一株假單胞菌對(duì)莧菜紅的脫色特性研究

劉 捷, 李湘凌, 邢 進(jìn), 胡翠茹, 袁 峰, 周濤發(fā)

(合肥工業(yè)大學(xué) 資源與環(huán)境工程學(xué)院,安徽 合肥 230009)

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一株假單胞菌對(duì)莧菜紅的脫色特性研究

劉 捷, 李湘凌, 邢 進(jìn), 胡翠茹, 袁 峰, 周濤發(fā)

(合肥工業(yè)大學(xué) 資源與環(huán)境工程學(xué)院,安徽 合肥 230009)

文章以一株假單胞菌Pseudomonassp.為研究對(duì)象,考察了該菌作用下碳源種類(lèi)、葡萄糖質(zhì)量濃度、初始pH值、染料質(zhì)量濃度及時(shí)間等因素對(duì)莧菜紅(AR27)偶氮染料的厭氧脫色的影響。研究結(jié)果表明生物降解在脫色過(guò)程中占主導(dǎo)作用,其脫色過(guò)程符合一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)規(guī)律。在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,利用Box-Benhnken組合實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面分析法對(duì)脫色條件進(jìn)行優(yōu)化。經(jīng)修正,得到的最佳脫色條件為：染料質(zhì)量濃度170 mg/L,葡萄糖質(zhì)量濃度1.6 g/L,脫色培養(yǎng)液的初始pH值為7.2,脫色時(shí)間75 h,此時(shí)該菌對(duì)偶氮染料AR27的脫色率為97.3%。

假單胞菌;偶氮染料;碳源;響應(yīng)面法

0 引 言

偶氮染料是分子中具有一個(gè)或多個(gè)偶氮基(-N=N-)的芳香類(lèi)化合物。由于其具有顏色范圍廣、色光良好等優(yōu)點(diǎn)而成為目前商業(yè)應(yīng)用最多的合成染料[1]。印染、染料等生產(chǎn)行業(yè)排放的廢水中含有大量的偶氮染料,使得該類(lèi)廢水色度高且具有嚴(yán)重的生態(tài)環(huán)境危害性[2],其中染料廢水的脫色已成為研究熱點(diǎn)之一。生物法是偶氮染料廢水脫色的較為有效的途徑,在好氧條件下大多數(shù)偶氮染料較難降解脫色,而在兼氧或厭氧條件下偶氮鍵易被還原斷裂[3-4]使其表現(xiàn)出良好的脫色能力。

近年來(lái),人們已發(fā)現(xiàn)多種具有脫色偶氮染料能力的菌株,包括氣單胞菌屬、光合細(xì)菌、芽孢桿菌、大腸桿菌和希瓦氏菌屬等。文獻(xiàn)[5]從染料廢水中分離出一株球形芽孢桿菌Lysinibacillussp. RGS對(duì)雷馬素紅具有較好的脫色效果。文獻(xiàn)[6]分離出的菌株Shewanellaaquimarina在高鹽偶氮染料廢水中對(duì)甲基橙的脫色率[7]達(dá)79.1%。文獻(xiàn)[8]篩選出的產(chǎn)堿桿菌AlkaligenesSpecies AP04是一株好氧菌,它可以以活性紅198作為唯一碳源維持生長(zhǎng)。文獻(xiàn)[8]成功利用菌株Geobacteraceaemetallireducens(DSM 7210)脫色酸性紅27,脫色率最高可達(dá)93.7%。

本文以莧菜紅(AR27)偶氮染料為模式污染物,利用課題組前期從活性污泥中分離出的一株以檸檬酸鐵為電子受體能進(jìn)行異化鐵還原的菌株(Pseudomonassp.),研究其脫色特性并優(yōu)化其脫色條件,以期為細(xì)菌在染料廢水治理領(lǐng)域的應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 染料

偶氮染料AR27(C20H11N2Na3O10S3),分析純,相對(duì)分子質(zhì)量為604.47,結(jié)構(gòu)式如圖1所示,最大吸收波長(zhǎng)為520 nm。

圖1 AR27的化學(xué)結(jié)構(gòu)式

1.1.2 菌種與培養(yǎng)基

菌種來(lái)源于本實(shí)驗(yàn)室前期分離出的一株具有異化鐵還原能力的菌株,經(jīng)鑒定該菌為假單胞菌Pseudomonassp.。

活化培養(yǎng)基如下:NaCl 5.0 g/L, MgCl20.1 g/L, CaCl20.1 g/L, KCl 3.0 g/L, KH2PO41.0 g/L, NH4Cl 1.25 g/L, NaNO32.0 g/L,CH3COONa 2.0 g/L, NaHCO32.5 g/L,抗壞血酸0.1 g/L。

脫色培養(yǎng)基如下：C6H12O61.5 g/L, KH2PO42.65 g/L, Na2HPO41.69 g/L,(NH4)2SO40.5 g/L,MgSO4·7H2O 0.2 g/L,少量微量元素。

1.1.3 主要儀器

AUY-120型電子天平,KADY便攜式pH值計(jì),SYQ-DSX-280B型手提式不銹鋼壓力蒸汽滅菌器,SF-VD-650型超凈工作臺(tái),SHP-250型生化培養(yǎng)箱,HC-2064高速離心機(jī),UV-754型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)。

1.2 方法

1.2.1 碳源種類(lèi)對(duì)染料脫色的影響

脫色實(shí)驗(yàn)均在250 mL的鹽水瓶中進(jìn)行。在配置好的脫色培養(yǎng)基中加入AR27, 其終質(zhì)量濃度為150 mg/L,分別投加葡萄糖、乙酸鈉、丙酮酸鈉、淀粉,各碳源終質(zhì)量濃度為1.5 g/L。不加碳源的作為對(duì)照組。調(diào)節(jié)pH值至7.0左右,121 ℃下滅菌20 min。按無(wú)菌操作法將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌株P(guān)seudomonassp.按體積分?jǐn)?shù)為10%的接種量接種至脫色培養(yǎng)基中。然后向培養(yǎng)基中通入高純N2,吹脫5 min,迅速用膠塞和鋁蓋密封,將其置于35 ℃的恒溫培養(yǎng)箱中反應(yīng)。脫色前,用滅菌的注射器取樣;脫色期間,間隔一定時(shí)間用無(wú)菌注射器取樣,測(cè)定AR27的脫色率。實(shí)驗(yàn)均設(shè)置3個(gè)平行樣。

1.2.2 葡萄糖質(zhì)量濃度對(duì)染料脫色的影響

向脫色培養(yǎng)基中(含有150 mg/L的AR27)添加葡萄糖,其終質(zhì)量濃度分別為0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 g/L。調(diào)節(jié)pH值至7.0左右,121 ℃下滅菌20 min。其余步驟同1.2.1。脫色前,用滅菌的注射器取樣;脫色期間,間隔一定時(shí)間用無(wú)菌注射器取樣,測(cè)定體系中pH值和AR27的脫色率。實(shí)驗(yàn)均設(shè)置3個(gè)平行樣。

1.2.3 體系初始pH值對(duì)染料脫色的影響

脫色培養(yǎng)基中葡萄糖質(zhì)量濃度為1.5 g/L,AR27質(zhì)量濃度為150 mg/L。用1 mol/L的HCl和NaOH溶液調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的初始pH值分別為5.0、6.0、7.0、8.0、9.0。121 ℃下滅菌20 min,其余步驟同1.2.1。脫色前,用滅菌的注射器取樣;脫色期間,間隔一定時(shí)間用無(wú)菌注射器取樣,測(cè)定體系中pH值和AR27的脫色率。實(shí)驗(yàn)均設(shè)置3個(gè)平行樣。

1.2.4 染料初始質(zhì)量濃度對(duì)染料脫色的影響

脫色培養(yǎng)基中葡萄糖質(zhì)量濃度為1.5 g/L,向其中添加AR27,使得體系中AR27的終質(zhì)量濃度分別為50、100、150、200、250、300、400 mg/L。調(diào)節(jié)pH值至7.0左右,121 ℃下滅菌20 min,其余步驟同1.2.2。用無(wú)菌注射器移取脫色前和脫色72 h后的水樣,測(cè)定AR27的脫色率。實(shí)驗(yàn)均設(shè)置3個(gè)平行樣。

1.2.5 響應(yīng)曲面法優(yōu)化脫色條件

在單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果最優(yōu)水平基礎(chǔ)上,根據(jù)Box-Behnken設(shè)計(jì)原理,本實(shí)驗(yàn)以脫色率r為響應(yīng)值,利用Design-Expert 8.0軟件設(shè)計(jì)四因素三水平響應(yīng)曲面實(shí)驗(yàn)[9],選取AR27質(zhì)量濃度、時(shí)間、pH值、葡萄糖質(zhì)量濃度4個(gè)影響因素,因素編碼水平見(jiàn)表1所列。

表1 響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)因素水平

1.2.6 菌體吸附脫色測(cè)定

將響應(yīng)曲面法得到的優(yōu)化條件進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),脫色完全后的培養(yǎng)基在8 000 r/min下離心10 min,棄去上清液,收集菌體。將得到的菌體置于甲醇中,利用超聲波破碎菌體,并使菌體均勻分布在甲醇溶液中。

然后將混合液靜置12 h,4 000 r/min下離心10 min,收集上清液。收集2次上述步驟所得上清液,測(cè)定被菌體吸附染料的吸光度,根據(jù)AR27標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出菌體吸附染料的質(zhì)量,從而得出吸附率[10]。

1.2.7 染料脫色率測(cè)定及計(jì)算

將含染料以及菌體的培養(yǎng)液離心后得上清液,以未加染料的菌體培養(yǎng)上清液為參比,在染料相應(yīng)的最大吸收波長(zhǎng)處(520 nm)測(cè)量其吸光度。脫色率r的計(jì)算公式如下:

其中,A0、At分別為接種后初始時(shí)刻和培養(yǎng)t時(shí)刻上清液的吸光度。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論

2.1 脫色的基本作用分析

由于菌體對(duì)染料具有吸附作用,在本研究中為了確定反應(yīng)體系中的吸附脫色作用的貢獻(xiàn),采用甲醇洗脫法來(lái)研究菌體吸附脫色的情況。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),菌體對(duì)染料的吸附率僅為(6.3±1.02)%,該吸附脫色率與體系的總脫色率97.3%相比較,吸附脫色作用所占比例很小,因此該體系中的脫色以該菌的生物降解過(guò)程為主。

2.2 不同因素對(duì)AR27染料脫色的影響

2.2.1 碳源的影響

分別以葡萄糖、乙酸鈉、淀粉、丙酮酸鈉作為實(shí)驗(yàn)組,不添加碳源作為對(duì)照組,研究了不同碳源對(duì)鐵還原菌脫色AR27的影響,如圖2所示。

由圖2可以看出,當(dāng)無(wú)外加碳源時(shí),AR27緩慢脫色,脫色135 h時(shí)AR27體系中脫色率為27.7%,表明該株菌可以利用AR27作為碳源來(lái)維持自身代謝并實(shí)現(xiàn)緩慢脫色。而目前只發(fā)現(xiàn)少量細(xì)菌可以以染料為唯一碳源進(jìn)行生長(zhǎng)并使其降解。如KlebsiellapneumoniaeY3可利用甲基紅作為唯一碳源維持生長(zhǎng)并使其逐漸降解[11],64 h脫色率為52%。

圖2 碳源對(duì)AR27脫色率的影響

外加葡萄糖、淀粉、丙酮酸鈉等碳源都提高了該菌對(duì)AR27的脫色率。當(dāng)脫色反應(yīng)時(shí)間為135 h時(shí),添加葡萄糖、淀粉、丙酮酸鈉體系的脫色率均達(dá)到了98%左右,與未添加碳源的體系相比較,其脫色率提高了3.5倍左右。而乙酸鈉作為外加碳源時(shí),并沒(méi)有明顯促進(jìn)脫色。同時(shí),添加葡萄糖、淀粉、丙酮酸鈉能提高AR27的脫色速度。當(dāng)脫色反應(yīng)時(shí)間為46 h時(shí),添加葡萄糖、淀粉、丙酮酸鈉體系的脫色率分別為80%、51%和41%,而添加乙酸鈉體系的脫色率僅為11%,與不添加碳源的體系基本相當(dāng)。與其他碳源相比較,葡萄糖能快速啟動(dòng)脫色反應(yīng),一方面是因?yàn)樗子诒痪杲到饫?為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供足夠的能量；另一方面是誘導(dǎo)偶氮還原,刺激了負(fù)責(zé)還原過(guò)程的酶系統(tǒng)[12]。

以上結(jié)果表明葡萄糖是該菌株脫色AR27的最適碳源，這與乙酸鈉可以作為金屬還原地桿菌DSM7210脫色AR27的有效碳源[8],甲酸鈉是中國(guó)希瓦氏菌D14T脫色AR27的最佳碳源[6]的研究結(jié)果存在明顯的差異,主要原因是該株菌可能是利用發(fā)酵糖產(chǎn)生乙酸、氫氣等發(fā)酵產(chǎn)物的過(guò)程中來(lái)還原偶氮染料。

2.2.2 葡糖糖質(zhì)量濃度的影響

葡萄糖是該菌生長(zhǎng)的基本物質(zhì)和脫色AR27的最適碳源,因此研究其在不同質(zhì)量濃度下脫色效果是十分必要的。AR27質(zhì)量濃度150 mg/L,pH值為7,不同葡萄糖質(zhì)量濃度下AR27在72 h時(shí)的脫色率如圖3所示。

由圖3可以看出，葡萄糖的質(zhì)量濃度低于1.5 g/L時(shí),脫色率隨著葡萄糖質(zhì)量濃度的增加而提高,這是由于葡萄糖質(zhì)量濃度較低時(shí),電子供體不足導(dǎo)致鐵還原菌的脫色能力較差。而當(dāng)葡萄糖的質(zhì)量濃度超過(guò)1.5 g/L時(shí),它的脫色率有所下降,并且測(cè)得此時(shí)的脫色體系pH值處于4.5～5.5之間。這可能是因?yàn)檩^高質(zhì)量濃度的葡萄糖會(huì)轉(zhuǎn)化為大量的有機(jī)酸,使得培養(yǎng)基pH值大幅降低,抑制了該菌的生長(zhǎng),而該株假單胞菌Pseudomonassp.的最佳生長(zhǎng)pH值為7,可見(jiàn)較低的pH值不利于菌株的脫色反應(yīng)。用NaOH將培養(yǎng)基調(diào)節(jié)至7左右時(shí),脫色反應(yīng)又繼續(xù)進(jìn)行,脫色率最終能達(dá)到95%左右。這種現(xiàn)象與文獻(xiàn)[13]研究結(jié)果一致。文獻(xiàn)[14]指出葡萄糖質(zhì)量濃度控制在1～2 g/L范圍內(nèi)脫色效率最高,繼續(xù)提高葡萄糖質(zhì)量濃度,菌株E2的脫色率會(huì)降低。因此,假單胞菌Pseudomonassp.脫色的最佳葡萄糖質(zhì)量濃度為1.5 g/L,體系pH值是影響脫色反應(yīng)的關(guān)鍵因素。

圖3 葡萄糖質(zhì)量濃度對(duì)AR27脫色的影響

2.2.3 體系初始pH值的影響

葡萄糖質(zhì)量濃度為1.5 g/L,AR27質(zhì)量濃度為150 mg/L,不同初始pH值對(duì)菌株P(guān)seudomonassp.脫色率的影響如圖4所示。從圖4可以看出,反應(yīng)72 h后,pH值為7～9時(shí)AR27的脫色率都能達(dá)到97%左右;pH值為5和6時(shí)脫色率分別為12%、31%,表明酸性條件下不利于脫色反應(yīng)。且實(shí)驗(yàn)過(guò)程中測(cè)得中性或堿性體系中培養(yǎng)基的pH值減小至6.8左右,而酸性體系的pH值變化不大。造成這種現(xiàn)象的可能原因是菌株P(guān)seudomonassp.對(duì)葡萄糖厭氧發(fā)酵,產(chǎn)物中的乙酸、丁酸等揮發(fā)性脂肪酸,與堿性的培養(yǎng)基發(fā)生中和反應(yīng),使培養(yǎng)基的pH值降低至接近中性,便于菌體的生長(zhǎng)[15],以致在初始pH值為9的堿性條件下AR27仍能保持較高的脫色率。

圖4 初始pH值對(duì)AR27脫色率的影響

2.2.4 AR27初始質(zhì)量濃度的影響

葡萄糖質(zhì)量濃度為1.5 g/L,pH值為7,不同AR27初始質(zhì)量濃度對(duì)菌株P(guān)seudomonassp.脫色率的影響如圖5所示。

圖5 AR27初始質(zhì)量濃度對(duì)其脫色率的影響

從圖5可以看出,脫色時(shí)間為72 h時(shí),AR27的初始質(zhì)量濃度不超過(guò)200 mg/L,脫色效果較好,脫色率達(dá)90%左右。而當(dāng)初始質(zhì)量濃度超過(guò)200 mg/L時(shí),脫色率隨著染料質(zhì)量濃度的增加而減小,這可能是高質(zhì)量濃度染料對(duì)該菌具有毒副作用,其中偶氮染料芳環(huán)上的磺酸基團(tuán)的抑制微生物的生長(zhǎng),降低了微生物的脫色率[16],或者是不合適的細(xì)胞/染料比造成的[17-20]。印染行業(yè)廢水中的染料質(zhì)量濃度[21]通常為10～200 mg/L,本研究中的菌株對(duì)具有在實(shí)際染料廢水的高效厭氧脫色中的應(yīng)用有一定的潛力。

2.3 不同碳源條件下染料的脫色動(dòng)力學(xué)分析

動(dòng)力學(xué)研究是厭氧降解有機(jī)物研究的重要內(nèi)容之一,通過(guò)對(duì)脫色動(dòng)力學(xué)的研究可計(jì)算出脫色反應(yīng)速率,為更好地應(yīng)用于實(shí)際染料廢水提供參考依據(jù)。

采用一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程[22]對(duì)不同碳源條件下AR27的吸光度與反應(yīng)時(shí)間進(jìn)行擬合,得到動(dòng)力學(xué)方程和相關(guān)參數(shù)見(jiàn)表2所列。

表2 不同碳源條件下AR27的脫色動(dòng)力學(xué)參數(shù)

由表2可看出,不同碳源條件下AR27脫色均符合一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)規(guī)律,且相關(guān)性良好。添加葡萄糖、丙酮酸鈉、淀粉和乙酸鈉等碳源以及不添加碳源時(shí),各體系中的染料脫色速率常數(shù)分別為0.073 4、0.047 8、0.033 4、0.004 8、0.002 6,從脫色速率常數(shù)進(jìn)一步說(shuō)明了添加葡萄糖能顯著提高該菌株對(duì)AR27的脫色速率。當(dāng)葡萄糖、丙酮酸鈉、淀粉和乙酸鈉作碳源時(shí)AR27的脫色半衰期分別為9.44、14.50、20.75、144.41 h,當(dāng)不添加碳源、菌株以偶氮染料為碳源時(shí)AR27的半衰期為266.59 h。

2.4 響應(yīng)面脫色條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果

采用Box-Behnken模型,以表現(xiàn)顯著的AR27質(zhì)量濃度(A)、葡萄糖質(zhì)量濃度(B)、pH值(C)、脫色時(shí)間(D)作為自變量,脫色率(r)為響應(yīng)值設(shè)計(jì)29組試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果見(jiàn)表3所列。

表3 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

根據(jù)表3的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,經(jīng)回歸擬合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)所得經(jīng)驗(yàn)?zāi)Ｐ蜑?

r=96.02+1.86A+4.36B+5.44C+

3.16D+1.25AB+0.35AC-0.68AD-

3.78BC+1.7BD-2.7CD-2.27A2-

8.42B2-5.4C2-2.85D2。

用Design-Expert8.0對(duì)模型進(jìn)行方差分析,結(jié)果見(jiàn)表4所列，其二次回歸方程的方差分析見(jiàn)表5所列。從表4中可知,模型顯著,失擬項(xiàng)不顯著。從表5中可知,該模型的復(fù)相關(guān)系數(shù)R2=0.976 6,說(shuō)明該模型能較好地描述實(shí)驗(yàn)結(jié)果。它的變異系數(shù)為1.76,低于10%,說(shuō)明該實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性較好。最后得出菌株P(guān)seudomonassp.脫色的最佳條件為:AR27質(zhì)量濃度為172.06 mg/L,葡萄糖質(zhì)量濃度為1.63 g/L,脫色培養(yǎng)液的初始pH值為7.16,脫色時(shí)間為77.15 h,此時(shí)該菌對(duì)AR27的預(yù)測(cè)脫色率達(dá)98.5%。

表4 響應(yīng)面結(jié)果的方差分析

為了檢驗(yàn)響應(yīng)曲面設(shè)計(jì)所得結(jié)果的可靠性,同時(shí)考慮到實(shí)際操作的可行性,將實(shí)驗(yàn)參數(shù)修正如下：AR27質(zhì)量濃度為170 mg/L,葡萄糖的質(zhì)量濃度為1.6 g/L,脫色培養(yǎng)液的初始pH值為7.2,脫色時(shí)間為75 h。在該修正條件下進(jìn)行3次平行實(shí)驗(yàn),得到脫色率的平均值為97.3%,與預(yù)測(cè)值相差1.2%,與理論值基本吻合。說(shuō)明該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與響應(yīng)曲面法優(yōu)化得到的脫色參數(shù)準(zhǔn)確可靠,具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

表5 二次回歸方程的方差分析

3 結(jié) 論

(1) 假單胞菌Pseudomonassp.脫色莧菜紅AR27是以生物降解為主,且莧菜紅AR27脫色過(guò)程符合一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)規(guī)律。

(2) 菌株能以莧菜紅為碳源維持自身生長(zhǎng)并使其脫色。外加葡萄糖、丙酮酸鈉和淀粉不僅能提高脫色率,也能顯著提高脫色速率,其中葡萄糖是該菌株的最佳碳源,其最佳質(zhì)量濃度為1.5 g/L左右。

(3) 菌株以葡萄糖為碳源,在pH值為7～9環(huán)境下,染料的初始質(zhì)量濃度低于200 mg/L，均表現(xiàn)出良好的脫色能力。

(4) 采用響應(yīng)曲面法得到的最優(yōu)化脫色條件為:AR27質(zhì)量濃度170 mg/L,葡萄糖質(zhì)量濃度1.6 g/L,脫色培養(yǎng)液的初始pH值為7.2,脫色時(shí)間為75 h,在該脫色條件下，AR27的脫色率達(dá)到了97.3%。

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(責(zé)任編輯 閆杏麗)

Characterization of decolorization of amaranth byPseudomonassp. strain

LIU Jie, LI Xiangling, XING Jin, HU Cuiru, YUAN Feng, ZHOU Taofa

(School of Resources and Environmental Engineering, Hefei University of Technology, Hefei 230009, China)

The effect of factors like carbon sources, initial concentrations of glucose and azo dye, initial pH value and time on the amaranth(AR27) anaerobic decolorization byPseudomonassp. strain was investigated. The results indicated that the biodegradation played the dominant role in the decolorization, and the kinetics of decolorization reaction was corresponding with the first order reaction kinetics models. Based on the single factor experiment, the decolorization was optimized by using the Box-Benhnken composite designing and response surface methodology. After amendment, the rate of decolorization of AR27 byPseudomonassp. strain reached 97.3% under the optimal parameters with AR27 of 170 mg/L and glucose of 1.6 g/L cultivating for 75 h at pH value of 7.2.

Pseudomonassp.; azo dye; carbon source; response surface methodology

2015-10-14；

2015-11-27

安徽省國(guó)土資源科技資助項(xiàng)目(2015-g-8)

劉 捷(1989-),女,湖北麻城人,合肥工業(yè)大學(xué)碩士生; 袁 峰(1971-),男，廣西桂林人，博士，合肥工業(yè)大學(xué)教授，博士生導(dǎo)師； 周濤發(fā)(1964-)，男，安徽廬江人，博士，合肥工業(yè)大學(xué)教授，博士生導(dǎo)師.

10.3969/j.issn.1003-5060.2016.11.023

X172

A

1003-5060(2016)11-1556-07