熱休克蛋白90α與原發(fā)性肝癌關(guān)系的研究進展

孔巧巧(綜述)　鄒志強(審校)

1 濱州醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)院　煙臺　264003；2 煙臺市傳染病醫(yī)院七科；3 煙臺市傳染病醫(yī)院

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熱休克蛋白90α與原發(fā)性肝癌關(guān)系的研究進展

孔巧巧1，2(綜述)鄒志強3(審校)

1 濱州醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)院煙臺264003；2 煙臺市傳染病醫(yī)院七科；3 煙臺市傳染病醫(yī)院

熱休克蛋白90α；原發(fā)性肝癌；乙型肝炎病毒

原發(fā)性肝癌是目前世界上致死率最高的惡性腫瘤之一，在全世界范圍內(nèi)發(fā)病率有逐年上升的趨勢。由于起病隱匿，早期無癥狀或臨床癥狀不明顯，進展迅速，確診時已達局部晚期或發(fā)生轉(zhuǎn)移，預(yù)后差。因此，肝癌的早期篩查和監(jiān)測非常重要。熱休克蛋白90α作為一種新的腫瘤標(biāo)記物，已有研究表明，熱休克蛋白90α在原發(fā)性肝癌中高表達[1]，與原發(fā)性肝癌的發(fā)生、發(fā)展、生物學(xué)行為及預(yù)后密切相關(guān)[2]?，F(xiàn)結(jié)合文獻，對熱休克蛋白90α與原發(fā)性肝癌關(guān)系的研究進展綜述如下。

1　熱休克蛋白及其生物學(xué)行為

1.1熱休克蛋白90α及其功能熱休克蛋白90α(Hsp90α)是細(xì)胞中普遍存在的與應(yīng)激損傷關(guān)系密切的蛋白質(zhì)，具有分子伴侶作用，在正常和應(yīng)激條件下有十分廣泛的功能。通過調(diào)控多種癌癥蛋白的功能，Hsp90α參與了腫瘤細(xì)胞的增殖、存活、侵入、轉(zhuǎn)移以及其它重要的過程。研究表明，Hsp90α可促進細(xì)胞遷移并通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期促進細(xì)胞增殖。腫瘤細(xì)胞尤其依賴Hsp90α生存于氧含量低、營養(yǎng)缺乏的微環(huán)境[3]，Hsp90α參與低氧誘導(dǎo)因子的信號傳導(dǎo)通路。Hsp90α可作為一種正向調(diào)節(jié)因子參與血管再生。細(xì)胞外的Hsp90α主要在神經(jīng)細(xì)胞、真皮成纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞中，且參與神經(jīng)細(xì)胞遷移、創(chuàng)傷愈合及病毒與細(xì)菌的感染。此外，Hsp90α的分泌是腫瘤細(xì)胞侵襲功能的先決條件，阻斷Hsp90α的分泌能夠顯著抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移。因此，血漿中Hsp90α的含量與臨床癌癥患者的腫瘤惡性程度正相關(guān)。

1.2熱休克蛋白90α分泌的調(diào)控機制作為最豐富的細(xì)胞蛋白之一(約1%總蛋白)，Hsp90α主要在細(xì)胞質(zhì)中，先前的研究也大多集中于Hsp90α在其胞質(zhì)中的功能。另外，雖然研究較少，Hsp90α可以釋放到細(xì)胞外的空間[1]。雖然胞外Hsp90α的存在很早就被觀察到了，但由于缺乏N-末端的經(jīng)典的分泌信號肽，其分泌被認(rèn)為是以一種非常規(guī)的方式進行的。Wang X等[4]首次闡明了Hsp90α的分泌調(diào)控機制，認(rèn)為分泌型的Hsp90α是一種C末端可被剪切的形式，同時，它的分泌被C末端的后四個氨基酸殘基(EEVD)序列與含三角型四肽重復(fù)序列的蛋白之間的相互作用所調(diào)控，并且Hsp90α的分泌由第90位蘇氨酸的磷酸化所決定，這種磷酸化受蛋白激酶A(PKA)和蛋白磷酸化酶5(PP5)調(diào)控。其中PKA是一個直接的、正向的Hsp90α分泌的調(diào)控子，其作為位點為Thr-90的磷酸化。正常情況下，細(xì)胞因子如VEGF、SDF、PDGF和應(yīng)激條件如缺氧等通常會導(dǎo)致信號通路的激活，特別是激酶類的活化，因此細(xì)胞因子或缺氧的壓力也可以刺激Hsp90α的分泌。而PP5是Hsp90α分泌的內(nèi)源負(fù)調(diào)控子，它在抑制分泌過程中具有雙重角色。研究表明， HSP90α也能夠通過細(xì)胞表面叫做外來體的納米囊泡被胞吐到細(xì)胞外[5]。

2　熱休克蛋白90α與原發(fā)性肝癌的關(guān)系

2.1熱休克蛋白90α對原發(fā)性肝癌的診斷價值長期以來，臨床常用AFP作為原發(fā)性肝癌的腫瘤標(biāo)記物，以診斷及監(jiān)測原發(fā)性肝癌的進展。然而，隨著對AFP作用機制及功能的深入研究，發(fā)現(xiàn)AFP對原發(fā)性肝癌的診斷缺乏特異性[6]。現(xiàn)有研究表明，Hsp90α在肝癌組織中高表達。Wang X等[1]研究者監(jiān)測了肝癌患者的血漿，發(fā)現(xiàn)血漿中Hsp90α的含量相比于正常人顯著升高。同樣，李慧等研究者[7]也發(fā)現(xiàn)在肝癌患者血清中Hsp90α明顯高于健康對照者(P=0.0001)。免疫組化學(xué)研究顯示，Hsp90α在肝癌組織中表達明顯高于癌旁組織[8]。黃紅平等[9]曾成功構(gòu)建了表達熱休克蛋白90的真核表達質(zhì)粒HA-HSP90，結(jié)果轉(zhuǎn)染HA-HSP90的HepG2細(xì)胞內(nèi)高水平表達外源性蛋白，而沒有轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的細(xì)胞內(nèi)未見外源性蛋白的表達。這說明，Hsp90α在肝癌細(xì)胞內(nèi)高表達。研究表明，原發(fā)性肝癌患者血清Hsp90α與肝癌腫瘤分化程度、腫瘤大小顯著相關(guān)(P<0.05)，與病灶數(shù)目無關(guān)(P>0.05)；與預(yù)后有關(guān)，Hsp90α陰性患者預(yù)后顯著優(yōu)于Hsp90α陽性患者，術(shù)后平均無瘤生存期前者38.6個月、后者25.5個月(P<0.05)，這說明Hsp90α可作為判斷原發(fā)性肝癌的臨床分期及預(yù)后的指標(biāo)[10]。綜上分析，Hsp90α可作為原發(fā)性肝癌的腫瘤標(biāo)記物，用于腫瘤的診斷和監(jiān)測腫瘤術(shù)后復(fù)發(fā)。

2.2熱休克蛋白90α對原發(fā)性肝癌的治療價值眾多研究表明，肝癌的轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)是導(dǎo)致肝癌較高病死率的重要原因，而且癌癥轉(zhuǎn)移是一個復(fù)雜的過程，它不僅在于腫瘤細(xì)胞的惡性程度，還在于細(xì)胞所在微環(huán)境產(chǎn)生的因子。秦荔榮等人[11]通過利用Ion ProtonTM測序儀比較人肝癌細(xì)胞株(Smmc-7721)和正常人肝細(xì)胞株(L-02)的差異表達基因，并且對差異表達基因進行聚類分析、基因功能注釋和富集分析獲得肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移相關(guān)基因，結(jié)果顯示，Hsp90α在有門靜脈轉(zhuǎn)移的肝癌組織表達明顯增強。該項研究提示Hsp90α是肝癌組織轉(zhuǎn)移的重要基因。因此，有效抑制Hsp90α的表達，對抑制腫瘤轉(zhuǎn)移有重要意義。此外，17-AAG可特異性結(jié)合Hsp90α，從而阻斷Hsp90α介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞的增殖與轉(zhuǎn)移的信號傳導(dǎo)通路，達到抑制腫瘤的功能。有學(xué)者曾研究[12]Hsp90α抑制劑格爾德霉素(GA)對人肝癌細(xì)胞株BEL7404的凋亡作用，結(jié)果顯示：GA對BEL7404細(xì)胞株有增值抑制作用，呈時間劑量依賴關(guān)系，且GA均可使BEL7404細(xì)胞株細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期。這說明抑制Hsp90α的功能可引起肝癌細(xì)胞增值抑制與凋亡。與之類似的，有學(xué)者研究[13]了17-AAG對人肝癌HepG2細(xì)胞株增殖與凋亡作用的影響，同樣發(fā)現(xiàn)17-AAG對肝癌細(xì)胞有增殖抑制、誘導(dǎo)凋亡的作用。王曉捷等[14]成功構(gòu)建了有效靶向沉默Hsp90α基因表達的siRNA真核表達載體，通過使用靶向的Hsp90asiRNA，不僅有效抑制了Hsp90α在肝癌細(xì)胞中的表達，而且還特異地抑制了肝癌細(xì)胞的分裂增殖及導(dǎo)致G2/M期周期阻滯，為臨床肝癌靶向基因治療提供了理論依據(jù)。

3　前景與展望

熱休克蛋白90α作為一種全新的有前途的惡性腫瘤標(biāo)記物，也是一個腫瘤轉(zhuǎn)移預(yù)后的潛在指標(biāo)。韓曉紅等人[15]已證明Hsp90α是一個非常有效的肺癌診斷生物標(biāo)志物，并可預(yù)測肺癌患者的化療治療療效。黃凌云等[16]研究發(fā)現(xiàn)，Hsp90α可以區(qū)分肺癌及良性肺部疾病患者和健康人，其靈敏性為0.817，特異性為0.919。也有研究顯示[17]，Hsp90α可以作為潛在的胃癌標(biāo)志物，與其他腫瘤指標(biāo)聯(lián)合，可大大提高胃癌診斷的靈敏度。臨床觀察顯示，AFP聯(lián)合Hsp90α比單用AFP診斷原發(fā)性肝癌的檢出率要高。因此，Hsp90α可作為原發(fā)性肝癌診斷的腫瘤標(biāo)記物之一，并且與其他腫瘤標(biāo)記物聯(lián)合應(yīng)用可提高原發(fā)性肝癌的診斷。此外，對于原發(fā)性肝癌的治療，除常規(guī)應(yīng)用手術(shù)、介入、藥物等療法，可考慮通過抑制Hsp90α的表達抑制腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。亦可通過Hsp90α術(shù)前及術(shù)后的隨訪，減少腫瘤復(fù)發(fā)，提高肝癌患者的生存期。

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鄒志強，E-mail：zhiqiangzou@126.com

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