王玉鋒 (河南省新鄉(xiāng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 453003)
一例豬圓環(huán)病毒病的診治
王玉鋒 (河南省新鄉(xiāng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 453003)
本文通過一例豬圓環(huán)病毒病的確診過程,綜述了豬圓環(huán)病毒病的流行病學(xué)、臨床癥狀、病理變化等,并結(jié)合目前生豬生產(chǎn)實(shí)際提出了本病的防治對(duì)策。
豬;圓環(huán)病毒??;診治;防治
豬圓環(huán)病毒病是指以2-型圓環(huán)病毒為主要病原、單獨(dú)或繼發(fā)/混合感染其他致病微生物的一系列疾病的總稱。豬2-型圓環(huán)病毒感染可導(dǎo)致豬繁殖障礙、仔豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征、豬皮炎-腎病綜合征、肺炎、腸炎、先天性震顫等。
新鄉(xiāng)市一個(gè)大型豬場(chǎng),母豬存欄1500頭,從去年冬天開始出現(xiàn)母豬懷孕60~80d后仔豬死亡流產(chǎn),少數(shù)發(fā)生在60d左右,多數(shù)發(fā)生在80d左右,頭胎產(chǎn)及經(jīng)產(chǎn)母豬均有發(fā)生,而且出現(xiàn)一旦發(fā)生這樣的病例,則與該病例同一豬舍的整棟都發(fā)生的現(xiàn)象。已死亡一頭母豬,共有8棟豬舍3月內(nèi)沒生小豬,因此懷疑為繁殖障礙性疾病,此前,該場(chǎng)在其他檢測(cè)機(jī)構(gòu)對(duì)細(xì)小病毒病進(jìn)行監(jiān)測(cè),排除了細(xì)小病毒 (PPV)感染。經(jīng)我們對(duì)該場(chǎng)場(chǎng)主的仔細(xì)詢問及對(duì)患病豬的癥狀討論分析,初步推斷應(yīng)該為圓環(huán)病毒感染。
首先對(duì)采集病料的器械消毒,無菌采集母豬血液,冷藏保存;病死豬淋巴結(jié)、肝臟、脾臟,流產(chǎn)死胎的臍帶血、胎衣放入無菌容器內(nèi),做好標(biāo)記,置-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
將無菌采集的病料按實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法做觸片,用革蘭氏和姬姆薩進(jìn)行染色并干燥,于400x顯微鏡下鏡檢,結(jié)果未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌。
無菌采集心血、肝臟、脾臟、淋巴結(jié)等組織,將其接種于肉湯、營養(yǎng)、瓊脂、麥康凱培養(yǎng)基上,于37℃的恒溫箱中放置24h,經(jīng)觀察無細(xì)菌生長。
將采集該場(chǎng)母豬血液,短暫離心,取上清液,通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清中豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體(PRRSAb)、 豬瘟抗體 (CSFVAb)、 偽狂犬抗體 (ADVAb)、圓環(huán)病毒病 (PCV),結(jié)果除圓環(huán)病毒抗體為陰性外,其余均為陽性。
將采集的流產(chǎn)死胎的臍帶血、胎衣,死亡母豬的淋巴結(jié)、脾臟等組織于研磨器中研磨,加入1.5ml生理鹽水后繼續(xù)研磨,待勻漿后轉(zhuǎn)至1.5ml滅菌離心管中,8000轉(zhuǎn)離心2min,取上清液100μl于1.5ml滅菌離心管中,用DNA提取試劑盒,嚴(yán)格按照試劑盒說明書提取核酸用于熒光PCR檢測(cè)病原。排除了豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬瘟、偽狂犬抗原。利用以下標(biāo)準(zhǔn)來判斷檢測(cè)到了圓環(huán)病毒病原。陽性:檢測(cè)樣本Ct值≤35.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線??梢桑簷z測(cè)樣本Ct值>35.0,重復(fù)一次實(shí)驗(yàn),如果Ct值仍大于35.0,且曲線有明顯的增長曲線,判定為陽性,否在為陰性。陰性:檢測(cè)不到樣本Ct值。根據(jù)以上判定標(biāo)準(zhǔn),利用熒光PCR檢測(cè)病原,結(jié)果如附圖所示,9份樣品均為陽性,陽性率達(dá)100%,目前,該豬場(chǎng)已對(duì)所有母豬進(jìn)行了圓環(huán)病毒病的普防,母豬流產(chǎn)現(xiàn)象得以控制,呈大幅下降趨勢(shì),母豬生產(chǎn)正逐漸恢復(fù)正常。
附圖 豬圓環(huán)病病原熒光PCR檢測(cè)結(jié)果
從附圖可知,其中起跳的較粗的那條曲線為陽性對(duì)照,其余9條曲線為9份樣品檢測(cè)曲線,通過與陽性對(duì)照物比較,結(jié)合文中的臨床癥狀、流行病學(xué)調(diào)查、實(shí)驗(yàn)室診斷及判定標(biāo)準(zhǔn)可判定這9份樣品均為陽性,即為圓環(huán)病毒感染,結(jié)果與預(yù)期相符。
對(duì)于有圓環(huán)病毒存在的豬場(chǎng)盡量要保證飼料中微量元素、維生素、必需氨基酸的含量。對(duì)仔豬補(bǔ)鐵由一次性改為二次,可在仔豬2~3日齡注射1ml鐵制劑,10~20日齡再注射2ml。
在圓環(huán)病毒易感期盡量不免疫;做好豬舍內(nèi)溫度的調(diào)控,根據(jù)不同季節(jié)的天氣變化及時(shí)做好防暑降溫及防寒保暖工作;轉(zhuǎn)群時(shí)不換料,即使換料也要加入抗應(yīng)激藥物。
嚴(yán)格檢疫引進(jìn)種豬,杜絕隱性感染;保持豬舍衛(wèi)生、干燥,豬舍要及時(shí)通風(fēng)換氣,降低氨氣等有害氣體濃度;保持科學(xué)合理的飼養(yǎng)密度;防止老鼠、飛鳥、貓等其他動(dòng)物進(jìn)入圈舍;嚴(yán)格執(zhí)行 “全進(jìn)全出”制度,出欄一批豬,要至少有10d左右的時(shí)間間隔,再入住下一批豬。
根據(jù)本場(chǎng)實(shí)際,制定科學(xué)合理的免疫程序。做好豬瘟、口蹄疫、高治病性藍(lán)耳等重點(diǎn)疫病及細(xì)小、偽狂犬病的程序免疫。
豬只感染圓環(huán)病毒病后,要采取隔離治療的方法?;疾∝i原圈舍要清理消毒。同時(shí)對(duì)患病豬只治療以標(biāo)本兼治及防止繼發(fā)感染為治療原則。