中藥特征圖譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用

張偉毅

（廣東省羅定市中醫(yī)院羅定527200）

中藥特征圖譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用

張偉毅

（廣東省羅定市中醫(yī)院羅定527200）

目的：分析討論中藥的特征圖譜技術(shù)對于不同種類的中藥的真?zhèn)?、?yōu)劣和產(chǎn)地等鑒定的實際應(yīng)用。方法：搜集關(guān)于特征圖譜技術(shù)的研究資料并且統(tǒng)計在不同種類的中藥的鑒定中的準確率。結(jié)果：特征圖譜的鑒別法準確率較高，且不受中藥呈現(xiàn)的形態(tài)及部位的影響。結(jié)論：研究人員需要加強特征圖譜技術(shù)與計算機軟件的開發(fā)，構(gòu)建較為完善的中藥特征圖譜的數(shù)據(jù)庫，使其在中藥鑒定中系統(tǒng)化和規(guī)范化，增加應(yīng)用的廣度和寬度。

中藥特征圖譜技術(shù) 中藥鑒定 實際應(yīng)用

伴隨生物科技和新型的化學儀器的產(chǎn)生與發(fā)展，中藥的特征圖譜技術(shù)日益完善，各種中藥的特征圖譜建立了相對全面的系統(tǒng)[1]，為各類中藥準確快速的鑒別提供了依據(jù)。中藥的特征圖譜技術(shù)是中藥在經(jīng)過比較特殊的前期加工和處理后，經(jīng)儀器檢測出其中含有的特定成分的特征圖譜，并與已知確定的數(shù)據(jù)庫中的中藥圖譜進行對照分析，從而判斷其真?zhèn)蔚亩康蔫b別技術(shù)手段[2]。該技術(shù)的鑒別效率高，穩(wěn)定性高，實際的應(yīng)用廣泛，共包括生物與化學兩種特征圖譜[3]。生物的特征圖譜是應(yīng)用分子的標記技術(shù)檢驗各類中藥的遺傳學特性，化學的特征圖譜是應(yīng)用液相色譜技術(shù)和光譜技術(shù)檢測各類中藥的化學特征[4]。

1　中藥的生物特征圖譜的應(yīng)用

生物的特征圖譜包括蛋白質(zhì)電泳與DNA兩類特征圖譜，在中藥的鑒別方面DNA圖譜的應(yīng)用效率更高，范圍更廣[3]。DNA的特征圖譜是按照每種生物特有的DNA序列的特征進行區(qū)分，使用先進的生物技術(shù)，以具備特異性的DNA顯示該圖譜。DNA排序的信息量極大，而且其序列是單獨唯一而且穩(wěn)定的，這種鑒別方法不被生物生長發(fā)育形態(tài)的改變以及鑒別部位的不同等外在的因素影響。該種鑒別方法不但能夠鑒別中藥的物種的類別，而且可以從獲取的DNA序列中判斷中藥是否出現(xiàn)變異，防止變異的中藥的潛在危害?？傊?，DNA的特征圖譜在中藥的鑒別中的效率較高，其應(yīng)用前景廣闊。

1.1隨機擴增DNA的應(yīng)用：隨機擴增性的DNA技術(shù)是采取合成的方法在低溫條件中，隨機應(yīng)用一個引物配對擴增DNA序列的模板，從而獲取某種中藥的DNA特征圖譜[4]，最后對圖譜結(jié)果的基因進行動態(tài)整合研究。研究人員應(yīng)用該技術(shù)獲取植物類中藥厚樸的DNA特征圖譜，然后憑借檢測結(jié)果的DNA條帶的特征完全準確地區(qū)分出偽品厚樸和易混淆厚樸。該技術(shù)進行中藥的鑒別的誤差較小，準確性較高，在中藥鑒別中的應(yīng)用非常廣泛，能有效地鑒別各類中藥的真假。

1.2直接測序法的應(yīng)用：DNA的直接測序法是將從待檢測的中藥中獲取的少量的DNA的樣本使用PCR擴增技術(shù)增加其數(shù)量，然后將擴增后的DNA使用DNA電泳及DNA染色技術(shù)進行標記，通過紫外燈進行照射觀察檢測擴增后的DNA的特征條帶，再用Sanger的末端終止法檢測出DNA的序列，分析比較待檢的中藥與真實中藥、偽造中藥的特征[5]。該方法常選取的序列有12Sr RNA、18sr RNA以及26sr RNA，常用來判斷中藥的真假。研究人員應(yīng)用該技術(shù)采集到我國包括懷山藥在內(nèi)的幾種不同產(chǎn)地的山藥的12Sr RNA，檢測并比較各自的序列后準確地鑒別出不同的品種[4]。因此，DNA的直接測序法還可區(qū)分近源異種植物類中藥，用于辨別中藥的產(chǎn)地。

2　中藥的化學特征圖譜的應(yīng)用

化學特征圖譜技術(shù)是指在中藥鑒別的操作過程中，利用多種先進的化學儀器、方法與統(tǒng)計學的分析軟件檢測分析中藥的不同組分的含量，根據(jù)不同種類中藥的特征峰峰值的面積、變化情況和比值等特性的差別，判斷中藥的真假、品種與產(chǎn)地[6]。該技術(shù)包括色譜技術(shù)與光譜技術(shù)兩種方法，色譜技術(shù)的鑒別方法最為常用[7]，色譜技術(shù)的鑒別中最常用的、且準確度最高的是高效液相色譜技術(shù)（HPLC）。該技術(shù)屬于封閉式的分析方法，受外界因素的干擾少，圖像的穩(wěn)定性高，應(yīng)用于中藥鑒別的準確度高，分離及鑒別的效果好。研究人員應(yīng)用該技術(shù)判斷植物類中藥紅蓼中的化學物質(zhì)乙酸乙酯，結(jié)果真紅蓼的相似值超過了0.95，偽紅蓼都沒有達到0.9，鑒別真?zhèn)蔚男Ч@著[5]。光譜技術(shù)可分為紅外光譜技術(shù)與核磁共振光譜技術(shù)，紅外光譜技術(shù)是中藥鑒別中較為常用的方法，將待檢中藥中的化學組分的紅外光譜進行疊加，當某種成分的含量穩(wěn)定時，該光譜保持穩(wěn)定。研究人員應(yīng)用該技術(shù)不僅判斷中藥中待檢山藥的真?zhèn)?，還能鑒別山藥的優(yōu)劣等級[1]。

3　問題與展望

同傳統(tǒng)的依靠人工的鑒別經(jīng)驗積累等中藥鑒別的手段相比，中藥的特征圖譜技術(shù)因其不被中藥的形態(tài)（粉末或切片等）、部位（根部或種子等）和中藥的數(shù)量多少干擾，準確性與穩(wěn)定性均較高。但是在我國進行中藥鑒別的現(xiàn)代化技術(shù)仍處在探索和研究階段，還沒有建立系統(tǒng)化的鑒別流程以及較為完整的中藥數(shù)據(jù)庫。為了推動中藥的特征圖譜技術(shù)的完善，我們未來的研究重點應(yīng)集中在形成系統(tǒng)化的理論體系、開發(fā)優(yōu)質(zhì)的分類軟件以及建造特征圖譜的完整數(shù)據(jù)庫等幾個方面。

[1]孫素琴，白雁.道地山藥紅外指紋圖譜和聚類分析的鑒別研究[J].光譜學與光譜分析，2013，23（12）：258-261.

[2]黃金春，陳世革，何報作，等.中藥葉形態(tài)-脈序圖譜鑒別法數(shù)據(jù)庫系統(tǒng)的構(gòu)建[J].世界科學技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2013，（9）：1928-1932.

[3]胡妮娜，田淑琴，于景偉，等.傳統(tǒng)中藥鑒定方法的研究發(fā)展概況[J].中醫(yī)藥信息，2012，21（3）：789-791.

[4]劉玉萍，何報作，曹暉.基因測序技術(shù)在中藥質(zhì)量研究中的應(yīng)用—山藥基原的DNA測序鑒[J].中草藥，2011，32（11）：126-130.

[5]李淼，樓一層，林鑫，等.紅蓼花、葉莖醋酸乙酯部位的高效液相色譜特征圖譜[J].中國醫(yī)院藥學雜志，2012，15（1）：234-236.

[6]朱秀卿，閻克里，趙麗．白術(shù)揮發(fā)油中極性和非極性成分的高效液相色譜法特征圖譜研究[J].中國藥物與臨床，2011，31（8）：83-84.

[7]張永鑫，劉曉，楊欣文，等．黃連4種飲片特征圖譜研究及生物堿含量測定[J].藥物分析雜志，2012，39（11）：126-128.

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1672-8351（2016）10-0155-01