氣相色譜法測定寬葉纈草揮發(fā)油中乙酸龍腦酯含量

胡麗霞 王曉仙 趙 明

武漢市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，湖北 武漢 430022

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氣相色譜法測定寬葉纈草揮發(fā)油中乙酸龍腦酯含量

胡麗霞 王曉仙 趙 明*

武漢市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，湖北 武漢 430022

寬葉纈草；乙酸龍腦酯；氣相色譜法

敗醬科纈草屬植物寬葉纈草(ValerianaofficinalisL.var.latifoliaMiq.)，在我國南部各省區(qū)廣為分布，根及根莖入藥，具有解表散寒，活血調(diào)經(jīng)，祛風(fēng)除濕，鎮(zhèn)痛解痙的作用[1]。以寬葉纈草根為原料經(jīng)水蒸氣蒸餾所得精油，為很好的香料和調(diào)香劑，在食品飲料、化妝品工業(yè)中有廣泛用途[2]。采用GC-MS測定其成分主要為乙酸龍腦酯(bornyl acetate)[3]，具有止瀉、鎮(zhèn)痛、抗炎及解痙的作用[4]。本文建立了以萘為內(nèi)標(biāo)，氣相色譜法測定寬葉纈草精油中乙酸龍腦酯的含量，為寬葉纈草生藥質(zhì)量評價(jià)提供依據(jù)，并對采集于湖北不同地區(qū)的樣品進(jìn)行了測定。

1 儀器與材料

1.1 儀器 美國安捷倫6890N氣相色譜儀；DB-WAX毛細(xì)管柱。

1.2 材料 藥材分別采集于湖北西部恩施、宣恩、利川、巴東地區(qū)，經(jīng)武漢大學(xué)藥學(xué)院王有為教授鑒定為敗醬科纈草屬寬葉纈草。乙酸龍腦酯對照品(中國藥品生物制品檢定所)；內(nèi)標(biāo)萘(色譜純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；無水乙醇(分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

2 方法

2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 精密稱取乙酸龍腦酯適量，加無水乙醇制成4.16mg/mL的溶液。

2.3 內(nèi)標(biāo)溶液 精密稱取萘適量，加無水乙醇制成1.01mg/mL的溶液。

2.4 供試品溶液的制備 精密稱取揮發(fā)油50mg置10mL量瓶中，加無水乙醇至刻度，搖勻，精密量取該溶液和內(nèi)標(biāo)溶液各1mL，搖勻，即得。

2.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線試驗(yàn) 精密吸取對照品儲備液0.038、0.075、0.15、0.3、0.6mL，分別置于10mL量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻即得濃度為0.016、0.031、0.062、0.125、0.250mg/mL的乙酸龍腦酯溶液；分別精密量取不同濃度溶液和內(nèi)標(biāo)溶液各1mL，搖勻。分別進(jìn)樣測定，每次1uL。以乙酸龍腦酯濃度對乙酸龍腦酯與內(nèi)標(biāo)峰面積之比進(jìn)行線性回歸。結(jié)果表明乙酸龍腦酯濃度在0.016～0.250mg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，其線性回歸方程為Y=1.40847X-0.001131 (r=0.99999)。

2.6 精密度和重復(fù)性試驗(yàn) 對同一供試品溶液連續(xù)測定6次，結(jié)果乙酸龍腦酯峰面積RSD=0.47%。對同一樣品從取樣開始重復(fù)測定6次，結(jié)果乙酸龍腦酯峰面積RSD=1.69%。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取同一供試品溶液，分別在放置0、2、4、8、12、14h后，依法測定乙酸龍腦酯的峰面積，結(jié)果表明同一供試品溶液中被測成分在14h內(nèi)基本穩(wěn)定，RSD值為1.82%。2.8 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取已知含量的樣品約50mg，置10mL量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻。分別精密吸取1mL 5份，精密加入對照品溶液1mL，搖勻。依法測定，測得平均加樣回收率為104.85%。

2.9 樣品的測定 精密稱取寬葉纈草藥材40g，置揮發(fā)油提取器中，加水500mL，提取4h。精密稱取精油50mg，置10mL量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液和內(nèi)標(biāo)溶液各1mL，搖勻，量取1uL進(jìn)樣。依法測定不同采挖時(shí)間不同地區(qū)的湖北寬葉纈草樣品。結(jié)果見表1。

表1 湖北產(chǎn)寬葉纈草揮發(fā)油中乙酸龍腦酯含量

注：樣品1采挖于2016年湖北恩施海拔1500m處，野生；樣品2采挖于2016年湖北恩施海拔1900m處，野生；樣品3采挖于年湖北恩施，栽培；樣品4采挖于2016年湖北宣恩，野生；樣品5采挖于2016年湖北利川，野生；樣品6采挖于2016年湖北巴東，野生；樣品7采挖于2015年湖北恩施海拔1500m處，野生；樣品8采挖于2015年湖北恩施海拔1900m處，野生；樣品9采挖于2014年湖北恩施海拔1800m處，野生。

3 討論

采用GC法對寬葉纈草揮發(fā)油中乙酸龍腦酯進(jìn)行含量測定，為其質(zhì)量控制提供了依據(jù)，也為寬葉纈草藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立奠定了基礎(chǔ)。

供試品的制備考察了樣品與內(nèi)標(biāo)溶液濃度，確定5uL/mL的樣品溶液與1mg/mL的內(nèi)標(biāo)溶液等體積混合成供試品溶液。色譜條件考察了不同分流比、載氣流速與升溫程序，分別確定30∶1的分流比，1mL/min的載氣流速，及60℃、120℃、140 ℃、230℃(5min)的升溫程序進(jìn)行測定。在此條件下分離效果好，乙酸龍腦酯峰及內(nèi)標(biāo)峰與相鄰峰完全分離。

測定結(jié)果表明產(chǎn)于湖北不同地區(qū)、不同采挖年限的寬葉纈草樣品中乙酸龍腦酯含量存在著差異，而是否與植被分布的生態(tài)環(huán)境、海拔高度、采挖年限因素有關(guān)，有待探討。

[1] 都曉偉，吳軍凱. 纈草屬植物化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J]. 現(xiàn)代藥物與臨床，2006，21 (1)：10-14.

[2] 陳建華，申會建，聶長明. 湖南山區(qū)寬葉纈草的利用價(jià)值[J]. 湖南林業(yè)科技，1993，20(1)：36-37.

[3] 王立群，熊義濤，陶福華，等. 寬葉纈草揮發(fā)油成分分析[J]. 中藥材，1996，22(6)：289-299.[4] 李曉光，葉富強(qiáng)，徐鴻華. 砂仁揮發(fā)油中乙酸龍腦酯的藥理作用研究[J]. 華西藥學(xué)雜志，2001，16(5)：78-79.

(編輯：陶希睿)

Determination of Bornyl Acetate in Volatile oil of Valeriana officinalis L.var.latifolia Miq by GC

HU Lixia WANG Xiaoxian ZHAO Ming*

Wuhan Hospital of Integrated Chinese and Western Medicine, Wuhan 430022,China

ValerianaofficinalisL.var.latifoliaMiq.；Bornyl Acetate；GC

2016-08-05

胡麗霞(1981-)，女，漢族，主管中藥師，主要從事中藥資源學(xué)研究。E-mail：huli-23@163.com

趙明(1959-)，女，漢族，副主任藥師，主要從事藥學(xué)研究。E-mail：15207514 @qq.com

R927.11

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1007-8517(2016)21-0023-03