人工海水培育羅氏沼蝦幼體試驗(yàn)

黃光華，馬華威,2，楊彥豪，黃立斌，馮鵬霏，呂 敏，盧小花，童桂香

( 1. 廣西水產(chǎn)科學(xué)研究院，廣西 南寧 530021； 2. 防城港市水產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心，廣西 防城港 538000 )

人工海水培育羅氏沼蝦幼體試驗(yàn)

黃光華1，馬華威1,2，楊彥豪1，黃立斌1，馮鵬霏1，呂 敏1，盧小花1，童桂香1

( 1. 廣西水產(chǎn)科學(xué)研究院，廣西 南寧 530021； 2. 防城港市水產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心，廣西 防城港 538000 )

按海鹽∶MgSO4∶CaCl2∶KCl∶H3B3O3∶KBr∶EDTA∶生石灰為2000∶600∶72∶36∶24∶4∶1∶2的比例配制成人工海水，研究在該人工海水中培育羅氏沼蝦幼體的可行性。結(jié)果表明，人工海水中的Mg2+、K+、Ca2+的比值為3∶1∶1，與天然海水接近，且水質(zhì)無毒性作用；人工海水培育80萬尾羅氏沼蝦蝦苗，獲得68萬尾幼體，成活率約為85%，蛻皮率為16.82%，特定生長率為25.34%/d，高于天然海水的培育水平。結(jié)果表明，自制人工海水可用于羅氏沼蝦幼體培育。

人工海水；羅氏沼蝦幼體；溶解氧；特定生長率

羅氏沼蝦 (Macrobrachiumrosenbergii)是我國三大水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)蝦類之一[1-3]。羅氏沼蝦幼體生長對(duì)水質(zhì)特性需要極其嚴(yán)格，要求水中離子組成及含量比例與海水特性相近[4-5]。隨著人們對(duì)羅氏沼蝦的需求不斷增加，內(nèi)陸苗種場(chǎng)常通過購買海水或取用海水來養(yǎng)殖，這就增加了養(yǎng)殖成本[6-7]。近幾十年來，沿海地區(qū)海水水質(zhì)惡化，增加了天然海水培育蝦苗的困難[8-9]。國內(nèi)外也進(jìn)行了一些人工海水培育蝦類的探索[5,10-12]，這為人工海水培育羅氏沼蝦幼體奠定了基礎(chǔ)。本研究測(cè)定了人工海水培育的羅氏沼蝦幼體的相對(duì)質(zhì)量增加率、蛻皮率、成活率、特定生長率，檢測(cè)了養(yǎng)殖過程中的水質(zhì)狀況，探索自制人工海水培育羅氏沼蝦幼體的可行性，為人工海水培育羅氏沼蝦幼體提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)用羅氏沼蝦幼體，即溞狀幼體，共80萬尾，由國家級(jí)廣西南寧羅氏沼蝦良種場(chǎng)提供，其親本為越南引進(jìn)的羅氏沼蝦原種后代。鹵蟲(Artemia)由國家級(jí)廣西南寧羅氏沼蝦良種場(chǎng)提供。

強(qiáng)氯精、EDTA、海鹽等購于上海生物工程有限公司，其他為分析純。

1.2 方法

1.2.1 人工海水配制

清潔淡水源于本試驗(yàn)場(chǎng)蓄水池塘，該池塘中輪葉黑草面積約60%，水質(zhì)清澈透明，抽水經(jīng)二級(jí)沙濾，注入蓄水池后隔日用質(zhì)量濃度為5 g/m3的強(qiáng)氯精消毒，然后用質(zhì)量濃度30 mg/L沸石粉整池潑灑，氣泵沖氣，次日停氣待水澄清，獲得清潔淡水。然后，將清潔淡水進(jìn)入化鹽池，將各種配制人工海水的試劑按海鹽∶MgSO4∶CaCl2∶KCl∶H3B3O3∶KBr∶EDTA∶生石灰=2000∶600∶72∶36∶24∶4∶1∶2，逐一溶解，攪拌均勻，充氣24 h后停氣、沉淀，即為人工海水。

1.2.2 幼體培育

孵化池培育前均用10 g/m3的強(qiáng)氯精消毒。幼體孵化水用配制好的人工海水和處理過的淡水混合成，比重為1.002，孵化時(shí)先將水溫升至30～31 ℃，然后將經(jīng)15 g/m3高錳酸鉀溶液浸泡15 min的抱卵親蝦放入孵化池中孵化，獲得受精卵。育苗池注入配制的人工海水，受精卵按80萬尾/池的密度投放。培育池上方用遮陽網(wǎng)覆蓋。

幼體共12期，第1期開始培育，第12期結(jié)束出苗。放養(yǎng)后第2 d開始投喂鹵蟲無節(jié)幼體，每日8:00—9:00，11:00—12:00，16:00—17:00各投喂1次餌料。第9 d起輔助投喂蛋羹，分別于每日6:00—7:00、13:00—14:00各投喂1次。每次喂蛋羹1 h后，停氣，吸出蛋羹。試驗(yàn)期間，定期用水質(zhì)分析儀測(cè)定氨氮、亞硝酸鹽和溶解氧量。第5、11、17、22 d參考文獻(xiàn) [13]的方法，測(cè)定海水的鈣含量，收集蛻皮，烘干保存，每日記錄蛻皮次數(shù)。經(jīng)22 d培育后淡化出苗，測(cè)定蝦的體長、濕體質(zhì)量(初始質(zhì)量和終末質(zhì)量)，以杯量法估算蝦苗成活率(蝦齡22日齡，即第12期)。設(shè)置天然海水為對(duì)照。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用單因子方差分析及Duncans多重比較差異顯著性(=0.05)。按下式計(jì)算各項(xiàng)指標(biāo)：

相對(duì)質(zhì)量增加率/%= (mt-m0)/m0×100%

蛻皮率/%·d-1=Nm/(Ns×t)×100%

特定生長率/%·d-1=(lnm2-lnm1)/t×100%

式中，mt、m0試驗(yàn)結(jié)束和初始時(shí)對(duì)蝦的濕體質(zhì)量(g)，m2、m1是試驗(yàn)結(jié)束和初始時(shí)對(duì)蝦的干體質(zhì)量(g)，t為試驗(yàn)持續(xù)的時(shí)間(d)，Nm為蛻皮次數(shù)，Ns為養(yǎng)蝦數(shù)(尾)。

2 結(jié)果與分析

2.1 養(yǎng)殖羅氏沼蝦幼體的人工海水配方

1000 kg養(yǎng)殖羅氏沼蝦幼體的人工海水配方見表1。其中，海鹽∶MgSO4∶CaCl2∶KCl∶H3B3O3∶ KBr∶EDTA∶生石灰的比例為：2000∶600∶72∶36∶24∶4∶1∶2，配比量分別依次為10000、3000、360、180、120、20、5、10 g。人工海水中，Na+、Mg2+、Ca2+和K+濃度分別為4625.3、335、116.43 mmol/L和111.83 mmol/L，Mg2+、K+、Ca2+的比值為3∶1∶1。

表1 1000 kg養(yǎng)殖羅氏沼蝦幼體的人工海水配方 g

2.2 人工海水養(yǎng)殖羅氏沼蝦幼體過程中的水質(zhì)

人工海水養(yǎng)殖羅氏沼蝦幼體過程中水質(zhì)的檢測(cè)結(jié)果見表2。由表2可知，人工海水中，氨氮、亞硝酸鹽、溶解氧質(zhì)量濃度均隨著時(shí)間延長而增加，平均值分別為0.398、0.082、5.40 mg/L，養(yǎng)殖22 d后的質(zhì)量濃度分別為0.69、0.115、5.585 mg/L。

2.3 羅氏沼蝦幼體培育結(jié)果

80萬羅氏沼蝦幼體經(jīng)人工海水22 d培育后，共計(jì)成活蝦苗約有68萬尾，成活率為85%。經(jīng)人工海水培育的羅氏沼蝦幼體成活率、終末質(zhì)量、相對(duì)質(zhì)量增加率、蛻皮率均顯著高于天然海水(P<0.05)(表3)。

2.4 養(yǎng)殖羅氏沼蝦幼體的人工海水中Ca2+的含量

養(yǎng)殖羅氏沼蝦幼體的2種水體中Ca2+的含量增加比率均隨著養(yǎng)殖時(shí)間的延長而增加。5 d和11 d時(shí)，2種水體中的Ca2+含量增加比率無顯著差異，而在17 d和22 d，人工海水中的Ca2+含量增加比率顯著高于天然海水(P<0.05)(表4)。

2.5 不同時(shí)間羅氏沼蝦幼體的特定生長率

羅氏沼蝦在人工海水和天然海水中的特定生長率均呈增加趨勢(shì)，且在人工海水中的特定生長率比在天然海水高(圖1)。

圖1 不同時(shí)間羅氏沼蝦幼體的特定生長率

水質(zhì)指標(biāo)檢測(cè)時(shí)間/d357911131416182022平均值氨氮0.130.310.450.170.330.510.580.210.430.570.690.398亞硝酸鹽0.0530.0670.0740.0650.0850.0940.0970.0610.0810.1120.1150.082溶解氧5.325.285.375.385.295.275.435.525.575.425.585.40

表3 羅氏沼蝦幼體培育22 d后的最終結(jié)果 (N=3, 平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)

注：標(biāo)字母a的平均值表示組間差異顯著(P<0.05).下同.

表4 人工海水在養(yǎng)殖羅氏沼蝦幼體過程中Ca2+含量變化(N=3, 平均值±標(biāo)準(zhǔn)差) %

3 討 論

配制人工海水中，Mg2+、K+、Ca2+的濃度和配比對(duì)幼體成活率影響至關(guān)重要[1,9]。天然海水的Na+、Mg2+、Ca2+、K+濃度分別是4133.1、420.26、130.74、142.32 mmol/ L，Mg2+、K+、Ca2+的配比系數(shù)均為3∶1∶1[4-5]。本試驗(yàn)中，人工海水的Na+、 Mg2+、Ca2+、K+濃度以及Mg2+、K+、Ca2+之間配比均接近于天然海水，符合羅氏沼蝦幼體養(yǎng)殖所需水質(zhì)特性，可用于羅氏沼蝦幼體培育。

三態(tài)氮中，非離子氨和亞硝酸鹽對(duì)羅氏沼蝦苗種有較強(qiáng)的毒性，其含量隨著養(yǎng)殖時(shí)間延長逐漸上升，而硝態(tài)氮影響甚微，不構(gòu)成毒性[8,14-15]。溶解氧保持在約5.5 mg/L能使幼體和蝦仔更健康、成活率更高[11]。因此，降低氨氮、亞硝酸鹽含量，保持溶解氧約5.5 mg/L對(duì)育苗效果具有重要意義。本試驗(yàn)在投喂后1 h吸污，吸出剩余的殘餌，比之前用小環(huán)藻(Cyclotellasp.)法[5]和過濾法[8]更為簡單有效。本試驗(yàn)中，羅氏沼蝦幼體對(duì)人工海水的氨氮、亞硝酸鹽含量與陳佳毅等[7-8,15]報(bào)道的耐受范圍略有不同，這可能是體質(zhì)、試驗(yàn)材料及生產(chǎn)和試驗(yàn)環(huán)境等因素不同所致[3-5]。從氨氮、亞硝酸鹽監(jiān)測(cè)指標(biāo)及溶解氧的平均值處在約5.5 mg/L綜合來看，筆者自制的人工海水對(duì)羅氏沼蝦的幼體基本無毒性，可用于羅氏沼蝦幼體培育。

蝦類的生長與Ca2+含量密切相關(guān)[16]。養(yǎng)殖水體的鈣含量不能滿足蝦類生長時(shí)，會(huì)影響蝦的生長發(fā)育，甚至死亡[17-19]。在本試驗(yàn)中，與天然海水相比，隨著養(yǎng)殖時(shí)間延長，人工海水的鈣離子含量增加比率高，羅氏沼蝦幼體在人工海水中的特定生長率高于天然海水，可以初步推斷出人工海水能使羅氏沼蝦幼體有較好生長。筆者認(rèn)為，在自制的人工海水養(yǎng)殖過程中，水體自身變化可能對(duì)羅氏沼蝦的生長發(fā)育有影響，特別是Ca2+含量水平變化，因此，需要進(jìn)一步探討羅氏沼蝦幼體的生長發(fā)育與Ca2+含量變化的關(guān)系。

羅氏沼蝦仔蝦有相互殘殺習(xí)性，本試驗(yàn)后期，除了適時(shí)投足餌料外，在培育池中懸掛網(wǎng)片，給仔蝦提供攀爬空間，降低其殘殺率，有助于提高出苗率。配制人工海水的原料經(jīng)過嚴(yán)格篩選，純度較高，鹽化后水質(zhì)比較干凈，雖然該配方配制方便，但鹽化工作強(qiáng)度大，比較麻煩，需要進(jìn)一步解決。

4 結(jié) 論

本研究用的人工海水對(duì)羅氏沼蝦幼體培育無毒性，隨著養(yǎng)殖時(shí)間延長，Ca2+含量增加比率較天然海水高，能有效提高羅氏沼蝦幼體的蛻皮率和存活率，表明羅氏沼蝦的生長發(fā)育受Ca2+濃度影響。進(jìn)一步探討羅氏沼蝦幼體的生長發(fā)育與人工海水中Ca2+濃度的關(guān)系很有必要。

[1] 姜增華. 揚(yáng)州地區(qū)羅氏沼蝦養(yǎng)殖模式、相關(guān)技術(shù)及發(fā)展對(duì)策的研究[D]. 南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2015.

[2] Luo W, Zeng C, Yi S K, et al. Heterosis and combining ability evaluation for growth straits of blunt snout bream (Megalobramaamblycephala) when crossbreeding three strains[J]. Chinese Science Bulletin, 2014, 59(9):857-864.

[3] Amstrong D A, Stephenson M J, Knight A W. Acute toxicity of nitrite to larvae of the giant Malaysian prawn,Macrobrachiumrosenbergii[J]. Aquaculture, 1976(9):39-46.

[4] Yang F, Qian Y Q, Ma W M, et al. MSG is involved in sperm gelatinolytic activity in the prawn,Macrobrachiumrosenbergii[J]. Chinese Science Bulletin, 2013,58(18):2113-2118.

[5] 黃光華，江林源,盧小花,等．小環(huán)藻在羅氏沼蝦人工育苗中的應(yīng)用研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011,39(13):7849-7850.

[6] 趙朝陽,周鑫,王桂芹,等.馬氏沼蝦蚤狀幼體發(fā)育特征及其與羅氏沼蝦幼體的形態(tài)差異[J]. 水生生物學(xué)報(bào),2011,35(4)：659-665.

[7] 陳佳毅，孫龍生，吳駿，等. 氨氮和亞硝氮對(duì)不同發(fā)育階段羅氏沼蝦幼體的急性毒性研究[J]. 水產(chǎn)養(yǎng)殖，2015，36(10)：1-6.

[8] 畢英佐，李桂峰，李海燕，等.羅氏沼蝦育苗水體氨氮、亞硝酸鹽氮的變化規(guī)律及對(duì)幼體的影響[J]. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，23(3)：67-70.

[9] 江林源，黃光華，盧小花，等. 羅氏沼蝦健康育苗技術(shù)[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，42(4)：446-449.

[10] Lee S W, Najiah M, Wendy W, et al. Multiple antibiotic resistance and heavy metal resistance profile of bacteria isolated from giant freshwater prawn (Macrobrachiumrosenbergii) hatchery[J]. Agricultural Sciences in China, 2009,8(6):740-745.

[11] 張煜,臧維玲,劉永士,等．淡水養(yǎng)殖凡納濱對(duì)蝦的瞬時(shí)耗氧速率與體長、溶氧水平關(guān)系研究[J]．湖南農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(9):136-139.

[12] Lin F, Liu L, Qian D, et al. Development of nucleic acid sequence-based amplification assay for detection ofMacrobrachiumrosenbergiiNodavirus[J]. Agricultural Biotechnology, 2014(3):42-45.

[13] 王茂林. 海水中鈣鎂離子對(duì)褐牙鲆幼魚生長和生理影響的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 青島：中國海洋大學(xué)，2009.

[14] 臧維玲，江敏，張建達(dá)，等.亞硝酸鹽和氨對(duì)羅氏沼蝦幼體的毒性[J]. 上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào)，1996，5(1)：15 -22.

[15] 戴習(xí)林，臧維玲，楊鴻山，等. Cu2+、Zn2+、Cd2+對(duì)羅氏沼蝦幼蝦的毒性作用[J]. 上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，10(4):298-302.

[16] 王慧，房文紅，來琦芳. 水環(huán)境中Ca2+、Mg2+對(duì)中國對(duì)蝦生存及生長的影響[J]. 中國水產(chǎn)科學(xué)，2000，7(1)：82-86.

[17] 候純強(qiáng). 水中鈣濃度對(duì)凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei)蛻皮和生長的影響及生理生態(tài)學(xué)機(jī)制[D]. 青島：中國海洋大學(xué)，2011.

[18] Greenway P. Calcium balance and moultng in the crustacean [J]. Biol Rev, 1985, 60(3):425-454.

[19] Chan S M, Rankin S M, Keeley L L. Characterization of the molt stages inPenaeusvannamei: setogenesis and haemolymph levels of total protein, ecdysteroids and glucose[J]. Biol Bull, 1988, 175(2):185-192.

LarvaRearingofMalaysianPrawnMacrobrachiumrosenbergiiinArtificialSeaWater

HUANG Guanghua1, MA Huawei1,2, YANG Yanhao1, HUANG Libin1, FENG Pengfei1, Lü Min1, LU Xiaohua1,TONG Guixiang1

( 1.Guangxi Academy of Fishery Sciences, Guangxi 530021, China；2. Fangchenggang Aquatic Products Quality and Safety Testing Center, Fangchenggang 538000, China )

Chemicals MgSO4∶CaCl2∶KCl∶H3B3O3∶KBr∶EDTA∶ lime stone were mixed at a ratio of 2000∶600∶72∶36∶24∶4∶1∶2 to make artificial sea water where Malaysian prawnMacrobrachiumrosenbergiilarvae were reared to research feasibility of Malaysian prawn larva rearing in artificial sea water. The water quality detection proved that artificial sea water prepared by a ratio of Mg2+, K+and Ca2+=3∶1∶1, closed to natural sea water, was non-toxic. In the artificial sea water, 680 thousands of postlarvae was obtained with survival rate of 85%,ecdysis rate of 16.82%, and specific growth rate of 25.34%/d, higher than those in nature sea water. The findings indicate that artificial seawater can be used for Malaysian prawn larva rearing.

artificial sea water;Macrobrachiumrosenbergiilarva; dissolved oxygen; specific growth rate

10.16378/j.cnki.1003-1111.2016.06.022

S968.22

A

1003-1111(2016)06-0727-04

2016-02-19；

2016-04-18.

廣西直屬公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)項(xiàng)目(GXIF-2012-08).

黃光華(1975—)，男，工程師；研究方向：羅氏沼蝦良種選育. E-mail: 1394823783@qq.com. 通訊作者：童桂香(1976—)，女，工程師；研究方向：水產(chǎn)養(yǎng)殖. E-mail: 463543285@qq.com.