三明市某規(guī)?；i場幾種疫病的檢測情況與分析

邱位木 陳小麗 吳德喜 李寶蘭

福建省三明市農(nóng)業(yè)局福建三明365001

三明市某規(guī)模化豬場幾種疫病的檢測情況與分析

邱位木 陳小麗 吳德喜 李寶蘭

福建省三明市農(nóng)業(yè)局福建三明365001

通過對三明市某大型豬場進行豬瘟、普通藍耳病、高致病性藍耳病、偽狂犬病的病原學和血清學檢測，以更好地了解這些疫病在豬場的流行情況，為豬場這幾種疫病的防控和凈化奠定基礎(chǔ)。本次調(diào)查分別檢測45份后備母豬血清、92份生產(chǎn)母豬血清、13份生產(chǎn)公豬血清，共計150份血清，150份扁桃體樣品。通過ELISA方法分別檢測了豬瘟、普通藍耳病、偽狂犬病gE和偽狂犬病gB。熒光定量PCR方法檢測了豬瘟、高致病性藍耳病。結(jié)果豬瘟和高致病性藍耳病病原學陽性率分別為8%和5.3%。一個月后對病原學檢測陽性豬采樣復查，結(jié)果豬瘟陽性率4.6%，高致病性藍耳病陽性率2.6%。豬瘟免疫抗體合格率93.3%，普通藍耳病免疫抗體合格率96%，偽狂犬病gB免疫抗體合格率100%，偽狂犬病gE感染抗體2%。生產(chǎn)母豬胎次越多，豬瘟和普通藍耳病的免疫抗體水平越高。

ELISA熒光定量PCR豬瘟普通豬藍耳病高致病性豬藍耳病偽狂犬病

隨著畜牧業(yè)的快速發(fā)展，養(yǎng)殖基數(shù)越來越大，散養(yǎng)和規(guī)模養(yǎng)殖并存，給疫病防控造成很大的難度。尤其是近年來規(guī)?；i場出現(xiàn)了多種疫病混合感染，病毒的變異、臨床的非典型化等更是加劇了豬的繁殖系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)疾病，給養(yǎng)豬生產(chǎn)帶來了巨大的經(jīng)濟損失[1]。目前我國的動物疫病防控主要還是通過疫苗免疫，雖然能有效控制一些重大動物疫病，但并不能消滅或者根除動物疫病[2]。因此，凈化是消滅或根除動物疫病的一種重要方式。在一個養(yǎng)殖場或者區(qū)域通過檢疫、淘汰陽性動物、培育健康動物并與生物安全隔離區(qū)建設(shè)相結(jié)合的方式，達到凈化疫病的目的[3]。種用動物是養(yǎng)殖的源頭，一旦種用動物攜帶病原，就會通過引種大面積傳播病毒。所以，凈化工作的重中之重就是種用動物的凈化。

三明市農(nóng)業(yè)局動物疫控中心獸醫(yī)實驗室對某規(guī)模豬場做了幾個病種的檢測，初步了解某規(guī)模種豬場豬瘟、普通藍耳病、高致病性藍耳病、偽狂犬病的疫苗免疫效果、感染抗體存在情況和病毒核酸存在情況，為該場今后的防疫和凈化工作提供科學數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要儀器設(shè)備酶標儀（瑞士SUNRISE），移液器eppendorf（0.1～2.5 μL、10～100 μL、100～1000 μL），冰箱（海爾）；恒溫培養(yǎng)箱（廣東韶關(guān)科力試驗儀器公司DNP-9162A）；生物安全柜（美國Labconco），高速冷凍離心機（德國Sigma），組織研磨儀、熒光定量PCR儀（德國凱杰）等。

1.1.2 試劑盒豬瘟、普通藍耳病、偽狂犬病gE、偽狂犬病gB抗體檢測試劑盒均為美國IDEXX ELISA試劑盒。豬瘟、高致病性藍耳病、普通藍耳病病原檢測試劑盒均為深圳匹基熒光定量PCR試劑盒。

IDEXX試劑盒置4℃冰箱保存，匹基試劑盒置冷凍冰箱保存。

1.2 方法

1.2.1 血清樣品制備通過耳緣靜脈分別隨機采集生產(chǎn)母豬、后備母豬、生產(chǎn)公豬的全血5 mL，其中后備母豬45頭、生產(chǎn)母豬92頭、生產(chǎn)公豬13頭，共150份豬全血。靜置2 h以上，待血液凝固析出血清，即可離心出血清備用。

1.2.2 免疫情況與疫苗類型該規(guī)模場采取自繁自養(yǎng)的養(yǎng)殖方式，養(yǎng)殖場設(shè)施設(shè)備齊全，防疫管理規(guī)范，有合適本場的免疫程序。豬瘟疫苗是從普萊柯生物工程股份有限公司自購的細胞源苗，豬藍耳病疫苗是從美國勃林格自購的經(jīng)典豬藍耳病活疫苗，豬偽狂犬病疫苗是從美國勃林格自購的gE基因缺失疫苗。

1.2.3 試驗方法血清抗體均采用間接ELISA抗體檢測試劑盒進行檢測，病原均采用熒光定量PCR檢測試劑盒進行檢測。檢測操作與結(jié)果判定嚴格按照試劑盒的使用說明書進行。

2 結(jié)果與分析

2.1 豬瘟檢測結(jié)果豬瘟檢測結(jié)果顯示（見表1），各類種豬豬瘟平均免疫抗體合格率為93.3%，其中公豬的合格率為92.3%，后備母豬為93.3%，生產(chǎn)母豬為93.4%，均達到較高水平。豬瘟病原熒光定量PCR第一次采樣檢測陽性率為8%，一個月后對病原檢測陽性豬重新采樣復查，發(fā)現(xiàn)陽性率降低至4.6%。

2.2 藍耳病檢測結(jié)果豬普通藍耳病免疫抗體檢測結(jié)果顯示（見表2），各類種豬普通藍耳病平均免疫抗體合格率為96%，其中公豬的合格率為100%，生產(chǎn)母豬為95.6%，后備母豬為95.5%，均達到較高水平。高致病性藍耳病病原熒光定量PCR第一次采樣檢測陽性率5.3%，一個月后對病原檢測陽性豬重新采樣復查，發(fā)現(xiàn)陽性率下降到2.6%。

2.3 偽狂犬病檢測結(jié)果豬偽狂犬病檢測結(jié)果顯示（見表3），各類種豬偽狂犬病gB免疫抗體合格率均為100%。各類種豬偽狂犬病gE平均感染抗體2%，其中公豬感染率為0、生產(chǎn)母豬感染率為2.2%、后備母豬的感染率為2.2%。

表1 豬瘟檢測結(jié)果

表2 藍耳病檢測結(jié)果

表3 偽狂犬病檢測結(jié)果

2.4 母豬胎次與幾種疫病抗體的關(guān)系從表4可見，4胎以上母豬的免疫抗體合格率都是100%，1～3胎母豬的免疫抗體水平，隨著胎次的增加抗體水平也越來越高，1胎母豬的豬瘟和普通藍耳病免疫抗體水平都是75%，合格率偏低，2胎母豬的豬瘟和普通藍耳病免疫抗體水平達到83%和91.7%，合格率達到一個相對理想的水平，3胎母豬的豬瘟和普通藍耳病免疫抗體水平達到93.7%和96.8%，合格率已經(jīng)達到一個較高的水平。母豬的生產(chǎn)胎次對免疫抗體有著相關(guān)的影響，母豬生產(chǎn)胎次越多，豬瘟和

普通藍耳病的免疫抗體也就越高。

表4 母豬胎次與幾種疫病抗體的關(guān)系

3 討論

從以上檢測數(shù)據(jù)分析，該豬場豬瘟、普通藍耳病、偽狂犬病gB免疫抗體水平都達到90%以上，說明疫苗的免疫效果好，豬群對這幾種病有著比較強的防御力。偽狂犬病gE感染抗體為2%，表明該豬場存在偽狂犬病野毒感染但是感染率不高，要對該豬場進行偽狂犬病凈化可行性高且難度不大。豬瘟和高致病性藍耳病的病原熒光定量PCR檢測，第一次采樣檢測結(jié)果和一個月后第二次采樣復查結(jié)果不一致，可能是因為豬瘟與高致病性藍耳病疫苗均為活疫苗，第一次采樣距疫苗注射時間不到10 d，有部分是疫苗毒核酸被檢出。第二次采樣是在一個月后，再次對樣品進行病原檢測，過濾掉部分疫苗毒陽性數(shù)，從第二次檢測結(jié)果看，豬瘟病毒核酸陽性率為4.6%、高致病性藍耳病病毒核酸陽性率為2.6%，豬瘟和高致病性藍耳病存在野毒感染情況，但從全省農(nóng)業(yè)部上報系統(tǒng)的歷年統(tǒng)計數(shù)據(jù)來看，該豬場的豬瘟和高致病性藍耳病的病原陽性率均低于全省平均陽性率，豬場應(yīng)該及時淘汰感染豬只，及時消滅隱性的感染源。

動物疫病凈化狹義上講就是在一個養(yǎng)殖場，通過檢測的手段對一系列動物疫病進行檢測，發(fā)現(xiàn)帶病或疑似帶病動物及時進行淘汰[4]。三明市近五年的凈化工作跟農(nóng)業(yè)部和省農(nóng)業(yè)廳對接，就是要從原種場、大型規(guī)模場開始逐步擴大到所有養(yǎng)殖場，消滅或根除動物疫病，從而帶動養(yǎng)殖場提升管理水平、改善生物安全環(huán)境、提高動物疫病防控能力，增加養(yǎng)殖場及其產(chǎn)品競爭力，有力促進產(chǎn)品質(zhì)量安全、公共衛(wèi)生安全和養(yǎng)殖業(yè)安全，為三明市畜牧業(yè)健康發(fā)展、農(nóng)民生產(chǎn)增效保駕護航。

[1]管亮,華耀,施雷,等.種豬群豬圓環(huán)病毒病的凈化技術(shù)研究[J].動物醫(yī)學進展,2015(7)：61-66.

[2]劉源.共譜動物疫病新篇章[J].中國畜牧業(yè),2015(18)：18-19.

[3]姚明霞,惲建偉.小型規(guī)模豬場疫病防控要點[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘,2011(5)：130.

[4]陳國順.小型商品豬場的疫病防治[J].福建畜牧獸醫(yī), 2011,33(3)：56-57.

The monitor and analysis of the swine diseases in the large scale swine farm in Sanming city

Qiu Weimu Chen Xiaoli Wu Dexi Li Baolan
(Agricultural Bureau of Sanming City,Fujian 365001)

In order to know well about the epidemic status of the swine diseases in the large scale swine farm and give the fundament for the prevention and purification of these swine diseases,the certain tissue and the serum of the swine were detected by using the ELISA and the fluorescence ration PCR,the study referred to the swine fever,porcine reproductive and respiratory syndrome(PRRS), high pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome and pseudorabies.The samples that were used for tests separately from the 45 replacement gilt serums,92 sow serums,13 boar serums and the 150 tonsils.The swine fever,porcine reproductive and respiratory syndrome(PRRS)and pseudorabies were studied by using ELISA,the swine fever and high pathogenic PRRS were studied by using fluorescence ration PCR.The result showed∶the pathogen positive rate of the swine fever and the high pathogenic PRRS is separately 8%and 5.3%,the positive swine were detected again one month later,the pathogen positive rate of the swine fever and the high pathogenic PRRS is separately 4.6%and 2.6%.The percent of pass about the swine fever,the PRRS,and pseudorabies gB immune antibody was separately 93.3%,96%,and 100%,the infection antibody of the pseudorabies gE was 2%.The more parities the sows have,the higher level of the immune antibody about the swine fever and the PRRS was.

ELISA Fluorescence ration PCR Swine fever Porcine reproductive and respiratory syndrome(PRRS)High pathogenic PRRS Pseudorabies

A

1003-4331（2016）06-0014-03