紫露草微核實(shí)驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)方法研究

趙永哲(齊齊哈爾市環(huán)境監(jiān)測(cè)中心站 黑龍江 齊齊哈爾 161005)

紫露草微核實(shí)驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)方法研究

趙永哲(齊齊哈爾市環(huán)境監(jiān)測(cè)中心站 黑龍江 齊齊哈爾 161005)

紫露草微核實(shí)驗(yàn)是采用生物技術(shù)監(jiān)測(cè)環(huán)境污染的一種方法，對(duì)該實(shí)驗(yàn)的結(jié)果統(tǒng)計(jì)評(píng)定采用兩總體均值之差等于一已知值的兩總體方差未知但相等t檢驗(yàn)法統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)，如實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間存在顯著性差異，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)組的紫微露草受到環(huán)境污染影響。否則說(shuō)明環(huán)境對(duì)實(shí)驗(yàn)組的紫微露草不產(chǎn)生影響。使計(jì)算過(guò)程更加科學(xué)準(zhǔn)確。

紫露草；評(píng)價(jià)；數(shù)據(jù)處理

1 前言

微核技術(shù)是一種微核毒理方面短期致突變的試驗(yàn)方法，可用于化合物致突變檢測(cè)以及環(huán)境污染檢測(cè)等植物微核技術(shù)可直接反映污染物對(duì)生物遺傳物質(zhì)的影響，通過(guò)觀察統(tǒng)計(jì)微核的數(shù)量可評(píng)估環(huán)境污染導(dǎo)致植物染色體畸變的程度，從而間接地反映環(huán)境污染的嚴(yán)重性植物微核技術(shù)測(cè)定的是細(xì)胞染色體受損傷的程度，它更接近于污染物對(duì)生物和人類(lèi)的危害，具有化學(xué)監(jiān)測(cè)和物理監(jiān)測(cè)所不能達(dá)到的效果作為一種有效的生物測(cè)試方法該技術(shù)廣泛用于水質(zhì)污染監(jiān)測(cè)，并作為許多國(guó)家常規(guī)指標(biāo)和水環(huán)境監(jiān)測(cè)的規(guī)范化方法之一。

紫露草微核實(shí)驗(yàn)技術(shù)是利用花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂中的染色體作為受擊目標(biāo)，以四分體內(nèi)所形成的微核頻率為監(jiān)測(cè)指標(biāo)。在花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂早期，受到污染環(huán)境中的各種誘變理化因子的作用，染色體發(fā)生斷裂，斷裂的染色體片段由于喪失著絲點(diǎn)，不能移向細(xì)胞兩極，在四分體時(shí)期形成0.5-3.0μm的微核，游離在四分體胞質(zhì)中。該微核出現(xiàn)的頻率可反映出環(huán)境污染物對(duì)真核生物的生殖細(xì)胞染色體損害的程度。

2 常規(guī)數(shù)據(jù)處理方法

2.1 微核形態(tài)觀察計(jì)數(shù)。

2.2 按公式計(jì)數(shù)微核率。

微核率=(微核總數(shù)/四分體總數(shù))100％

2.3 處理與評(píng)價(jià)。

根據(jù)記錄的所有樣品群體的結(jié)果，計(jì)算其平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差和標(biāo)準(zhǔn)誤差，以平均值差的標(biāo)準(zhǔn)誤差公式，來(lái)鑒別處理組和對(duì)照組間差別的顯著性。

式中：Sd——平均值差的標(biāo)準(zhǔn)誤差值；

SEt——處理組的標(biāo)準(zhǔn)誤差值；

SEc——對(duì)照組的標(biāo)準(zhǔn)誤差值。

當(dāng)平均值差等于或大于平均值差的標(biāo)準(zhǔn)誤差值2倍時(shí)，表示處理組的平均值與對(duì)照組平均值差異顯著(5％以下的概率)，從而評(píng)價(jià)是否受到誘變劑污染及污染水平。

3 t檢驗(yàn)法統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)處理方法

3.1 微核形態(tài)觀察計(jì)數(shù)

3.2 按公式計(jì)數(shù)微核率

微核率=(微核總數(shù)/四分體總數(shù))100％

3.3 處理與評(píng)價(jià)

采用兩總體均值之差等于一已知值的t檢驗(yàn)法統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)，步驟如下。

3.3.1 判斷實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間的總體方差上否相等(查驗(yàn)二組有相同的精密度)

采用F檢驗(yàn)法

(1)建立假設(shè)δ12=δ22；

(2)計(jì)算樣本方差；

標(biāo)記實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組二者較優(yōu)大方差為smax2，較小方差為smin2

自由度：f1=nmax-1，f2=nmin-1

(3)由F表查得臨界值Fα/2(f1，f2)；

(4)比較，如果F＞Fα/2(f1，f2)，則實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組實(shí)驗(yàn)的精密度在置信度α下存在顯著差異。說(shuō)明實(shí)驗(yàn)組或?qū)φ战M存在異常數(shù)值，可采用Dixon檢驗(yàn)法或者Grubbs檢驗(yàn)法找出異常值并去除后，重新進(jìn)行統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)，但要求扣除異常值后參與統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)的數(shù)據(jù)量一般不少于5個(gè)。

如果F＜Fα/2(f1，f2)，則實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組實(shí)驗(yàn)的精密度在置信度α下不存在顯著差異。

3.3.2 如果F＜Fα/2(f1，f2)，則建立假設(shè)

雙側(cè)檢驗(yàn)H0：μ1-μ2=d(總體均值之差為已知常數(shù)d)。

單側(cè)檢驗(yàn)H0：μ1-μ2≥d或H0：μ1-μ2≤d。

3.3.4 計(jì)算統(tǒng)計(jì)量t

3.3.5 比較：如果|t|＞tα(f)，則實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間存在顯著性差異，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)組的紫微露草受到環(huán)境污染影響。如果|t|＜tα(f)，則實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間不存在顯著性差異，說(shuō)明環(huán)境對(duì)實(shí)驗(yàn)組的紫微露草不產(chǎn)生影響。

4 討論

采用兩總體均值之差等于一已知值的t檢驗(yàn)法統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)，可以更精確的判定紫露草微核實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照之間是否存在差異，并可以通過(guò)F檢驗(yàn)檢查實(shí)驗(yàn)過(guò)程中實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間是否存在偶然性誤差的影響。并可能剔除異常數(shù)據(jù)，提高評(píng)價(jià)的準(zhǔn)確度。并且可以通過(guò)實(shí)驗(yàn)確實(shí)常數(shù)d的取值，以確實(shí)環(huán)境對(duì)紫微露草的影響程度。從而對(duì)紫露受到的污染程度進(jìn)行量化判別。并且可以進(jìn)一步研究：就是通過(guò)常數(shù)d讓不同類(lèi)型的污染程度之間建立一種可以比較的聯(lián)系。

〔1〕黃坤艷.植物微核技術(shù)在環(huán)境污染監(jiān)測(cè)中的建立與應(yīng)用〔J〕.北京農(nóng)業(yè)，2008，9：19-23.

〔2〕王映雪.微核技術(shù)在環(huán)境監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用概況〔J〕.云南環(huán)境科學(xué)，2000，19(4)：53-55.

〔3〕劉虹等.利用白花紫露草根尖微核技術(shù)監(jiān)測(cè)武漢南湖水質(zhì)的污染〔J〕.

〔4〕中南民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版).自然科學(xué)版，2012，2：34-37.

〔5〕王兆群，王芹.紫露草微核技術(shù)監(jiān)測(cè)工業(yè)廢水遺傳毒性〔J〕.儀器儀表與分析監(jiān)測(cè)，2003，(1).38-39.

〔6〕陳霆，王海娟，段昌群等。V利用紫露草技術(shù)監(jiān)測(cè)撫仙湖水質(zhì)污染的研究〔J〕.云南大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2002，24(3)：237-240.

Study on Evaluation Method of Tradescantia Micronucleus Test Results

ZhaoYongzhe(Environment Monitoring Center Station of Qiqihaer City Qiqihaer Heilongjiang 161005)

Tradescantia micronucleus test is a method used biological technology for monitoring environmental pollution.If there is a significant difference between experimental group and compare group，Tradescantia in experimental group is effected by environmental pollution.Otherwise，Tradescantia in experimental group is not effected by environmental pollution.This method make the calculation process more scientific and accurate.

Tradescantia Evaluation Data processing

X171

A

1674-263X(2016)02-0085-02

2016-06-20

趙永哲(1971-)，男，碩士，高級(jí)工程師，從事環(huán)境監(jiān)測(cè)工作。