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    動物寄生蟲病實驗室常規(guī)診斷方法及防控措施

    2016-12-17 19:37:35靳芹
    北方牧業(yè) 2016年7期
    關鍵詞:載玻片沉淀法寄生蟲病

    動物寄生蟲病實驗室常規(guī)診斷方法及防控措施

    動物寄生蟲病的確診是在流行病學資料調(diào)查研究的基礎上,通過實驗室檢查,查出蟲卵、幼蟲或成蟲。對于基層獸醫(yī)實驗室,最常用的寄生蟲檢測方法是糞便檢查和血液檢查。本文主要介紹寄生蟲病的這兩種診斷方法及其防控措施。

    1 寄生蟲病的糞便檢測方法

    糞便檢查是寄生蟲診斷中最簡便直觀的診斷方法。適合于以下蟲體:寄生于消化道、肝臟、胰臟的蠕蟲;寄生于牛羊肺氣管、支氣管的大、小型肺線蟲,豬后圓線蟲;寄生于腸系膜靜脈的血吸蟲,消化道的球蟲、腸小代蟲等。主要是借助顯微鏡觀察其寄生蟲卵、幼蟲、卵囊、包囊或滋養(yǎng)體的形態(tài)特征。

    1.1 糞便的初檢

    鏡檢之前,必須觀察糞便的顏色、稠度、氣味、黏液多少,有無血液、飼料消化程度等。有些寄生于動物消化道的絳蟲會不斷隨宿主糞便排出呈斷續(xù)面條狀的孕卵節(jié)片,還有其他一些消化道寄生蟲有時也可隨糞便排出體外,可直接挑出蟲體,進行判斷。

    1.2 直接涂片法

    于載玻片上滴數(shù)滴甘油(1︰1),用鑷子從不同部位取黃豆大小的一塊糞便與之混勻,剔除粗糞渣,加上蓋玻片(不要產(chǎn)生氣泡)鏡檢蟲卵。此法最為簡單,但檢出率不高。若做一下改良可提高檢出率,取2~3克被檢糞便,加2~3倍煮沸過的涼水,用干凈的玻璃棒進行旋轉(zhuǎn)攪拌,在旋轉(zhuǎn)攪拌的中心迅速提出小棒,用其棒尖的液滴涂片進行鏡檢。

    1.3 集卵法

    利用各種方法,將分散在糞便中的蟲卵集中起來,再行檢查,以提高檢出率。有漂浮法和沉淀法,前者適于線蟲卵、絳蟲卵和球蟲卵,后者主要用于吸蟲病和棘頭蟲病的診斷。

    1.3.1 飽和鹽水漂浮法

    用比重大的溶液稀釋糞便,使比重小的蟲卵浮集于溶液的表面,檢查時就很容易發(fā)現(xiàn)蟲卵。取被檢糞樣2~5克于300毫升燒杯中,先加入飽和鹽水約10毫升,用小玻璃棒將糞搗成糊狀,然后按10~20倍的量加飽和鹽水,并進行充分攪拌,過濾后,靜置0.5小時左右,用直徑0.5~1.0厘米的金屬圈蘸取表面液膜,抖落于載玻片上,加蓋玻片后鏡檢。(注:若檢查比重較大的蟲卵,如棘頭蟲蟲卵、豬肺絲蟲蟲卵及吸蟲卵時,需用硫酸鎂、硫代硫酸鈉以及硫酸鋅等飽和溶液。)

    1.3.2 水洗沉淀法

    主要有自然沉淀法和離心沉淀法。自然沉淀法,從不同部位取5~10克被檢糞便置于燒杯中,加10~20倍水充分攪合,用兩層紗布慮入另一燒杯中,靜置20分鐘,棄上清,反復操作至上層液體透明為止。棄上清液,用吸管吸取沉淀物涂片鏡檢。離心沉淀法是取上法過濾所得的糞液置離心管中,以2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘離心1.5分鐘,取出后傾去上層液,再加水攪合,離心沉淀,反復操作,至上層透明,棄去上清,取其沉淀物涂片鏡檢。離心法取代自然法可大大縮短沉淀時間。

    1.4 蟲卵計數(shù)法

    利用蟲卵計數(shù)法測定家畜每克糞便的蟲卵數(shù),從而可推斷動物寄生蟲的感染程度和防治效果。但這只是定性的測定,沒有定量結(jié)果,檢測不出蟲卵的具體數(shù)量和蟲體類型,不推薦實驗室做具體檢測用。

    2 寄生蟲病的血液檢測方法

    寄生于血液中的寄生蟲的檢查一般需要采血檢查寄生于血漿中或血細胞中的蟲體。血液中寄生的常見寄生蟲主要有:錐蟲、巴貝斯蟲、泰勒蟲、住白細胞原蟲和心絲蟲等。

    2.1 鮮血壓片法

    若血液中幼蟲量較多,可直接滴一滴血于載玻片上,蓋上蓋玻片,在低倍鏡下檢查,可見微絲蚴在其中活動。

    2.2 血液涂片與染色

    一般病畜高溫時取耳靜脈血涂片,用載玻片接觸最先流出的一滴血,制成血液涂片,后用姬姆薩液染色后鏡檢。例如:染色后,伊氏錐蟲的胞漿呈淡天藍色,細胞核和鞭毛呈淡紅紫色。梨形蟲檢測,血液滴于載玻片后,推平,干燥后,將少量甲醇滴于血膜上待干燥后,姬姆薩染色,油鏡檢查,有梨形、圓形、卵圓形等不規(guī)則形態(tài)。

    2.3 蟲體濃集法

    當血液中蟲體較少不易查出時,常先進行集蟲,再涂片檢查。采病畜抗凝血6~7毫升,以500轉(zhuǎn)/分鐘的速度,離心5分鐘,使其中大部分紅細胞沉降;而后,將含有少量紅細胞、白細胞和蟲體的上層血漿移入另一離心管中,補加一些生理鹽水,以2500轉(zhuǎn)/分鐘的速度離心10分鐘。取沉淀物制成抹片,按上述染色方法檢查。此法適用于伊氏錐蟲病和梨形蟲病的檢查。

    3 寄生蟲病防控措施

    3.1 預防原則

    將動物糞便進行無害化處理;科學飼養(yǎng),保持飼養(yǎng)環(huán)境清潔無污染,尤其是防止飼料和飲水的污染;消滅中間宿主和傳播媒介;可采用藥物進行前期預防性驅(qū)蟲。

    3.2 寄生蟲防治用藥原則

    3.2.1 選擇藥物時,要以高效、低毒、廣譜、廉價以及使用方便幾個方面考慮。也可將兩種或兩種以上驅(qū)蟲藥物聯(lián)合應用,從而擴大驅(qū)蟲范圍。

    3.2.2 在治療過程中,應加強護理和觀察,給以足夠的恢復時間,必要時在治療后再次進行病原體檢查以判定療效。

    3.2.3 使用驅(qū)蟲藥,要求劑量準確,服藥后注意觀察,及時解救出現(xiàn)嚴重副作用的病畜;用藥后,要使病畜停留在指定的場所,以便及時收集排出的糞便和蟲體,加以適當處理,以防止散布病原。

    3.2.4 在進行大規(guī)模的驅(qū)蟲之前,要進行小群實驗,取得經(jīng)驗并肯定其藥效和安全性之后,再開展全群驅(qū)蟲工作。

    3.3 寄生蟲病疫苗預防接種

    3.3.1 低劑量蟲體感染:人為的低劑量感染寄生蟲,使宿主對進一步感染可產(chǎn)生有效的抵抗力。如:牛的巴貝斯蟲病和雞球蟲病。

    3.3.2 滅活的寄生蟲或寄生蟲粗提物:通過接種死的、整體的或顆粒性寄生蟲或寄生蟲粗提物,來誘導機體產(chǎn)生獲得性抵抗力。

    3.3.3 提純抗原:也叫蟲體分泌抗原,一般是寄生蟲勻漿或寄生蟲培養(yǎng)液中的提取物,能引起宿主產(chǎn)生保護性免疫。

    3.3.4 繼代培養(yǎng)致弱蟲苗,柔嫩艾美爾球蟲通過雞胚傳代致弱培養(yǎng),而獲得致弱的蟲苗,用于預防柔嫩艾美爾球蟲病,其致病力顯著降低。

    河北省黃驊市農(nóng)業(yè)局 靳芹

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