殼寬的日增長量與溫度的變化趨勢相同，均呈下降趨勢，這與Caroline等[7]的研究結(jié)果一致。

3.2 黑蝶貝人工育苗的病害防治

近年來，在海南省陵水縣新村港海域養(yǎng)殖黑蝶貝人工苗時出現(xiàn)死亡較為嚴重的現(xiàn)象。養(yǎng)殖貝苗生長至殼長≥ 20 mm時，開始出現(xiàn)大量死亡，當殼長≥30 mm時，再一次出現(xiàn)死亡高峰期，這與海區(qū)病害流行及附著生物繁殖量較快等均有關(guān)聯(lián)[11]。經(jīng)多年的研究發(fā)現(xiàn)，它與大珠母貝人工苗養(yǎng)殖死亡非常相似。在陵水縣新村港珍珠養(yǎng)殖場養(yǎng)殖馬氏珠母貝(P.martensi)多毛類寄生蟲病感染率高達76%以上[12]，患病馬氏珠母貝死亡率較高，而引起此病貝死亡的原因可能是貝類免疫系統(tǒng)受到破壞從而導致免疫能力低下、進而引發(fā)各種并發(fā)癥所致，并與其揮發(fā)性成分的代謝具有一定關(guān)聯(lián)[13]。本試驗中通過對死亡貝苗的觀察，發(fā)現(xiàn)外套膜萎縮病和黑心肝病是導致貝苗死亡的主要原因[12-14]。這一病害至今仍難以控制，從外海捕撈的黑蝶貝親貝移入港灣內(nèi),經(jīng)過1～3個月的養(yǎng)殖，亦會很快受感染甚至引起死亡。張國范等[14]報道的野生型群體對養(yǎng)殖環(huán)境變化的不適應性，如密度變化、營養(yǎng)條件、病原體的侵害和惡化的水環(huán)境等，而引起死亡及誘發(fā)其它個體死亡。同時，人類對海洋沿岸生態(tài)的破壞和海洋中有毒污染物的長期存留而造成的生物富集對海洋生物群落可造成致命的打擊，水質(zhì)污染、海洋環(huán)境的變化亦會對黑蝶貝的生存構(gòu)成威脅[15，18]。本試驗采集的野生黑蝶貝成貝與人工苗養(yǎng)殖期間出現(xiàn)大量死亡，可能與野生型群體對生存環(huán)境變化出現(xiàn)的不適應性有關(guān)。

良好的養(yǎng)殖管理對于黑蝶貝苗的生長和成活至關(guān)重要。首先，貝苗投放海區(qū)養(yǎng)殖時的規(guī)格對其后續(xù)生長具有較大的影響。在本試驗中，當海水相對密度出現(xiàn)變化時，殼長(2.02±0.012) mm的黑蝶貝貝苗的生長明顯減慢，而殼長(4.12±0.019) mm的黑蝶貝貝苗的生長影響相對較小，這與Southgate等[19-20]的結(jié)果一致。同樣，梁飛龍等[21]在大珠母貝的中間培育中，發(fā)現(xiàn)規(guī)格較大的貝苗投入到海區(qū)養(yǎng)殖后，其適應能力更強且成活率更高。因此，將貝苗培養(yǎng)至一定規(guī)格后再移入海區(qū)養(yǎng)殖，對黑蝶貝的生長存活更有利。其次，海水相對密度的穩(wěn)定性對于貝苗的快速成長有著重要影響，而深層海水的鹽度受到降雨的影響小，不易出現(xiàn)海水淡化現(xiàn)象，因此吊養(yǎng)在較深水層對黑蝶貝貝苗的生存更有利，這與鄧陳茂等[4,22]的研究結(jié)果相似。本試驗中，不同吊養(yǎng)水層下黑蝶貝貝苗成活率高低依次為5 m>4 m>2 m，表明較深水層有利于提高貝苗成活率。同樣，大珠母貝在一定深度范圍內(nèi)，吊養(yǎng)深度越深，其成活率越高[23]，這可能與接近其野外生存環(huán)境有關(guān)。因此，在貝類人工馴養(yǎng)的過程中，應先了解其生長環(huán)境，然后進行模擬，這樣可大大減少貝苗在環(huán)境改變后的不適應現(xiàn)象。

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IntermediateCultureofBlacklipPearlOysterPinctadamargaritiferaJuveniles

CHEN Mingqiang, LI Youning, GUO Huayang,YAN Junxian, WU Kaichang,ZHANG Dianchang, WANG Yu

( Key Lab of South China Sea Fishery Resources Exploitation & Utilization,Ministry of Agriculture, South China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Guangzhou 510300, China )

This study was conducted to investigate the effects of shell length of (4.12±0.019) mm and (2.02±0.012) mm, body weight of (0.07±0.008) g and (0.03±0.005) g, and rearing depth of 2 m, 4m and 5 m on the rearing performance of blacklip pear oysterPinctadamargaritiferaunder conditions of 500 ind per treatment at water temperature of 23.09—29.77 ℃ in a 8—10 depth coast during the intermediate 180 day culture period. The results showed that the large size fingerlings had significantly higher growth rate than the small-sized fingerlings did, indicating that (4.12±0.019) mm fingerling was more suitable for transferring from hatchery to sea-cages. There was no significant difference in survival in the fingerlings with same sizes cultured at the depth of 2 m, 4 m and 5 m (P>0.05), but the survival of fingerlings with different sizes was significantly different when cultured at different depth (P<0.05). The findings provide valuable information on the artificial breeding of blacklip pearl oyster.

Pinctadamargaritifera; breed seeding; intermediate culture; survival rate

10.16378/j.cnki.1003-1111.2016.03.008

S968.31

A

1003-1111(2016)03-0239-05

2015-10-08；

2015-11-27.

海南省重點科技計劃項目(06123)；中央級公益性科研院所基本科研業(yè)務費專項資金資助項目(2008YD04，2013TS09)；三亞市農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新項目(2014NK09).

陳明強(1968—)，男，助理研究員；研究方向：海水珍珠養(yǎng)殖技術(shù).E-mail:chenmingqiang68@163.com.通訊作者：李有寧(1958—)，男，研究員；研究方向：海水珍珠養(yǎng)殖技術(shù).E-mail:liyongning@tom.com.